You are on page 1of 46

1

UNIVERSIDAD NACIONAL MICAELA BASTIDAS DE APURMAC


FACULTAD DE INGENIERA AGROINDUSTRIAL
ESCUELA ACADMICA PROFESIONAL DE INGENIERA
AGROINDUSTRIAL

Determinacin de parmetros ptimos para el


diseo, y construccin de un secador para
hierbas aromticas nativas de la regin
Apurmac
Anteproyecto de tesis para optar el ttulo de
ingeniero agroindustrial

Autor: Bach.Ing. Sonia Garfias Contreras


Asesor: Ing. Alfredo Fernndez Ayma

APURMAC-PER
2012
2

Determinacin de parmetros ptimos para el


diseo, y construccin de un secador para
hierbas aromticas nativas de la regin
Apurmac

Jurados:

Ing.Mgt. Fulgencio Vilcanqui Perez Ing.Mgt. Silver Barreto Carbajal


Presidente de jurado Jurado

Dra. Liz Dagnit Bejarano Lujn


Jurado

Asesor:

Ing. Mgt. Guadalupe Chaquilla Quilca


3

NDICE

1. CAPITULO I: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ................................................ 5


1.1. DEFINICIN Y FORMULACIN DEL PROBLEMA ......................................... 5
1.2. JUSTIFICACIN E IMPORTANCIA DE LA INVESTIGACIN ...................... 5
2. CAPITULO II: OBJETIVOS ............................................................................................ 7
2.1. OBJETIVO GENERAL ............................................................................................. 7
2.2. OBJETIVOS ESPECFICOS .................................................................................... 7
3. CAPITULO III: MARCO REFERENCIAL .................................................................... 8
3.1. MARCO TERICO ................................................................................................... 8
3.1.1. GENERALIDADES DEL BIOCOMBUSTIBLE. ............................................ 8
3.1.2. BIOETANOL Y SU PROCESO DE OBTENCIN......................................... 8
3.1.3. FUENTES DE MATERIA PRIMA PARA LA PRODUCCIN DE
BIOETANOL....................................................................................................................... 9
3.1.4. LA CHILLCA. ................................................................................................... 10
3.1.5. COMPOSICIN DE LA LIGNOCELULOSA. ............................................. 12
3.1.6. HIDRLISIS DE LA LIGNOCELULOSA ................................................... 14
3.1.7. PROCESO DE FERMENTACIN ................................................................. 16
3.2. MARCO CONCEPTUAL ........................................................................................ 20
4. CAPITULO IV: HIPOTESIS Y VARIABLES .............................................................. 22
4.1. FORMULACIN DE HIPOTEISIS ....................................................................... 22
4.1.1. HIPTESIS GENERAL................................................................................... 22
4.1.2. HIPTESIS ESPECFICA .............................................................................. 22
4.2. VARIABLES Y DEFINICIN OPERACIONAL DE VARIABLES: variable
independiente, dependiente, interviniente y/o extraa. ..................................................... 22
5. CAPITULO V: METODOLOGIA DE LA INVESTIGACIN ................................... 23
5.1. TIPO Y NIVEL DE INVESTIGACIN ................................................................. 23
5.1.1. TIPO ................................................................................................................... 23
5.1.2. NIVEL ................................................................................................................ 23
5.2. MTODO Y DISEO DE LA INVESTIGACIN................................................ 23
5.2.1. MTODO........................................................................................................... 23
4

5.2.2. DISEO DE INVESTIGACIN ..................................................................... 25


5.3. POBLACIN............................................................................................................. 25
5.4. MUESTRA ................................................................................................................. 25
5.4.1. TCNICAS DE MUESTREO .......................................................................... 25
5.4.2. TAMAO Y CLCULO DE MUESTRA ...................................................... 25
5.5. DESCRIPCIN DE LA EXPERIMENTACIN .................................................. 26
5.6. TCNICA E INSTRUMENTOS DE RECOLECCON DE DATOS .................. 29
5.6.1. ETAPA I: DETERMINACIN DE LA COMPOSICIN DE
POLISACRIDOS DE CHILLCA. ................................................................................ 29
5.6.2. ETAPA II: SACARIFICACIN ..................................................................... 32
5.6.3. ETAPA III: PROCESO DE FERMENTACIN LA CHILLCA ................. 34
5.6.4. ETAPA IV: OBTECIN DEL BIOETANOL DE LA CHILLCA ............... 36
5.7. PROCESAMIENTO Y ANALISIS DE DATOS .................................................... 37
5.7.1. SACARIFICACIN ......................................................................................... 37
5.7.2. FERMENTACIN............................................................................................ 37
5.7.3. DETERMINACIN DE BIOETANOL PRODUCIDO AL FINAL DE LA
FERMENTACIN............................................................................................................ 37
5.7.4. OBTENCIN DEL BIOETANOL (RENDIMIENTO). ................................ 37
6. CAPITULO VI: ADMINISTRACIN DEL ANTEPROYECTO................................ 38
6.1. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES ................................................................... 38
6.2. DIAGRAMA DE GANTT ............................................................................................ 38
BIBLIOGRAFIAS..................................................................................................................... 39
ANEXOS..................................................................................................................................... 42
5

1. CAPITULO I: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.1. DEFINICIN Y FORMULACIN DEL PROBLEMA

El departamento de Apurmac, tiene fuentes de materia prima para la produccin de


biocombustibles como el bioetanol, a partir de materiales lignocelulsicos, y una de las
alternativas es la chillca Baccharis salicifolia, sin embargo se desconoce, la
composicin fisicoqumica en forma cuantitativa, los parmetros ptimos para lograr
una hidrlisis ideal, el tipo de azcares que pueda liberarse durante el proceso de
hidrlisis de los polisacridos utilizando una mezcla de cido sulfrico y enzima.
Durante la fermentacin, la levadura Sacharomyces cerevisiae producir bioetanol con
los azcares fermentables que se haya obtenido por la hidrlisis de la chillca Baccharis
salicifolia, y parmetros como el nivel de rendimiento, rentabilidad de su produccin
del bioetanol de chillca, por lo que en el presente trabajo de investigacin se plantea:
Ser posible la obtencin de bioetanol a partir de chillca Baccharis salicifolia, con
rendimiento alto?.

