PRACTICA 1: DIFUCIN DEL AGUA OSMOSIS

I. FUNDAMENTO
El agua es uno de los compuestos esenciales en todos los organismos vivos, su contenido
dentro de las clulas eucariotas vara segn la especie, tipo celular y edad; donde se
encuentra en porcentajes mayores al 70%. Las caractersticas del agua permiten que sea
un buen solvente para muchas molculas. El transporte de las molculas o solutos de un
rea de alta concentracin hacia un rea de baja concentracin a travs de una membrana.
La difusin del agua es bien conocida como osmosis. Es un fenmeno fsico relacionado
con el transporte pasivo del agua a travs de la membrana. La smosis del agua es un
fenmeno biolgico importante para la fisiologa celular de los seres vivos.
II. OBJETIVO:
Observar y describir los fenmenos de difusin y smosis y su importancia en el intercambio
de sustancias en la clula.
III. MATERIALES
- Microscopio ptico - Agua destilada
- Tportaobjetos y cubreobjetos - Algodn
- Marcador de vidrio - Alcohol corriente
- Solucin hipotnica agua destilada - Agua corriente
- Solucin hipertnica NaCl mayor al 0.9%
- Solucin isotnica de NaCl al 0.9% (suero fisiolgico)

IV. PROCEDIMIENTO
Parte A. clula animal

1 En tres lminas portaobjetos tubos de ensayo numerados coloque:

1. Una gota de solucin hipotnica
2. Una gota de solucin isotnica de NaCl al 0.9% (suero fisiolgico)
3. Una gota de solucin de hipertnica NaCl al 2%.
2 Obtener gotas de sangre con la lanceta hematolgica y colocar una gota en cada
lmina portaobjetos
3 Con un gotero coloque en una lmina portaobjeto una gota de cada uno de los tres
tubos.
Luego examine en el microscopio su aspecto. Observar qu efecto ha tenido las distintas
soluciones sobre la morfologa del eritrocito y explicar por qu.
Parte B. clula vegetal

1 En tres lminas portaobjetos tubos de ensayo numerados coloque:

1. Una gota de solucin hipotnica
2. Una gota de solucin isotnica de agua de cao
3. Una gota de solucin de hipertnica NaCl al 2%.
2 Obtener hojas de Elodea sp. y colocarlos en una lmina portaobjetos
3 Con un gotero coloque en una lmina portaobjeto una gota de cada uno de los tres
tubos.
Luego examine en el microscopio su aspecto. Observar qu efecto ha tenido las distintas
soluciones sobre la morfologa de la clula vegetal y explicar por qu.
 PRCTICA 2: ACTIVIDAD ENZIMTICA
PRIMERA PARTE: CATALASA

I. FUNDAMENTO

Las enzimas son molculas proteicas cuya funcin es acelerar (catalizar) reacciones
qumicas que ocurren dentro de la clula y que en ausencia de ellas no se llevaran a cabo
o de lo contrario tomaran muchsimo tiempo. Las enzimas son especficas para sus
sustratos, los cuales quedan unidos complementariamente al sitio de unin de la enzima
donde son modificados enzimticamente, liberndose al final de la reaccin los productos
respectivos.

Existen diversos factores que influyen en la actividad enzimtica: Temperatura, pH,

Concentracin de la enzima, Concentracin del sustrato, Inhibidores.

Las enzimas son clasificadas segn sus funciones o tipo de reacciones

1) Oxidoreductasas Transfieren electrones (iones hidronios o tomos de H)

2) Transferasas Transfieren Grupos
3) Hidrolasas Reaccin de hidrlisis (transfiere una molcula de agua)
4) Liasa Adiciona grupos a dobles enlaces o forma doble enlaces por remocin
de grupos
5) Isomerasas Transfiere grupos dentro de molculas para obtener formas
isomericas
6) Ligasas Forma enlaces C-C, C-S, C-O y C-N por reaccin de condensacin
acoplada a ruptura de ATP.

La mayora de las enzimas cataliza la transferencia de electrones, tomos o grupos

funcionales. Las enzimas se clasifican en base a cdigos y su nombre es asignado de
acuerdo tipo de reaccin

La catalasa es una enzima que se encuentra en las clulas de los tejidos animales y
vegetales. La funcin de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el
metabolismo celular, se forma una molcula txica que es el perxido de hidrgeno, H2O2
(agua oxigenada). Esta enzima, la catalasa, lo descompone en agua y oxgeno, por lo que
se soluciona el problema. La reaccin de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:
II. OBJETIVO.
2.1 Detectar la presencia de la enzima catalasa en un tejido animal y vegetal.
III. MATERIALES
-Gradillas
- Pipetas-tubos de ensayo
- Hgado de pollo, cualquier rgano vegetal
- Agua oxigenada

IV. MTODOS

1 Colocar en dos tubos de ensayo unos trocitos de hgado en diferentes cantidades.

2 Aadir 3 mililitros de agua oxigenada.
3 Se observar un intenso burbujeo debido al desprendimiento de oxgeno.
4 Discutir la formacin de burbujas, relacionndolo con la concentracin de catalasa.

SEGUNDA PARTE: HIDROLISIS DE LA AMILASA

I. FUNDAMENTO
La amilasa o ptialina, es una enzima presente en la saliva. Esta enzima acta sobre el
polisacrido almidn, hidrolizando el enlace O-glicosdico, por lo que el almidn se
terminar por transformar en unidades de glucosa. Es importante que recuerdes las
reacciones caractersticas de glcidos para comprender esta experiencia.
II. OBJETIVOS.
Comprobar que slo bajo ciertas condiciones las enzimas funcionan ptimamente
catalizando una reaccin enzimtica con su sustrato.

