AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI-FRAKSI EKSTRAK ETIL

ASETAT KULIT BATANG MAHKOTA DEWA [Phaleria

macrocarpa (Scheff.) Boerl] TERHADAP SEL KANKER MANUSIA

CYTOTOXIC ACTIVITY OF SOME FRACTIONS FROM ETHYL

ACETATE EXTRACT OF THE BARK OF MAHKOTA DEWA
[Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl] AGAINST HUMAN
CANCER CELL LINES
Ermin Katrin dan Hendig Winarno
Lab Bahan Kesehatan, Pusat Aplikasi Teknologi Isotop dan Radiasi-BATAN

ABSTRAK
Telah dilakukan uji aktivitas sitotoksik fraksi-fraksi dari ekstrak etil asetat simplisia kulit batang
mahkota dewa terhadap sel leukemia tikus L1210 dan dua fraksi terhadap empat jenis sel kanker manusia
yaitu servik HeLa, leukemia THP1, karsinoma paru-paru A549, dan limfoma HUT78. Simplisia kulit
batang mahkota dewa dengan kadar air 3,5% dimaserasi berturut turut dengan n-heksan, etil asetat, dan
etanol. Uji aktivitas sitotoksik ketiga ekstrak terhadap sel leukemia L1210 menunjukkan bahwa ekstrak etil
asetat memiliki aktivitas sitotoksik tertinggi degan nilai IC50 = 10,15 g/ml, diikuti ekstrak etanol (IC50 =
12,92 g/ml) dan ekstrak n-heksan (IC50 = 13,35 g/ml). Fraksinasi ekstrak etil asetat dengan
kromatografi kolom silika gel dan dielusi secara landaian dengan n-heksan - etil asetat metanol, diperoleh
delapan fraksi. Uji sitotoksik kedelapan fraksi terhadap sel leukemia L1210 menunjukkan bahwa kecuali
fraksi 7 (IC50 = 20,87 g/ml), semua fraksi dinyatakan aktif dengan nilai IC50 < 20 g/ml, dan fraksi 2
merupakan fraksi yang paling sitotoksik (IC50 = 8,30 g/ml) diikuti fraksi 5 (9,53 g/ml), fraksi 4 (10,82
g/ml), fraksi 6 (11,56 g/ml), fraksi 3 (12,94 g/ml), fraksi 1 (15,52 g/ml), dan fraksi 8 (16,77 g/ml).
Uji aktivitas sitotoksik fraksi 5 dan fraksi 6 terhadap empat jenis sel kanker lestari manusia, yaitu servik
HeLa, leukemia THP1, karsinoma paru-paru A549, dan limfoma HUT78 juga menunjukkan bahwa kedua
fraksi tersebut aktif terhadap keempat sel uji dengan IC50 antara 4,75 g/ml sampai 14,85 g/ml.

Kata kunci : mahkota dewa, sitotoksisitas, sel leukemia tikus L1210, sel kanker manusia

ABSTRACT

Cytotoxic activity test of some fractions from ethyl acetate extract of the bark of mahkota dewa [Phaleria
macrocarpa (Scheff.) Boerl] against mouse leukemia L1210 cell line and two fractions against four kinds
of human cancer cell lines, namely servic HeLa, leukemia THP1, lung carcinoma A549, and lymphoma
HUT78 have been done. The dried bark of mahkota dewa tree was macerated using n-hexane, ethyl asetate,
and ethanol, respectively. Cytotoxic activity test of those extract against leukemia L1210 cell line showed
that ethyl asetate extract exhibited the highest cytotoxic activity with IC50 = 10.15 g/ml, followed by
ethanol extract (IC50 = 12.92 g/ml) and n-hexane extract (IC50 = 13.35 g/ml). Fractionation of the ethyl
asetate extract by silica gel column chromatography and gradually eluted using n-hexane - etil asetat
metanol, it were obtained eight fractions. Cytotoxic activity test of eight fractions (except fraction 7 with
IC50 = 20.87 g/ml) against leukemia L1210 cell line showed that the fractions exhibited cytotoxic activity
with IC50 < 20 g/ml, was the most cytotoxic was fraction 2 (IC50 8.30 g/ml) followed by fraction 5 (9.53
g/ml), fraction 4 (10.82 g/ml), fraction 6 (11.56 g/ml), fraction 3 (12.94 g/ml), fraction 1 (15.52
g/ml), and fraction 8 (16.77 g/ml). Cytotoxic activity test of fraction 5 and 6 against four kinds of
human cancer cell lines, namely servic HeLa, leukemia THP1, lung carcinoma A549, and lymphoma
HUT78 showed that those fractions exhibited cytotoxic activities onto fourth cancer cell lines with IC50
between 4.75 g/ml until 14.85 g/ml.
Keywords : mahkota dewa, cytotoxicity, mouse leukemia L1210, human cancer cell lines

