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M.C. Gutirrez, M.

Droguet
IDENTIFICACIN DE COMPUESTOS VOLTILES POR CG-MS

LA CROMATOGRAFA DE GASES Y LA ESPECTROMETRA DE MASAS:


IDENTIFICACIN DE COMPUESTOS CAUSANTES DE MAL OLOR

M.C. Gutirrez*, M. Droguet**

0.1. Resumen 0.3. Rsum: LA CHROMATO-


Se describe la cromatografa de gases y su GRAPHIE EN PHASE GAZEUSE
acoplamiento con la espectrometra de masas, ET LA SPECTROMTRIE DE
tcnicas que constituyen una herramienta potente
para separar, identificar y cuantificar los
MASSES: IDENTIFICATION DES
componentes voltiles y semivoltiles de mezclas COMPOSS QUI PRODUISENT
complejas. UNE MAUVAISE ODEUR
Se aplican estas tcnicas a la identificacin La chromatographie en phase gazeuse et la
de los compuestos que producen mal olor en un spectromtrie de masses sont dcrites. Le
tejido. Para ello, se emplea tambin la extraccin couplement de ces deux techniques constitue un
de espacio en cabeza. De los resultados del outil important pour sparer, identifier et quantifier
anlisis GC-MS se desprende que la principal les composs volatiles et semi volatiles de
causa del mal olor es la presencia de sulfuros mlanges complexes.
orgnicos en el tejido. Ces techniques sont appliques
lidentification des composs qui produisent une
Palabras clave: Cromatografa de gases, GC, espectrometra mauvaise odeur sur un tissu. Dans ce cas, la
de masas, MS, cromatografa de gases-espectrometra de
technique dextraction head-space est aussi
masas, GC-MS, espacio en cabeza, head-space, compuestos
orgnicos voltiles, mal olor, sulfuros orgnicos, dimetil employe. Daprs les rsultats de lanalyse, la
disulfuro, dimetil trisulfuro principale cause de la mauvaise odeur est attribue
la prsence de sulphurs organiques sur le tissu.
0.2. Summary: GAS CHROMATOGRA- Mots cls: Chromatographie en phase gazeuse, GC,
PHY AND MASS SPECTRO- spectromtrie de masses, MS, chromatographie en phase
METRY: IDENTIFICATION OF OFF- gazeuse-spectomtrie de masses, GC-MS, head-space,
composs organiques volatiles, mauvaise odeur, sulphurs
ODOURS COMPOUNDS organiques, dimetyl disulphur, dimethyl trisulphur
Gas chromatography and mass
spectrometry are described. The coupling of these
techniques constitutes a potent tool to separate, 1. INTRODUCCIN
identify and quantify the volatile and semi-volatile El primer trabajo en el que se hace pasar
components of complex mixtures. una fase mvil gaseosa a travs de una columna
These techniques are applied to the data de 1951, dando lugar a la tcnica conocida
identification of compounds which produce off- como cromatografa de gases. Esta tcnica,
odours on a fabric. In this case the head-space descrita por Martin y James en 1952, es en la
extraction is also used. The analysis results show actualidad en mtodo usado ampliamente para la
that the main cause of these odours is the presence separacin de los componentes voltiles y
of organic sulfides on the fabric. semivoltiles de una muestra. La combinacin de
altas resoluciones, sensibilidad y tiempos de
anlisis cortos la ha convertido una tcnica de
Key words: Gas chromatography, GC, mass spectrometry, MS, rutina usada en la mayora de los laboratorios
gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS, head-space, qumicos.
volatile organic compounds, bad smell, organic sulphurs,
Respecto a la cromatografa lquida, la
dimethyl disulfide, dymethil trisulfide
cromatografa de gases tiene la ventaja de disponer
de detectores mucho ms universales (por ejemplo,
el de ionizacin de llama). Adems, para
numerosas aplicaciones, los mtodos son ms
simples, ms rpidos y ms sensibles que los
* M. Carmen Gutirrez Bouzn, Dra. en Qumica, correspondientes a la cromatografa lquida de alta
Investigadora de la Universidad Politcnica de resolucin. La instrumentacin requerida para
Catalunya, en el Laboratorio de Control de la cromatografa de gases tambin es mucho ms
Contaminacin Ambiental
sencilla y econmica que la empleada en HPLC.
** Marta Droguet, Ing. Industrial, Lasem Sin embargo, en cromatografa de gases, la
influencia de la temperatura sobre la distribucin
del equilibrio es considerable, a diferencia de la

