Jurnal Biotika Vol. 1, No.

1, Juni 2002 : 48-56

PENGARUH SUHU DAN EKSTRAK BIJI NIMBA

(Azadirachta indica A. Juss) TERHADAP JUMLAH HEMOSIT
JENGKERIK (Gryllus mitratus Burm.)

Hikmat KASMARA1), Ahmad RIDWAN2) dan Darmadi GOENARSO2)

1)
Jurusan Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Padjadjaran
2)
Jurusan Biologi, Fakultas MIPA, ITB

ABSTRACT

The effect of temperature and neem seed extract (Azadirachta indica A. Juss) on the
haemocyte number of cricket (Gryllus mitratus Burm.) has been studied. Temperatures
applied in this experiment were 25o 1o C, 30o 1o C and 35o 1o C. Neem seed
extract was injected in volumes of 10 l/g body weight into the ventral abdomen
intersegment between segment 5 and 6 of the insect body. The concentrations of neem
seed extract were 0.0 %, 2.5 %, 5.0 %, 10.0 % and 20.0 %. Controls without injection
were also analysed. Hemolymph was taken by sterile needle from the prothorax. The
experiment design was randomized block design (RBD) factorial pattern. In this
experiment, four types of haemocyte were observed e.g. prohaemocyte (PR),
plasmatocyte (PL), coagulocyte (CO) and granulocyte (GR). At 25o C, treatment of 0.0
%, 2.5 % and 5.0 % neems seed extract to increased the haemocyte number during 3
hours exposure, at 10.0 % neem seed extract the haemocyte number started to decrease,
while at 20.0 % the haemocyte number returned to the same level as the control. The
same pattern was obtained for the treatment at 30o and 35o C. When the exposure was
increased to 24 hours, at 25o C, application of neem seed extract 0.0 %, 2.5 %, 5.0 %,
10.0 % and 20.0 % increased haemocyte number compared to control. The differences
of the haemocyte number between control and treatment at 30o C, only occurred on the
5.0 % neem seed extract. At 35o C, the haemocyte number of the 0.0 %, 2.5 % and 5.0
% neem seed extract were equal to control, while on the 10.0 % and 20.0 %, the
haemocyte number were lower than control. The lowest haemocyte number was
obtained at 35o C, 20.0 % neem seed extract and 24 hours exposure.
Key words : temperature, neem seed extract, haemocyte, cricket

PENDAHULUAN mempengaruhi serangga dari anggota

Sekarang telah banyak diketahui
jenis tumbuhan yang dapat digunakan
sebagai bahan pestisida, salah satu
diantaranya yang telah berhasil
dikembangkan adalah nimba
(Azadirachta indica A. Juss) yang
menghasilkan bahan aktif Azadirachtin
(Sastrodihardjo, 1992). Bioaktif yang
dihasilkan nimba merupakan pestidida
yang mempunyai spektrum luas terhadap
serangga fitofagus dan paling banyak
Ordo Orthoptera, Heteroptera, Diptera,
Hymenoptera, Coleoptera, Lepidoptera
dan sedikit Thysanoptera (Schmutterer,
1990).
Schmutterer (1990), menyatakan
bahwa beberapa efek yang terjadi bila
serangga terkena bahan aktif nimba,
diantaranya adalah menghambat makan,
mencegah serangga betina meletakkan
telurnya, mengganggu metamorfosis,
menurunkan fekunditas, menghambat
pertumbuhan dan mengurangi

