ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA DE

CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE CIENCIAS QUMICAS
CARRERA: BIOTECNOLOGA AMBIENTAL
GUA DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
PRCTICA No. 1: Seguridad en el laboratorio de
Microbiologa
1. DATOS GENERALES:
NOMBRES:

CDIGOS:

EVELYN CRISTINA GUTIRREZ QUERO

2622

PAOLA FERNANDA ARREGUI ARELLAN

2656

JESSICA PATRICIA ALTAMIRANO EGUEZ

2647

JHONY DANIEL ALVARIO QUISATASIG

2616

GRUPO No. : 5
FECHA DE REALIZACIN:

FECHA DE ENTREGA:

29 de Noviembre del 2016

6 de Diciembre del 2016

2. OBJETIVOS:
2.1.

GENERAL
Conocer las normas de seguridad, las instalaciones y el manejo adecuado de los
equipos del laboratorio de microbiologa para su correcto uso durante las
prcticas.

2.2.

ESPECFCOS

2.2.1. Determinar las normas de seguridad del laboratorio para evitar cualquier
incidente.
2.2.2. Entender el funcionamiento de los diferentes instrumentos y equipos que
se encuentran en el laboratorio de microbiologa.
2.2.3. Conocer algunos mtodos de desinfeccin de ciertos instrumentos que se
emplearan en las diferentes prcticas.

3. INTRODUCCIN

El presente informe de laboratorio, pretende dar a conocer y ampliar las reglas

generales de seguridad e higiene que deben cumplirse en un laboratorio de
microbiologa, para lo cual se han tomado en cuenta distintos temas para obtener un
panorama ms amplio. Las normas de seguridad del laboratorio de microbiologa
son de vital importancia, porque nos permite hacer un buen uso de los equipos,
instalaciones y materiales de cultivo. Al hacer referencia a normas de seguridad
estamos describiendo un conjunto de reglas que se deben tomar en cuenta al
momento de realizar una prctica, ya que esto involucra el uso de equipamientos y
otros elementos cuyos riesgos es necesario conocer. Para esto realizamos un
anlisis detallado del tema con el fin de entender y conocer a que riesgos estamos
expuestos, ya que los laboratorios de microbiologa constituyen ambientes de
trabajo especiales, que pueden presentar riesgos de enfermedades infecciosas para
las personas que se encuentren en ellos. A continuacin daremos a conocer las
normas bsicas del laboratorio de microbiologa, as como, los procedimientos que
se deben llevar a cabo antes y despus de una prctica y el correcto uso de
instalaciones y equipos de laboratorio. Finalmente despus de haber dejado en claro
las normas de seguridad tanto para equipos, como para el correcto uso de material
de cultivo pondremos nfasis en explicar la importancia de conocer cules son las
normas de seguridad a seguir en el laboratorio de tal manera que el trabajo se realice
con un riesgo mnimo de exposicin, tanto para las personas que lo ejecutan como
para el medio ambiente y as poder salvaguardar la integridad y seguridad de cada
uno.

4. DESARROLLO

Equipos del laboratorio de Microbiologa definicin y correcta utilizacin:

