Ciclo del nitrgeno

Universidad Nacional de Rio Negro

Materia: Microbiologa

Integrante: Quini Camila

INTRODUCCION:

El nitrgeno es el macronutriente que en mayor medida condiciona la vida sobre la

tierra. Un 78% de atmsfera est formado por N2.El ciclo del nitrgeno tiene una
trayectoria definida y complicada, dado que tiene que seguir una serie de procesos
fsicos, qumicos y biolgicos. Las plantas no pueden asimilar por si mismas el
nitrgeno atmosfrico, gracias al proceso biolgico de algunas bacterias y
cianobacterias, el nitrgeno que se encuentra en la atmsfera puede ser asimilable, al
romper la unin de sus enlaces por medios enzimticos y as poder producir
compuestos nitrogenados, que pueden ser aprovechados por la mayora de los seres
vivos, en especial las plantas, que forman relaciones simbiticas con este tipo de
bacterias. Ese nitrgeno fijado se transforma en aminocidos y protenas vegetales,
que son aprovechadas a su vez por los herbvoros, quienes los van almacenando para
finalmente pasarlos al ltimo eslabn de la cadena alimenticia, es decir a los
carnvoros. Cabe mencionar, que el nitrgeno regresa de nuevo al ciclo por medio de
los desechos (tanto restos orgnicos, como productos finales del metabolismo), los
cuales por medio de otras bacterias lo liberan a la atmsfera. De esta forma se logra
un equilibrio en el ciclo del nitrgeno.

Fijacin Biolgica del nitrgeno:

Fijacin No simbitica:

Esta pude ser realizada por microorganismos tales como: organismos aerobios (como
Azotobacter),anaerobios del suelo (como Clostridium), bacterias fotosintticas (ciertos
actinomicetes como Frankia) , algas azul verdes y cianobacterias.. No est muy bien
desarrollada esta fijacin y no se conocen datos de importancia en magnitud. Sin
embargo en ciertos suelos tropicales se calcula que esta fijacin aporta alrededor de
50Kg/Ha ao.

Fijacin Simbitica:

Este mecanismo de ingreso de nitrgeno al sistema suelo, es de real importancia en la

produccin agrcola. Se cree que en ciertas condiciones de simbiosis puede llegar a
fijarse hasta 300Kg/Ha ao de nitrgeno. Este mecanismo es realizado por varios
organismos especficos pero uno de los ms importantes es el gnero Rhizobium (que
viven en simbiosis con las leguminosas y tambin con algunos rboles y arbustos).
Este nitrgeno fijado a nivel bacteriano puede volver a utilizarse en cultivos posteriores
y de aqu su importancia.

FISIOLOGA

La fijacin biolgica de nitrgeno es catalizada por una asociacin enzimtica llamada

nitrogenasa. La nitrogenasa est compuesta por dos protenas solubles: la protena del
hierro (dinitrogenasa reductasa) y la protena del MoFe (dinitrogenasa). El MoFe es un
cofactor esencial en la dinitrogenasa. Las dos enzimas del complejo funcionan
conjuntamente: la dinitrogenasa reductasa reduce la dinitrogenasa, mientras que esta
ltima reduce el nitrgeno. Ambas enzimas son necesarias para que se produzca la
fijacin. La ecuacin para la fijacin del nitrgeno puede ser la siguiente; el Mg+2 es el
cofactor necesario:
N2 + 6e- + 6H+ + 12ATP + Mg+2 -- 2NH3 + 12ADP + 12Pi + Mg+2

Cada electrn transferido requiere 2 ATP. La nitrogenasa no es del todo efectiva. De

hecho, tambin reduce otros compuestos como el H+ , el N2O, el N-3 y el CN. La
evolucin del hidrgeno es un subproducto de carcter general de la fijacin del
nitrgeno, particularmente en flujos de electrones poco elevados:

2H+ + 2e- + 4ATP --- H2 + 4ADP + 4Pi

La ecuacin general para la fijacin catalizada por la nitrogenasa es, por tanto:

N2 + 16ATP + 8e- + 8H+ + Mg+2 --- 2NH3 + H2 + 16ADP + 16Pi + Mg+2

Etapas

El termino mineralizacin hace referencia a la transformacin de nitrgeno orgnico

(enzimas, protenas, AA, cidos nucleicos, etc.) a la forma inorgnica, ms
especficamente a amonio (NH+) y Nitrato (NO-). Tambin hace referencia a la
nitrificacin como el otro proceso de importancia donde el NH+ es trasformado en
(NO-), pero no se desarrolla en esta monografa.

