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Facultad de Veterinaria
Departamento de Patologa Animal 1 (Sanidad Animal)
ESTUDIO EPIDEMIOLOGICO DE LA
PROVINCIA DE SEGOVIA
Licenciado en Veterinaria
Septiembre, 1993.
Estudio epidemiolgico de la
Paratuberculosis ovina en la provincia de
Segovia
Directora de la Tesis:
Fa ~
- fl
CERTIFICO:
INDICE
1. INTRODUCCION
1.4.- ETIOLOGA 8
1. 4 . 2 . - MYCOBACTERIUM PARATUBERCULOSIS lo
1.4.2.1. Cultivo 11
1.4.2.2. Identificacin 11
1.4.2.3. Variedades 14
1.4.2.4. Resistencia 15
1.6.- PATOGENIA 19
1.7. - SINTOMATOLOGA. . 22
1.8. LESIONES 24
1.9. - DIAGNOSTICO 29
1.10. TRATAMIENTO. 39
1.11. CONTROL 40
1.12. VACUNACION. 44
.
III
IV. RESULTADOS 81
de las muestras 83
IV. 1. 3.2 Resultados de las pruebas bioqumicas. 85
.
y. DISCUSION 103
1. INTRODUCCION
2
1. INTEODUCCION
TABLA 1V 1
1. - ANDALUCA 11. 13
2.- ARACOIT
5. - CANARIAS O
6.- CANTABRIA O
16.- VALENCIA 0
1.4.- ETIOLOGA
1.4.2.1. CULTIVO
1 4.2.2. - IDENTIFICACION
.
13
.
14
1.4.2.3.- VARIEDADES.
1.4.2.4.- RESISTENCIA.
.
16
1.6.- PATOGENIA
.
22
17 . - SINTOMATOLOGA
.
23
1.8. LESIONES
1.9.- DIAGNOSTICO
1.9.3. ETIOLOGICO
1.9.3.2. Histopatologa.
1.9.3.3. Aislamiento.
.
34
.
36
1.9.5.3. Otras.
1.10.- TRATAMIENTO
1.11.- CONTROL
.
41
1.12.- VACUNACION
47
II JUSTIFICACION Y OBJETIVOS.
111.1.1. REACTIVOS
A DN DIFCO
Acido actico MERCK
Acido brico MERCK
Acido ctrico monohidratado MERCK
Acido clorhdrico MERCK
Acido fluorhdrico MERCK
Acido fosfrico MERCK
Antilg O oveja-peroxidasa NORDIC
Azino di(3ethylbenzthiaz. sulf.) (ABTS) BOEHRINGER
Agar 0)401>3
Agar noble DIFCO
Agarosa DIFCO
Alumbre potsico PANREAC
Asparragina DIFCO
Anfotericina B CI BCO
Azul de metileno PANREAC
Benzoato de metilo MERCK
Broth Nutrient DIFCO
Carbonato sdico MERCK
Citrato sdico tribsico NlERCK
Cloroformo PRO BUS
Cloromicetina BOIMERIEUX
Cloruro de benzalconio MERCK
Cloruro frrico MERCK
Cloruro potsico NlERCK
Cloruro sdico PANREAC
Depex CARLO ERBA
Eosina Y PANREAC
Etanol absoluto MERCK
Etanol 95Q PANREAC
Etanol ~QQ PANREAC
Etanol 70~ PANREAC
51
Etanol ~ PANREAC
Formalina 3540% PROBUS
Fosfato disdico anhidro MERCK
Fosfato monosdico anhidro NlERCK
Fosfato monosdico monohidratado MERCK
Fosfato potsico MERCK
Fuchina bsica PANREAC
Gelatina PANREAC
Glicerina MERCK
Hematoxilina de carrazzi MERCK
Hidrato de cloral OXOID
Hidrxido sdico PANREAC
Lauril sulfato sdico MERCK