1.2. JUSTIFICACIN E IMPORTANCIA DE LA INVESTIGACIN

La chillca Baccharis salicifolia, crece en la regin de Apurmac, no es aprovechada con


fines industriales, crece en chacras donde se dej de cultivar, en terrenos vrgenes, pero
generalmente se encuentran en abundancia en terrenos con escases de agua y pendiente
pronunciada, adems los tallos, hojas, en s toda la planta no se utiliza, porque no tiene
ninguna propiedad curativa, alimenticia o nutritiva. El olor que libera es desagradable
no es posible utilizar como fuente de madera para muebles porque no posee las
caractersticas que se requiere ya que el tallo es muy delgado.

La chillca Baccharis salicifolia es una fuente lignocelulsico abundante y renovable


como materia prima para la produccin de bioetanol, por proceso de sacarificacin se
obtiene azcares fermentables, este por un proceso de fermentacin y posterior
destilacin es obtenido el bioetanol, de esta manera se busca disminuir la contaminacin
ambiental hasta en un 30% como resultado de una combustin ms completa, adems
equilibrar el costo del combustible y por ende de los productos de primera necesidad.

El bioetanol obtenido a partir de una fuente lignocelulsico tiene mayor octanaje, tiene
la eficiencia energtica mayor a cuatro veces cuando comparado con los combustibles
6

fsiles, es posible tambin utilizar como oxigenante en mezclas bioetanol-gasolina, esto


sustituye el uso de oxigenantes, por contener mayor oxgeno que los combustibles
derivados del petrleo.

La presente investigacin es una alternativa a la demanda energtica para la


sustentabilidad de la industria y del parque automotor, permitiendo satisfacer la
demanda energtica del presente y del futuro que ya nuestro gobierno ha implantado el
uso de biocombustibles.
7

2. CAPITULO II: OBJETIVOS

2.1. OBJETIVO GENERAL

Caracterizar la lignocelulosa y obtener bioetanol a partir de chillca.

2.2. OBJETIVOS ESPECFICOS

Determinar las caractersticas lignocelulsicas de la Chillca Baccharis


salicifolia, conducente al proceso de hidrolisis.
Determinar los parmetros de hidrlisis (tiempo, concentracin de cido
sulfrico, concentracin de enzima, temperatura) para la obtencin de los
azcares reductores y bioetanol a partir de chillca.
Determinar el rendimiento del bioetanol de chillca, en funcin al contenido de
azcar reductor.
8

3. CAPITULO III: MARCO REFERENCIAL

3.1. MARCO TERICO


3.1.1. GENERALIDADES DEL BIOCOMBUSTIBLE.

El biocombustible surge a causa de la poca disponibilidad y el aumento del costo del


los combustibles fsiles. Los bosques y los cultivos agrcolas, ahora son el inters
principal para la produccin de biocombustibles, se considera que la bioenerga es
renovable por cuanto se basa en el ciclo del carbono; nuevos rboles u otras plantas
pueden reemplazar a las que han sido transformadas en energa [1]. EL presente
trabajo se centra en la obtencin de bioetanol a partir de la chillca Baccharis
salicifolia.

3.1.2. BIOETANOL Y SU PROCESO DE OBTENCIN.

Actualmente, el bioetanol es el biocombustible con mayor produccin mundial, del


cual se han elaborado ms de 40,000 millones de litros durante el ao 2004 en todo el
mundo. Brasil produjo 15,066 millones de litros, principalmente a partir de caa de
azcar, EE.UU. 13.351 millones de litros, procedentes del almidn de maz. Se est
realizando estudios con la posibilidad de cultivar rboles, con alto contenido de
celulosa, con el nico fin de producir etanol, como pueden ser el chopo o el sauce,
igualmente el cultivo especfico de algunas plantas y podra ser una alternativa para
las tierras sin cultivo, en el marco de la poltica agraria comn [2].

El bioetanol tiene una pureza de 99.4%, utilizado en motores de ciclo de Otto, estos
alcoholes tienen mayor octanaje, debido a su alto contenido de oxgeno [3], estudios
realizados seala que el bioetanol producido de maz representa solo una mejora en la
eficiencia energtica sobre el petrleo, mientras que el bioetanol producido de la
madera puede mejorar la eficiencia energtica hasta cuatro veces ms [1], en mezclas
gasolina-etanol (Tabla.3.1.), sustituye el uso de oxigenantes [4], evitando as la
adicin de sales de plomo, al realizar la mezclas de etanol-gasolina (Tabla 3.1.), en
climas fros y templados no debe sobrepasar 5-10% en volumen de etanol y en zonas
clidas pudiendo llegar hasta el 20%. El empleo del etanol como nico combustible
debe realizarse en motores especficamente diseados para el bioetanol [3], una
desventaja de esta mezcla de etanol-gasolina, es el contenido de oxgeno, esto
ocasiona la produccin de xidos de nitrgeno [4].
9

Tabla 3.1. Mezcla de etanol y gasolina


Cdigo Porcentaje de etanol (%)
E5 5%
E10 10%
E20 20%
E85 85%
E95 95%
E100 100%
Fuente: Hernndez Prez Y. y Melo Rodrguez C. I., 2006.