III. MATERIALES
-Tubos de ensayo - Bao mara
-Gradillas - Vaso de precipitados
-Solucin diluida de almidn y sacarosa - Lugol

IV. MTODOS
1. Poner en una gradilla cuatro tubos de ensayo, numerados del 1 al 4.
2. Proceder a llenar los tubos como lo indica la figura.
3. Agregar 3 gotas de lugol a cada tubo
4. Aparecern diferencias entre los 4 tubos dependiendo de si hay o no almidn en el
medio. Recuerda: reaccin positiva, color violeta, hay almidn. Reaccin negativa, no
cambia color, no hay almidn.

Nota: Para ayudarte y formar ms saliva, piensa en un limn o en algo que te apetezca
mucho comer... As favoreces que se forme ms saliva.
V. QUESTIONARIO de ambas partes

1. Qu tipo de enzimas corresponden las enzimas estudiadas, porqu?

2. En qu parte de las clulas encontramos la enzima catalasa y cul es la funcin de
dicha enzima?
3. Qu factores, adems de la temperatura, podran afectar la actividad de una enzima?
4. Dibuje las reacciones observadas en la prctica, explique.
5. Anote sus observaciones y Relacione la actividad con la concentracin de la enzima,
temperatura ptima

PRACTICA 3 - METABOLISMO ANAEROBIO:

FERMENTACIN ALCOHLICA

I. FUNDAMENTO

La respiracin celular es el proceso mediante el cual se oxidan molculas energticas

(glucosa, principalmente), empleando al oxgeno como aceptor final de electrones, y
obteniendo gran cantidad de energa para la realizacin de las funciones celulares bsicas.

La fermentacin, por el contrario, es un proceso anaerbio que implica la ruptura de

alimentos por un proceso de degradacin qumica que no requiere oxgeno. Los alimentos
no son degradados completamente hasta CO2 y H2O (como ocurre en la respiracin), sino
hasta compuestos intermedios tales como cido lctico (fermentacin lctica) o alcohol
(fermentacin alcohlica). Esta ruptura incompleta de los alimentos significa que menos
energa es disponible durante la fermentacin que el liberado durante la respiracin.

Ambos procesos pueden tomar lugar en las clulas a la vez. Adems, los primeros
pasos en la ruptura de la glucosa en la respiracin, son anaerbicos.

Anaerbica
Glucosa cido lctico
Aerbica
Glucosa CO2 + H2O

Ciertas bacterias y hongos derivan todo sino parte de su energa de la fermentacin

y los productos finales son frecuentemente el alcohol y CO2, el proceso en este caso es
denominado fermentacin alcohlica. Las levaduras y bacterias, las cuales conducen a la
fermentacin son capaces de emplear sus sistemas enzimticos para liberar energa
anaerbicamente a partir de carbohidratos, particularmente almidn y azcar.
 DESTINO DE LA GLUCOSA EN CONDICIONES AEROBIAS (RESPIRACIN) O
ANAERBIAS (FERMENTACIN)

III. MATERIALES

Encontrars en el laboratorio
- Tubos de ensayos - Reactivo de Fehling A y B
- Gradillas - Bao Mara
- Probetas -Algodn - Tiras de medidas de pH
-Dicromato de potasio - 5 globos de colores.
- Soluciones al 2% de fructosa, glucosa, almidn y sacarosa
- cido sulfrico diluido

IV. MTODOS

Fermentacin alcohlica
1. Preparar los tubos como lo indica la tabla:

REACTIVO 1 2 3 4 5 6

Agua Destilada .... .... .... ..... .... ....

Sol. de levadura 5mL 5mL 5mL 5mL 5mL
Solucin de Glucosa 5mL
Sol. Sacarosa 5mL
Sol. Almidn 5mL
Sol. Fructosa 5mL
Sol. Glucosa 5mL
 2. La muestra con glucosa sola nos servir para realizar la reaccin de Fehling y
comprobar que es glucosa por su poder reductor.
3. Para colocar la levadura en el tubo, previamente se tiene que disolver una punta de
esptula de la cepa de panificacin de Sacharomyces cerevisae en un poco de
agua.
4. Llenar los tubos cuidando que no queden burbujas de aire, para conseguir un
ambiente de anaerobiosis. Colocar un globo en la boca de los tubos para que el
sistema quede cerrado hermticamente.
5. Llevar todos los tubos a 37C por 30 min.
6. Anotar la formacin de CO2 para cada tubo (La fermentacin se evidenciar por la
presencia de burbujas en el tubo y el globo hinchando, debido a la produccin de
CO2.
7. Detectar la presencia de glucosa aplicando reactivo de Fehling A y B, llevando a
Bao Mara por 8 minutos
8. Medir el pH del medio.
9. Opcionalmente, el profesor del grupo detectar cuidadosamente la presencia de
etanol en las muestras. Hay que tener mucho cuidado porque hay que manipular
cido sulfrico y puede ser peligroso el manejarlo. Se tomarn 2 ml. de la solucin
del tubo hermticamente cerrado y la ponemos en otro tubo de ensayo. Aadimos
unos cristalitos de dicromato potsico y a continuacin 2 ml. de cido sulfrico
diluido. Al calentar al bao Mara debe formarse un compuesto aromtico
caracterstico, y se pone de manifiesto porque cambia de color de amarillento a
verdoso. Es una reaccin que nos indica que existe etanol.
10. Observar, comparar y discutir los resultados de los experimentos planteados.

DESARROLLO

1. Esquematice sus observaciones, complete la tabla segn sus observaciones.

2. Describa sus observaciones y explique los resultados.

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6

CO2

glucosa

pH

etanol

Referencia bibliogrfica.
USMP 2013. Gua de prcticas de Biologa Celular y Molecular. Departamento acadmico
de ciencias bsicas. Fac. Medicina humana