REGULACION DEL PH - AMORTIGUADORES Mantener el pH constante es vital para el correcto desarrollo de las reacciones quimicas y bioguimicas que tienen lugar tanto en los seres vivos como, a nivel experimental, en el laboratorio, Los amortiguadores (también lamados disoluciones amortiguadoras, sistemas tampén o buffers) son aquellas disoluciones cuya concentracién de protones apenas varia al afadir acidos o bases fuertes (Figura 1a), Los amortiguadores més sencillos estin formados por mezclas binarias de un écido débil ¥ una sal del mismo Acido con una base fuerte (por ejemplo, acide acético y acctato s6dico), o bien por una base débil y la sal de esta base con un dcido fuerte (por ejemplo, amonfaco y cloruro aménico) (Figura 1a) La concentracién de protones del agua pura experimenta una elevacién inmediata cuando se aflade una minima cantidad de un dcido cualquiera. A un litro de agua neutra (pH 7) basta affadirle 1 ml de HCI 10M para que el pH descienda $ unidades. En cambio, si esta misma cantidad de dcido se aflade a 1 litro de disolucién amortiguadora formada por Hac/AcNa 1M, el pH desciende en una centésima, 0 sea, quinientas veces menos (Figura 1b). MECANISMO DE LA ACCION AMORTIGUADORA Supongamos un amortiguador constituido por un scido acético (écido débil) y acetato sédico (sal de dcido débil y base fuerte). Bl dcido estara parcialmente disociado segin Ja ecuacién: Ac S Ac +1" Aplicando la ley de accién de masas: bel] Ko" Tall El acetato sédico, como todas las sales est completamente disociado, y por lo tanto, el in acetato (Ac’) procedente de esta sal desplazari el equilibrio de disociacién del ‘icido hacia la izquierda, haciendo que disminuya la [H"]. La presencia conjunta de la sal y el dcido hace decrecer la acidez libre, Si las cantidades de sal y de dcido son del mismo orden, la [H*] vendré regulada por el equilibrio de disociacién del acido, Si a este sistema afladimos un dicido fuerte (HCI), se produce un aumento instantineo de la (H"], y el equilibrio de disociacién del acético se desplaza hacia la izquierda, formindose AcH hasta recuperar pricticamente 1a [AcH] inicial. Ademés, los iones acetato procedentes de la sal se pueden combinar con los H’ procedentes del HCl para formar AcH (Figura 2). La reaccién podria representarse asi Amortiguadores Pagina I de 11NaAe+HC] + HAc +NaCl El sistema amortiguador ha destruido cl dcido fuerte, generando en su lugar una cantidad equivalente de Scido débil, cuyo equilibrio de disociacién determinard la [H*] final, Si aifadimos una base fuerte (NaOH) a este sistema, los iones OH- se combinan rapidamente con los H* para formar agua, con lo que el equilibrio de disociacién del ficido se desplaza hacia la derecha para restaurar Ia concentracién inicial de protones (Figura 2). En otras palabras, 1a adicién de una base provoea Ia transformacién de tuna parte del acético libre en acetato: HAc+NaQH — NaAc+H20 La utilidad de los amortiguadores, tanto en métodos de laboratorio como en la regulacién del equilibrio dcido-base del plasma sanguineo, estriba precisamente en la posibilidad de mantener la [H"] dentro de limites tan estrechos que puede considerarse como invariable. El pH de una mezcla amortiguadora se puede conocer mediante la ecuacion de Henderson-Hasselbalch. En la disociacién del acido acético: AcH S Ac +H Ja constante de equilibrio es: melt «ety Si tomamos logaritmos: 0 To que es lo mismo: yreordenando, Amortiguadores Pagina 2 de 11que es la formula conocida como la ecuacién de Henderson-Hasselbalch. Teniendo en cuenta que el dcido acético es muy débil y que, por tanto, el equilibri de disociacién esti casi totalmente desplazado hacia la izquierda (desplazamiento favorecido por la presencia de cantidades notables de acetato) podremos sustituir en la ecuacién de Henderson-Hasselbalch, sin introducir errores, la concentracién de acético libre por la de