L-Cisteina DIFCO
LowensteinJensen, medio base DIFCO
Metanol MERCK
Micobactina J RHNE-M
Middlebrook 7H9, medio base DIFCO
Mycostatin SIGMA
Nutrient broth DIFCO
OADC DIFCO
Parafina plastificada PANREAC
Penicilina FLOW
Peptona OXO ID
Perxido de hidrgeno PANREAC
Piruvato sdico MERCK
PPA-3 (antgeno para AGID y ELISA) ALLIED
Prpura de bromocresol CARLO ERBA
Rojo neutro CARLO ERBA
Suero fetal bovino (SFB) FLOW
Tween 20 MERCK
Tween 80 MERCK
Timol PANREAC
Tolueno PRO BUS
Yodato sdico MERCK
Xilol PRO BUS
52
NaH2PO4H2O 4.00 g
Na2HPO4 6.50 g
Formalina al 10% 100 ml
Agua destilada 900 ml
Hematoxiliria de carrazzi
Hematoxil ma 0.50 g
Yodato potsico 0.10 g
Alumbre potsico 25.0 g
Glicerina 100 ml
Agua destilada 400 ml
Eosina
Eosina Y 1.0 g
Acido actico 12 gotas
Agua destilada 100 ml
53
Fucsina de Zieh
Fucsina de Kinyoun
Alcohol clorhdrico
Azul de metileno
LCistena 0.5 y
Cloruro de Benzalconio 3.0 g
Agua destilada 97 ml
Cloruro de Benzalconio 3g
Agua destilada 997 ml
54
PO4H2K 9.11 g
PO4HNa2 9.51 g
CNa 3.95 g
Agua destilada 1.000 ml
CNa 8.0 g
ClK 0.2 g
P04H2K 0.2 g
PO4HNa2 1.15 y
Agua destilada 1.000 ml
Solucin Neutralizante
Tween80 (10%) 10 ml
Perxido Hidrogeno (30%) 10 ml
55
Tween-8 O 0.5 ml
Rojo Neutro (0,1 %) 2 ml
PBS 0.067 M pH 7 100 ml
NaH2PO4 H20
. 1.8 g
NaH2 PO4 12.36 y
Cl Na 8.5 g
Agua destilada 993 ml
Ajustar a pH 7.6 con NaO?! lN.
Tween-2 O 0.5 ml
Esterilizar en autoclave.
Gelatina g
Solucin A:
Acido ctrico 22.97 g
Agua destilada 1.000 ml
Solucin B:
Citrato sdico tribsico 2H20 29.41 y
Agua destilada 1.000 ml
Tampn citrato 50 ml
ABTS 5.48 ig
Agua oxigenada (1:25) 19 ~.tl
Proteger iluminacin.
Solucin de frenado
Adicionar a 55 9C:
Glicerina 15 ml
Medio base 46.5 y
Micobactina J 4 mg
Agua destilada 750 ml
Adicionar a 55 ~C:
Se esteriliz en autoclave.
.
II:
60
Glicerina 5 ml
Medio Base 7H9 4.7 y
Agua destilada 900 ml
Adems se adicion:
Micobactina 5 2 mg
Asparragina 14 y
61
0 2
Tabla n
Fuentepelayo 1 E 200 21
Euentepeayo TI B 500 20
Chatn A 450 32
Moraleja A 250 10
Olombrada A 200 12
Mozoncillo B 400 0
Vallelado A 150 12
Fuentes A 250 14
Pinarnegrillo 5 350 12
GRAFICO 1
VALLADOLID
<~ S O R 1 A
Moralel. dc C.
Funt.. e. e. Dios brad.
( CUELLAR (Y
VdI.i.d,
CARBONERO EL 4-
GUADALAJARA
-1
SEGOVIA
U-,
AVILA
MADRID
--Nt>
64
* heces
* suero
* heces
:
68
111.5.1.2. Histopatologa.
.
.73
111.9.2.3. Mtodo
.