El bioetanol se produce por la fermentacin de los azucares contenidos en la materia


orgnica de las plantas. En este proceso se obtiene el alcohol hidratado, con un
contenido aproximado del 5% de agua, que tras ser deshidratado se puede utilizar
como combustible, en la Figura. 3.2. Se presenta, el proceso completo de obtencin
del bioetanol.

Tratamiento Hidrlisis
Lignocelulosa (cida)
(Molienda)

Hidrlisis (Enzimtico) y
fermentacin

Destilacin
100G. Etanol
95G. Etanol

Eliminacin de agua
Figura 3.2. Proceso general para la obtencin de bioetanol de lignocelulosa
Fuente: Martnez Jimnez A., 2007.

3.1.3. FUENTES DE MATERIA PRIMA PARA LA PRODUCCIN DE


BIOETANOL.

El bioetanol, o etanol de la biomasa, es el principal resultado de la bioconversin [1],


es producido por fermentacin de cultivos agrcolas que contiene azcares, almidones
o celulosa [7].
10

Tambin se puede obtener de residuos agroindustriales entre los que se encuentran el


bagazo de caa de azcar, cascarilla de arroz, rastrojos o lotes de maz, los pastos, los
desechos de madereras (virutas y aserrn) maderas suaves y duras, papel de
deshechos de oficinas, etc., los cuales son transformados mediante procesos qumicos
y enzimticos, en azcares y posteriormente en etanol mediante procesos de
fermentacin [4].

En esta investigacin nos enfocaremos en la produccin de bioetanol a partir de


materia prima lignocelulsico chillca Baccharis salicifolia.

3.1.4. LA CHILLCA.

La chillca es una planta silvestre, arbusto muy ampliamente distribuido en las


Amricas. Su hbitat principal son las orillas de ros y arroyos, pero aparece
frecuentemente en mbitos perturbados como orillas de parcelas, canales de riego, etc.
Sus plntulas luego aparecen en las parcelas adyacentes. Mientras se cultiva, no
pueden prosperar, pero son las plantas leosas las que ms pronto se establecen en
campos abandonados en muchas regiones [8].

a. ORIGEN Y TAXONOMIA

Se distribuye del suroeste de E.U.A. hasta Sudamrica, su taxonoma [9] es la


siguiente:

Nombre Cientfico : Baccharis salicifolia


Reino: Plantae
Divisin: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsida
Orden: Asterales
Familia: Asteraceae
Subfamilia: Asteroideae
Tribu: Astereae
Gnero: Baccharis
Especie: B. salicifolia

b. IDENTIFICACIN Y DESCRIPCIN

Es un arbusto con hojas como un sauce, ramas largas y rectas, flores en cabezuelas de
alrededor de 7 x 7 mm, casi esfricas, y creciendo en lugares hmedos. Puede
11

convivir con algunas especies de Senecio con hojas parecidas, pero stas tienen flores
amarillas [8].

La chillca es arbusto erecto, algunas veces postrado, formando matorrales densos. Su


tamao es de 0.8 a 2 m de alto, a veces ms, el tallo tiene la forma cilndrica, leosa,
glabra a glandular-granuloso (Fig. 3.1).

Baccharis
salicifolia
0.8 a 2m
de alto a
ms

Figura 3.1 Tamao y tallo de Chila Baccharis salicifolia

Sus hojas lminas linear-lanceoladas, estrechamente elpticas, de 5.5 a 12cm de largo


por 0.1 a 1.5cm de ancho, margen levemente dentado-aserrado, con no ms de 5
dientes por centmetro o a veces entero, base angostamente cuneada a atenuada y en
ocasiones ligeramente asimtrica, trinervada, sin pelos (Fig. 3.2).

La inflorescencia tiene la forma de cabezuelas pedunculadas, dispuestas en panculas


terminales densas a laxas, son casi globulares o incluso ms anchas que altas.

Las flores o cabezuela se clasifican segn:

Cabezuelas masculinas con involucro semiacampanado, de 5-7 mm de alto por


3.5 a 6 mm de ancho, brcteas dispuestas en 3 series, oblongo-lanceoladas, en
ocasiones estrechamente lanceoladas a oblanceoladas, agudas o acuminadas,
12

apenas con un solo nervio, levemente ciliadas y de color morado, con 24 a 41


flores blanquecinas, rara vez con 1 a 6 flores marginales femeninas, corolas de
4.5 a 7 mm de largo, con nervacin poco visible, cerdas del vilano 20-33, de 4
a 5 mm de largo [8].
Cabezuelas femeninas con involucro acampanado o casi cilndrico, de 5.5 a 7
mm de alto por 6 mm de ancho, brcteas dispuestas en 4 series, lanceoladas
a oblanceoladas, agudas a acuminadas, levemente uninervias, ciliadas, verde-
moradas, flores 124 a 210, corolas de 2.5 a 3.5 mm de largo, blanquecinas, sin
nervacin visible, con pelos simples muy cortos, cerdas del vilano 20 a 38, de
3 a 5 mm de largo.

Baccharis
salicifolia con
hoja lanceolada,
levemente
aserrado

Figura 3.2 Hojas de chillca Baccharis salicifolia

Los frutos y semillas aquenios de 1.5 a 5 mm de largo, color caf olivo, con 5 a 10
costillas, poco visibles a conspicuas, semigranulosas. Su habitad son mrgenes de
arroyos y ros, orillas de caminos y parcelas, bosques abiertos, estn distribuidos
desde el nivel del mar, hasta los 2800msnm, se distribuyen suelos o lugares poco
hmedos [8].