avético (otal ([AcH] = [4eido), Andlogamente, como cl acetato sédico esti completamente disociado podemos considerar que la concentracién del ién acetato coincide con la concentracién de Ia sal ({Ac'] = [sal]). Con estas modificaciones podemos expresar la ecuacién de Henderson- Hasselbalch de una forma vilida para todos los amortiguadores (no sélo para el acético/acetato): PROPIEDADES DE LOS AMORTIGUADORES Son propiedades que pueden deducirse ficilmente de la formula, ‘© 1. El pH de una disolucién amortiguadora depende de la naturaleza del dcido Sbil que lo integra (de su pK), de modo que para cantidades equimoleculares de sal y de dcido, el pH es justamente el pK de este fcido, Dicho de otra forma, se puede definir el pK de un dcido débil como el pH del sistema amortiguador que se obtiene cuando [sal] = [acido] (Figura 3). ‘© 2. El pH del sistema amortiguador depende de la proporeién relativa entre 1a sal y el ficido, pero no de las concentraciones absolutas de estos componentes. De aqui se deduce que afiadiendo agua al sistema, las concentraciones de sal y cido disminuyen paralelamente, pero su cociente permanece constante, y el pH no cambia. Sin embargo, si la dilucién llega a ser muy grande, el equilibrio de disociacién del dcido se desplazaré gradualmente hacia la derecha, aumentando la [sal] y disminuyendo [acido}, con lo cual el cociente aumenta y el pH también, de forma que se iria acercando gradualmente a la neutralidad (pH 7). © 3. Cuando se afiaden dcidos o bases fueries a la disolucién amortiguadora, el cequilibrio sc desplaza en cl sentido de climinar cl écido afiadido (hacia la izquierda) 0 de neutralizar la base afiadida (hacia la derecha). Este desplazamiento afecta a las proporciones relativas de sal y dcido en el equilibrio. Como el pH varia con el logaritmo de este cociente, Ia modificacién del pH resulta exigua hasta que uno de los componentes est préximo a agotarse, Amortiguadores Pagina 3 de 11CAPACIDAD 0 EFICACIA AMORTIGUADORA Podemos definir la capacidad amortiguadora de un tampén como la cantidad de dcido 0 ‘base fuerte que puede neutralizar suftiendo un desplazamiento de pH de una unidad (Figura 4), Resulta evidente que la eficacia amortiguadora esta vinculada a dos factores: © Ia_concentracién_absoluta_del_sistema: Un sistema de acético y acetato concentrado (IM en cada componente, por ejemplo) tendré el mismo pH que el mismo sistema a concentracién 0,01M (100 veces més diluido). Sin embargo, Ia capacidad amortiguadora seri mayor en el sistema mas concentrado. Por ejemplo, si afladimos 0,1 moles de HCI al sistema IM (cuyo pH es 4,76), se transforman 0,1 motes de NaAc en HAC, y cl pH baja a 4,67. En cambio, en el sistema 0,01M, la edicién de 0,1 moles de HCI consume todo el NaAc y, como sigue quedando HCI libre, provocard un fuerte descenso del pH. ‘© Ia proporcién relativa de las formas disociada y sin disociar: La capacidad amortiguadora es maxima cuando el cociente sal/Zcido es préximo a la unidad Si tenemos 50 moléculas de acético y $0 de acetato, el plI seré igual al pK. Si afadimos 41 moléculas de NaOH (Figura 5), después de reaccionar con el écido habré 91 moléculas de sal (50 + 41) y nueve de acido (50 - 41), La relacién sal/eido ha pasado de un valor 1 a un valor aproximado de 10, con lo cual, el pli hhabré variado en una unidad (pll = pK'1). Si en este momento afiadimos & moléculas de NaOH, reaccionaran con otras tantas de acético, y tendremos un total de 99 moléculas de sal (91 + 8) y 1 molécula de dcido (9 - 8). La relacién sal/dcido es aproximadamente de 100, y el pH = pK+2. Con una molécula mas de NaOH se agota el sistema (100% sal), y cualquier cantidad minima de NaOH provocard grandes cambios en el pH. De modo anilogo, se observa que partiendo de un valor sal/acido de uno (pH = pK), al afiadir 41 moléculas de HCl (Figura 6) se obtiene un pH = pK - 1, y con 8 moléculas