Cuando se habla de Amonificacin, est hacindose referencia al pasaje especfico

de nitrgeno orgnico a amonio (NH+). Este proceso es realizado por
microorganismos hetertrofos del suelo, y es amplia la cantidad de organismos que
pueden realizar la Amonificacin (mineralizacin) por ejemplo numerosas bacterias,
hongos, actinomicetos y ciertas algas. Esto sucede porque el sustrato a utilizar no es
especfico y all reside esta variabilidad. Adems es uno de los procesos del ciclo
biogeoqumico que menos se ve afectado por los cambios en el medio ambiente, y
puede darse tanto en Anaerobiosis como en Aerobiosis, en condiciones de
temperaturas medias y en rangos de pH donde la actividad biolgica se desarrolla
normalmente (para la mayora de los microorganismos el rango mnimo es cercano a
5.5). Esta modificacin qumica se da en dos reacciones, en primer lugar el nitrgeno
orgnico se transforma en Aminas (R-NH) y posteriormente en Amonio (NH+).

Asimilacion: los vegetales absorben el nitrato del suelo y lo utilizan para fabricar
protenas, las que pasan a los animales a travs de la cadena alimentaria. El ciclo se
reinicia con los desechos de animales o cuando animales y vegetales mueren.

Desnitrificacion: parte del nitrato presente en el suelo se pierden en el proceso de

desnitrificacin, a travs de la cual algunas bacterias transforman el nitrato el
nitrgeno gaseoso y lo liberan a la atmosfera.

Caractersticas de los rhizobios

Las bacterias Rhizobium son organismos de vida libre que habitan en la rizosfera y se
alimenta de los restos de organismos muertos. Estas contienen un plsmido que
codifica informacin que es vital para la infeccin y la nodulacin de la planta
hospedadora correspondiente. Son bacilos mviles (cuentan con flagelos), Gram-
negativos, con dos capas de pared celular (la primera capa esta hecha por
carbohidratos y protenas, y la segunda capa por lpidos y carbohidratos), procariotas,
aerbicos (necesita oxgeno para crecer), motiles (al hacerse el test de motilidad, el
agar se vuelve amarillo y no de su color original morado-), beta (digiere la
hemoglobina), crece casi en cualquier temperatura, pero su desarrollo es ms ptimo
en una temperatura de 25 C o 77 F, sus dimensiones son de 0.5-0.9 x 1.2-3.0m.

Ejemplos de rhizobios:

* Vida libre ( bacilos): Podemos encontrar bacterias anaerobias estrictas,

como Clostridium, y facultativas, como Klebsiela, pero tambin aerobias
como Azotobacter, Beijerinckia yAzospirilum.

*En simbiosis:( prdida de pared celular)Bacteroides.

Pertenecen al subgrupo de las proteobacterias en el que se incluyen los gneros

Allorhizobium,Azorhizobium,Bradyrhizobium,Mesorhizobium,Rhizobium y Sinorhizobiu
m(recientementeincludoen Ensifer)

*Las Colonias son hmedas, adherentes, mucho contenido extracelular mucilaginoso.

Asociaciones rhizobio-leguminosa

El nitrgeno es muy abundante en la atmsfera, sin embargo, las plantas no pueden

utlizarlo en su forma elemental y tienen que obtenerlo del suelo principalmente en
forma de nitratos o amonio. La fijacin biolgica de nitrgeno es un proceso clave en la
biosfera, por el cual microorganismos portadores de la enzima nitrogenasa convierten
el nitrgeno gaseoso en nitrgeno combinado. El grupo de bacterias al que se conoce
colectivamente como rizobios, inducen en las races (o en el tallo) de las leguminosas
la formacin de estructuras especializadas, los ndulos, dentro de los cuales el
nitrgeno gaseoso es reducido a amonio. Se estima que este proceso contribuye entre
el 60-80 % de la fijacin biolgica de nitrgeno. La simbiosis es inhibida si existe un
exceso de nitrato o amonio en el suelo. En esta simbiosis en los ndulos, la planta
husped obtiene nutrientes nitrogenados de la bacteria (rizobios) y ofrece a sta una
fuente de carbono y un ambiente favorable para fijar nitrgeno. Esta simbiosis
contribuye con una parte considerable del nitrgeno combinado en la tierra y permite a
las plantas leguminosas crecer sin fertilizantes nitrogenados y sin empobrecer los
suelos.