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cromatografa lquida. Por ello, la cromatografa de La columna se encuentra dentro de un


gases presenta limitaciones en tres casos: horno con programacin de temperatura. La
compuestos poco voltiles, generalmente los velocidad de migracin de cada componente (y en
de peso molecular superior a 300 u.m.a., consecuencia su tiempo de retencin en la
compuestos sensibles a una elevacin de la columna) ser funcin de su distribucin entre la
temperatura incluso moderada (determinados fase mvil y la fase estacionaria.
compuestos de inters biolgico), Cada soluto presente en la muestra tiene
compuestos que se encuentran en forma inica una diferente afinidad hacia la fase estacionaria, lo
(puesto que son en general poco voltiles). que permite su separacin: los componentes
Por esta razn, la cromatografa de gases fuertemente retenidos por esta fase se movern
se emplea cuando los componentes de la mezcla lentamente en la fase mvil, mientras que los
problema son voltiles o semivoltiles y dbilmente retenidos lo harn rpidamente. Un
trmicamente estables a temperaturas de hasta factor clave en este equilibrio es la presin de
350-400C. En cambio, cuando los compuestos a vapor de los compuestos (en general, a mayor
analizar son poco voltiles y/o termolbiles, la presin de vapor, menor tiempo de retencin en la
tcnica separativa adecuada suele ser la columna). Como consecuencia de esta diferencia
cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC). de movilidad, los diversos componentes de la
A menudo la cromatografa de gases se muestra se separan en bandas que pueden
emplea para confirmar de la presencia o ausencia analizarse tanto cualitativa como cuantitativamente
de un compuesto en una muestra determinada. mediante el empleo de los detectores
Esto se lleva a cabo por comparacin del seleccionados.
cromatograma de la sustancia pura con el de la Existen tres tcnicas bsicas de inyeccin
muestra, siempre que las condiciones para la de muestras (lquidas o gaseosas) en columnas
obtencin de ambos sean idnticas. Una de las capilares: split, split-less y on column. Las dos
dificultades de esta comparacin es que puede primeras consisten en inyectar y vaporizar la
haber diferentes compuestos que presenten el muestra en una cmara de vaporizacin. El sistema
mismo comportamiento cromatogrfico bajo split desva la mayor parte de la muestra fuera del
condiciones idnticas, lo que llevara a sistema cromatogrfico y enva slo una pequea
identificaciones errneas. En consecuencia, las fraccin a la columna. El mtodo split-less dirige
mejores tcnicas de anlisis cualitativo son toda la muestra a la columna, por lo que resulta
aqullas que combinan la capacidad de separacin ms adecuado para el anlisis de trazas o de
de la cromatografa con la capacidad de la componentes muy voltiles. La inyeccin on-
identificacin de tcnicas como la espectroscopa column se lleva a cabo en fro, eliminando la etapa
de masas (tcnicas acopladas). de vaporizacin que podra producir la
Por otra parte, tambin se utiliza la descomposicin de los compuestos termolbiles.
cromatografa de gases para establecer la cantidad En ocasiones, por ejemplo en el caso de
de componentes individuales presentes en una muestras de tejidos, se desean analizar los
muestra, empleando curvas de calibracin de los componentes voltiles contenidos en muestras
correspondientes patrones. A tal efecto, se pueden slidas. En tal caso, es necesario efectuar una
emplear diferentes detectores basados extraccin previa con un disolvente adecuado e
generalmente en la medida de una determinada inyectar el extracto en la columna. La extraccin de
propiedad fsica de los componentes a analizar. espacio en cabeza (HS: head-space) es una
Algunos de ellos son universales, mientras que alternativa ms rpida a la extraccin en Soxhlet,
otros resultan ms selectivos y responden que adems evita la prdida de los componentes
nicamente a algunos de los componentes de una ms voltiles. En este mtodo, la muestra slida se
mezcla. En este sentido, la espectrometra de coloca en un vial sellado con un septum y se
masas acoplada a la cromatografa de gases puede calienta durante un tiempo determinado a la
resultar un detector universal para la cuantificacin temperatura fijada. Durante esta operacin, la
de sustancias orgnicas si se registran el total de mayor parte de los compuestos voltiles se
los iones generados (modo TIC) o bien un detector transfieren al aire del vial, denominado espacio de
ms especfico cuando se seleccionan unos iones cabeza. Se calienta el tiempo suficiente para que
de masa determinada (modo SIR). se alcance el equilibrio. Seguidamente, con una
jeringa se toma una alcuota del aire del vial y se
1.1. La cromatografa de gases inyecta en el cromatgrafo. La aguja de la jeringa
En cromatografa de gases, la muestra se debe calentarse a la misma temperatura que la
inyecta en la fase mvil, la cual es un gas inerte muestra para evitar condensaciones sobre la
(generalmente He). En esta fase, los distintos misma.
componentes de la muestra pasan a travs de la
fase estacionaria que se encuentra fijada en una
columna. Actualmente, las ms empleadas son las
columnas capilares.