4.1. Cmaras de flujo laminar: Es un receptculo en forma generalmente
prismtica con una nica cara libre, la frontal que da acceso al interior, donde se
localiza la superficie de trabajo, que normalmente permanece limpia y estril.
Adems pueden tener una lmpara de rayos ultravioleta-C con accin germicida
para esterilizar el recinto y su contenido.
Utilizacin:
Es un sistema diseado para proporcionar un caudal de aire limpio y constante a
travs de un filtro HEPA, direccionndolo hacia la parte inferior de la cabina y
recirculando al ambiente por la parte frontal, creando una presin que protege la
muestra de la contaminacin (1).
4.2. Incubadora: Es un equipo cerrado que permite controlar la temperatura,
humedad y otras condiciones necesarias para el desarrollo de un cultivo
microbiolgico.
Utilizacin:
Las incubadoras son esenciales para una gran cantidad de trabajos experimentales
en biologa celular, la microbiologa y en biologa molecular pues se utilizan para
cultivos celulares, tanto bacterianos como de eucariotas(2).
4.3. Estufa de secado: Son aquellas que estn diseadas para el cultivo
microbiolgico con puerta interior de vidrio, sistemas de control de temperatura
desde refrigeracin a 100C para secado de material o esterilizacin en seco adems
est fabricado en su interior y exterior con material de acero inoxidable, por lo cual
tiene gran durabilidad, y gracias a un microprocesador tiene uniformidad en la
temperatura.
Utilizacin:
Se emplea para esterilizar o secar el material de vidrio y metal utilizado en los
exmenes que se realiza en el laboratorio y que proviene de la seccin de lavado.
Tambin al ser calentada por aire a alta temperatura, absorbe humedad y elimina la
posibilidad de que se mantenga cualquier actividad biolgica debido a las elevadas
temperaturas y a los tiempos utilizados (3).
4.4. Incubadora agitadora: Es un equipo que permite la realizacin de ensayos de
crecimiento y viabilidad de clulas cancergenas con materiales polimricos, fluidos
biolgicos y muestras de tejidos en condiciones de temperatura y agitacin
controladas. El rango de temperatura se halla comprendido entre 25 y 42 C, y la
velocidad de agitacin puede variar entre 50 y 250 rpm.
Utilizacin:
Se utilizan mucho para aplicaciones de biloga, como por ejemplo para cultivos
celulares, de tejido, para estudios bioqumicos y aireacin de clulas (4).

4.5. Cmara de esterilizacin: Es aquella que comprende todos los procedimientos

fsicos, mecnicos y preferentemente qumicos, que se emplean para destruir
grmenes patgenos.
Utilizacin:
Se utiliza en el proceso de eliminacin microbiana y por ende garantizan la no
contaminacin de muestras o cultivos, hechos fundamentales en la validez de un
resultado en el laboratorio.
4.6. Centrifugas: Es un equipo de laboratorio que genera movimientos de rotacin,
tiene el objetivo de separar los componentes que constituyen una sustancia.
Utilizacin:
Es utilizada en los laboratorios como proceso de la separacin de la sedimentacin
de los componentes lquidos y slidos en particular.
4.7. rea de microscopia: Se basa en el diagnstico morfolgico de los distintos
estados de los microrganismos tiene como objetivo pesquisar e identificar distintas
formas microscpicas adems su sensibilidad depende de las caractersticas de las
tcnicas, de la carga infectante, de la biologa de los parsitos, del transporte y
preparacin de la muestra.
Utilizacin:
Se utilizan para obtener una imagen aumentada de objetos minsculos o detalles
muy pequeos de los mismos Algunas de ellas son, tcnicas de preparacin y
manejo de los objetos de estudio, tcnicas de salida, procesamiento, interpretacin y
registro de imgenes (5).
4.8. Ultrasonido: Es una tcnica eficaz para retirar los contaminantes de piezas
sumergidas en soluciones acuosas, contaminantes tan distintos como grasas y aceite,
abrasivos, agentes de pulido entre otros que pueden ser fcilmente retirados, sin
daar las piezas.
Utilizacin:
Son utilizaos para la limpieza de diferentes elementos, la desgasificacin de
solventes HPLC, la mezcla, la dispersin y la emulsificacin.
4.8. Bao mara: Es un mtodo empleado en las industrias farmacutica, cosmtica
y en laboratorio de microbiologa para conferir temperatura uniforme a una
sustancia lquida o slida o para calentarla lentamente, sumergiendo el recipiente
que la contiene en otro mayor con agua u otro lquido que est en ebullicin.
Utilizacin:
Se utiliza en el laboratorio para realizar pruebas serolgicas y procedimientos de
incubacin, aglutinacin, inactivacin, biomdicos, farmacuticos y hasta
industriales. Por lo general, se utilizan con agua, pero tambin permiten trabajar con
aceite. Los rangos de temperatura en los cuales normalmente son utilizados estn
entre la temperatura ambiente y los 60 C (6).
5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:
5.1.