Alamat korespondensi :
Dra. Ermin Katrin Winarno
Lab Bahan Kesehatan, Pusat Aplikasi Teknologi Isotop dan Radiasi-BATAN
Jl. Cinere Pasar Jumat, Lebak Bulus, Jakarta
E-mail : erminkk@batan.go.id

PENDAHULUAN
metoksibensofenon-3-O- -D-glukosida yang
Akhir-akhir ini, penggunaan tanaman untuk
kemudian diberi nama phalerin (Wahyuningsih
mengobati berbagai penyakit mulai dilakukan oleh
dkk, 2005). Senyawa tersebut tidak toksik dan
berbagai lapisan masyarakat dengan slogan
diduga dapat berfungsi sebagai imunostimulan.
kembali ke alam. Salah satu pengobatan yang
Sedang dalam daging buah ditemukan senyawa
banyak menggunakan bahan alam adalah untuk
baru 4,4-dihidroksi-2-metoksibensofenon-6-O- -
penyakit kanker. Di Indonesia penderita kanker
D-glukopiranosida yang kemudian diberi nama
yang terbanyak adalah kanker payudara, diikuti
mahkoside A dan 6 senyawa lain, yaitu mangiferin,
kanker mulut rahim, hati, limpoma dan kanker
kaempferol-3-O- -D-glukosida, asam dodekanoat,
darah (Aditama, 2001).
asam palmitat, etil stearat dan sukrosa (Zang et al.,
Telah banyak jenis tanaman yang diduga dan
2006), tetapi senyawa-senyawa tersebut belum
diyakini dapat menyembuhkan penyakit kanker,
diuji aktivitas biologinya. Makalah ini melaporkan
salah satunya adalah tanaman mahkota dewa
hasil penelitian yang telah dilakukan yaitu
[Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl] (Harmanto,
ekstraksi dan fraksinasi simplisia kulit batang
2001). Tanaman mahkota dewa secara empiris
mahkota dewa serta uji sitotoksik terhadap
mempunyai banyak khasiat dapat menyembuhkan
pertumbuhan sel kanker lestari manusia, yaitu
beberapa penyakit diantaranya pegal-pegal, flu,
servik HeLa, leukemia THP1, karsinoma paru-paru
alergi, diabetes, hingga kanker. Di Jawa daun dan
A549, dan limfoma HUT78. Sebagai uji
buah dimanfaatkan sebagai obat gatal-gatal dan
pendahuluan digunakan sel kanker tikus leukemia
eksim. Cangkang biji mempunyai rasa sepet dan
L1210.
pahit, bila dikonsumsi secara langsung dapat
mengakibatkan mabuk, pusing bahkan pingsan,
METODOLOGI PENELITIAN
namun cangkang ini dimanfaatkan untuk
Bahan
mengobati penyakit kanker payudara, kanker
Bahan yang digunakan pada penelitian ini
rahim, sakit paru-paru dan sirosis hati. Bijinya
adalah simplisia kulit batang mahkota dewa
sangat beracun dan dapat menyebabkan muntah-
[Phaleria Macrocarpa (Scheff.) Boerl] berumur 3
muntah dan lidah mati rasa, hanya digunakan
tahun yang diperoleh dari kebun petani mahkota
sebagai obat luar untuk penyakit kulit. Batang
dewa di Desa Cibeuteung, Parung, Bogor, Jawa
mahkota dewa digunakan untuk mengobati kanker
Barat. Sel kanker manusia servik HeLa (human
tulang, sedang daunnya bisa menyembuhkan lemah
ephiteloid cervic carcinoma), leukemia THP1
syahwat, disentri, alergi, dan tumor. Daging buah
(human peripheral blood leukemia-acute
mengandung senyawa golongan alkaloid, saponin,
monolcytic), karsinoma paru-paru A549 (human
flavanoid, dan polifenol (Anonim, 2008). Bila
lung carcinoma), dan limfoma HUT78 (human
dikonsumsi dalam keadaan segar, buah mempunyai