48
 Kasmara et al. : Pengaruh Suhu dan Ekstrak Biji Nimba
kelulushidupan. Akan tetapi cara kerja
berbagai ekstrak nimba terhadap jenis-
jenis serangga tertentu sampai sejauh ini
belum ada yang pasti (Ahmad, 1992).
Darah serangga atau hemolimf
merupakan cairan ekstra seluler yang
jernih berwarna kuning atau hijau muda,
terdiri atas cairan plasma dan sel darah
yang disebut hemosit. Hemosit berperan
dalam sistem pertahanan tubuh serangga
terhadap infeksi bakteri dan racun.
Jengkerik rumah (Acheta
domesticus) yang baru menetas diberi
makanan yang mengandung azadirachtin,
menyebabkan menurunnya penambahan
berat tubuh dibandingkan dengan hewan
kontrol, efeknya sesuai dengan porsi
dosis yang diberikan. Sedangkan
jengkerik rumah betina instar ke-7 yang
diberi makanan yang mengandung
azadirachtin menyebabkan terhambatnya
penambahan berat badan dan lebih
lamanya fase nimfa dibandingkan dengan
hewan kontrol (Schmutterer, 1990).
Quadri dan Narsaiah (1978) dalam Adler
dan Uebel (1986), menyatakan bahwa
gangguan penambahan berat badan yang
disebabkan oleh azadirachtin pada kecoa
(Periplaneta americana), ada
hubungannya dengan penurunan jumlah
hemosit.
Beberapa peneliti menyatakan
bahwa perubahan jumlah dan komposisi
sel darah bukan disebabkan oleh infeksi
mikroba saja, tetapi dapat dipengaruhi
pula oleh adanya racun, perubahan suhu,
umur dari hewan, keadaan fisiologis,
kualitas dan kuantitas bahan yang
diinjeksikan kedalam tubuh hewan
(Shapiro, 1989 dalam Gupta, 1979;
Woodring, 1985 dalam Blum, 1985).
Jengkerik (Gryllus mitratus
Burm.) merupakan serangga yang
termasuk kedalam ordo Orthoptera,
mempunyai ukuran tubuh cukup besar
dan mudah untuk dipelihara di
laboratorium. Sampai saat ini jengkerik
Terhadap Jumlah Hemosit Jengkerik
merupakan hewan bukan sasaran dalam
kelas serangga. Sekarang jengkerik
banyak dimanfaatkan sebagai pakan
burung dan ikan hias peliharaan.
Ekstrak biji nimba telah
diketahui mempunyai potensi yang besar
sebagai insektisida alternatif dan
diharapkan penggunaannya tidak
menimbulkan pengaruh negatif terhadap
hewan bukan sasaran, manusia dan
lingkungan. Oleh karena itu penelitian
pengaruh ekstrak biji nimba terhadap
hewan bukan sasaran perlu dilakukan.
Dari penelitian ini diharapkan
akan diperoleh informasi mengenai tipe-
tipe hemosit dari darah (hemolimf)
jengkerik, tingkat toksisitas ekstrak biji
nimba terhadap hewan bukan sasaran
dalam hal ini jengkerik serta mengkaji
pengaruh suhu dan ekstrak biji nimba
terhadap jumlah hemosit jengkerik (efek
fisiologi).
BAHAN DAN METODE
Ekstrak biji nimba (Azadirachta
indica A. Juss) sebagai bahan yang
diujikan dalam penelitian ini didapatkan
dari PAU Ilmu Hayati ITB. Larutan
ekstrak biji nimba tersebut mempunyai
komposisi : 20 % fraksi aktif (pestisida),
20 % minyak nimba, 50 % minyak nabati
(Vetco) dan 10 % emulgator yang
terdiri atas larutan Tween 20 dan Span.
Untuk membuat 1 liter larutan ekstrak
nimba dibutuhkan 2 kg biji nimba.
Ekstrak biji nimba yang
diperoleh, dianggap sebagai konsentrasi
100 %. Untuk membuat larutan dengan