mas, el pH ~ pK - 2. La siguiente molécula de HCI agotaria el sistema (100% dcido), y cualquier cantidad minima de HCI provocard grandes cambios en el pH. AMORTIGUADORES FISIOLOGICO: La concentracién de protones es una de las constantes del medio interno que se mantiene dentro de limites muy estrechos, porque los cambios del pH provocan graves trastomos en el metabolismo. Para controlar el equilibrio acido-base del medio interno, los seres vivos disponen de un conjunto de sistemas amortiguadores: los amortiguadores fisiol6gicos. Podemos clasificar los amortiguadores fisiolégicos en dos grupos: los inorgdnicos y los orgénicos. Entre los amortiguadores inorginicos mas importantes estén el sistema fosfato. monodcido/didcido y el sistema dcido carbénico/bicarbonato. Entre los amortiguadores orginicos mas importantes se encuentran los aminodcidos y proteinas y el sistema hemoglobina reducida/oxihemoglobinato. Amortiguadores Pagina 4 de 111.- FOSFATO MONOSUSTITUIDO/FOSFATO DISUSTITUIDO (H2PO47HPO4") El Acido fosférico (LH3P0z), ademés de formar parte de numerosos compuestos ongénicos (Acidos nucleicos, fosfolipidos, azicares, etc.) también se encuentra en forma libte, aunque en pequefia proporcin. La concentracién de iones fosfato en el plasma sanguineo es de unos 2 mEqiliro EL dcido fosférico tiene tres protones disociables segiin las reacciones (Figura 7) DK, =212 PK =72 PR 1 H3PO, oS H+ HpPOe SHY + HPO SHY +POe Cada forma, molecular o nica actia como dcida respecto a la que tiene a su derecha y como basica respecto a la que tiene a su izquierda. Se pueden establecer, por tanto, tres equilibrios de disociacién, cada uno con una constante caracteristica a 25°C: Ky = 5,7 = 105 (pKy = 2,12) ; K 2= 6,2 « 10% (pK = 7,21) y Ky = 2,2 « 10°3 (pKy = 12,67). Estos valores indican que el primer II* se desprende con facilidad aiin a pll dcido (a pli = 2,1 la mitad del H5POs se ha disociedo a HaPO,), 1o que quiete decir que el H3PO4 es un dcido moderadamente fuerte. El pK de la segunda disociacién (7,2) es el més proximo al pH del medio interno y por lo tanto, esta segunda disociacién es la que tiene lugar reversiblemente en cl medio interno, y de ahi su aceién amortiguadora. Fl tercer Hse disocia en medio muy alcalino (pH = 12,7), y por tanto no tiene interés biol6gico. A la temperatura del organismo, y teniendo en cuenta la fuerza iénica del plasma en condiciones fisiol6gicas ordinarias, se acepta generalmente el valor de 6,8 para el pKa de la segunda ionizacién del fosfato, A partir de este valor se puede calcular la relacién de de ambos fosfatos en el plasma a pH 7,4: [H:Poz] Como la concentracién del HPOs= es cuatro veces superior a la de H2PO4, el sistema es més efieaz para amortiguar acidos fuertes que para amortiguar bases fuertes, lo cual supone una ventaja bioldgica, ya que en el organismo predomina la tendencia a las variaciones hacia el lado acide. ‘Tanto en condiciones normales como en condiciones fisiolégicas, las proporciones relativas de las otras dos especies iénicas (HsPO< y POs") son despreciables, y no participan en la actividad amortiguadora del sistema, Amortiguadores Pagina S de 112.- ACIDO CARBONICO - BICARBONATO En este sistema amortiguador tienen lugar 3 equilibrios reversibles entre el CO gaseoso de los pulmones y el bicarbonato (HCO) disuelto en la sangre (Figura 8) CO2(g) $F COz(@) + 10S HCO; 5 HCOS + IF En los animales con pulmones, el sistema amortiguador acido carbénico/bicarbonato es especialmente efectivo. Por un lado, el HCO; del plasma sanguineo esti en equilibrio con el CO> gaseoso presente en el espacio aéreo de los pulmones, lo que supone una reserva pricticamente ilimitada de CO que pucde participar en el equilibrio. Por otro lado, los cambios en la [HCO;"] también se puede regular a nivel de los rifiones, que pueden eliminar el bicarbonato por la orina o reabsorberlo, segiin las