cutaneous T-cell lymphoma), sel leukemia tikus
efek samping, yaitu bengkak di mulut, sariawan,
L1210, doksorubisin untuk kontrol positif. Bahan
mabuk bahkan keracunan yang penyebabnya belum
kimia yang digunakan yaitu etanol 96%, n-heksan,
diketahui dengan pasti. Beberapa uji efikasi dan
etil asetat, kloroform, etanol, metanol, HCl, serium
keamanan beberapa ekstrak daging buah, biji, dan
sulfat (CeSO4) 1% dalam H2SO4 10%, silika gel
daun mahkota dewa telah banyak diteliti
(70-230 mesh ASTM), lempeng silika gel 60 F254,
(Widowati, 2004), tetapi bagian kulit batang masih
akuabides, medium Eagles MEM, medium
sangat terbatas (Hertiani, 2002).
penumbuh Dulbeccos modified Eagles medium
Struktur senyawa yang terkandung dalam
(DMEM/F-12), fetal bovine serum (FBS),
tanaman mahkota dewa masih belum banyak yang
phosphate buffer saline (PBS) 10%, dimetil
terungkap, beberapa yang ditemukan pada daun
sulfoksida, dan biru tripan 0,4%.
mahkota dewa adalah 4,5-dihidroksi,4-
Alat
Kolom kromatografi, lampu UV 254 nm dan
366 nm, penguap putar, oven, desikator, neraca
analitik, inkubator CO2, multiwell plate tissues
culture, mikroskop, hemocytometer Fuch Rosental,
blender, dan alat-alat gelas.
Penyiapan Simplisia
Kulit batang mahkota dewa dipisahkan dari
kayu, dikeringkan, dirajang halus kemudian di-
blender sampai halus dan ditentukan juga kadar air
simplisia kering.
Ekstraksi
Sebanyak 746,2 g simplisia kulit batang
mahkota dewa kering dengan kadar air 3,5% yang
telah dihaluskan dimaserasi berturut-turut dengan
pelarut nheksan, etil asetat, dan etanol. Tiap-tiap
pelarut diulang sebanyak 4-5 kali 9 liter hingga
tidak memberikan bercak pada uji dengan
kromatografi lapis tipis. Masing-masing filtrat hasil
maserasi dikumpulkan dan diuapkan dengan
penguap putar hingga kering, kemudian dilanjutkan
pengeringan dengan pompa vakum dalam desikator
hingga bobot tetap.
Penapisan Fitokimia
Penapisan fitokimia dilakukan terhadap
golongan alkaloid, flavonoid, saponin, tanin,
kuinon, sterol dan terpen, minyak atsiri, dan
kumarin.
Fraksinasi ekstrak etil asetat dengan
kromatografi kolom
Sebanyak 11,0 g ekstrak etil asetat yang
telah dihomogenkan dengan 70 g cellite,
difraksinasi dengan kolom kromatografi berukuran
8 cm x 90 cm (silika gel = 330 g, n-heksan - etil
asetat-metanol = 3:1:0 hingga 0:0:1 secara
landaian). Pemisahan dilakukan dengan mengatur
kecepatan aliran kurang lebih 50 ml/menit dan
penampungan dilakukan setiap 500 ml. Hasil
pemisahan dikelompokkan dalam fraksi
berdasarkan pola bercak yang sama berdasarkan
KLT.
Uji aktivitas sitotoksik tehadap sel leukemia
tikus L1210 secara in vitro
Uji aktivitas sitotoksik dilakukan terhadap
ekstrak n-heksan, etil asetat, etanol, dan delapan
fraksi hasil fraksinasi dengan kromatografi kolom.
Masing-masing sampel dibuat dengan enam
macam variasi konsentrasi, yaitu 0 (kontrol), 5, 10,
20, 30, dan 40 g/ml, dengan ulangan 3 kali.
Masing-masing konsentrasi di tempatkan dalam
multiwell plate tissues culture 24 sumuran yang
berisi 1 ml suspensi sel L1210 (mengandung 2 x