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1.2. La espectrometra de masas 1.3 Acoplamiento cromatografa de


La espectrometra de masas (MS) es una gases-espectrometra de masas
de las tcnicas analticas ms completas que La cromatografa de gases es una tcnica
existen. Recientemente, esta tcnica se utiliza no separativa que tiene la cualidad de conseguir la
slo en investigacin, sino tambin en anlisis de separacin de mezclas muy complejas. Pero una
rutina de los procesos industriales, en control de vez separados, detectados, e incluso cuantificados
calidad, etc. todos los componentes individuales de una muestra
Sus principales cualidades son: problema, el nico dato de que disponemos para la
- Capacidad de identificacin de forma identificacin de cada uno de ellos es el tiempo de
prcticamente inequvoca, ya que proporciona retencin de los correspondientes picos
un espectro caracterstico de cada molcula. cromatogrficos. Este dato no es suficiente para
- Cuantitativa: permite medir la concentracin de una identificacin inequvoca, sobre todo cuando
las sustancias. analizamos muestras con un nmero elevado de
- Gran sensibilidad: habitualmente se detectan componentes, como es frecuente en cromatografa
concentraciones del orden de ppm o ppb y en de gases capilar.
casos especficos se puede llegar hasta ppt e Por otra parte, la espectrometra de masas
incluso ppq. puede identificar de manera casi inequvoca
- Universal y especfica. cualquier sustancia pura, pero normalmente no es
- Proporciona informacin estructural sobre la capaz de identificar los componentes individuales
molcula analizada. de una mezcla sin separar previamente sus
- Suministra informacin isotpica. componentes, debido a la extrema complejidad del
- Es una tcnica rpida: se puede realizar un espectro obtenido por superposicin de los
espectro en dcimas de segundo, por lo que espectros particulares de cada componente.
puede monitorizarse para obtener informacin Por lo tanto, la asociacin de las dos
en tiempo real sobre la composicin de una tcnicas, GC (Gas Chromatography) y MS (Mass
mezcla de gases. Spectrometry) da lugar a una tcnica combinada
Dentro del espectrmetro de masas, se GC-MS que permite la separacin e identificacin
procede a la ionizacin de la muestra mediante de mezclas complejas.
diferentes mtodos. El sistema de ionizacin ms La utilizacin de la cromatografa de gases
frecuente es el de impacto electrnico que acoplada a un espectrmetro de masas requiere
bombardea las molculas con electrones de una sistemas especiales de conexin. En principio, se
cierta energa, capaces de provocar la emisin trata de dos tcnicas que trabajan en fase gaseosa
estimulada de un electrn de las molculas y as y necesitan una muy pequea cantidad de muestra
ionizarlas. para su anlisis, por lo que son muy compatibles.
Adems de molculas ionizadas o iones El nico obstculo serio a la hora de realizar su
moleculares (M+) tambin se forman iones acoplamiento es que el efluente que emerge de la
fragmento debido a la descomposicin de los iones columna cromatogrfica sale a presin atmosfrica
moleculares con exceso de energa. El tipo y y debe introducirse en el interior del espectrmetro
proporcin relativa de cada uno de estos de masas que trabaja a alto vaco. Actualmente, el
fragmentos es caracterstico de las molculas acoplamiento directo resulta fcil cuando se utiliza
analizadas y de las condiciones del proceso de la cromatografa de gases capilar, que es el caso
ionizacin. Una vez ionizadas las molculas, se ms habitual.
aceleran y se conducen hacia el sistema colector En resumen, una mezcla de compuestos
mediante campos elctricos o magnticos. La inyectada en el cromatgrafo de gases se separa
velocidad alcanzada por cada in ser dependiente en la columna cromatogrfica obteniendo la elucin
de su masa. La deteccin consecutiva de los iones sucesiva de los componentes individuales aislados
formados a partir de las molculas de la muestra, que pasan inmediatamente al espectrmetro de
suponiendo que se trate de una sustancia pura, masas. Cada uno de estos componentes se
produce el espectro de masas de la sustancia, que registra en forma de pico cromatogrfico y se
es diferente para cada compuesto qumico y que identifica mediante su respectivo espectro de
constituye una identificacin prcticamente masas.
inequvoca del compuesto analizado. El espectro En este proceso, el espectrmetro de
de masas puede almacenarse en la memoria del masas, adems de proporcionar los espectros,
ordenador para compararse con los espectros de acta como detector cromatogrfico al registrar la
una coleccin de espectros (o librera) y proceder a corriente inica total generada en la fuente inica,
su identificacin o puede estudiarse para averiguar cuya representacin grfica constituye el
la naturaleza de la molcula que le dio origen, etc. cromatograma o TIC (total ion current). En efecto,
la corriente inica generada por todos los iones da
lugar a un pico gaussiano de rea proporcional a la
concentracin del compuesto detectado.