Conclusiones

5.1.1. Se conoci correctamente las instalaciones del laboratorio as como los

diferentes cuartos dnde se realizaran los procesos de cultivacin de
microorganismos y desinfeccin de instrumentos.
5.1.2. Se determin las normas de seguridad que debern seguir en el
laboratorio a fin de evitar incidentes. Entre las distintas normas
tenemos el correcto uso del mandil, guantes y cofia, tener ropa ligera y
zapatos cerrados, no comer ni traer bebidas al laboratorio, entre otras
ms.
5.1.3. Se observ y determin el correcto uso de los diferentes equipos de
las instalaciones como por ejemplo el rea de microscopa, reas de
pesado, refrigeradoras, cmaras de flujo laminar, incubadora agitadora,
estufa de secado, cmara de esterilizacin, centrfugas, microondas, a
fin de conocer todo lo necesario para el cultivo y produccin de
microorganismos.
5.1.4. Se conoci algunos mtodos para la limpieza de ciertos artefactos tales
como: las cajas Petri que deben ser envueltas en algodn para luego ser
desinfectadas, las pipetas que deben estar con las puntas a un solo lado
al momento de envolverlas en papel aluminio para no volver a
contaminarlas cuando se las saca.
5.2.

Recomendaciones
5.2.1. Se recomienda desinfectar el lugar de trabajo antes de iniciar la
practicas y al momento de concluirlas en caso de haya habido algn
tipo de derrame de material contaminante.
5.2.2. Tomar nicamente las cantidades de material de cultivo que se
indiquen o sean necesarias para que la experimentacin concluya con
xito.
5.2.3. Se recomienda utilizar los materiales y equipos de laboratorio de una
manera muy cuidadosa ya que son muy costosos, frgiles y podran
daarse.
5.2.4. Antes de utilizar un cultivo debemos analizar las etiquetas para evitar
cualquier riesgo para nuestra salud y tambin para el laboratorio.
5.2.5. Debe utilizarse guantes en el momento de manipular microorganismos
o sustancias qumicas que se puedan absorber a travs de la piel.
5.2.6. Mientras se permanezca en el laboratorio el uso de la bata o mandil es
indispensable, porque nos protege de cualquier tipo de derrame
bacteriano.
5.2.7. Usar correctamente los equipos de laboratorios para no tener
accidentes graves.

7.- BIBLIOGRAFA:
1. Gonzales M. (2015). Camaras de flujo laminar y su utilizacin. Recuperado de:
http://www.equiposylaboratorio.com/sitio/contenidos_mo.php?it=1891

2. Vicente R. (2012). Definicin de incubadoras y utilizacin. Recuperado de:

http://www.instrumentosdelaboratorio.net/2012/08/incubadora.html
3. Alvarez
T(2013).
Incubadora
agitadora.
Recuperado
de:
http://www.instrumentosdelaboratorio.net/2012/08/estufa-de-secado-u-horno-desecado.html
4. Rosero
P
(2016).
Centrifugas
y
sus
usos.
Recuperado
de:
http://www.equiposylaboratorio.com/sitio/contenidos_mo.php?it=837
5. Hernandez
J.
(2010).Microondas
y
sus
usos.
Recuperado
de:
https://pendientedemigracion.ucm.es/info/otri/cult_cient/infocientifica/noti_mar_2
010_03.htm
6. Duran C. (2010). Refrigerador normal y su uso. Recuperado de:
http://www.instrumentosdelaboratorio.net/2012/08/el-refrigerador-delaboratorio.html
7. Gonzales.
D.
(2008).
Microbiologa
General.
Recuperado
de:
http://campus.usal.es/~micromed/Practicas_odontologia/unidades/labv/LabMicro/
practica1.html
8. Sla, G. (12 de Marzo de 2015). Minesteirio de trabajo y asuntos sociales de
Espaa. Recuperado el 03 de Diciembre de 2016, de Prevencin del riesgo en el
laboratorio.
Organizacin
y:
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/NTP/Fi
cheros/401a500/ntp_432.pdf
9. Unirioja. (17 de Julio de 2014). Universidad de Rioja. Recuperado el 03 de
Diciembre de 2016, de Prevencin de riesgos en las prcticas de laboratorio:
https://www.unirioja.es/servicios/sprl/pdf/laboratorios_alumnos.pdf
10. UNL. (Julio de 2013). Comisin de higiene y seguridad del trabajo. Recuperado
el 03 de Diciembre de 2016, de Principios generales de bioseguridad:
www.fcdb.unl.edu.ar