105 sel) dalam medium RPMI-1610, kemudian
diinkubasi dalam inkubator CO2 5% pada suhu
37oC selama 48 jam. Jumlah sel yang masih hidup
dihitung dengan mikroskop. Aktivitas sitotoksik
yang merupakan kemampuan sampel uji dalam
menghambat pertumbuhan sel dinyatakan dalam
persentase (%) penghambatan berdasarkan rumus:
% penghambatan :
[ rerata sel dlm kontrol ] [ rerata sel dlm sampel uji ]
[ rerata sel dalam kontrol ]
Perhitungan nilai IC50 (inhibitory concentration
fifty), yaitu konsentrasi zat uji yang dapat
menghambat pertumbuhan sel sebesar 50%,
dihitung dari kurva regresi linier antara log
konsentrasi zat uji dengan nilai probit aktivitas
penghambatan.
Uji aktivitas sitotoksik tehadap sel kanker
manusia HeLa, THP1, A549, dan HUT78 secara
in vitro
Uji aktivitas sitotoksik pada sel kanker
manusia HeLa, THP1, A549, dan HUT78
dilakukan terhadap dua fraksi hasil fraksinasi
kromatografi kolom yang memiliki jumlah dan
nilai IC50 terbaik pada pengujian terhadap sel
leukemia L1210. Masing-masing sampel dibuat
dengan enam macam variasi konsentrasi, yaitu 0
(kontrol), 5, 10, 20, 40, dan 80 g/ml, dengan
ulangan tiga kali. Sebagai kontrol positif digunakan
doksorubisin dengan konsentrasi 6 g/ml. Masing-
masing konsentrasi ditempatkan dalam multiwell
plate tissues culture 24 sumuran yang berisi 1 ml
suspensi sel (mengandung 2 x 106 sel) dalam
medium, kemudian diinkubasi dalam inkubator
CO2 5% pada suhu 37oC selama 72 jam. Suspensi
sel dalam setiap sumuran dipipet 90 l dan
dimasukkan ke dalam serocluster plate (96
sumuran) dan ditambah 10 l biru tripan, lalu
dihomogenkan kembali. Sebanyak 10 l larutan
dialirkan ke dalam hemocytometer dan dilakukan
perhitungan jumlah sel yang hidup dan yang mati
di bawah mikroskop. Selanjutnya dihitung
persentasi aktivitas antiproliferasi dan nilai IC50
yaitu konsentrasi yang menyebabkan pertumbuhan
sel terhambat sebesar 50% dengan cara yang sama
seperti pada perhitungan terhadap sel L1210.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Pembuatan ekstrak dan penapisan fitokimia
Hasil ekstraksi dengan n-heksan, etil asetat,
dan etanol dari 746,20 g simplisia kulit batang
mahkota dewa (serbuk kering dengan kadar air
3,5%) masing-masing diperoleh rendemen 1,24%,
2,01%, dan 10,45% (Tabel 1).
Ekstrak n-heksan berwarna hijau tua dengan
kandungan kimia adalah steroid dan terpen, ekstrak
etil asetat berwarna hijau tua dengan kandungan
kimia adalah alkaloid, flavonoid, dan steroid,
sedang ekstrak etanol berwarna coklat tua dengan
kandungan kimia adalah flavonoid, dan steroid.
Semua komponen tersebut juga terkandung dalam
rajangan simplisia kulit batang mahkota dewa.
Komponen kimia dalam kulit batang mahkota
dewa ini sama dengan kandungan kimia dalam
daging buah mahkota dewa, dan senyawa tersebut
diduga berpotensi sebagai antikanker dan
antioksidan (Lisdawati, 2002).
Kromatogram lapis tipis ketiga ekstrak
tersebut (Gambar 1) menunjukkan bahwa dalam
ekstrak n-heksan (a) sedikitnya terdapat 9 senyawa,
etil asetat (b) 9 senyawa, dan etanol (c) 4 senyawa.

