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Prctica N 01
I.- INTRODUCCIN
El estudio de bacterias, virus, hongos y otros agentes infecciosos se da debido a que stos
pueden causar enfermedades y pueden ayudarnos a entender el mundo natural.
Muchos de stos pueden ser patgenos para los seres humanos, animales u otras formas de
vida, su manipulacin posee riesgos que varan dependiendo de cada agente y de la forma
como se les utilice.
El trmino contencin se utiliza para describir mtodos seguros para manejar materiales
infecciosos en el ambiente del laboratorio donde son manipulados o conservados. Las Normas
de Bioseguridad han sido diseadas para reducir, a niveles aceptables, los riesgos inherentes a
la utilizacin de materiales peligrosos. El objetivo de la contencin es reducir o eliminar la
exposicin de quienes trabajan en laboratorios u otras personas, y del medio ambiente externo
a agentes potencialmente peligrosos.
II.- OBJETIVOS.
Conocer los conceptos bsicos sobre bioseguridad y reconocer situaciones de riesgo para
prevenir accidentes laborales.
Conocer las Normas de Bioseguridad que rigen en los laboratorios de microbiologa y
aplicarlas.
Reconocer el Nivel de Bioseguridad del laboratorio de microbiologa de la EO, UDCH.
2.1. Definicin de Peligro Biolgico: Agentes biolgicos o materiales que son potencialmente
peligrosos para los seres humanos, animales y/o plantas.
Contencin Primaria: Proteccin del personal y del ambiente del laboratorio mediante la
utilizacin de buenas tcnicas microbiolgicas (prctica en laboratorio) y el uso de equipos de
seguridad apropiados.
Los cuatro Niveles de Bioseguridad definen la contencin necesaria para proteger al personal
y al medio ambiente.
Nivel de Bioseguridad 1. En este nivel se trabaja con agentes que presentan un peligro
mnimo para el practicante del laboratorio y para el ambiente. El acceso no es restringido y el
trabajo se realiza por lo regular en mesas estndar de laboratorio. No se requiere de equipo
especial ni tampoco de diseo especfico de las instalaciones . Los practicantes de estos
laboratorios son generalmente supervisados por un personal con entrenamiento en
microbiologa. En nuestro caso los alumnos estarn supervisados por el profesor encargado
de laboratorio y por su profesor de asignatura.
Principios de la Bioseguridad:
1.- Universalidad: Todo el personal debe seguir las precauciones estndares rutinariamente
para prevenir la exposicin con materiales infecciosos.
o mandil) no evita los accidentes de exposicin a estos fluidos, pero disminuyen las
probabilidades de una infeccin.
b) Piel:
c) Ojos:
d) Pulmones:
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VI.- CUESTIONARIO
6.1. Cuntos y cules son los principios de bioseguridad?
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OGA LIC. Marianella Incio G.
6.5. Explique Ud. las medidas que se deben tomar en un Consultorio odontolgico para
prevenir infecciones.
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VII. REFERENCIAS
Organizacin Mundial de la salud (OMS) Manual de Bioseguridad en el Laboratorio.
2005. 3era Edicin .Ginebra
http://www.who.int/csr/resources/publications/biosafety/CDS_CSR_LYO_2004_11SP.
pdf?ua=1
http://www.ins.gob.pe/CBS/PDF/bmbl4_spanish.pdf
I.- OBJETIVOS.
II. INTRODUCCIN.
Para la optimizacin del desarrollo de las prcticas el Alumno debe contar con el atuendo, material
e instrumentos necesarios, con el fin de proteger su integridad fsica y concientizar sobre los
riesgos de trabajar con microorganismos y en un laboratorio. Por tal motivo es necesario que el
alumno se familiarice desde el principio con el material y equipos empleados en el aislamiento e
identificacin de los microorganismos (bacterias, hongos y virus). Pero adems existe una
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pequea lista de materiales que son necesarios tengan a la mano como requisitos exigidos para el
trabajo microbiolgico. A continuacin se describen algunos de ellos:
Placa de Petri: Recipiente de vidrio o polipropileno que, en general se usa para contener medio
de cultivo y proporciona una suficiente rea para el crecimiento bacteriano.
Asa o Ansa, en punta (aguja) o anillo para siembras: Muy usada en la prctica bacteriolgica;
hecha de alambre de platino o de otro material se inserta en un mango que facilita su manejo. El
alambre puede ser recto o terminar en forma de pequeo anillo.
Pipetas: Son cilindros de vidrio o de plstico, alargados de modo longitudinal a manera de tubos,
los cuales pueden ser graduadas y sirven para medir volumen conocido de lquido. Otras no son
graduadas y se utilizan para la transferencia de lquidos.
Tubos de Ensayo: Tubo de cristal, cerrado por uno de los extremos, y sirve para hacer anlisis
qumicos.
Mechero de Bunsen: Mechero de gas en el que este se mezcla con aire antes de producir la
flama. Se utiliza para esterilizar el alambre de platino.
Autoclave: Aparato para esterilizacin por vapor bajo presin, provisto de un manmetro y una
llave que regula la presin y la temperatura a la que desea esterilizar.
