TECNICAS

INMUNODIAGNOSTICAS

se basan en Interaccin Ag-Ac.

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 PRUEBAS INMUNIDAGNOSTICAS
AGLUTINACIN: Ag.particulado-Ac.
1) Rosa bengala-brucella (Ag.particulado)
2) LATEX (Lo hacemos particulado)QH
3) Hemaglutinacin/Inhibicin hemaglutinacin (eritrocito(=1)/unido a
eritrocito(=2)
PRECIPITACION(Ag.soluble)
1) AGID 2) Inmunodifusin Radial 3) Inmunoelectroforesis
INMUNOMARCADOS
1) Fluoresceina (IFD/IFI)
2) Enzimas (ELISA/DOT/WESTERN)/INMUNHISTOQUIMICA
3) Radio actividad (RIA)
SERONEUTRALIZACION
In vitro(cc)/In vivo(SN)

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 PRUEBAS INMUNO-DIAGNSTICAS

UNIN PRIMARIA ACs-MARCADOS

FLUORESCENCIA ENZIMATICAS
FERRITINA, ORO COLOIDAL

UNIN SECUNDARIA (luego de unin Ag-Ac hay):

PRECIPITACIN AGLUTINACIN NEUTRALIZACIN

FIJACIN de COMPLEMENTO
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 PRUEBAS INMUNIDAGNOSTICAS
PRECIPITACION (Ag.soluble)

1. AGID (IDGA)

2. Inmunodifusin Radial (Ac o Ag disuelto en Agar)

3. Inmunoelectroforesis

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 Tanto para las tcnicas de
PRECIPITACION como de AGLUTINACION
Ags y Acs deben estar en cantidades equilibradas

Prozona
Exceso Acs Exceso Ags

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 Precipitacin (principio)

Los anticuerpos son bivalentes (unen dos

epitopos a la vez), los antgenos complejos son
multivalentes (poseen muchos epitopos).
Cuando se forman grandes complejos estos se
hacen insolubles y precipitan.

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 IDGA (AGID)

Los Ag y Ac colocados en una placa de gel de agar

difunden radialmente

en la zona de equilibrio se produce una banda de

precipitacin.

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 PRECIPITACION(Ag.soluble)

Inmuno Difusin en Gel Agar (AGID)

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 IDGA

Ag Ac

Zona de
equilibrio
(banda de
precipitacin)

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 IDGA

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 Inmunodifusin radial
1. Se incorpora al agar Ac 2. Una vez solidificado se perforan hoyos
3. se coloca Ag 4. Se colocan estandares de conc. Ag conocida

2 mg.
5 mg.

muestra
1 mg.

10 mg.

50 mg.

El rea de este anillo tendr relacin directa con la [Ag] o [Ac].

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 PRECIPITACION(Ag.soluble)

INMONOELECTROFORESIS

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 AGLUTINACIN
Reaccin producida por la unin de los Ac
con un Ag particulado o insoluble

Aglutinacin (Ag.particulado) Rosa bengala-brucella

Hemaglutinacin
Ag parte del eritrocito (grupos sanguineos)
algunos virus tiene epitopes hemoaglutinantes

Inhibicin hemaglutinacin =
Acs. inhiben los epitopes hemoaglutinantes o del eritrocito
y hematies no aglutinan

LATEX (Lo hacemos particulado) QH
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 Tanto para las tcnicas de
PRECIPITACION como de AGLUTINACION
Ags y Acs deben estar en cantidades equilibradas

Prozona
Exceso Acs Exceso Ags

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 Aglutinacin pasiva (Brucella)

Suero
problema Aglutinacin
Brucella
+
colorante
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 Aglutinacin pasiva
Rosa bengala-brucella (Ag.particulado)
Brucella + colorante rosado
Ag Mezclar
Suero

Control Neg
Ag

Muestra con
Ac anti-brucella Muestra SIN
Ac anti-brucella

Control Pos
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 HEMO-AGLUTINACIN
Eritrocito es el Ag.particulado

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 Hemoaglutinacin
El Ag soluble se puede unir qumicamente a eritrocitos y
(haciendo un Ag. Soluble particulado)

Eritrocitos con Suero

Ag pegado problema Hemoaglutinacin

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 Hemoaglutinacin viral
Algunos virus son capaces de aglutinar eritrocitos
de mamferos o aves, y esto puede utilizarse para
caracterizar un virus desconocido, o medir [Ac]
en suero.
Ejemplos : Orthomyxovirus
Paramyxovirus
Parvovirus
Coronavirus

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 Hemoaglutinacin y su Inhibicin

Virus Hemoaglutinacin (HA)

Hemoaglutinante

Eritrocitos

Inhibicin de
Suero problema
J.Maisonnave Area de Inmunologa - F.Veterinaria Hemoaglutinacin20(IHA)
 Hemoaglutinacin

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 LATEX = Esferas de poliestireno
el Ag de QH (que es soluble) lo hacemos particulado,
Uniendo el Ag a las esferas de Latex

Suero
Mezclar

Control Neg

Ag

Control Pos
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 PRUEBAS INMUNO-MARCADAS
(Acs marcados)

FLUORESCEINA
InmunoFluorescencia

Enzimas ELISA
(Inmunoenzimaticas)
DOT
WESTERN-BLOT
IHQ = InmunoHistoQuimica

Isotopos radioactivos RIA

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 PRUEBAS INMUNO-MARCADAS

Fluoresceina

InmunoFluorescencia Directa (IFD)

Ag + Acs (especfico)-FICT

Conjugado fluorescente

IFI = Ag + Acs (especfico) + anti-Ig-FICT

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 INMUNOENZIMATICA
InmunoFluorescencia Directa (IFD)

Fluoresceina

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 Inmunofluorescencia

Negativo Positivo
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 Inmunofluorescencia

Ventajas Desventajas

Se debe utilizar

Permite identificar Ag microscopio UV.
especficos de patgenos
en tejidos, cultivos de
Personal capacitado.
clulas y secreciones
(IFD o IFI).
Infraestructura

Permite identificar Ac necesaria.
especficos en suero

Fundamentalmente
(IFI).
cualitativa

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