konsentrasi 2,5 %, 5,0 %, 10,0 % dan
20,0 % dilakukan pengenceran dengan
menggunakan larutan pengencer yang
terdiri atas minyak nabati (Vetco)
ditambah emulgator Tween 20 dan Span
sebanyak 10 %.
49
 Jurnal Biotika Vol. 1, No. 1, Juni 2002 : 48-56
Hewan uji yang digunakan dalam
penelitian ini adalah jengkerik (Gryllus
mitratus Burm.), yang didapatkan dari
toko penjual ikan hias, makanan ikan dan
burung. Menurut keterangan dari
pemasok jengkerik, menerangkan bahwa
serangga tersebut ditangkap dari daerah
Kabupaten Subang Jawa Barat. Jengkerik
yang digunakan dalam penelitian ini
berjenis kelamin jantan yang telah
dewasa dan dipilih yang sehat dan tidak
cacat.
Rancangan Penelitian
Penelitian ini dilakukan dalam 2
tahap, yaitu :
Tahap 1
Penentuan LD50 ekstrak biji
nimba terhadap hewan uji. Data yang
diperoleh kemudian diolah dengan
analisis regresi (analisis probit). Hasil
penelitian tahap 1 akan digunakan untuk
penelitian tahap 2.
Tahap 2
Penelitian ini dilakukan dengan
metode eksperimental, dengan
menggunakan Rancangan Acak
Kelompok (RAK) dengan pola
perhitungan faktorial 3 x 6. Faktor
perlakuannya adalah suhu sebanyak 3
taraf, yaitu : 25o 1o C, 30o 1o C dan
35o 1o C. Konsentrasi ekstrak biji
nimba : tanpa penyuntikan (kontrol), 0,0
%, 2,5 %, 5,0 %, 10,0 % dan 20,0 %.
Setiap perlakuan konsentrasi disuntikan
larutan sebanyak 10 l per gram berat
badan hewan uji. Pada perlakuan
konsentrasi 0,0 % ekstrak biji nimba,
hewan uji hanya disuntik dengan pelarut.
Parameter yang diukur adalah
jumlah hemosit yang dilakukan dengan 2
perlakuan waktu pendedahan, yaitu 3 jam
dan 24 jam setelah perlakuan pemberian
ekstrak biji nimba. Setiap perlakuan
dilakukan 5 (lima) kali ulangan.
50
Cara Pemberian Eksktrak
Pemberian ekstrak biji nimba
terhadap hewan uji dilakukan dengan
cara penyuntikan, yang dilakukan pada
intersegmen abdomen antara segmen ke-
5 dan ke-6 bagian ventral (Matsumura,
1985; Harvey dan Brown, 1950).
Penyuntikan dilakukan dengan
menggunakan mikro siring volume 10 l.
Setiap perlakuan konsentrasi disuntikan
larutan sebanyak 10 l per gram berat
badan hewan uji (Yeager, et al., 1942).
Perlakuan Suhu
Perlakuan suhu untuk
pengukuran parameter jumlah hemosit
dilakukan dengan cara memasukkan
seekor jengkerik ke dalam botol gelas
warna coklat gelap yang berukuran
diameter 4 cm dan tinggi 8 cm.
Penggunaan botol warna coklat gelap
adalah untuk menghindarkan hewan uji
stres selama selama pendedahan. Bagian
atas botol ditutup dengan sumbat gabus
yang diberi lubang udara dan pada
sumbat diselipkan termometer air raksa
untuk mengukur suhu udara yang
terdapat dalam botol. Botol-botol yang
telah siap disususn dalam rak plastik,
sehingga kedudukan botol tetap tegak.
Selanjutnya dicelupkan kedalam
penangas air (waterbath), hingga
ketinggian air mencapai leher botol.
Penangas air dilengkapi dengan termostat
dan suhunya diatur sesuai dengan
perlakuan. Suhu perlakuan adalah suhu
udara dalam botol, yang diamati dari
termometer yang terpasang pada botol.
Hewan uji setelah mendapat perlakuan