necesidades (Figura %). En este sistema amortiguador, la forma Acido es la suma de la [CO>] disuelto en el plasma y de la (11CO3], y la forma sal es la [IICOs"], Bl equilibrio se desarrolla segin Ja siguiente reaccidn: CO, + HO S HCO; 5 EI HzCO} es un dcido moderadamente fuerte, con un pK aproximado de 3,1. Sin embargo, como sélo una milésima parte del CO2 disuelto en agua se transforma en Acido carbénico, y como la [CO2] participa en el equilibrio de disociacién, resulta un pK de 6,1 (una constante de equilibrio mil veces menor). Por lo tanto, el pK de este sistema amortiguador, tomando en consideracién la totalidad de las formas dcido, es de 6,1. La ecuacién de Henderson-Hasselblach que se aplica en este sistema amortiguador es: [uco;) T= 6,1 + tog HCO] _ pe Se FCO, HCO] A.un pH fisiolégico de 7,4: HC Co, icorm,coy ~ Toot”? La (H2CO3] puede considerarse como despreciable frente a la [CO2]. Por lo tanto, serén los cambios en la proporcién HCOs/CO> los que darin lugar a una variacién del pH. En condiciones normales, el plasma tiene una reserva alealina (la suma de las formas sal y dcido) de 26,88 miliequivalentes (mEq) de CO3 por litro. Como a pH 7,4 la proporcién centre la forma sal y k yma dcido es de 20, resulta que la [HCOs"] es de 25,6 mEq/l y la Amortiguadores Pagina 6 de 11[CO2] es de 1,28 mEq, lo que se corresponde con una presién parcial de CO en los alvéolos pulmonares de 41 mm Hg (Figura 9). En condiciones normales, cada uno de los componentes de este sistema amortiguador est presente en la siguiente proporcién: COxg) S COM) 1 1hO S ICO; S HCOs 1H 4immHg1,28mEqt Aespreciable — 25,6mEq/ El pH normal de la sangre se sitia entre 7,35 y 7.45, lo que corresponde a una [H"] en tomo a 40 nM. Como el pK del tampén bicarbonato es 6,1, bastante alejado del pH normal de la sangre, su eficacia amortiguadora es muy reducida. Sin 0, su importancia fisiolégica es enorme ya que: ‘el sistema respiratorio permite controlar Ia presién parcial de CO2 en los Imones y compensar en cuestién de minutos los cambios de pH (Figura 10), Si forzamos Ia respiracidn, desciende la presién parcial de CO2 en los pulmones y, con ella, la cantidad de COz disuelio en sangre. El cociente HCOs1CO2 aumenta, al igual que el pH (alealosis respiratoria), Si retenemos Ia respiracién, aumenta la presién parcial de CO en los pulmones, y con ella la cantidad de COp disuelto en sangre. El cociente HCOs"/CO> disminuye, al igual que el pH (acidosis respiratori ‘los rifiones permiten ajustar la [11COs"] en el plasma exeretindolo cuando esté en exeeso y reabsorbiéndolo si es necesario, También pueden exeretar un exceso de H*, Estas funciones compensatorias son lentas (entre 12 y 72 horas), por lo que zo son capaces de reaccionar ante cambios bruscos (Figure 11). La acidosis consiste en un aumento de la [H*] en la sangre (Figura 12). Puede deberse a causas metabélicas (prictica de deporte, ayunos prolongados, ingestién de dcidos) 0 respiratorias (apneas © enfermedades que provocan una reduccién del ritmo respiratorio). Al aumentar la [H"], el equilibrio se desplaza hacia la izquierda (se combinan con el HCOs"), aumentando la [HyCOs] y, conseeuentemente, la [C03] disuelto en el plasma. Un aumento en el CO2 disuelto en el plasma se traduce en un aumento de la presién parcial del CO2 gaseoso en los pulmones. Se puede calcular la ‘nueva presién parcial del CO2 en los pulmones mediante la Ley de Henry: Py_ {Cos} F, (CO) Amortiguadores Pagina 7 de 11Bste exceso de COz se puede compensar facilmente mediante un aumento de la frecuencia respiratoria. Cuando esto no es posible, la compensacién se produce en los rifones, estimulando la secrecton de H” y la reabsoreién de HCOs” (Figura 12). La alealosis consiste en un aumento de la [OH] en Ia sangre (Figura 13). Puede deberse a causas metabslicas (pérdida de cidos por vémitos o ingestién de bicarbonato © antideidos