INGENIERIA QUMICA

PRACTICA N3
ESPECTROFOTOMETRA: CURVAS DE ABSORCIN

EQUIPO: 5 B

INTEGRANTES DEL EQUIPO

ENRIQUE CINTA GONZLEZ
ESTELA ESTEFANA TORRES ORTIZ
KATHIA MARELY MARTNEZ SNCHEZ
DOCENTE: ROSA MARIA MARQUEZ HACES

FECHA DE ENTREGA: 09-OCTUBRE-2016

PRACTICA N3
ESPECTROFOTOMETRA: CURVAS DE ABSORCIN

Objetivo: Determinar la longitud analtica de las muestras proporcionadas, a travs de la

construccin de una curva de absorcin.
Fundamento.
La espectrofotometra UV-visible es una tcnica analtica que permite determinar la concentracin
de un compuesto en solucin. Se basa en que las molculas absorben las radiaciones
electromagnticas y a su vez que la cantidad de luz absorbida depende de forma lineal de la
concentracin. Para hacer este tipo de medidas se emplea un espectrofotmetro, en el que se
puede seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa por una solucin y medir la cantidad de
luz absorbida por la misma.
Para obtener una curva de calibrado de un compuesto se preparan soluciones de diferentes
concentraciones del mismo, determinndose para cada una de ellas el valor de absorbancia a
max. Estos valores de absorbancia se representan en el eje de abscisas (eje de x) y los de
concentracin en el eje de ordenadas (eje de y). Se observar que, a bajas concentraciones, el
aumento de concentracin se corresponde con un incremento lineal en la absorbancia (zona de
cumplimiento de la ley de Lambert-Beer). A concentraciones altas la linealidad se pierde y se
observa que la lnea se aplana, por lo que las medidas son poco fiables. La representacin de
Lambert-Beer, A = cl, nos permitir calcular el valor del coeficiente de extincin molar, que
corresponde a la pendiente de la recta.
Actividades pre-laboratorio
1.- Investigar en fuentes de informacin la longitud de onda analtica del KMnO 4 y del K2Cr2O7.
2.- Investigar la aplicacin de las curvas de absorcin en los mtodos instrumentales de anlisis.
La espectrofotometra es una tcnica que permite analizar el espectro de cualquier sustancia, y
averiguar sus componentes.
Todas las disoluciones que presentan color, absorben radiacin electromagntica perteneciente al
espectro visible, el cual puede dividirse en varias zonas segn se muestra en la tabla siguiente:

Longitud de Onda
(nm)
380-435
435-480
480-490
490-500
500-560
560-580
580-595
595-650
650-780

Col
Violeta or
Azul
Azul-verdoso
Verde-azulado
Verde
Verde-Amarillo
Rojo
Anaranjado
Rojo

Color
Complementario
Verde
Amarillo
Amarillo
Anaranjado
Rojo
Purpura
Violeta
Azul
Azul-verdoso
Verde-azulado

En dicha tabla, la columna del "color" indica la porcin del espectro que es absorbida, mientras
que

la

correspondiente

al

"color

complementario"

indica

la

porcin

de

radiacin

electromagntica que no absorbe la muestra y que por tanto es transmitida a travs de ella y
puede ser captada por el ojo humano (color de la disolucin).
Para el KMnO4 se obtiene el mximo de absorcin a la longitud de onda, = 525.2

nm; a esa

misma longitud de onda se obtiene la absorcin para el K2Cr2O7 y como ejemplo un resultado
para el K2Cr2O7 obtendramos una absorbancia mxima seria 350nm.
Ley de Lambert-Beer A = .c.d
Para llevar a cabo el anlisis cuantitativo de una especie mediante la espectroscopia de
absorcin molecular, es preciso realizar una etapa previa de calibracin.