3.1.5. COMPOSICIN DE LA LIGNOCELULOSA.


a. CELULOSA

Constituye de 20 a 50% del peso seco, es un homopolmero de celobiosa que a su vez es


un dmero de glucosa [10], est conformado por hexosas (glucosa, manosa, galactosa),
13

las cuales se mantienen unidas mediante enlaces -1,4glucosdicos, esta configuracin


le permite a la celulosa formar cadenas largas lineales fuertes, la celulosa pura (-
celulosa) contiene entre 10000 a 15000 unidades de glucosa por molcula [11].

b. LIGNINA

La lignina es una molcula bastante compleja constituida por la unin de varios


cidos y alcoholes fenilproplicos (cumarlico, coniferlico y sinaplico), todos ligados
entre s en una estructura tridiemnsional [12], tambin la lignina es un termoplstico
biolgico compuesto por residuos aromticos que no pueden ser fermentados a etanol,
pero pueden ser usados como combustible o bien como plsticos biodegradables. [10].
La lignina es el pegamento que mantiene unidas las fibras de celulosa y hemicelulosa
a travs de enlaces de hidrgeno y enlaces covalentes, dificultando con ello su
remocin total; asimismo, le confiere rigidez a la fibras y las protege contra ataque
microbiano [12].

c. HEMICELULOSA

La hemicelulosa constituye del 20 a 40% del peso seco, es un heteropolmero


complejo que est formado por pentosas (xilosa, arabinosa) [9]. Estos tres polmeros
de carbohidratos son fuentes potenciales de azcares que pueden ser fermentados para
la produccin de etanol [10].

d. PECTINA

La pectina que constituye del 2 a 20% del peso seco es un homopolmero metilado
del cido poligalacturnico [10].

Tabla: 3.2. Composicin de diversos recursos lignocelulsico (%)


Fuente Celulosa Hemicelulosa Lignina
Madera 44-50 20-26 17-30
Bagazo de caa 50 20 30
Olote de maz 36 23 17
Paja de trigo 33 25 23
Paja de arroz 34 25 23
Paja de cebada 40-44 28-30 20-22
Fuente: Quintero Ramrez R., 2008.

Estos tres polmeros de carbohidratos son fuentes potenciales de azcares que pueden
ser fermentados para la produccin de etanol [11].
14

3.1.6. HIDRLISIS DE LA LIGNOCELULOSA

a. Pre tratamiento fsico de la lignocelulosa

Los pretratamientos fsicos Pueden usar altas presiones y temperaturas, molienda,


radiacin o congelamiento; por tal razn, tienen un alto consumo de energa y pueden
resultar costosos.

b. Pre tratamiento qumico de la lignocelulosa

Los pretratamientos qumicos incluyen pre-hidrlisis cida, hidrlisis de los


polisacridos, empleo de bases como hidrxido de sodio o amoniaco u rgano
solventes, como etanol, metanol, butanol, fenol y heametilen-diamina (remocin de la
lignina).

c. Hidrlisis cida

La hidrlisis cida emplea cidos concentrados o diluidos, y pueden utilizarse


cualquier tipo de cidos; sin embargo, en la prctica se suele emplear cido sulfrico,
por razones de costos. Durante este proceso, los cidos empleados, bajo condiciones
de calor hidrolizan los polisacridos y los separan de la lignina; luego, la celulosa y
hemicelulosa, posteriormente para obtiene los azcares fermentables.

La velocidad de reaccin es rpida, permitiendo un procesamiento continuo, un


inconveniente serio es que los cidos acuosos que hidrolizan los polisacridos
destruyen en gran cantidad los azcares en el proceso. Asimismo, los costos se ven
aumentados por el carcter corrosivo de algunas de estas tecnologas, obligando el
empleo de materiales costosas en el diseo de equipos como cermicas o
recubrimiento con ladrillos de carbono [12].

Concentraciones HCl de 2 a 5%, temperaturas cercanas de 160C y presiones de


10atm, son factores para la formacin de compuestos txicos, temperaturas
moderadas menores de 160C proveen una adecuada hidrlisis de la hemicelulosa,
con poca descomposicin de azcares; de otro lado, temperaturas superiores a 160C
favorecen la hidrlisis de la celulosa y productos de descomposicin de lignina que
toxifican el jarabe azucarado [14], dentro de estos compuestos txicos se encuentran
el furfural, hidroximetilfurfural , cido actico entre otros [19].
15

Segn estudios realizados en obtencin de etanol a partir de buffel, la hidrlisis se


llevo a cabo con NaOH al 1.5% en peso, a una temperatura de 120 a 160C,
manteniendo durante una hora, adems se hizo una prueba con H2SO4, obteniendo
como resultado el mejor rendimiento con H2SO4, con tiempos 2 horas y temperatura
de 140C [16], en la investigacin obtencin de etanol a partir de renuevos de
guadua el proceso se realiz a una presin de 115psi, por 2 horas, hasta llegar de 7 a
10Brix, obteniendo hasta el 26% de etanol, con eficiencia al 87.88%[17],
investigaciones con cido sulfrico diluido de 8%, temperatura de 30C,tiempo de 1
hora, tuvieron mejores resultados con rendimientos altos de azcares fermentables
[18], sin embargo invetigaciones realizadas en bagacillo de caa de azcar,

d. Hidrlisis enzimtica

Por lo general se utiliza celulasa, provenientes de diversos microorganismos como el


hongo Trichoderma viride y M. verrucaria, en menor escala. Este proceso puede
presentarse de la siguiente manera:

Celulosa Celobiosa Glucosa


C6H10O5 endoglucanaza y celobiohidrasas C12H22O11 -glucosidasa C6H12O6

Hemicelulosa Pretratamiento C5H10O5 + C6H12O6 + otros azcares.