para facilitar la digestién) 0 respiratorias (biperventilacién provocada por la hipoxia en alta montatia, estados de estrés 0 de ansiedad). Al aumentar la [OH"], el equilibrio se desplaza hacia la derecha porque los OH" se combinan con los H~ para formar agua. Al disminuir la (H"] aumenta la disociacién del HCOs. Al disminuir la [11zCOs] el CO disuelto en el plasma se combina con el agua para formar IICO3. La disminucién del COp disuelto en la sangre provoca que el CO2 en estado gaseoso en los se disuelva en el plasma para restablecer el equilibrio, lo que hace disminuir mn parcial del CO gaseoso en los pulmones. La nueva presién parcial del CO> los alvéolos pulmonares se puede calcular mediante l2 Ley de Henry. sta minucién de la presién parcial del COz en los pulmones se puede compensar facilmente mediante una disminucién de la frecuencia respiratoria. A nivel renal, la compensacién consiste en una disminuciin en la secrecién de H* y en una disminuci6n en la reabsorcién del HCOs” plasmatico (Figura 13) 3. AMINOACIDOS Y PROTEINAS La caracteristica mas Hamativa de los eminoécidos (AA) es la existencia en una misma molécula de grupos acidos (capaces de ceder H") y grupos basicos (capaces de captar 1), Por Io tanto, en medio Acido se comportan como bases, y en medio basico se comportan como dcidos. Las moléculas que presentan esta caracteristica se dice que son anféteros 0 anfolites. Los grupos dcidos y bisicos pueden neutralizarse mutuamente, constituyendo una sal interna formada por un ién hibride (carga positiva y carga negativa), que se llama zwitterion (Figura 14) Si consideramos un AA sencillo (que sélo tiene dos grupos ionizables), éste puede adoptar tres formas iénicas diferentes: cation (+) Zwitterién (+1) Anion (4) 9 ° ® 1 pKyr2a | PKa=986 I a HIN FEW EH Uf OSE HHHN, UE 8 ° a rf ° fH 4 R R El primer grupo que se disocia es el carboxilo (pK ~ 2,22). Debido a la proximidad del grupo NH3*, el COOH se comporta como un acid moderadamente fuerte. Si aplicamos Ja ecuacién de Henderson-Hasselbalch al primer equilibrio de disociacién, resulta que a Amortiguadores Pagina 8 de 11pH fisiolégico, la concentracién de la forma catiénica es practicamente despreciable (una de cada 151.000 moléculas en la forma zwitterién). El segundo grupo en disociarse es el NII3*. Como el pK es 9,86, la concentracién de la forma aniénica es muy pequefia en comparacién con la forma zwitterién (I molécula en forma aniGnica por cada 300 en forma 2witteridnica). El AA se comporta a pH fisiolégico como un dcido débil que esti disociado al 0,35% (Figura 14). Existe un pH para el cual Ia carga eléetrica media de la molécula es cero, Este pH se llama punto isoeléctrico (pI). El pl es el. pl en el que la moléeula se disocia por igual en ambos sentidos, y como equidista de los dos valores de pK, puede obtenerse por su semisuma: pK pk: pl Asi, para la glieina (pK, ~ 2,34 y pKa ~ 96, el pl vale 5,97 (Figura 15). Asi, a pH ~ 5,97 la immensa mayoria de las moléculas de glicina estarfan en forma de iones hibridos (zwitterién) y no se desplazarian hacia ningsin polo al aplicarles un campo eléctrico. Cuando el AA contiene otros grupos decides 0 bisieas, el poder amortiguador gana posibilidades. Asi, el deido glutdmico tiene tres grupos disociables, cuyos pK son: pK 2,19; pK = 4.25 y pK = 9,67 (Figura 16) =tH+ H+ Boe to n in 2 La forma I (totalmente protonada) tiene una carga neta positiva. La forma I] tiene carga ncutra (una positiva y una negativa), la forma Il tione una carga negativa y la forma IV tiene dos cargas negetivas. El punto isocléetrico del dcido glutémico (forma II) seré aproximadimente la semisuma de pK y pK2 (pl = 3,22). Le proporcién de moléculas en Ja forma IV (2 cargas negativas) es tan peque e considerarse como despreciable a la hora de calcular el pl. En el caso del A arginina existen dos grupos basicos y uno ficido. La