En general, localizado el mximo de absorcin de una

sustancia, se prepara una curva de calibracin a partir
de

distintas

sustancia

concentraciones

(llamadas

conocidas

patrones),

para

de

obtener

dicha
las

absorbancias a esa longitud de onda frente a la

concentracin

de

dichas

comparacin,

podremos

muestras.
calcular

la

Despus,

por

concentracin

desconocida de una muestra tras medir su absorbancia

Al representar la absorbancia frente a la concentracin, la pendiente nos proporciona el coeficiente
de extincin. As, podremos determinar cualquier concentracin desconocida de una muestra a
partir de su absorbancia.

Curva de calibracin
A = .c.d
A = Absorbancia (adimensional)
c = Concentracin de la sustancia (mol.l-1)
= Coeficiente de extincin molar (mol 1.l.cm-1) d = ancho de la cubeta (cm)

EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Equipo:
Espectrofotmetro UV-VIS Marca Genesys 20 en un rango de trabajo de 325 q 800nm.
Materiales (por equipo de trabajo):

5 vasos de precipitado de 50ml.

1 pizeta de agua destilada
3 celdas para lectura
Papel aluminio para forrar dos vasos de precipitado de 50ml
Guantes de ltex (por integrante de equipo de trabajo)
1 pao limpio y suave de algodn para limpiar las celdas (si es posible, conseguir 1 pao

para limpieza de lentes)

1 franela pequea para limpieza del rea del trabajo
2 hojas de papel milimtrico (por integrante de equipo de trabajo)

Reactivos (por grupo):

Solucin 5x10-4 M de K2Cr2O7 (100ml)
Solucin 5x10-4 M de KMnO4 (100ml)
Agua destilada
2 pipetas graduadas de 10ml

METODOLOGIA.
1.- Encender el UV-VIS Marca Genesys 20, siguiendo el protocolo de encendido indicado por el
profesor. Esperar 30 minutos para que la lmpara alcance su mxima intensidad.
2.- Forrar con papel aluminio dos vasos de precipitado de 50 ml, elaborando una pequea tapa
para evitar que la luz haga contacto con los reactivos que se depositarn en cada vaso. Depositar
en un vaso de precipitado de 50ml, aproximadamente 10 ml de solucin 5x10 -4 M de K2Cr2O7; de
igual manera, en el otro vaso de precipitado, depositar 10ml de solucin 5x10 -4 M de KMnO4

3.- Habindose colocado previamente los guantes, tomar cuidadosamente las celdas, revisando
que estn limpias; manejarlas con cuidado evitando rayarlas. Si es necesario, enjuagar con agua
destilada dejndolas secar brevemente.
NOTA: Si se manejan celdas de cuarzo y llegaran a estar sucias, enjuagar cuidadosamente con
una solucin 1:1 de HCl 3N y alcohol etlico absoluto, aplicando un enjuague final con solo alcohol
etlico y dejando secar al aire.
4.- Transcurridos los 30 minutos indicados en el punto 1 , tomar una primera celda con cuidado y
llenar con agua destilada hasta la marca, cuidando que no se formen burbujas. Sujetando la celda
por la parte esmerilada, limpiar el exterior con un pao y suave, evitando rayarla.
5.- Enjuagar las dos celdas restantes con pequeas porciones de la solucin correspondiente, una
con solucin de K2Cr2O7 y la otra con solucin de KMnO 4, cuando menos 3 veces. Despus de
haberlas enjuagado, llenar cada celda con la solucin respectiva hasta la marca, evitando la
formacin de burbujas y limpindolas con un pao limpio y suave. Precaucin: Depositar los
residuos de los reactivos qumicos utilizados (K 2Cr2O7 y KMnO4) en el lugar indicado por el
profesor para la gestin de residuos peligrosos realizada por el Laboratorio.
6.- Introducir en el portaceldas del espectrofotmetro, en primer lugar el blanco
7.- Seleccionar en el espectrofotmetro una longitud de onda de 330 nm.
8.- Calibrar el blanco a 0 Abs/100T.
9.- Despus de retirar del portaceldas la celda que contiene el blanco, colocar en primer lugar la
celda que contiene la solucin de K 2Cr2O7. Leer la absorbancia correspondiente y anotar su valor.
Repetir el procedimiento de lectura, pero ahora con la solucin de KMnO 4. Nota: si fuera
necesario, verificar la calibracin del blanco entre las lecturas de cada solucin.
10.- Repetir los pasos 8 y 9, pero variando la longitud de onda en incrementos de 20 nm, desde
330 hasta 610 nm.
11.- Despus de haber realizado las mediciones, enjuagar.