La celulosa requiere de una digestin intensa y, generalmente se lleva a cabo en dos


etapas. La primera es realizada en condiciones cidas, y su efecto es el de hacer
disponible al polmero para realizar de manera eficiente la segunda etapa con
celulasas, que resulta de la accin combinada de diferentes tipos de actividad
enzimticas: endoglucanasas que hidrolizan enlaces -1,4glucosdicos del esqueleto
lineal formado por glucosas, celobiohidrolasas que liberan unidades de disacrido
(celobiosa) desde los extremos, y -glucosidasas las cuales hidrolizan celobiosa y
productos solubles de cadena corta (5 residuos o menos) en glucosa monomrica. La
hemicelulosa no tiene relacin qumica con la celulosa. La hemicelulosa
frecuentemente rodea a las fibras de celulosa y aumenta su fuerza de unin y tensin.
Para despolimerizar a la hemicelulosa se prefiere la hidrlisis cida con cido
sulfrico diluido, a presiones mayores de una atmsfera y temperaturas de 120 a
200C, debido principalmente a su bajo costo. La biomasa en partculas de tamao
16

relativamente pequeo se somete al proceso de hidrlisis cida diluida, generando una


fraccin slida, mayoritariamente compuesta de celulosa y lignina; y una lquida, que
contiene un jarabe, producto de la despolimerizacin de xilano presente en la
hemicelulosa. Despus la glucosa puede ser fermentada y convertida en etanol en el
mismo biorreactor con levaduras como S. cerevisiae. Este proceso se conoce como
sacarificacin y fermentacin simultnea [4,11].

Sin embargo, las celulasas se inhiben considerablemente al presentarse glucosa y


cadenas cortas de celulosa cuando se da inicio a la hidrlisis enzimtica. Para evitar
esto, se emplea la tecnologa de sacarificacin y fermentacin de manera simultnea,
con el fin de convertir en el menor tiempo posible en etanol la glucosa que se va
generando como producto de la hidrlisis enzimtica; la inhibicin del etanol
acumulado sobre las celulasas es comparativamente menor a la de la glucosa,
resultando as una buena estrategia para incrementar la velocidad global de celulosa
en la conversin de etanol [12, 11].

3.1.7. PROCESO DE FERMENTACIN

FUNDAMENTOS BIOQUMICOS DE LA FERMENTACIN

La fermentacin alcohlica es resultado de una serie de reacciones bioqumica a


travs de las cuales algunos microorganismos, por medio de un conjunto de enzimas
producidas por ellos o aadidas artificialmente, realizan una transformacin de
azcares para convertirlos en etanol, dixido de carbono y energa, mediante la ruta
de Embden Meyerhof Parnas (Fig. 3.4), [19].

La reaccin global general que resume todo el proceso cuando se fermentan hexosas
es: El rendimiento terico estequiomtrico para la transformacin de glucosa en
etanol es de 0.511g etanol y 0.489g de CO2 por g de glucosa. Esto fue comprobado
por Gay Lussac. En realidad es difcil lograr este rendimiento, ya que las levaduras
utilizan la glucosa para la produccin de otros metabolitos. El rendimiento
experimental vara entre 90% y 95% del terico, es decir de 0.469 a 0.485 g/g
glucosa. Otro parmetro importante es la productividad o la cantidad de etanol
producido por unidad de tiempo y volumen [20].
17

a. MICROORGANISMOS PARA LA PRODUCCIN DE BIOETANOL

Los microorganismos ms empleados en la obtencin de etanol son las levaduras [12],


la Sachoromyces cerevisiae, es la especie de levadura usada con frecuencia [20],
aunque existen varios tipos de bacterias y hongos que tambin son capaces de
sintetizarlo [12], como la Zymomonas mobilis [20]. La fermentacin alcohlica se
realiza en ausencia de oxgeno, excepto durante el tiempo de inoculacin, durante el
cual se insufla una pequea cantidad para permitir un crecimiento limitado de los
microorganismos [12].

glucosa ATP
ADP
glucosa-6-P

fructosa-6-P
ATP
ADP
fructosa-1,6-difosfato

dihidroxiacetona-P

gliceraldehido-3-P
NAD
NADH+H+
1,3-difosfoglicerato
ADP
ATP
3-fosfoglicerato

2-fosfoglicerato
H2O
fosfoenol piruvato
ADP
ATP
piruvato
CO2
acetaldehido
NADH+H+
NAD
Etanol

Figura 3.4. Metabolismos glicoltico de los azcares, Ruta Embden Meyerhof


Parnas. Fuente: Abad Arranz E., 2006.
18

Sin embargo, la celulosa, como el almidn, es un polmero lineal conformado por


unidades de glucosa, y se diferencia de ese ltimo en su configuracin estructural. La
hemicelulosa, a diferencia de la celulosa, es un polmero ramificado, y est
conformado por hexosas (azcares de 6 carbonos) y pentosas (azcares de 5
carbonos); su composicin vara de acuerdo al tipo de planta del cual provenga. Con
estos compuestos, las levaduras no son muy efectivas en la produccin de etanol a
partir de materiales celulsicos, debido a su incapacidad de fermentar azcares como
la xilosa. Para ello, se ha encontrado que diversas cepas de bacterias Gram negativas
modificadas genticamente como Eschirichia coli, Klebsiella oxytoca, y Zimomonas
mobilis, tuvieron buenos resultados en la produccin de etanol a partir de material
celulsico [12].