Cuestionario:
1.- Que es la bioseguridad, de cuantos niveles consta y que caractersticas posee cada
uno de estos niveles (7)?

La bioseguridad, se define como el conjunto de medidas preventivas, destinadas a mantener

el control de factores de riesgo laborales procedentes de agentes biolgicos, fsicos o
qumicos, logrando la prevencin de impactos nocivos. Consta de 4 niveles que son:
Nivel de Bioseguridad 1 (BSL-1)
BSL-1. Prcticas, equipo y medidas de seguridad mnimas para un nivel de
enseanza,
GR1. No emplea barreras primarias ni secundarias.
No representan una amenaza para la salud humana

Lavado de manos

Puertas cerradas

Acceso limitado a espacios

Cuidado de no salpicar

Descontaminacin de superficies, despus de trabajar.

Equipo de proteccin personal: batas, guantes de ltex, lentes, mascarillas, etc.

Nivel de Bioseguridad 2 (BSL-2)

BSL-2. Prcticas, equipo y medidas para laboratorios de anlisis clnico y patologa
clnica.
GR-2 Acceso restringido en operacin, uso de barreras primarias (campanas
biolgicas).
Personal capacitado en el manejo de agentes de riesgo.

Restriccin de paso mientras se trabaja.

Seales de advertencia de peligro biolgico.

Vigilancia personal de seguridad.

Campanas de seguridad biolgica.

Dejar las batas antes de salir del rea de trabajo

Nivel de Bioseguridad 3 (BSL-3)

BSL-3. Prcticas y equipo para manejo de patgenos letales.
GR3, barreras primarias y secundarias (CSB, acceso controlado a las reas, HVAC
-presin negativa-.
Acceso estrictamente controlado.

Altamente capacitados en agentes letales.

Corredores separados del acceso al lab.

Acceso a travs de puertas dobles.

Flujo de aire negativo/sin recirculacin.

Campanas de seguridad biolgica.

Nivel de Bioseguridad 4 (BSL-4)

BSL-4. Prcticas y equipo para manejo de patgenos exticos y mortales
GR4, barreras primarias y secundarias (CSB, HVAC dedicado -presin negativa-,
edificio independiente o zona aislada, respiracin autnoma, descontaminacin de
desechos, ante cuarto.)
Acceso prohibido.

Acceso por puertas dobles c/regadera.

Flujo de aire negativo/sin recirculacin.

Sistema respiratorio autnomo.

Descontaminacin de desechos.

2.- Mencione las diferencias entre un laboratorio de microbiologa y un laboratorio

convencional (8).
Laboratorio de microbiologa

Un laboratorio de Microbiologa es
un lugar habilitado para manejar y
estudiar microorganismos.

Un laboratorio de microbiologa
posee ducha de emergencia, por si
ocurre algn derrame de material que
contenga
microorganismos
patgenos.

El trabajo debe realizarse de acuerdo

con los estndares tcnicos y de
seguridad propios de un laboratorio
de Microbiologa.

Todas

las muestras deben ser

manejadas con precaucin por su
potencial patogenicidad.

Para

deshacerse
del
material
contaminado se deben utilizar
recipientes adecuados que deben ser
esterilizados posteriormente.