disociacién de la arginina se esquematiza del siguiente modo, donde pKj = 1,8; pKz = 9,2 y pK3 = 12,5 (Figura 17) Amortiguadores Pagina 9 de 11La forma I (totalmente protonada) tiene dos cargas positivas. La forma II tiene una carga neta positiva, la forma IIL es neutra (una positiva y una negativa) y la forma IV tiene una carga negativa, EI punto isoeléetrico de la arginina (forma 111) seré aproximadamente la semisuma de pk y pK3 (pI-10,75). La proporcién de moléculas en la forma I (2 cargas positivas) es tan pequefta que puede considerarse como despreciable a la hora de caleular elpl. Las proteinas estin formadas por la unién de AA mediante un enlace peptidico. Este enlace se produce entre el grupo COOH de un AA y el grupo NH de otro, de forma que desaparecen sus propiedades amortiguadoras. Sin embargo, siempre existiré al menos un grupo amino y un grupo carboxilo terminal, que puedan actuar como amortiguadores. ‘Ademés hay algunos AA que aportan grupos ionizables en sus cadenas laterales: dcido aspartico y glutdmico, arginina, lisina histidina, etc La disociacién de los grupos decidos o basicos de estas cadenas laterales presentan mos valores de pK que pueden verse alterados por la influencia de otros grupos ionizables préximos. En la Figura 18 se recogen algunos de estos grupos y sus valores de pK. Es de destacar el pK del AA histidina, que tiene un pl de 7,6 y, por lo tanto, a pH fisiol6gico serd el que presente mayor capacidad amortiguadora 4.- HEMOGLOBINA REDUCIDA - OXIHEMOGLOBINATO. La hemoglobina es una proteina que se encuentra en los globulos rojos y es la encargada de transportar el oxigeno por la sangre desde los pulmones @ los tejidos. Tiene un grupo prostético denominado hemo, que esté unido a un étomo de hierro y que es el responsable del color rojo a la sangre (Figura 19) Las caracteristicas de la hemoglobina (Hb) como amortiguador estén intimamente vinculadas a la capacidad de disociacién del grupo imidazélica de un aminodcido histidina que se encuentra unido al hicrro, El pK de este grupo funcional, que es aproximadamente 7, tiene la especial propicdad de modificarse en funcién de que la molécula de Hb esté oxigenada (HbO2) o reducida (Hb) (Figura 20). La oxihemoglohina (H1b03) es un deido mis fuerte que la Hb reducida (Su pK es menor). En efecto: Amortiguadores Pagina 10 de 11HbH SS Hb + HY (pK=7,9) HbOH SS HbOy + HY (pK=6,7) Esta propiedad le confiere una eficacia amortiguadora excepcional, que se ve favorecida por el hecho de que la Hb es una protefna muy abundante en la sangre (el 15% del total de protein. Si consideramos gue en el eritrocito el pH interno es 7,3 y aplicamos la ecuacién de Henderson-Hasselbalch, se puede calcular fécilmente que para la HbO2, el 80% de las moléculas estén en forma disociada y el 20% esti en la forma acida no disociada. En cambio, el 80% de la Hb reducida se encuentra sin disociar, y el 20% esta disociada (Figura 21), Esta especial propiedad hace de la Hb un amortiguador extraordinariamente eficaz, puesto que al modificar su pK (liberando O2) puede amortiguar grandes cambios en la proporeién sal/acido sin que apenas se produzcan cambios en el pH (Figura 22), Supongamos que un eritrocito tiene 100 moléculas de HbO;H a pH 7,3 (Figura 22). Como acabamos de ver, habré 80 moléculas de HbO3~ y 20 moléculas de HbO2H. Si introducimos 60 moléculas de HCI, los H' son captados por la forma salina (HbO2~ para originar la forma dcida (HbO2H). Esto origina un cambio en la proporcién sal/écido de 80/20 a 20/80, lo que se veria reflejado como un cambio en el pH de 7,3 a 6,1. Sin embargo, bastaré que la HbO2H elimine 100 moléculas de O2 para convertirse en HbH para que Ia proporcién 20/80 sea compatible con un pH 7,3. En resumen, mediante la liberacién de su 03, la Hb ha sido capaz de captar un 60% de H* sin sufrir ningin cambio en el pH. Amortiguadores Pagina 11 de 11