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En el caso de mezclas complejas, el pequeos y se mantiene a 150C durante 1 h


cromatograma obtenido puede presentar muchos en un vial sellado. Se inyecta 1ml del espacio
picos, algunos de ellos muy prximos, resultando de cabeza (aire).
difcil la identificacin rpida y fiable de algn Anlisis por cromatografa de gases-
compuesto de inters. Cuando se desea espectrometra de masas (GC-MS): Se emplea
explcitamente localizar la presencia de uno o un equipo FISONS MD-800 con una columna
varios compuestos determinados, de espectro DB-5MS. La programacin de temperatura es
conocido, con la mayor rapidez o con la mxima la siguiente: 40C (inicial), 120C (final),
sensibilidad posible se recurre a la tcnica de gradiente: 3C/min. La inyeccin se efecta en
deteccin SIR (selected ion recording). En esta split 1/75 a 200C. El modo de adquisicin es
modalidad de trabajo se detectan solamente Full Scan (35-450 u.m.a.).
algunas masas de inters, en lugar de trabajar con Identificacin de los compuestos voltiles: a
el total de los iones (TIC). De esta forma, se partir de su espectro de masas; librera NIST;
aumenta la selectividad del mtodo, reducindose programa MASSLAB.
las interferencias.
3. RESULTADOS Y DISCUSIN
2. EXPERIMENTAL Para determinar la causa del olor en la
Muestra a analizar: compuestos voltiles prenda confeccionada, se analizaron
contenidos en una prenda de polister/algodn cualitativamente por GC-MS los compuestos
teida y confeccionada que presenta un olor voltiles emitidos por la muestra. La figura 1
desagradable. Se encuentra plegada sobre un representa el cromatograma obtenido.
cartn y almacenada en una bolsa.
Tratamiento previo de la muestra (head-space):
El tejido a analizar (1g) se corta en trozos