Tabel 1. Hasil ekstraksi serbuk kulit batang mahkota dewa (746,20 g) dan penapisan fitokimia

No Bentuk dan warna Bobot Kandungan kimia berdasar

Contoh penapisan fitokimia
(g) (%)

1 ekstrak serbuk kering, hijau 9,27 1,24 terpenoid, steroid

n-heksan tua

2 ekstrak serbuk kering, hijau 15,02 2,01 steroid, flavonoid, alkaloid

etil asetat tua

3 eksktrak serbuk kering, 77,97 10,45 steroid, flavonoid,

etanol coklat tua

4 rajangan serbuk kering, terpenoid, steroid, flavonoid,

kulit batang coklat muda alkaloid, saponin

9
Fase gerak : a. kloroform-metanol (20:1)
9 b. kloroform-metanol-air (6,5:3,5:1)
8 c. kloroform-metanol-air (6:4:1)
8
7 7
Fase diam : silika gel GF254
6 6
5 4
Deteksi : sinar uv 254 nm
5
4
4 3 Penampak : serium sulfat 1% dalam H2SO4 10%
3 3

2 2
2
1 1 1

AcOEt
a b c
Gambar 1. KLT ekstrak n-heksan (a), etil asetat (b), dan etanol (c)
 dan air dari kulit batang mahkota dewa terhadap
Uji aktivitas sitotoksik ketiga ekstrak
larva udang Artemia salina Leach menunjukkan
terhadap sel L1210 secara in vitro (Tabel 2),
bahwa ekstrak kloroform (semipolar) memiliki
menunjukkan bahwa nilai IC50 ekstrak n-heksan,
aktivitas tertinggi (Hertiani dkk, 2002). Hal ini
ekstrak etil asetat, dan ekstrak etanol berturut-turut
menunjukkan kecenderungan yang sama bahwa
adalah 13,35 g/ml, 10,15g/ml, dan 12,92 g/ml.
ekstrak etil asetat yang juga semipolar memiliki
Suatu ekstrak dinyatakan memiliki aktivitas
aktivitas tertinggi pada pengujian terhadap sel
inhibisi apabila memiliki nilai IC50 50 g/ml
L1210, meskipun ekstrak n-heksan dan ekstrak
(Mans et al., 2000), dengan demikian ketiga
metanol juga memiliki aktivitas sitotoksik. Hal ini
ekstrak tersebut dinyatakan aktif. Hasil uji
menunjukkan bahwa dalam setiap esktrak, baik non
sitotoksik pada kulit batang terhadap sel L1210 ini
polar, semi polar, maupun polar masing-masing
melengkapi hasil uji sitotoksik ekstrak kulit biji
mengandung komponen yang memiliki aktivitas
dan daging buah yang memiliki aktivitas sitotoksik
sitotoksik.
terhadap sel uji yang sama (Lisdawati, 2002).
Pengujian toksisitas ekstrak kloroform, methanol,

Tabel 2. Hasil uji aktivitas inhibisi ekstrak n-heksan, ekstrak etil asetat, dan ekstrak etanol kulit batang mahkota
dewa terhadap pertumbuhan sel L1210

Konsentrasi Log % Probit Persamaan IC50

Sampel
( g/ml) konsentrasi inhibisi* % inhibisi regresi linier (g/ml)
0 (kontrol) 0,00 0,00 -
5 0,70 26,32 4,36
10 1,00 37,32 4,67 y = 1,8572x +
Ekstrak 13,35
20 1,30 54,55 5,13 2,9096
n-heksan
30 1,48 69,38 5,50
40 1,60 88,04 6,18
0 (kontrol) 0,00 0,00 -
5 0,70 28,23 4,42
Ekstrak etil y = 2,1294x + 10,15
asetat 10 1,00 52,15 5,05
2,8567
20 1,30 62,68 5,33
30 1,48 81,34 5,88
40 1,60 93,78 6,55
0 (kontrol) 0,00 0,00 -
5 0,70 18,18 4,08
Ekstrak y = 2,8847x + 12,92
etanol 10 1,00 31,58 4,53
1,7942
20 1,30 54,07 5,10
30 1,48 81,82 5,92
40 1,60 96,65 6,88
* rata-rata dari 3 kali ulangan
Tabel 3. Fraksi hasil fraksinasi ekstrak etil asetat (11,0 g) dengan kromatografi kolom

No Fraksi Warna Bobot (g) Rendemen (%) IC50 (g/ml)*

1 Fr-1 Hitam kehijauan 0,337 3,07 15,52
2 Fr-2 Hitam kehijauan 0,298 2,71 8,30
3 Fr-3 Hitam kehijauan 0,321 2,92 12,94
4 Fr-4 Hitam kehijauan 0,365 3,32 10,82
5 Fr-5 Hitam kehijauan 0,619 5,62 9,53
6 Fr-6 Hijau tua kehitaman 5,728 52,07 11,56
7 Fr-7 Coklat tua 2,017 18,34 20,87
8 Fr-8 Coklat tua 1,126 10,24 16,77
TOTAL 10,811 98,29