Sacharomyces cerevisiae

Es un hongo eucariota unicelular comnmente conocido como levadura, que ha sido


tradicionalmente usada en la produccin de bebidas alcohlicas y alimentos. La
conversin industrial de carbohidratos a etanol recae en organismos que toleran altos
niveles tanto de substrato como de producto, y que adems producen etanol a
temperaturas relativamente altas, Sacharomyces cerevisiae es la levadura ms
tolerante a etanol y puede crecer en concentraciones de 8 a 12% de etanol, y
fermentar azcares a niveles del 12 a 20% de etanol. Bajo condiciones anaerbicas,
puede crecer y producir etanol. El carbohidrato es convertido a piruvato por gliclisis,
y entonces mas piruvato descarboxilaza convierte el piruvato a acetaldehdo y dixido
de carbono, y alcohol-deshidrogenasa reduce el acetaldehdo a etanol. El rendimiento
con sustratos puros como glucosa y sacarosa, es 95%, y con materiales sin procesar el
grado industrial es 91%. El material tpico para la fermentacin alcohlica por
levaduras es el azcar contenido en materiales como caa y remolacha, que pueden
ser fermentadas directamente [4]. Sin embargo Sacharomyces cerevisiae silvestre no
posee la capacidad de metabolizar los azcares de cinco carbonos (xilosa, arabinosa,
ribosa, etc.) a etanol, en la actualidad se ha generado cepas de S. cerevisiae que
utilizan xilosa. Pero la sntesis de etanol y rendimientos de conversin de xilosa en
etanol son bajos [21].
19

b. SISTEMAS DE FERMENTACIN PARA LA PRODUCCIN DE


BIOETANOL (BIORREACTOR).

Los fermentadores o biorreactores son el corazn de cualquier proceso de


fermentacin o conversin enzimtica [22]. Los biorreactores son los equipos donde
se realiza el proceso de cultivo, sea en estado slido o lquido, su diseo debe
asegurar la homogeneidad entre los componentes del sistema y condiciones ptimas
para el crecimiento microbiano y la obtencin del producto deseado [23], es
importante tener en cuenta las operaciones de transferencia de calor y oxgeno al
medio de cultivo, siendo stos los principales factores que afectan el proceso de
fermentacin [23].

Un biorreactor provee todos los servicios necesarios para el proceso de fermentacin,


tales como mezclado, control de temperatura, suministro de oxgeno, entradas para la
adicin de nutriente, control de potencial de hidrogeniones, etc. Por otra parte, cuando
se habla de sistemas de cultivo o mtodos de cultivo se hace referencia al modo de
operar el biorreactor, en forma continua o discontinua. Los biorreactores ms
utilizados para la fermentacin estn provistos de mecanismos de agitacin,
dispersin y aireacin as como de sistemas para el control de la temperatura, pH. Los
biorreactores deben ser optimizados para obtener la mxima concentracin de
productos de la fermentacin, como los metabolitos primarios en la produccin del
bioetanol, en un tiempo mnimo y a menor costo de produccin [24].

c. PROCESO DE OBTENCIN DEL BIOETANOL

En la masa de fermentacin, el etanol slo se encuentra en una concentracin mxima


de 8 a 12%, para poder separar el bioetanol del lquido fermentado, que consiste en
separar la mezcla lquida aprovechando la diferencia de volatilidad de los
componentes que forman la mezcla. Cuanto mayor sea la volatilidad entre los
componentes de la mezcla, habr mayor diferencia entre los componentes de la fase
lquida y vapor, as la mezcla lquida a su punto de ebullicin desprender vapores
ricos en componentes voltiles [25]. La destilacin puede llevarse a cabo segn dos
mtodos principales. El primer mtodo se basa en la produccin de vapor mediante la
ebullicin de la mezcla lquida que se desea separar y condensacin de los vapores sin
permitir que el lquido retorne al caldern. Es decir, no hay reflujo. El segundo mtodo
se basa en el retorno de una parte del condensado a la columna, en unas condiciones
20

tales que el lquido que retorna se pone en ntimo contacto con los vapores que
ascienden hacia el condensador. Cualquiera de los dos mtodos puede realizarse de
forma continua o por cargas [26].

d. DESTILACIN SIMPLE

El lquido se deja hervir de un recipiente (caldera) condensndose separadamente el


destilado, y quedando en la caldera el residuo [25]. Puede llevarse a cabo por lotes o
en forma continua [27].

e. RECTIFICACIN

En esta etapa el bioetanol de la destilacin con reflujo o rectificacin se lleva a cabo


en una columna [25].

La mezcla de la alimentacin se introduce de modo ms o menos centrado en una


cascada vertical de etapas. El vapor que se eleva en la parte superior del alimentador
(llamada zona enriquecedora o rectificadora) se lava con el lquido para eliminar o
absorber el componente menos voltil, el lquido de lavado se obtiene condensado el
vapor que sale por la parte superior, enriquecido con el componente ms voltil [27].

3.2. MARCO CONCEPTUAL

3.2.1. Biocombustible.

Trmino que se le denomina a cualquier tipo de combustible que derive de la


biomasa, de fuente renovable, se presentar tanto en forma slida (residuos vegetales,
fraccin biodegradable de los residuos urbanos o industriales) como lquida
(bioalcoholes (Bioetanol), biodisel) y gaseosa (biogs, hidrgeno).

3.2.2. Bioetanol.

Alcohol etlico o etanol es un producto compuesto obtenido a partir de la


fermentacin de los azcares, que se encuentran en los cultivos agrcolas, residuos
agroindustriales.
21

3.2.3. Metabolismo.

Se refiere al conjunto de reacciones bioqumicas que ocurre o tiene lugar en la clula,


y tiene tres funciones especficas: Obtener energa del medio, convertir los nutrientes
del medio, formar y degradar molculas necesarias para funciones celulares
especficas.

3.2.4. Hidrlisis cida.

Son cidos concentrados o diluidos, que se calienta para hidrolizar la lignocelulosa y


separar la lignina; luego, celulosa y hemicelulosa, posteriormente obtener los azcares
fermentables.

3.2.5. Hidrlisis enzimtica.

Reaccin o modificacin que permite romper la estructura de la lignocelulosa y


separar la lignina, con el fin de obtener azcares fermentables.