Sample ID: T-052-150 Acquired on 21-Oct-2000 at


8FEB-3 23:24:38 Scan EI+
3.473 TIC
100
1.23e5
RT

1.089

2.629 3.253
1.272 8.827
3.179
1.401
2.336
4.701
7.855

9 rt
1.000 2.000 3.000 4.000 5.000 6.000 7.000 8.000 9.000 10.000 11.000 12.000 13.000 14.000

FIGURA 1: Cromatograma (TIC) obtenido a partir del tejido

En la tabla 1 se recopila la informacin tipos de sulfuros orgnicos (dimetil disulfuro y dimetil


relativa a dicho cromatograma: los compuestos trisulfuro), compuestos a los cuales se atribuye
voltiles detectados, sus tiempos de retencin y principalmente el mal olor de la muestra. Su presencia
los factores de identificacin correspondientes a se confirma por comparacin de los espectros de
cada uno de ellos. Se observa que estos masas (obtenidos a los tiempos de retencin
compuestos voltiles identificados son, en correspondientes a dichos sulfuros) con los espectros
general, hidrocarburos aromticos y disolventes de estos compuestos almacenados en la librera
clorados. Sin embargo, tambin se identifican dos (figuras 2 y 3).

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TABLA 1

Compuestos voltiles identificados a partir del cromatograma del tejido y de los espectros de masas
correspondientes

Tiempo de Factor de
Compuesto identificado
retencin (min) identificacin (%)
1,01 Isobutano 90
1,08 Metil ester c. actico 97
1,09 Cloruro de metileno 93
1,2 2-pentanona 96
1,3 Pentano 92
1,4 Cloroformo 98
1,6 Ciclohexano 94
1,8 Tricloroetileno 97
2,3 Dimetil disulfuro 91
2,6 Tolueno 91
3,2 Hexanal 90
3,3 Tetracloroetileno 98
4,4 Etilbenceno 89
4,7 1,3-dimetilbenceno 81
7,9 Dimetil trisulfuro 95
8,8 1-etil-4-metil benceno 89

Sample ID: T-VCbolsa150 Acquired on 21-Oct-2000 at 22:08:17


Reverse fit factor [REV]: 908
8FEB-2 125 (2.317) Rf (6,3.000)
SAMPLE 94
1.94e3
100

% 45
79

47 48
61 64 96
44 55 81 84
0
R:908 WILEY6 3475: DIMETHYLDISULFIDE $$ METHYLDISULFIDE
R:908
Hit 1
94
100 WILEY6 3475: DIMETHYLSULFIDE $$ METHYLDISULFIDE

45
79

%
46

47
61
48 64
96
44 81

0 m/z
35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 105

FIGURA 2: Identificacin del dimetil disulfuro a partir de su espectro de masas

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Sample ID: T-054-1 Acquired on 19-Oct-2000 at 12:01:55


Reverse fit factor [REV]: 952
SAMPLE
5FEB-2 426 (7.837) Rf (6,3.000)
1.24e3
126
100

79

% 45
47

46 64
80
111
48 128

0
R:952 WILEY6 12611: TRISULFIDE, DIMETHYL (CAS) $$ 2,3,4-TRITHIAPENTANE $$ METHYLTRITHIOMETHANE $$ METHYL TRISULFIDE
Hit 1
R:952 100
126

WILEY6 12611: TRISULFIDE, DIMETHYL (CAS) $$ 2,3,4-TRITHIAPENTANE $$ METHYLTRITHIOMETHANE $$ METHYL


TRISULFIDE

%
79

45
46 64 111
80 128

0 m/z
45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 105 110 115 120 125 130 135

FIGURA 3: Identificacin del dimetil trisulfuro a partir de su espectro de masas

Por otra parte, tambin se pueden A un tiempo de retencin de 7,9 minutos se


confirmar visualizando el cromatograma obtiene un pico importante de masa 126 u.m.a.
correspondiente a los iones ms caractersticos correspondiente al dimetil trisulfuro.
estos compuestos (figura 4): A tiempos de retencin de 2,3 minutos y 7,9
A un tiempo de retencin de 2,3 minutos se minutos se obtienen dos picos importantes de
obtiene un pico importante de masa 94 masa 79 u.m.a., fragmentacin comn al dimetil
u.m.a correspondiente al dimetil disulfuro. disulfuro y dimetil trisulfuro.