OBSERVACIONES

Lo primero que procedimos a

hacer

fue

forrar

nuestros

vasos

de

precipitado

de

manera que la luz no hiciera

contacto con los reactivos.

Posteriormente una vez forrados los vasos perfectamente

procedimos a depositar 10 ml de cada solucin una de K 2Cr2O7
5x10-4M y la otra con solucin de KMnO4 5x10-4M en los vasos de
precipitado.

Una vez aadidas las soluciones

tapamos los vasos para evitar el
contacto con la luz hasta, y las
destapamos hasta que colocamos
estas soluciones en las celdas
para medir la absorbancia.

Antes de pasar a medir la absorbancia de nuestras soluciones observamos que tuviramos

todo lo que bamos a ocupar como los guantes puestos, llevar el pao y franela para
limpiar en caso que se derramara alguna sustancia, observamos que las celdas se
encontraban limpias y procedimos a iniciar nuestra prctica.
Tomamos la primera celda y le agregamos agua destilada hasta donde indicaba la marca y
la tiramos porque vimos que se vean burbujas, en el siguiente intento quedo
perfectamente la celda cubierta por agua destilada hasta la marca, sujetamos la celda con
mucho cuidado, evitando rayarlas y tomndolas por la parte esmerilada.
De igual manera hicimos esto con las soluciones que estaban en los vasos de
precipitado, tuvimos que poner en las celdas las soluciones hasta la marca indicada, en
el primer caso en la celda de de K 2Cr2O7 5x10-4M la enjuagamos perfectamente antes de
utilizarla para medir la absorbancia y con la otra con solucin de KMnO 4 5x10-4M hicimos
lo mismo antes de pasar a medir en el espectrmetro.

Lo primero que hicimos al

utilizar este aparato fue
calibrarlo a 330nm con
nuestra celda de agua
destilada

para

posteriormente
analizar
soluciones

las

poder
otras

A continuacin mostraremos distintos resultados de las mediciones de absorbancia que

obtenamos de nuestras soluciones.

En estas imgenes podemos observar que realizamos primeramente el

calibrado de manera correcta a 430nm con agua destilada como lo indica la
tcnica que debe de ser y posteriormente analizamos la absorbancia del
K2Cr2O7 5x10-4M y del KMnO4 5x10-4M obteniendo como resultado que el
K2Cr2O7 5x10-4M da como resultado 0.177 y KMnO 4 5x10-4M 0.255 pero que
desafortunadamente no pudimos captar ese resultado.

Absorbancia del K2Cr2O7 5x10-4M

Absorbancia del K2Cr2O7 5x10-4M

A 410 nm = 0.177

A 410nm= 0.107

Longitud de

ABSORBANCIA

ABSORBANCIA

onda

K2Cr2O7 5x10-4 M

KMnO4 5X10-4M

330nm

0.45

0.519

350nm

0.75

0.499

370nm

0.783

0.428

390nm

0.471

0.318

410nm

0.177

0.255

430nm

0.107

0.503

450nm

0.085

0.194

470nm

0.052

0.214

490nm

0.027

0.299

510nm

0.009

0.418

530nm

0.003

0.496

550nm

0.001

0.459

570nm

0.002

0.271

590nm

0.001

0.087

-4
Absorbancia
del KMnO4del
5x10
M 4 5x10-4M
Absorbancia
KMnO

A 430 nm=A0.194
490 nm= 0.299
CALCULOS Y RESULTADOS
1.- Elaborar una tabla para cada solucin estudiada, como se indica a continuacin

2.- En una hoja de papel milimtrico, construir la curva de absorcin correspondiente a cada
ABSORBANCIA