Bacterias hetertrofas conocidas como rhizobios se asocian en estructuras nodulares

fijadoras de N2 atmosfrico en leguminosas, contribuyendo de manera fundamental a
la fertilidad del suelo, a la produccin de alimentos para el hombre y animales y a la
economa de fertilizantes nitrogenados, ya que muchas leguminosas son
autosuficientes en sus requerimientos de nitrgeno.

Asociaciones con Frankia spp.

Despus de las leguminosas, las plantas actinorrcicas constituyen el segundo grupo

importante de plantas fijadoras de N2. Pertenecen algunas 10 familias de
Espermatfitas, con unos 24 gneros que contribuyen a la economa de este elemento
en zonas erosionables, en suelos pobres, en donde se desarrollan como vegetacin
pionera. Todos los gneros de una misma familia no son necesariamente nodulados y
se encuentran igualmente especies no noduladas en el interior de un mismo gnero.

Quiz la primera descripcin de ndulos radicales en estas plantas se remonta a 1895

en Alnus glutinosa, cuyo desarrollo y N en el follaje se correlacionaron con el nmero
de ndulos.
Estas asociaciones recibieron diferentes nombres: simbiosis tipo Alnus, simbiosis con
actinomicetes y ms recientemente actinorrizas, por analoga con micorrizas
(simbiosis con hongos).

En el siguiente cuadro se presenta las principales especies descriptas. Son

frecuentemente especies leosas presentes al estado espontneo en todos los
continentes y climas, desde al rtico al Subtropical. Son, sin embargo, ms frecuentes
como rboles o arbustos que juegan importante rol en la economa del N en bosques
de zonas templadas fras. Su distribucin es menor en la regin tropical. Estas plantas
son escasamente mencionadas en los textos bsicos de biologa y ecologa, a pesar
de que son importantes componentes de ecosistemas de vastas regiones y muchas de
ellas muy empleadas en forestacin. Esta vegetacin es tolerante a suelos de baja
fertilidad, como dunas arenosas, zonas quemadas, suelos erosionados y muchas
resisten la salinidad.

Familia Gnero
Betulacea Alnus (aliso)
Casuarinacea Casuarina, Allocasuarina
Coricea Coriaria
Dasticacea Dastica
Eleagnacea Eleagnus
Myricacea Coptonia
Rhamnacea Discaria, Trevoa
Roscea Cercocarpus

Proceso de infeccin

Nos centramos en el primer contacto que se establece entre la planta y la bacteria,

todava se desconoce cmo llega la bacteria a la zona de la influencia de la planta, es
decir si es atrada por quimiotactismo o es un encuentro azaroso, y una vez en ella
cmo se produce la comunicacin entre el microorganismo y el hospedador, es decir si
existe y la naturaleza de las molculas qumicas implicadas.
Las plantas es la que empieza el juego de la asociacion, ya que la esta teniendo los
nutrientes suficientes( ATP disponible para usar)deja entrar al rhizobio, de forma
contraria, si la planta tiene algn tipo de estrs( hdrico, trmico, enfermedad, etc) no
permite la entrada del rhizobio.
Una vez que la bacteria entra en contacto con la planta, existen dos maneras de
producirse la infeccin: de forma intracelular (Figura 2) o de forma intercelular .En la
primera, la infeccin se efecta mediante la entrada a travs de pelos radiculares, los
cuales en presencia de la bacteria se deforman y ramifican originando una regin
plegada a travs de la que se produce la penetracin del filamento, que va a progresar
por el pelo hacia la clula epidrmica y de all se dirigir a las clulas corticales,
mientras que las clulas infectadas de la planta van encapsulando los filamentos,
depositando sobre los mismos material similar al de la pared celular. De forma
simultnea a la progresin del canal infeccin hacia el crtex interior, las clulas van
dirigiendo el camino de la infeccin mediante la alteracin de su citoesqueleto
induciendo una invaginacin en la vacuola generando los llamados puentes
citoplasmticos cuya orientacin comunica unas clulas con otras y por los cuales ir
creciendo la bacteria. Paralelamente, las clulas del cortex exterior salen de su estado
de quiescencia reactivndose su ciclo celular, dando as lugar al prendulo, cuyas
clulas son invadidas por el microsimbionte. En algunas actinorrizas en dichas clulas,
los filamentos se diferencian en vesculas e inducen la sntesis de la enzima
nitrogenasa. Posteriormente, se inducen divisiones celulares en el periciclo del cual
surgir el primordio de ndulo que en su crecimiento hacia la superficie de la raz
englobar y se fundir con el tejido prenodular.