Laboratorio convencional.
Un laboratorio convencional es un
lugar donde no se trabaja con
reactivos ni mucho menos con
microrganismos.
En un laboratorio convencional no
posee ducha de emergencia.

No contiene normas de seguridad

porque no se trabaja con organismos
vivos, ni reactivos.
No existen habitaciones en cuales se
separe equipo
Para el manejo de los objetos
presentes
en
un
laboratorio
convencional no es necesario tomar
precauciones, ya que estos no causan
ningn dao ni enfermedad.
Para
deshacerse
del
material
contaminado no es necesario utilizar
recipientes especiales.

3.- Mencione los pasos a seguir cuando un cultivo liquido bacteriano se derrama sobre
una superficie (9).
Mantener la calma.
Lavado. Primero se eliminan los restos groseros de cristal, plstico, agar, etc., despus se
lava con abundante agua y un detergente acuoso y a continuacin se inicia la
desinfeccin. Hay que tener en cuenta que cualquier sustancia orgnica (agar sangre,
restos de peptona,etc.) es extraordinariamente bloqueante de la capacidad oxidativa del
hipoclorito sdico y de la capacidad de actuacin de los iodforos; por ello, la norma es
primero limpiar y despus desinfectar.
Desinfeccin. Se emplear un desinfectante preferentemente lquido. Los ms tiles en el
laboratorio son:

Hipoclorito sdico. De eleccin para suelos, cermica, etc. No debe usarse en

superficies metlicas. Se utiliza a la dilucin pertinente para conseguir 50000 p.p.m.
de cloro libre. Se vierte haciendo un crculo alrededor del derrame, o mejor sobre
papel absorbente, y se deja actuar 20 minutos.

Iodforo. Se utiliza a la dilucin indicada por el fabricante. Adecuado en superficies

metlicas.

Alcohol etlico al 70%.

Productos detergentes desinfectantes. Agentes como Virkon (perxido tamponado con

surfactante), de fcil manejo, no corrosivo, no irritante, especialmente activo en
presencia de materia orgnica y que cambia de color cuando deja de ser activo.

4.- Cules son los riesgos y problemticas en el grupo que se tendrn al no seguir las
indicaciones recomendadas? (10)
El riesgo que se puede correr si es que no se toman las debidas precauciones son:

Contaminacin por microorganismos patgenos: la manipulacin inadecuada, presenta

efectos txicos sobre tejidos vivos.
Intoxicacin digestiva: Por cualquier toxico txico ingerido es por eso que se debe leer
la etiqueta del envase que lo contiene.
Quemaduras por productos qumicos: cidos o bases, en contacto con la piel, ojos,
inhalacin.
Electrocucin: tiene lugar cuando, por un contacto elctrico directo o indirecto, una
persona pasa a formar parte de un circuito elctrico, transcurriendo por su organismo una
determinada intensidad elctrica durante un tiempo.
Cortes o punciones con material de vidrio: al cortar varillas de vidrio o introducirlas en
corchos horadados.
Un pequeo incendio: Lquidos inflamables, sobre todo los compuestos lquidos con
bajo punto de ebullicin como los disolventes orgnicos.
Mareos o prdida de conocimiento: debido a una fuga txica.

5.- Enliste los equipos y materiales a utilizarse en el laboratorio de microbiologa con su

respectiva descripcin y uso (10).