Fraksinasi ekstrak etil asetat dengan
kromatografi kolom.
Berdasarkan kenyataan bahwa ekstrak etil
asetat memiliki aktivitas tertinggi (IC50 10,15
g/ml) dan memiliki bercak mayor yang terpisah
dengan baik pada kromatogram lapis tipis, maka
pada penelitian ini ekstrak etil asetat dipilih untuk
dipisahkan lebih lanjut dengan kromatografi
kolom. Hasil fraksinasi yang dimonitor dengan
KLT memberikan delapan fraksi dengan
karakterisasi seperti diperlihatkan pada Tabel 3
(kolom 1-5).
Uji aktivitas sitotoksik terhadap sel L1210
dengan cara yang sama seperti uji pada ekstrak
menunjukkan semua fraksi memiliki aktivitas
sitotoksik dengan nilai IC50 < 50 g/ml, dan fraksi
2 merupakan fraksi yang paling aktif (IC50 8,30
g/ml) diikuti fraksi 5 (9,53 g/ml), fraksi 4 (10,82
g/ml), fraksi 6 (11,56 g/ml), fraksi 3 (12,94
g/ml), fraksi 1 (15,52 g/ml), fraksi 8 (16,77
g/ml) dan fraksi 7 (20,87 g/ml) seperti
diperlihatan pada Tabel 3 (kolom 6).
Berbeda dengan hasil penelitian sebelumnya
(Hertiani dkk, 2002) setelah ekstrak kloroform
difraksinasi, fraksi-fraksi menunjukkan toksisitas
lebih rendah dibanding ekstraknya, sedang dalam
penelitian ini fraksi-fraksi hasil fraksinasi ekstrak
etil asetat masih memberikan nilai IC50 pada
rentang antara 8,30 20,87g/ml. Dengan
demikian isolat aktif tidak terkonsentrasi pada satu
fraksi, melainkan setiap fraksi masih mengandung
komponen aktif.
Berdasarkan kenyataan bahwa fraksi 5
(0,619 g, IC50 9,53 g/ml) dan fraksi 6 (5,728 g,
IC50 11,56 g/ml) selain memiliki aktivitas tinggi
juga memberikan rendemen yang cukup, maka
kedua fraksi ini dipilih untuk diuji lebih lanjut
aktivitas sitotoksiknya terhadap empat jenis sel
kanker manusia, yaitu servik HeLa, leukemia
THP1, karsinoma paru-paru A549, dan limfoma
HUT78. Dengan menggunakan analisis probit
seperti perhitungan pada uji terhadap sel L1210,
maka nilai IC50 dapat ditentukan (Tabel 4). Hasil
uji sitotoksik menunjukkan bahwa kedua fraksi,
yaitu fraksi 5 dan fraksi 6 memiliki aktivitas
sitotoksik terhadap keempat sel yang diuji dengan
nilai IC50 antara 4,75 g/ml sampai 14,85 g/ml.
Kenyataan ini mengindikasikan bahwa komponen
dalam kedua fraksi tersebut perlu diisolasi lanjut
untuk mendapatkan isolat yang berpotensi sebagai
antikanker.

Tabel 4. Nilai IC50 fraksi 5 dan 6 terhadap sel HeLa, THP1, A549, dan HUT78
No Jenis sel Nilai IC50 Fraksi 5 (g/ml) Nilai IC50 Fraksi 6 (g/ml)