dosis ekstrak biji nimba dan hewan
kontrol, dimasukkan ke dalam botol-
botol yang sebelumnya telah disesuaikan
suhu yang ada didalamnya dengan suhu
perlakuan. Pendedahan hewan uji
dilakukan selama 3 dan 24 jam pada
masing-masing perlakuan suhu.
 Kasmara et al. : Pengaruh Suhu dan Ekstrak Biji Nimba
Pembuatan Apusan Hemolimf
Pengambilan hemolimf
dilakukan dengan cara melukai bagian
protoraks jengkerik dengan
menggunakan jarum steril. Mula-mula
bagian protoraks dibersihkan dengan
kapas yang telah dibubuhi larutan alkohol
70 %, kemudian bagian tengah dari
protoraks ditusuk dengan jarum steril,
hemolimf yang keluar kemudian diambil
segera. Pembuatan apusan hemolimf ini
dilakukan untuk mengetahui tipe-tipe
hemosit yang terdapat dalam hemolimf
jengkerik. Hemolimf yang baru diambil
dari tubuh jengkerik diteteskan pada kaca
objek yang bersih, bebas lemak dan
dengan menggunakan kaca objek lain
yang tumpul salah satu ujung sisinya,
tetesan hemolimf diratakan pada
permukaan kaca objek untuk
mendapatkan apusan yang tipis. Apusan
kemudian diwarnai dengan larutan
pewarna Wrights (Woodring, 1985
dalam Blum, 1985). Identifikasi tipe
hemosit dilakukan menurut Woodring,
1985 dalam Blum, 1985 dan Gupta, 1994
dalam Gujar, 1994).
Penghitungan Jumlah Hemosit
Untuk menghitung jumlah
hemosit digunakan hemositometer
Improved Neubauer mengikuti
prosedur dari Goenarso (1978). Larutan
pengencer yang digunakan adalah sama
seperti yang digunakan untuk
menghitung sel darah putih pada hewan
vertebrata, yaitu larutan Turk.
Seekor jengkerik dibersihkan
bagian protoraksnya dengan kapas yang
telah dibubuhi dengan larutan alkohol 70
%, kemudian bagian tengah dari
protoraks ditusuk dengan jarum steril,
hemolimf yang keluar diambil dengan
menggunakan pipet Thoma yang biasa
digunakan untuk pengenceran sel darah
putih (skala 11) sampai skala 0,2
kemudian dengan segera diencerkan
Terhadap Jumlah Hemosit Jengkerik
dengan larutan Turk hingga volume skala
11 (pengenceran 50 kali). Ujung pipet
Thoma ditutup dengan jari kemudian
diputar-putar sampai suspensi
didalamnya homogen. Suspensi yang
telah homogen diteteskan kedalam
hemositometer "Improved Neubauer".
Jumlah hemosit dihitung dibawah
mikroskop. Penghitungan jumlah hemosit
untuk setiap sampel hemolimf dilakukan
2 kali ulangan.
Uji toksisitas Ekstrak Biji Nimba
Terhadap Jengkerik
Uji ini dilakukan dengan tujuan
untuk menentukan dosis yang akan
digunakan pada penelitian ini . Tahap
awal pengerjaannya yaitu melakukan
exploratory test, yaitu dengan
memberikan perlakuan pada pada hewan
uji dengan berbagai dosis pada rentang
yang cukup besar. Setelah diketahui dosis
terendah yang menyebabkan kematian
dan dosis tertinggi dimana hewan uji
masih hidup dalam 24 jam, baru
dilakukan perlakuan dengan rentang
dosis yang lebih kecil. Waktu
pengamatan 24, 48 dan 72 jam. Hasil
yang diperoleh kemudian dihitung
dengan menggunakan pogram komputer,
sehingga akan didapatkan harga LD50.
Analisis Data
Data yang didapatkan dari hasil
penelitian, kemudian diolah dengan sidik