ABSORBANCIA

K2Cr2O7 5x10-

KMnO4 5X10-

4M

4M

3.-

solucin estudiada, ubicando a la

absorbancia en el eje de las Y contra
longitud de onda en el eje de las X.
En base a los resultados
presentados, determinar la longitud
onda analtica de cada solucin
estudiada, reportando los resultados
la bitcora personal para su revisin
parte del profesor

de
en
por

Object 3

Longitud de
onda
330nm
350nm
370nm
390nm
410nm
430nm
450nm
470nm
490nm
510nm
530nm
550nm
570nm
590nm

0.45
0.75
0.783
0.471
0.177
0.107
0.085
0.052
0.027
0.009
0.003
0.001
0.002
0.001

0.519
0.499
0.428
0.318
0.255
0.503
0.194
0.214
0.299
0.418
0.496
0.459
0.271
0.087

Obtuvimos una mxima absorbancia

en el K2Cr2O7 que fue a una longitud de onda de 370nm y en el kmno4 obtuvimos la mxima
absorbancia en 330nm

4.- Qu concluye acerca de los resultados obtenidos? Coinciden con los que marca la
bibliografa?
Que los resultados que obtuvimos durante la prctica son aproximados a los que esperbamos,
pero cabe destacar que debemos considerar que los resultados varan, ya que debemos tomar en
cuenta muchos factores para la determinacin de la absorbancia de la solucin como son las
condiciones de los reactivos empleados en estas, as como tambin tener en cuenta los errores
aleatorios y sistemticos que son un factor que influye mucho en nuestra obtencin de resultados.

CONCLUSIONES

En

esta

prctica

aprendimos

cmo

utilizar

el

espectrofotmetro de manera correcta siguiendo las

pasos que nos indicaba la prctica tanto de calibrado,
de

cmo

tenamos

que

agarrar

las

celdas

que

introduciramos a este, y los cuidados que debamos

de

tener al manejarlo por ejemplo, las celdas deban de

contener las soluciones bien sin ninguna burbuja, lo

limpibamos con un pao, y debamos de llenar la celda hasta la marca indicada, as

mismo que debamos enjuagar estas para obtener unos resultados ms confiables,
pudimos observar como los datos de la absorbancia iban variando conforme
aumentbamos la longitud de la onda, en el caso del KMnO 4 observamos cmo nos
mostraba los datos de absorbancia que eran altos y luego bajos y as vario hasta
concluir la prctica, lo contrario del K2Cr2O7 que solo mostro resultados altos al
principio y de ah fue disminuyendo.
Enrique Cinta Gonzlez
Mediante esta prctica aprend a utilizar correctamente el espectrofotmetro de una
manera ms completa porque en esta ocasiona trabajamos con reactivos los cuales
fueron: el agua destilada (El blanco), el K2Cr2O7 (Cromato) y el KMnO4
(Permanganato). La configuracin del espectrofotmetro es sumamente sencilla haba
que prestar mucha atencin ya que hay estar configurando por cada longitud de onda y
tambin cuidar la manera correcta de introducir nuestra celda. Cabe mencionar que al
introducir la celda del blanco siempre nuestro resultado era 0 y de nuestros otros dos
reactivos observe que su absorbancia variaba mucho lo cual me preocupo pero la
maestra nos coment que no haba problema alguno.
Estela Estefania Torres Ortiz
En esta prctica aprendimos todos los cuidados que debemos tener al introducir las
celdas al espectrofotmetro, como se deben limpiar y como aadir las soluciones

correctamente, tambin aprendimos a utilizar correctamente el espectrofotmetro para

poder obtener la curva de calibracin deseada.
Kathia Marely Martnez Snchez
BIBLIOGRAFA

http://es.slideshare.net/juandavidjaramilloorozco1/laboratorio-deespectrofotometra-1
http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETR
%C3%8DA.pdf
https://es.wikipedia.org/wiki/Espectrofotometr%C3%ADa
https://bachinternacional.wikispaces.com/file/view/DETERMINACI
%C3%93N+ESPECTROFOTOM%C3%89TRICA+de+concentraciones.pdf