1 Servik HeLa 14,85 13,42

2 Leukemia THP1 4,75 6,25
3 Karsinoma A549 8,38 12,80
4 Limfoma HUT78 6,25 7,52

Aktivitas sitotoksik fraksi 5 (IC50 14,85
g/ml) dan fraksi 6 (IC50 13,42 g/ml) terhadap
sel kanker servik HeLa ini lebih tinggi
dibandingkan dengan ekstrak air buah mahkota
dewa dan daun mahkota dewa yang memiliki
IC50 masing-masing sebesar 197 dan 812 g/ml
(Sumastuti dkk, 2002). Nilai IC50 fraksi 5 dan
fraksi 6 juga lebih tinggi dibanding senyawa
Phalerin (isolat dari ektrak metanol daun
mahkota dewa) yang hanya memiliki IC50 61,00
g/ml (Wahyuningsih dkk, 2005). Oleh karena
itu kedua fraksi tersebut perlu dipisahkan lebih
lanjut untuk mendapatkan isolat yang berpotensi
sebagai antikanker.
KESIMPULAN
Ekstrak etil asetat (IC50 10,15 g/ml)
simplisia serbuk kulit batang mahkota dewa
menunjukkan aktivitas sitotoksik tertinggi
dibandingkan ekstrak etanol (IC50 12,92 g/ml)
dan ekstrak n-heksan (IC50 13,35 g/ml).
Fraksinasi ekstrak etil asetat simplisia serbuk
kulit batang mahkota dewa menggunakan silika
gel kromatografi kolom diperoleh delapan fraksi
yang memiliki aktivitas sitotoksik terhadap sel
leukemia tikus L1210 dengan IC50 adalah 15,52
g/mg/ml berturut-turut untuk fraksi 1, 2, 3, 4,
5, 6, 7, dan 8. Uji sitotoksik fraksi 5 dan 6
terhadap 4 jenis sel kanker manusia
menunjukkan bahwa kedua fraksi memiliki
aktivitas sitotoksik dengan nilai IC50 antara 4,75
g/ml sampai 14,85 g/ml, dan perlu diisolasi
lanjut untuk mendapatkan isolat aktif.
UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan terimakasih disampaikan
kepada Sdr. Suhanda S.Si. yang telah membantu
melakukan pengujian aktivitas sitotoksik.
Ucapan terima kasih juga disampaikan kepada
Drh. Bambang Pontjo S, Ph.D dari Institut
Pertanian Bogor yang telah memberi ijin
penggunaan sel kanker lestari manusia dan
fasilitas laboratorium untuk pengujian.
DAFTAR PUSTAKA
Aditama, T.Y., 2001. Kanker. Medisinal Jurnal
Kedokteran, 2, 1-5.
Anonim, Mahkota Dewa Nusantara [Phaleria
macrocarpa (Scheff.) Boerl.],
http://www.trubus-online.com, diakses
pada 11 Maret 2008.
7
Harmanto, N., 2001. Sehat dengan Ramuan
Tradisional Mahkotadewa. Edisi
Pertama, Agromedika Pustaka,
Tangerang, 31-5.
Hertiani, T., Pratiwi, S.U.T., 2002. Uji
toksisitas kulit batang makutadewa
(Phaleria macrocarpa (Scheff.)
Boerl.) terhadap Artemia salina Leach
dan profil kromatografi lapis tipis
fraksi aktif. Majalah Farmasi
Indonesia, 13(2), 65-70.
Lisdawati, V., 2002. Buah mahkota dewa
Toksisitas, efek antioksidan dan efek
antikanker berdasarkan uji penapisan
farmakologi.
http://www.mahkotadewa.com/indi/inf
o/makalah/vivi201002.htm, diakses
pada 30 April 2007.
Mans, D.R. ., Rocha, A.B., and Schwartsmann,
G., 2000. Anti-cancer drug discovery
and development in Brazil: Targeted
plant collection as a national strategy
to acquire candidate anti-cancer
compounds, Oncologist, 5, 185-198.
Sumastuti, R. dan Sonlimar, M., 2002. Efek
Sitotoksik ekstrak buah dan daun
mahkota dewa [Phaleria macrocarpa
(Scheff.) Boerl.] terhadap sel HeLa.
Farmakologi Universitas Gadjah
Mada, Yogyakarta,
http://www.tempointeraktif.com/medi
ka/arsip/122002/1rt-3.htm, diakses
pada 11 Maret 2008.
Wahyuningsih, M.S.H., Mubarika, S., Artama,
W.T., Wahyuono, S., dan Gandjar,
I.G., 2005. Sitotoksisitas phalerin hasil
isolasi dari daun mahkota dewa
[Phaleria macrocarpa (Scheff.)
Boerl.] terhadap berbagai sel kanker
manusia in vitro, Majalah Obat
Tradisional, 10(32), 5-9.
Wahyuningsih, M.S.H., Mubarika, S., Gandjar,
I.G., Hamann, M.T., Rao, K.V., dan
Wahyuono, S., 2005. Phalerin,
glukosida benzofenon baru diisolasi
dari ekstrak metanolik daun mahkota
dewa [Phaleria macrocarpa (Scheff.)
Boerl.]. Majalah Farmasi Indonesia,
16(1), 51-7.
Widowati, L., 2005. Kajian hasil penelitian
mahkota dewa, J. Bahan Alam
Indonesia, 4(1), 223-7.
Zhang, Y-B., Xu, X-J., and LIU, H-M., 2006.
Chemical constituent from mahkota
dewa, J. Asian Nat. Prod. Res., 8(1-2),
119-23.