3.2.6. Destilacin.

Operacin unitaria que consiste en separar dos o ms componentes de una mezcla


lquida, aprovechando la volatilidad.

3.2.7. Rectificacin.

Proceso por el cual se concentra el etanol a mayor grado alcohlico.


22

4. CAPITULO IV: HIPOTESIS Y VARIABLES

4.1. FORMULACIN DE HIPOTEISIS


4.1.1. HIPTESIS GENERAL

Por las caractersticas lignocelulsicas que presenta la chillca, es una materia prima
que puede ser utilizado para producir bioetanol

4.1.2. HIPTESIS ESPECFICA


La chillca como materia prima presenta rendimientos elevados en la
produccin de bioetanol.
Mayores concentraciones de cido sulfrico, enzima, mayores tiempos y
temperaturas de hidrlisis, genera mayor concentracin de azcares
fermentables, obteniendo niveles de rendimiento alto.

4.2. VARIABLES Y DEFINICIN OPERACIONAL DE VARIABLES: variable


independiente, dependiente, interviniente y/o extraa.

Hiptesis Variables Indicadores ndices Instrumento


Variables independientes
Concentracin de Cmin=10 % Calculo de la
cido sulfrico Cmax= 16 % concentracin
Hidrlisis Tiempo de hidrolisis tmin=50 minutos
Cronometro.
cida tmax=70 minutos
Temperatura de Tmin=70 C
Termmetro.
hidrlisis Tmax=78 C
Hidrlisis Concentracin de Cmin=11 Unidad Clculo de la
enzimtica enzima Cmax=15 internacional concentracin
Variables dependientes
Azcares reductores % Calculo
Obtencin de Rendimiento % Clculo
Bioetanol Calidad del bioetanol Gay Lussac Mtodo grado
alcohlico total
23

5. CAPITULO V: METODOLOGIA DE LA INVESTIGACIN

5.1. TIPO Y NIVEL DE INVESTIGACIN


5.1.1. TIPO

La investigacin es de tipo aplicativo [28], se har pruebas experimentales en


laboratorio con las variables independientes, para obtener bioetanol de chillca, lo cual
contribuir en la disminucin del impacto ambiental, adems se propone como una
nueva fuente de materia prima para la produccin de bioetanol, y equilibrar el costo
del combustible.

5.1.2. NIVEL

La investigacin es de nivel experimental [29], se manipularan las variables


independientes como: concentracin (HSO4, celulasa), temperatura, tiempo, para
optimizar el proceso de obtencin del bioentanol de chillca Baccharis salicifolia.

5.2. MTODO Y DISEO DE LA INVESTIGACIN


5.2.1. MTODO
5.2.1.1. MTODO EXPERIMENTAL

Para la investigacin de obtencin de bioetanol de chillca se utilizar el mtodo


experimental [30], esto implica el empleo de instrumentos de laboratorio,
equipos y reactivos, para el manipuleo de las variables independientes, para
observar los efectos que ocurre en el proceso de obtencin del bioetanol de
chillca, lo cual se realizar en los Laboratorios BIOTECNOLOGA, QUMICA y
MICROBIOLOGA, de la FACULTAD DE INGENIERA AGROINDUSTRIAL
de la UNIVERSIDAD NACIONL MICAELA BASTIDAS DE APURMAC.
Tambin se solicitar a otros laboratorios, a parte de la ya mencionada, de esta
manera prever algunas deficiencias que puede haber para la presente
investigacin.
24

Tabla 5.1 Modelo de la prueba experimental


Materia prima Caracterizacin Variables y parmetros de evaluacin Etapas de estudio
Chillca cido Temperatura Tiempo Enzima (celulasa) Hidrolisis Fermentacin Destilacin y
Baccharis sulfrico (C) (min) (Unid.Internacinal) rectificacin
salicifolia (%)
10 70 50 11 - - -
16 78 70 15 - - -
Pruebas Celulosa Azcares Grado Rendimiento
experimentales totales alcohlico
Hemicelulosa Azcares Calidad del
reductores bioetanol
Lignina
tiempo mes 3mes 4meses 2mes
Fuente: Elaboracin propia
25

5.2.2. DISEO DE INVESTIGACIN


5.2.2.1. DISEO EXPERIMENTAL

El diseo de la investigacin es experimental [31], para lo cual se emplear l,


diseo compuesto central, y optimizar los parmetros de obtencin de bioetanol.

5.3. POBLACIN

La poblacin de trabajo para la obtencin de bioetanol de chillca es la provincia de


Abancay, Distrito Tamburco, a aproximadamente 300m de la ciudad Universitaria. La
disponibilidad de la chillca es de 10Kg/m2, en una superficie de 3hectareas. La planta
para el proceso de emplear en toda la parte leosa (tallo y ramas).

5.4. MUESTRA
5.4.1. TCNICAS DE MUESTREO

La muestra ser extrada mediante el muestreo aleatorio, por duplicado, para realizar
las pruebas necesarias para la obtencin de bioetanol de chillca.

5.4.2. TAMAO Y CLCULO DE MUESTRA

La toma de muestra se calcular con la siguiente frmula:

Donde:

n: Cantidad de muestra a extraer.


E: Margen de error o nivel de precisin
q: Probabilidad de fracaso
Z: Nivel de confianza
P: Probabilidad de xito

La frmula permite calcular el tamao de muestra en poblacin infinita (N= ), como la


poblacin es infinito, en la formula no se considera, adems la formula es para muestras
heterogenias y que estn dispersos no uniformemente [32].
26

5.5. DESCRIPCIN DE LA EXPERIMENTACIN

La presente investigacin se realizar por el diseo central compuesto [33], esto nos
permite optimizar los tratamientos, para lo cual se identificar las variables que
verdaderamente influyen en la eficiencia del proceso de obtencin de bioetanol.