Mesas de laboratorio y fregadero: es usada para realizar las practicas que se va a hacer
en el laboratorio generalmente debe estar cuidada y muy limpia.
Vitrinas y armarios: utilizado para instrumentos de laboratorio as como tambin para
almacenamiento de cidos o gases.
Mechero Bunsen: utilizado en los laboratorios cientficos para calentar, esterilizar o
proceder a la combustin de muestras o reactivos qumicos.
Gradillas: s utilizada para sostener y almacenar gran cantidad de tubos de ensayo o tubos
Eppendorf.
Incubadora: permite controlar la temperatura, humedad y otras condiciones necesarias
para el desarrollo de un cultivo microbiolgico.
Frigorfico o cmaras refrigeradas
Autoclaves:sirve para esterilizar material de laboratorio, utilizando vapor de agua a alta
presin y temperatura , cuagula las protenas de los microorganismos.
Congeladores: su funcin consiste en mantener, en un ambiente controlado (espacio
refrigerado) diversos fluidos y sustancias, para que los mismos se conserven en buenas
condiciones.
Microscopio ptico: empleado para examinar objetos transparentes, o laminas muy finas.
Se utiliza para poder ampliar o aumentar las imgenes de objetos no visibles a simple
vista
Centrfuga: es una mquina de rotacin para separar componentes sirve para acelerar
el proceso de sedimentaciones.
Cmaras de seguridad biolgica: espacio de trabajo cerrado y ventilado para trabajar de
modo seguro con materiales contaminados (o potencialmente contaminados) con agentes
patgenos (bacterias, virus...)
Desionizador de agua: equipos de purificacin de agua, con conexin directa a la red y
flujo continuo. Filtracin del agua a travs de resinas de lecho mixto para intercambio
inico
Contador de colonias: es un instrumento utilizado para contar colonias de bacterias o de
otros microorganismos que crecen en una placa de agar.
Balanzas: es un instrumento que sirve para medir la masa de los objetos. Es una palanca
de primer grado de brazos iguales que, mediante el establecimiento de una situacin de
equilibrio entre los pesos de dos cuerpos, permite comparar masas.
Baos termostticos: se utiliza para mantener una solucin a una temperatura constante
durante el tiempo que nos interesa.
Agitador/ mezclador: se utiliza para mezclar lquidos o preparar disoluciones y
suspensiones.
Jarras de anaerobios: es un recipiente ideal para realizar incubaciones
en anaerobiosis ya que en su soporte de acero inoxidable se pueden instalar bolsas de
generacin de atmsfera libre de oxgeno.
Asas de siembra: se usan para sembrar pueden ser metlicas o de plsticos, curvas o
restas (para la siembra por picadura).
Ph-metros: sensor utilizado en el mtodo electroqumico para medir el pH de una
disolucin.
Placas de Petri: sirve para crear cultivos microbianos
Asas acodadas o Asas de Digralsky: asa para siembra por diseminacin en superficie.

Portas y cubres: los porta es una lmina donde se coloca el objeto para poder ser
observado en el microscopio y los cubre objeto cubre preparaciones microscpicas
sobre el portaobjeto.
Vasos de precipitados y matraces: se utiliza muy comnmente en el laboratorio, sobre
todo, para preparar o calentar sustancias y traspasar lquidos.
Cucharas y esptulas: consiste en una lmina plana de metal con agarradera o mango
similar a un cuchillo con punta roma. Segn su uso, hay diferentes tipos de esptula.

ANEXOS 1

a)

b)

c)

d)

Notas:
a) Cmara de flujo laminar
b) Incubadora
c) Incubadora Agitadora
d) Cmara de Esterilizacin UV

Seguridad en el laboratorio de
Microbiologa
CATEGORIA
DEL DIAGRAMA
POR CALIFICAR

ESPOCH
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE CIENCIAS QUMICAS
LABORATORIO

12-2016
MICROBIOLGA

ANEXOS 2

LMINA

ESCALA

FECHA

A4

06-

e)

f)

g)

d)

Notas:
e) Centrfuga
f) Microscopios
g) Ultra sonido
h) Materiales de cultivo

Seguridad en el laboratorio de
Microbiologa
CATEGORIA
DEL DIAGRAMA
POR CALIFICAR

ESPOCH
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE CIENCIAS QUMICAS
LABORATORIO

12-2016
MICROBIOLGA

ANEXOS 3

LMINA

ESCALA

A4

FECHA

06-

i)
Notas:
i) Auto clave
j) Bao Mara
k) Reverbero
m) Estufa de secado

j)

k)

m)
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