La ruta de infeccin intercelular se inicia tras la entrada en la raz de los filamentos

del rhizobio a travs de espacios intercelulares. Los filamentos cruzan la epidermis
progresando por el apoplasto e invaden las paredes de las primeras capas de clulas
en el parnquima. Para ello se produce una degradacin de la lmina media mediante
enzimas hidrolasas secretadas por la propia bacteria. En respuesta a la invasin, la
planta deposita material extracelular en la zona de infeccin y en zonas adyacentes. El
proceso no necesita de la deformacin de los pelos radiculares aunque la presencia de
la bacteria puede originarla. Tampoco se induce la creacin de un prendulo sino que
directamente se activa la divisin celular en el periciclo, originndose el primordio que
crecer hacia el exterior encontrndose con los filamentos en su progresin.

.
La nitrogenasa es una enzima que funciona en condiciones de anaerobiosis .

La planta y los rhizobios son aerobios Leghemoglobina, (responsable del color rojo
de los ndulos) se acumula entre bacteroides y membrana periobacteroide
Por su afinidad por el O2, la leghemoglobina fija al O2 en el microambiente donde se
encuentra el complejo nitrogenasa, disminuyendo la capacidad ozidativa de ese
microambiente lo suficiente como para permitir la accin de la nitrogenasa.

Factores limitantes de la FBN en la simbiosis rhizobio-leguminosa

Por ser un proceso resultante de complejas reacciones fisiolgicas y bioqumicas, que

involucra especies distintas, la FBN depende de la expresin del potencial gentico del
microorganismo diazotrofo, del hospedante, o de ambos (en cao de las simbiosis) y del
ambiente.

Factores fsico-qumicos:

pH: la bacteria es muy sensible a la acidez, aunque diferentes cepas de una misma
especie difieren en su sensibilidad al pH. El encalado permite incremento en la
nodulacin.

Las leguminosas se afectan directamente por accin de altas concentraciones de H+, o

bien indirectamente por deficiencias (Ca, Mg) o toxicidad (Al, Mn).

Temperatura y humedad: los rhizobios son organismos mesofilos aunque se

encuentran distribuidos en casi todas las regiones del mundo. Difieren marcadamente
en su tolerancia a elevadas temperaturas. La seleccin de cepas tolerantes a altas
temperaturas y a la desecacin es muy importante en la introduccin de leguminosas
forrajeras en regiones ridas y semiridas.

La simbiosis es ms sensible a extremos de temperatura, bajas temperaturas retardan

la infeccin y formacin de ndulos, en tanto que las altas temperaturas provocan
ndulos pocos eficientes.

El nivel de agua debe ser tal que no se origine problemas de presin osmtica en la
clula. La disminucin del potencial hdrico del suelo limita tambin el transporte de los
productos de fijacin a la planta y el flujo de los fotosintetizados. Altas humedades
limitan la aireacin y lo FBN. Los ndulos soportan poco tiempo el anegamiento.