ragam dan dilanjutkan dengan uji beda
rata-rata menurut Duncan, dengan selang
kepercayaan P 0,05.
51
 Jurnal Biotika Vol. 1, No. 1, Juni 2002 : 48-56
HASIL DAN PEMBAHASAN
Tipe Hemosit
Hasil pengamatan tipe hemosit
pada darah jengkerik (Gryllus mitratus
Burm.), didapatkan 4 (empat) macam
yaitu : prohemosit, plasmatosit,
koagulosit dan granulosit. Prohemosit
yang didapatkan mempunyai ukuran
diameter antara 6,4 8,6 m, bentuk
bulat dengan inti berukuran besar,
dengan pewarna Wrights inti berwarna
merah-ungu gelap, sitoplasma merah
ungu. Plasmatosit mempunyai bentuk
bermacam-macam yaitu bulat, lonjong
dan memanjang, mempunyai inti di
tengah dengan ukuran yang besar.
Hasil pengukuran plasmatosit
jengkerik (Gryllus mitratus) adalah
mempunyai ukuran panjang antara 12,3
24,9 m dan lebar 6,6 11,0 m. rumah (Acheta domesticus), yaitu
Dengan pewarna Wrights inti berwarna
merah-ungu gelap, sitoplasma merah-
ungu. Granulosit jarang didapatkan,
mempunyai bentuk lonjong dan
bergranula bulat kecil. Ukuran yang
didapatkan panjang 11,4 12,9 m dan
lebar 7,1 8,6 m, dengan pewarna
Wrights granul berwarna merah,
sitoplasma berwarna biru. Koagulosit
berbentuk oval, mempunyai ukuran
panjang 10,0 13,3 m dan lebar 8,0
11,6 m. Inti besar ditengah, sitoplasma
hialin, dengan pewarna Wrights inti
berwarna merah-ungu terang tampak
seperti roda pedati, sitoplasma berwarna
biru.
Plasmatosit dan koagulosit
merupakan hemosit yang dominan
ditemukan dalam darah jengkerik.
Woodring (1985) dalam Blum (1985),
mendapatkan nilai differential hemocyte
counts (DHC) pada nimfa jengkerik
rumah (Acheta domesticus) adalah :
prohemosit (5 %), plasmatosit (40 %),
granulosit (5 %) dan koagulosit (50 %).
52
Gupta (1994) dalam Gujar
(1994), dari hasil penelaahannya terhadap
tulisan-tulisan mengenai darah serangga
oleh peneliti-peneliti terdahulu,
menyatakan secara garis besar terdapat 6
(enam) tipe hemosit yang terdapat dalam
hemolimf serangga, yaitu : prohemosit
(PR), plasmatosit (PL), granulosit (GR),
koagulosit (CO), spherulosit (SP) dan
oenositoid (OE). Beberapa peneliti lain
melaporkan telah menemukan 3 6 tipe
hemosit dari darah serangga yang
termasuk kedalam ordo Orthoptera.
Banyak peneliti menyatakan
bahwa oenositoid (OE) tidak pernah
ditemukan dalam darah serangga ordo
Orthoptera (Arnold, 1974 dalam
Rockstein, 1974). Woodring (1985)
dalam Blum (1985), telah menemukan 4
tipe hemosit dalam darah nimfa jengkerik
prohemosit, plasmatosit, granulosit dan
koagulosit.
Uji Toksisitas
Hasil uji toksisitas ekstrak biji
nimba terhadap hewan uji (jengkerik),
setelah dihitung dengan menggunakan
program komputer analisis probit,
didapatkan hasil sebagai berikut :
LD50 24 jam = 34,8 % larutan
ekstrak biji nimba
LD50 48 jam = 22,0 % larutan
ekstrak biji nimba
LD50 73 jam = 20,7 % larutan
ekstrak biji nimba
Dimana banyaknya larutan ekstrak biji
nimba yang disuntikkan pada setiap ekor
hewan uji adalah 10 l per gram berat
badan.
Jumlah Hemosit
Pada serangga tidak semua
hemosit terdapat bebas dalam peredaran,
tetapi banyak sel yang melekat pada