76
,
.77
ESTADO DE SALUD
POSITIVOS A B A + E
NEGATIVOS C D C + D
* eficiencia = (A+D)/(A+B+C+D)
~78
TECNICA DE REFERENCIA
TECNICA
ESTUDIADA POSITIVOS NEGATIVOS TOTAL
POSITIVOS A B A + B
NEGATIVOS O c + n
IV. RESULTADOS
.
82
.
83
Tabla n9 3
LAURIL SULFATO 1 8 9
Cl BENZALCONIO 3 6 9
.
84
Tabla flQ 4
LAURIL SULFATO 9 36 25
Cl BENZALCONIO 3 36 8,3
Tabla n~ 5
CRISTAL 7 36 19.44
POLICARBONATO 5 36 13.38
.
86
2 6
Tabla fl
Fuentepelayo 1 3 200 8%
Fuentepelayo II 3 500 3%
Chatn A 450 8%
Moraleja A 250 2%
Olombrada A 200 4%
Mozoncillo 3 400 0%
Vallelado A 150 4%
Fuentes A 250 4%
Pinarnegrillo B 350 2%
.
:1
87
Tabla ir 7
A 6 1.650 5.33%
B 4 1.450 2.62%
.
89
Tabla n9 8
3 5 NEGATIVO - NEGATIVO
4 1 NEGATIVO - NEGATIVO
5 7 NEGATIVO - NEGATIVO
8 2 + NEGATIVO NEGATIVO
12 2 NEGATIVO
13 5 NEGATIVO
14 5-6 NEGATIVO
20 4-5 NEGATIVO
90
..
91
Tabla n2 9
FUENTEPELAYO 1 8% 5% 3%
CHATUN 8% 2% 1.5%
Tabla n~ 10
ZN+ 5 7 12
ZN 9 45 54
total 14 52 66
.
93
TABLA n~ 11
ZN+ 8 4 12
ZN 11 43 54
TOTAL 19 47 66
SENSIBILIDAD: 42%
ESPECIFICIDAD: 91.5%
VALOR PREDICTIVO POSITIVO: 67%
VALOR PREDICTIVO NEGATIVO: 80%
EFICIENCIA DE LA PRUEBA: 77%
94
TABLA 112 12
HECES + 3 7 10
HECES 11 39 50
TOTAL 14 46 60
.
95
TABLA 13
14 0 14
4 39 46
TOTAL 21 39 60
ESPECIFICIDAD: 100%
SENSIBILIDAD: 67%
VALOR PREDICTIVO POSITIVO: 100%
VALOR PREDICTIVO NEGATIVO: 85%
TABLA 14
CULTIVO + 10 0 10
CULTIVO - 11 39 50
TOTAL 21 39 60
96
ESPECIFICIDAD: 100%
SENSIBILIDAD: 48%
VALOR PREDICTIVO POSITIVO: 100%
VALOR PREDICTIVO NEGATIVO: 78%
.
97
TABLA n~ 15
CUELLAR 33 6 18.18
CARBONERO 21 4 19.05
FUENTEPELAXO 50 9 18.00
.
)
ji 1 1
99
TABLA n2 16
EDAD TOTAL A E E
SUEROS AGID % ELISA % ELISA
90% 100%
TABLA ir 17
TEST Ng POSITIVOS
CULTIVO 8 29,6
ASID 2 7,4
ELISA 3 11,1
TABLA flg 18
V. DISCUSION
,
109
EFICACIA DE LA VACUNACION.
V. CONCLUSIONES
BIBLIOGRAFA
Pp. 2565.
142
4~ u
4
U, 4
s
4
Fig. t 1. Frotis de mucosa intestinal con elevado
nmero de M. paratuberculosis. Grado de
positividad +++ (Z-N>
.4- e
1
1 3
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44
4
4
~ LA 4
1
Fig. n~6. Infiltrado inflamatorio de la lmina propia
integrado por macrfagos, clulas
epiteliodes, linfocitos y clulas
plasmticas (HE>
Ficg. n2 7.- Infiltrado celular constituido por
macrfagos y clulas epiteliodes
delimitado por linfocitos (H-E).
e.
4
3
1
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A
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