Sample ID: T-052-150 Acquired on 21-Oct-2000 at 23:24:38


8FEB-3 Scan EI+
7.855 126
100
1.01e3
DMTS

RT
%
1.034 4.665 4.903 5.673 6.058 7.672
1.731 2.354 2.501 3.161 3.803 5.343 6.920 8.662 8.827 8.937 9.723 9.888
0
8FEB-3 Scan EI+
2.336 94
100
3.253 1.98e3
RT
DMDS

%
1.584 3.308 4.316 5.105 6.883 8.222 8.845
1.877 2.978 4.555 5.416 5.563 6.278 7.213 7.653 8.552 9.521 9.888
0
8FEB-3 Scan EI+
2.336 79
DMTS

100
1.107 1.23e3
DMDS

7.873 RT
% 1.162
2.758 2.996 3.693 4.261 6.810 9.448 9.851
1.877 3.161 4.976 5.160 6.132 7.122 7.635 8.332 8.754
0 rt
2.000 3.000 4.000 5.000 6.000 7.000 8.000 9.000

FIGURA 4: Cromatogramas correspondientes a los iones de masa 126, 94 y 79 u.m.a. obtenidos a partir del
tejido

A pesar de haberse confirmado la presencia dentro de la bolsa. En efecto, las pastas de papel
de sulfuros orgnicos como causantes del mal olor fabricadas por proceso Kraft y no sometidas a
del tejido, no se dispone de datos suficientes para blanqueo pueden desprender sulfuros residuales.
precisar su procedencia. Aunque no se puede En concreto, el cartn que acompaa al tejido
descartar que se originen durante el propio analizado tiene aspecto de haberse obtenido a
procesado de la muestra, es ms probable que partir de papel reciclado y no est blanqueado.
provengan del cartn que est en contacto con ella

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orgnicos, concretamente dimetil disulfuro y dimetil


4. CONCLUSIONES trisulfuro.
4.1. La cromatografa de gases es una
tcnica muy til para de separacin y 5 BIBLIOGRAFA
determinacin de compuestos orgnicos voltiles y 1. J.M.Casas, J.Garca, J.M:Guadayol,
semivoltiles que sean trmicamente estables. J.Oliv. Anlisi instrumental 2:
Acoplada a la espectrometra de masas, permite Cromatografa i electroforesi. Edicions UPC,
una identificacin inequvoca de los distintos Barcelona, 250p. (1994).
componentes separados sin necesidad de disponer 2. M. Lpez-Mesas. Tesis doctoral. Universitat
de patrones de los mismos. En caso de poder Politcnica de Catalunya (UPC), Terrassa
comparar con los correspondientes patrones, se (2002).
puede llevar a cabo, adems, el anlisis 3. L. Esteban. La Espectrometra de masas en
cuantitativo de los compuestos identificados. imgenes. ACK editores, Madrid, 261 p.
4.2. Estas dos tcnicas acopladas (GC-MS) (1993).
permiten la identificacin de cualquier tipo de 4. M.C.Gutirrez, M. Crespi Characterization
compuestos voltiles presentes sobre tejidos. of textile effluents treated by
Concretamente, se pueden aplicar a la electrochemical techniques. WEFTEC
determinacin de los compuestos que causan Annual Conference and Exposition,
malos olores. Existen muchos compuestos voltiles Anaheim (California) (2000).
capaces de conferir un olor desagradable. En la 5. M.Vilaseca, M.C.Gutirrez, M.Raspall,
prenda confeccionada analizada, la causa del mal M.Crespi. Characterisation of dried sludge
olor se atribuye a la presencia de sulfuros from textile treatment plants. IFATCC 19th
Congress, Paris (2002)
.

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