beberapa organ tubuh (Sastrodihardjo,
1984).
 Kasmara et al. : Pengaruh Suhu dan Ekstrak Biji Nimba
Terhadap Jumlah Hemosit Jengkerik
Dari analisis sidik ragam Tabel 1. Jumlah Hemosit Jengkerik pada
menunjukkan bahwa perlakuan Berbagai Perlakuan Suhu dan
pemberian ekstrak biji nimba (ebn) Dosis Ekstrak Biji Nimba, Waktu
memberikan pengaruh nyata terhadap Pendedahan 3 jam.
jumlah hemosit, sedangkan perlakuan Suhu Rata-rata jumlah hemosit (sel/mm3)
suhu tidak memberikan pengaruh yang (oC)
Dosis 25 30 35
nyata pada pendedahan selama 3 jam). (%)
Pada Tabel 1, dapat terlihat K 17.540 1.859 20.900 1.234 19.480 1.715
bahwa pada hewan kontrol dengan (a) (ad) (ac)
perlakuan suhu 25o, 30o dan 35o C, 0 35.300 2.984 30.680 3.365 35.420 1.437
(jln) (hijkn) (jln)
jumlah hemosit tidak menunjukkan 2,5 26.800 1.663 26.020 1.204 26.850 1.514
perbedaan yang nyata, demikian pula (defj) (bcdefh) (defk)
halnya dengan yang diberi perlakuan 5,0 37.580 3.153 34.120 1.033 38.860 1.997
(mn) (jkn) (n)
ekstrak biji nimba 0,0 %, 2,5 %, 5,0 %, 10.0 29.740 3.307 26.180 2.943 25.400 1.207
10,0 % dan 20,0 % pada perlakuan suhu (ghijkl) (bcdefi) (bcdefg)
25o, 30o dan 35o C tidak memberikan 20,0 22.040 1.738 22.480 1.393 19.300 1.476
(ae) (af) (ab)
perbedaan yang nyata. Jumlah hemosit
rata-rata jengkerik yang diberi perlakuan Keterangan : Semua nilai rata-rata + SE.
ekstrak biji nimba 0,0 %, 2,5 %, 5,0 % Nilai rata-rata yang diikuti oleh
dan 10,0 % pada suhu perlakuan 25o, 30o huruf kecil yang sama pada arah
dan 35o C dengan lama pendedahan kolom maupun baris adalah
tidak nyata menurut uji Duncan
selama 3 jam, masing-masing
P 0,05.
menunjukkan peningkatan dibandingkan
dengan kontrol. Secara statistik pelarut
Dengan penambahan waktu
dan ekstrak biji nimba menimbulkan
pendedahan menjadi 24 jam, perlakuan
pengaruh terhadap jumlah hemosit.
suhu dan pemberian ekstrak biji nimba
Sedangkan jengkerik yang diberi
memberikan pengaruh yang nyata
perlakuan ekstrak biji nimba 20,0 % pada
terhadap jumlah hemosit hewan uji. Pada
suhu perlakuan 25o, 30o dan 35o C, tidak
Tabel 2, dapat dilihat bahwa jumlah
menunjukkan perbedaan nyata
hemosit rata-rata jengkerik yang diberi
dibandingkan dengan kontrol. Pada
perlakuan ekstrak biji nimba 0,0 %, 2,5
perlakuan suhu 25o C jumlah hemosit
%, 5,0 %, 10,0 % dan 20,0 % pada suhu
rata-rata pada hewan kontrol adalah
pendedahan 25o, 30o dan 35o C, masing-
17.540 1.859 sel/mm3. Jumlah hemosit masing menunjukkan peningkatan
tertinggi didapatkan pada hewan yang
dibandingkan dengan kontrol , kecuali
diberi perlakuan ekstrak biji nimba 5,0
pada hewan yang diberi perlakuan
%, baik pada hewan yang diberi
ekstrak biji nimba 20,0 %, suhu
perlakuan suhu 25o C maupun perlakuan
perlakuan 35o C nampak turun dan
suhu 30o dan 35o C.
jumlah hemositnya lebih rendah
dibandingkan dengan kontrol.
Secara statistik pelarut dan
pemberian ekstrak biji nimba serta
perlakuan suhu menimbulkan pengaruh
terhadap jumlah hemosit, kecuali pada
hewan yang diberi perlakuan suhu 35o C
dan ekstrak biji nimba 0,0 %, 5,0 % dan