Filtros esterilizantes: Para dejar libre de contenido microbiano a productos en estado lquido,
los que por su naturaleza no pueden ser sometidos a la accin del calor en sus diferentes
modalidades
Contador de colonias: Consta de una lupa y una fuente de luz, que permite contar el nmero de
colonias de microorganismos cmodamente gracias al aumento del campo visual.
Cabina de Flujo laminar: Equipo que proporciona rea estril, para los trabajos microbiolgicos,
en especial cultivo, evitando la interferencia de los microorganismos de contaminacin ambiental.
Refrigerador: Se utilizan para conservar tanto materiales (medios de cultivo, reactivos) como
microorganismos. Generalmente est a temperatura fija de 4 C.
III.- CUESTIONARIO
Prctica N 02
MICROSCOPIA
I.- INTRODUCCIN
Para realizar el estudio detallado de clulas, tejidos animales o vegetales y poder realizar la
diferenciacin de muchas especies bacterianas, se requiere el uso de instrumentos que permitan
ampliar muchas veces ms la imagen de las estructuras.
El instrumento que fue empleado por los primeros bilogos para estudiar la clula y los tejidos, es
el microscopio. Su nombre deriva etimolgicamente de dos races griegas: mikrs, que significa
pequeo y skopoo, que significa observar. Es decir el microscopio es un instrumento que sirve
para observar objetos o estructuras pequeas.
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Existen dos tipos de microscopios que emplean la luz como fuente de energa para formar
imgenes aumentadas y detalladas de objetos que a simple vista no es posible observar:
a) Microscopio ptico.
b) Microscopio electrnico.
El desarrollo de la Microbiologa como ciencia tiene su apoyo en la microscopia tanto ptica como
electrnica. La primera para observar morfologa, agrupacin y motilidad y la segunda nos permite
observar la ultra estructura celular
Base o pi: Es un soporte metlico, amplio y slido en donde se apoyan y sostienen los
otros componentes del microscopio.
Brazo, estativo o columna: Permite la sujecin y traslado del microscopio. Soporta al
tubo ptico, a la platina y el revlver.
Platina: Superficie plana de posicin horizontal que posee una perforacin circular
central. En ella se apoya la preparacin (Lmina portaobjetos que contiene a la muestra
que se va examinar) que se sujeta a la platina mediante pinzas o con un carrito o
charriot, que mediante mandos especiales facilitan el movimiento de la preparacin de
derecha a izquierda y de adelante hacia atrs.
Tubo ptico: Consiste en un cilindro metlico que suele medir 160 mm o 170 mm de
longitud (depende del fabricante) el cual en un extremo, est conectado al revolver o
portaobjetos y en el otro se relaciona con el ocular.
Revolver o portaobejtivos: Es un componente que gira alrededor de un eje con la
finalidad que los objetivos que sostiene coincidan de manera perpendicular con la
perforacin central de la platina. En su superficie inferior posee varios agujeros donde se
atornillan los objetivos.
Tornillos macromtrico y micromtrico: Estn situados en la parte inferior del brazo o
columna. El tornillo micromtrico est incorporado e la circunferencia del tornillo
macromtrico. Ambos tornillos permiten el desplazamiento de la platina hacia arriba y
hacia abajo con la finalidad de acercar o alejar la preparacin hacia los objetivos y as
conseguir un enfoque ptimo de la imagen.
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b) COMPONENTES PTICOS: Son los objetivos, los oculares, el condensador y los prismas. Los
tres primeros estn constituidos por sistemas de lentes positivos y negativos.
Filtro azul: Absorbe el exceso de luz roja y amarilla del iluminador para que la
iluminacin sea ms similar a la luz natural.
Diafragma : Sirve para controlar el dimetro del cono de luz que llega al objetivo, no
para controlar la intensidad de iluminacin, al disminuir la apertura del diafragma se
aumenta el contraste y la profundidad de foco, pero se disminuye la resolucin, para
lograr la mejor imagen posible es necesario cambiar la apertura del diafragma al cambiar
el objetivo.
II.- OBJETIVOS:
Microscopio ptico.
Diagrama de microscopio.
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3.-Colocarlo sobre una lmina portaobjetos, adicionar una gota de agua y cubrirlo con una
laminilla.
4.-Llevar la muestra al microscopio, observar a menor aumento y luego desplazar a los otros
objetivos (mediano y mayor aumento).
5.- En cada una de las observaciones apreciar la orientacin de la flecha de la muestra, respecto a
la imagen observada en el ocular.
2.- Colocarlo sobre una lmina portaobjetos: adicionar una gota de agua y cubrirla con una
laminilla.
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3.- Llevarla al microscopio compuesto y observar a menor, mediano y mayor aumento, en cada
caso contar el nmero de puntos que se observa en el campo microscpico.
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VI.- CUESTIONARIO
6.4. Por qu las imgenes observadas a travs del microscopio compuesto son invertidas?
6.6. Cul es la funcin del aceite de cedro en las observaciones que se realizan con el objetivo
de 100 aumentos (100 X)
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