Salinidad: la tolerancia de los rhizobios a las sales vara mucho y de hecho las
leguminosas y las plantas actinorrcicas son ms sensibles a la salinidad que las
mayoras de las bacterias..
Fuentes de carbono y energa: los rhizobios introducidos en el suelo deben competir
por los nutrientes del suelo. La competencia saprofitica es una de las cualidades que
se les exige a las cepas para ser seleccionadas en la produccin de inoculantes. Las
leguminosas ejercen efectos estimulantes sobre la poblacin de rhizobios, a travs de
sus exudados y descamaciones de tejidos. El agregado al suelo de sustratos
orgnicos, como abono de granja estimulan a los rhizobios debido, tal vez, al efecto
combinado de los nutrientes orgnicos e inorgnicos, modificaciones del pH, o
aumentos en el nivel de CO2 del suelo.

Fertilidad del suelo: las leguminosas noduladas presentan requerimientos mayores

de nutrientes en relacin a la fertilizada con nitrgeno combinado. Esto ocurre con los
elementos que se encuentran en la nitrogenasa y otros sistemas enzimticos, como el
Mo, Fe, S, Cu, Mg, Co. La fertilizacin con fosforo, potasio, azufre, microelementos,
afectan la sobrevivencia del rhizobio y la nodulacion y FBN. Interesa en muchos casos
complementar el aporte de nitrgeno por FBN con una fertilizacin con nitrgeno
combinado.

Polucin: el uso indiscriminado de herbicidas, fungicidas, la acumulacin de sales de

metales pesados en suelos y aguas resulta perjudicial para el rhizobio. Se han descrito
diversas tcnicas de incorporacin de biocidas a las semillas evitando su ntimo
contacto con la bacteria. A pesar de la multiplicidad de resultados obtenidos, se piensa
que los pesticidas aplicados en dosis aconsejadas no perjudican al rhizobio.

Productos de la fotosntesis: las leguminosas noduladas requieren iluminacin

adecuada para mantener una activa fijacin. Si se incrementa el nivel de CO 2 en la
parte area de la planta la fijacin de N2 se estimula 4 veces ms en un corto lapso de
tiempo.

Factores biolgicos:

Se han aislado de la rizosfera o del rizoplano cierto nmero de bacterias, hongos y

sobre todo, actinomicetes, que se muestran antagnicos frente al rhizobio in vitro. Este
antagonismo puede deberse a competencia por los nutrientes, acidificacin,
produccin de antibiticos u otras sustancias, y an a la predacin de protozoos o a la
infeccin por fagos lticos.

Los fagos lticos fueron motivo de numerosos estudios, sobretodo en suelos donde
las pasturas fracasaban en la nodulacin luego del segundo ao de instaladas. El
problema de la decadencia de los alfalfares fue atribudo, en parte a la accin de estos
parsitos intracelulares.

Las bacteriocinas constituyen un grupo de sustancias, sobre todo protenas, pptidos,

producidas por muchas bacterias que afectan a organismos muy relacionados, incluso
a la misma especie, a diferencia de los antibiticos, que poseen un espectro de accin
ms amplio.

Las rhizobiocinas han sido descritas como elemento de lucha biolgica que permite
la supremaca de la clula productora frente a la poblacin de rhizobios nativos del
suelo.
Distintos patgenos pueden afectar directamente a la FBN atacando ndulos
(insectos) o indirectamente afectando el crecimiento de las plantas como nematodos.

CONCLUSIN

Los ciclos nutricionales del suelo constituyen el corazn de la microbiologa del suelo.
De hecho, sin los microorganismos del suelo, no habra prcticamente ningn ciclo de
nutrientes y la vida, tal como la conocemos no podra existir. El nitrgeno es un
nutriente vegetal determinante y experimenta diversas transformaciones. Existen dos
formas de fijacin: la industrial y la biolgica. Pero sin dudas la ms econmica y la
que produce los mejores beneficios en cuanto a rendimiento es la biolgica, la cul
est a cargo de los microorganismos del suelo.

Es evidente la extrema necesidad de comprender la importancia de este elemento,

todas sus formas qumicas posibles en el planeta, sus fuentes ms comunes y la
capacidad de suministrarlo cuando es escaso. Mientras seamos capaces de
comprender su naturaleza y su balance en la biosfera, seremos ms capaces de
obtener resultados productivos positivos.

BIBLIOGRAFA

Coyne M.; 2000. Microbiologa del Suelo: un enfoque exploratorio. Ed. Paraninfo.
Capitulo 22.

Frioni, Lillian. Microbiologa: bsica, ambiental y agrcola- 1 ed. Buenos Aires:

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