53
 Jurnal Biotika Vol. 1, No. 1, Juni 2002 : 48-56

10,0 % tidak menunjukkan perbedaan mekanisme pertahanan tubuh untuk

nyata dibandingkan dengan jumlah melawan bakteri dan benda asing lainnya
hemosit hewan kontrol yang diberi yang masuk kedalam tubuh.
perlakuan suhu 25o C. Jumlah hemosit Beberapa peneliti menyatakan
terendah didapatkan pada hewan yang bahwa perubahan jumlah sel darah bukan
diberi perlakuan suhu 35o C dan ekstrak disebabkan oleh mikroba saja, tetapi
biji nimba 20,0 %, yaitu sebesar 11.230 dipengaruhi oleh suhu, umur dari hewan,
1.099 sel/mm3. keadaan fisiologi, kualitas dan kuantitas
bahan yang diinjeksikan kedalam tubuh
Tabel 2. Jumlah Hemosit Jengkerik pada hewan (Shapiro, 1979 dalam Gupta,
Berbagai Perlakuan Suhu dan 1979; Woodring, 1985 dalam Blum,
Dosis Ekstrak Biji Nimba, Waktu 1985). Peneliti lain menyatakan bahwa
Pendedahan 24 jam. jumlah hemosit dipengaruhi oleh
Suhu Rata-rata jumlah hemosit (sel/mm3) perubahan suhu, seperti pada Blatta
(oC) orientalis yang didedahkan pada suhu 5o
Dosis 25 30 35 C, menyebabkan indeks mitosisnya
(%)
K 16.520 1.656 22.060 1.486 22.270 999 turun, tetapi apabila dikembalikan pada
(b) (cdefg) (defg) keadaan suhu normal indeks mitosisnya
0 25.420 1.731 23.420 1.117 20.540 1.017 kembali meningkat. Sedangkan pada
(fg) (defg) (be)
2,5 26.830 1.135 23.270 1.438 21.270 1.330 Blaberus yang didedahkan pada suhu 37o
(g) (defg) (cdef) C, indeks mitosisnya sedikit meningkat
5,0 22.120 1.259 34.420 1.582 19.200 1.299 dibanding kontrol (Shapiro, 1979 dalam
(cdefg) (h) (bd)
10,0 25.450 1.192 24.480 1.665 17.560 839
Gupta, 1979).
(fg) (efg) (bc) Jengkerik yang diberi perlakuan
20,0 23.280 1.886 19.570 1.384 11.230 1.099 ekstrak biji nimba 20,0 % yang
(defg) (bd) (a)
didedahkan pada suhu 25o, 30o dan 35o C
Keterangan : Semua nilai rata-rata + SE. selama 3 jam jumlah hemositnya kembali
Nilai rata-rata yang diikuti oleh turun dan secara statistik tidak berbeda
huruf kecil yang sama pada arah nyata dengan kontrol. Sedangkan pada
kolom maupun baris adalah jengkerik yang diberi perlakuan ekstrak
tidak nyata menurut uji Duncan biji nimba 20,0 % yang didedahkan pada
P 0,05. suhu 35o C selama 24 jam, menunjukkan
penurunan jumlah hemosit yang cukup
Pelarut dan ekstrak biji nimba besar dan jumlahnya lebih kecil
yang disuntikan kedalam tubuh jengkerik dibandingkan dengan kontrol. Woodring
adalah merupakan benda asing bagi (1985) dalam Blum (1985), menyatakan
tubuh jengkerik, dengan masuknya benda bahwa racun dan organisme penginfeksi
asing kedalam hemolimf, maka akan dapat mengurangi jumlah hemosit karena
menimbulkan pengaruh terhadap sistem respon seluler menghilangkan senyawa
pertahanan tubuh serangga. Adanya racun dan organisme penginfeksi yang
gangguan ini akan merangsang terjadinya masuk kedalam peredaran darah
respon pertahanan tubuh, respon yang serangga.
terjadi dapat berupa peningkatan jumlah
hemosit yang bersifat fagosit, untuk
menetralisis gangguan tersebut. Yeager,
et al. (1942), menyatakan bahwa sel
darah atau hemosit merupakan bagian

54
 Kasmara et al. : Pengaruh Suhu dan Ekstrak Biji Nimba
Terhadap Jumlah Hemosit Jengkerik
KESIMPULAN DAN SARAN pada hewan yang diberi perlakuan
ekstrak biji nimba 10,0 % dan 20,0 %
Kesimpulan jumlah hemositnya lebih rendah
Hasil pengamatan hemosit dibandingkan dengan jumlah hemosit
jengkerik (Gryllus mitratus Burm.), pada hewan kontrol. Jumlah hemosit
didapatkan 4 tipe hemosit yaitu : terendah didapatkan pada jengkerik yang
prohemosit, plasmatosit, koagulosit dan diberi perlakuan suhu 35o C yang diberi
granulosit. ekstrak biji nimba 20,0 % dengan lama
Nilai LD50 larutan ekstrak biji pendedahan 24 jam.
nimba terhadap jengkerik adalah untuk
LD50 24 jam = 34,8 %, LD50 48 jam = Saran
22,0 % dan LD50 72 jam = 20,7 %, Untuk mengetahui lebih jauh
dengan banyaknya larutan ekstrak biji pengaruh ekstrak biji nimba (Azadirachta
nimba yang disuntikkan pada setiap ekar indica A. Juss) terhadap jumlah hemosit
hewan uji adalah 10 l per gram berat jengkerik (Gryllus mitratus Burm.), perlu
badan. dilakukan penelitian lebih lanjut dengan
Pada perlakuan suhu 25o C melakukan pengamatan mengenai indeks
dengan waktu pendedahan selama 3 jam, mitosis (mitotic index) dan menghitung
pemberian ekstrak biji nimba 0,0 %, 2,5 jumlah dari tiap tipe hemosit (differential
% dan 5,0 % meningkatkan jumlah haemocyte count). Dengan mengukur
hemosit, sedangkan dengan pemberian parameter tersebut di atas diharapkan
ekstrak biji nimba 10,0 % jumlah hemosit dapat memberikan informasi yang lebih
mulai turun dan pada pemberian ekstrak lengkap mengenai pengaruh ekstrak biji
biji nimba 20,0 % jumlah hemosit turun, nimba terhadap hemosit jengkerik.
hingga jumlahnya tidak berbeda dengan
jumlah hemosit pada hewan kontrol.
Pola yang sama didapatkan pada
jengkerik yang diberi perlakuan suhu 30o
dan 35o C.
Penambahan waktu pendedahan
menjadi 24 jam, pada perlakuan suhu 25o
C pemberian ekstrak biji nimba 0,0 %,
2,5 %, 5,0 %, 10,0 % dan 20,0 %
meningkatkan jumlah hemosit
dibandingkan dengan jumlah hemosit
pada hewan kontrol. Pada perlakuan suhu
30o C pemberian ekstrak biji nimba 5,0 %
meningkatkan jumlah hemosit,
sedangkan jumlah hemosit pada hewan
yang diberi perlakuan konsentrasi ekstrak
biji nimba lainnya tidak berbeda dengan
jumlah hemosit pada hewan kontrol.
Pada perlakuan suhu 35o C, jumlah
hemosit hewan yang diberi perlakuan
ekstrak biji nimba 0,0 %, 2,5 % dan
5,0 % adalah sama dengan jumlah
hemosit pada hewan kontrol, sedangkan

55
 Jurnal Biotika Vol. 1, No. 1, Juni 2002 : 48-56

DAFTAR PUSTAKA Yeager, J.F.; E.R. McGovran; S.C. Munson

dan E.L. Mayer. 1942. Effect of
Blocking Hemocytes with Chinese Ink
Adler, V.E. dan E.C. Uebel. 1986. Effects of
and Nephrocytes with Trypan Blue
Margosan-O on Six Species of
upon The Cockroach Periplaneta
Cockroaches (Orthoptera : Blaberidae,
americana to Sodium Arsenite
Blattidae and Blattellidae). Proc. 3 rd.
and Nicotine, Ann. Entomol. Am., 35,
Int. Neem Conf. Nairobi. pp. 387
23 40.
392.
Ahmad, I. 1992. Potensi Nimba Sebagai
Insektisida. PAU- Ilmu Hayati Institut
Teknologi Bandung, Bandung.
Blum, M.S. 1985. Fundamentals of Insect
Physiology. A Wiley Interscience
Publication, New York, pp. 21 25.
Goenarso, D. 1978. Cara Menghitung Jumlah
Sel Darah Menggunakan Kamar
Hitung, Jurusan Biologi ITB,
Bandung.
Gujar, G.T. 1994. Recent Advances in Insect
Physiology and Toxicology, Agricole
Publishing Academy, New Delhi, pp.
106 117.
Gupta, A.P. 1979. Insect Hemocytes,
Development, Forms, Function and
Techniques, Cambridge University
Press, New York, pp. 501 503.
Harvey, G.T. dan A.W.A. Brown. 1950. The
Effect of Insecticides on the Rate of
Oxygen Consumption in Blattella,
Can. J. Zoology, 29, 42 53.
Matsumura, F. 1985. Toxicology of
Insecticides, Plenum Press, New York-
London, pp. 12 17.
Rockstein, M. 1974. The Physiology of
Insecta. Vol. V, 2nd. Ed. Academic
Press, New York London.
Sastrodihardjo, S. 1984. Pengantar
Entomologi Terapan, Penerbit ITB,
Bandung.
Sastrodihardjo, S. 1992. Prospek Produk
Alami (Khususnya Nimba) untuk
Pestisida, PAU-Ilmu Hayati ITB,
Bandung.
Schmutterer, H. 1990. Properties and
Potential of Natural Pesticides from
the Neem Tree Azadirachta indica,
Annu. Rev. Entomol, 35, 271 297.

56
The author has requested enhancement of the downloaded file. All in-text references underlined in blue are linked to publications on