Por lo tanto el nmero total de experimentos a llevarse a cabo viene definido por la
siguiente ecuacin:

= + +

Donde:
N = Es el nmero total de tratamientos u observaciones.
2p = Es el nmero de tratamientos bsicos de la parte factorial o
combinaciones de tratamientos.
2p = Corresponde a los tratamientos de la parte axial o estrella o
combinacin de tratamientos en los puntos axiales del diseo.
C = Constituye el tratamiento central que se repite un nmero
determinado de veces dependiendo del nmero de factores o rplicas en
el centro del diseo.
p = nmero de factores en estudio o variables.

Clculo del nmero total de tratamientos

Datos: p= 4, C= 2

= + + =

Parmetros de evaluacin de las variables independientes

En la tabla 5.2 se muestra los parmetros con los cuales se trabajar para obtencin de
bioetanol.

Tabla 5.2. Parmetros de variables independientes


Parmetros de evaluacin
Niveles Acido sulfrico Temperatura Tiempo celulasa
(%) (C) (min) (Unid.Int.)
Parmetros de evaluacin 10 70 50 11
16 78 70 15
Fuente: Elaboracin propia.
27

Clculo de punto estrella o axiales

1 1
= (2 )4 = (24 )4 = 2

Clculo del centro de diseo (0 )

+ 16 + 10
0 = = = 13
2 2

Clculo del radio de diseo ( )

16 10
= = =3
2 2

Clculo de ecuacin decodificada (Zj), (-1 y +1).

= 0 +

1 = 13 + (+2) 3 = 19 1 = 13 + (2) 3 = 17.5

En el tabla 5.3. se muestra el resumen de los clculos decodificados, con los puntos
centrales y axiales.

Tabla 5.3. Resumen de codificacin de las variables


Nivel codificado Niveles
Xi Acido sulfrico Tiempo Temperatura Celulasa
(%) (min) (C) (UI)
Ecuacin decodificada = -2 7 40 66 9
Nivel inferior -1 10 50 70 11
Centro diseo 0 12.5 60 74 13
Nivel superior +1 16 70 78 15
Ecuacin decodificada = +2 19 80 82 17
Radio del diseo r 3 10 4 2
Fuente: Elaboracin propia

Matriz de diseo de escala codificada

En la tabla 5.4. se presenta las combinaciones que se har con las variables
independientes para la obtencin de bioetanol.
28

Tabla 5.4. Modelo de cuadro de respuestas


Variable
Codificacin de valores Matriz de diseo de escala codificado
respuesta
Ac. Sulfrico Tiempo Temperatura celulasa
N Y
X1 X2 X3 X4 (%) (min) (C) (Unid.Int.)
1 0 0 0 0 13 74 60 13
2 -1 -1 -1 -1 10 70 50 11
3 1 -1 -1 -1 16 70 50 11
4 -1 1 -1 -1 10 78 50 11
5 1 1 -1 -1 16 78 50 11
6 -1 -1 1 -1 10 70 70 11
7 1 -1 1 -1 16 70 70 11
8 -1 1 1 -1 10 78 70 11
9 1 1 1 -1 16 78 70 11
10 -1 -1 -1 1 10 70 50 15
11 1 -1 -1 1 16 70 50 15
12 -1 1 -1 1 10 78 50 15
13 1 1 -1 1 16 78 50 15
14 -1 -1 1 1 10 70 70 15
15 1 -1 1 1 16 70 70 15
16 -1 1 1 1 10 78 70 15
17 1 1 1 1 16 78 70 15
18 -2 0 0 0 7 74 60 13
19 2 0 0 0 19 74 60 13
20 0 -2 0 0 13 66 60 13
21 0 2 0 0 13 82 60 13
22 0 0 -2 0 13 74 40 13
23 0 0 2 0 13 74 80 13
24 0 0 0 -2 13 74 60 9
25 0 0 0 2 13 74 60 17
26 0 0 0 0 13 74 60 13
Fuente: Elaboracin propia. Nota: esta combinacin se utilizar para las variables de respuesta.
29

DIAGRAMA DE FLUJO PARA OBTENCIN DE BIOETANOL DE CHILLCA


Materia prima
Baccharis salicifolia

Molienda

10,16 % cido sulfrico Tiempo 50,70 min


11,15 UI Celulasa Hidrolisis Temperatura 70,78C

Sacharomyces
Fermentacin Grado alcohlico Gay Lussac
cerevisiae

Destilacin

Rendimiento (%)
Rectificacin
Grado alcohlico total (Litros)

Bioetanol Gay Lussac


Gay Lussac

5.6. TCNICA E INSTRUMENTOS DE RECOLECCON DE DATOS

5.6.1. ETAPA I: DETERMINACIN DE LA COMPOSICIN DE


POLISACRIDOS DE CHILLCA.

a. Preparacin de la muestra (TAPPI T 207 om-81 y TAPPI T 264 om-97)

Materiales y aparatos

Vaso de precipitado
Estufa

Reactivos

Agua destilada
Etanol 95%
Benceno
30

b. Determinacin Lignina (TAPPI T 222 om-83)

Materiales y aparatos

Vaso de precipitado
Matraz de erlenmeyer
Placa porosa para filtrar
Estufa
Bao mara

Reactivos

Agua destilada
cido sulfrico

Clculo


% =

c. Determinacin de Celulosa o -celulosa (TAPPI T 203 os-74)

Materiales y aparatos

Vaso de precipitado
Matraz de erlenmeyer
Placa porosa para filtrar
Varilla de vidrio
Estufa
Bao mara

Reactivos

Agua destilada
Hidrxido de sodio 17.5%
Dicromato de potasio 0.5N
cido sulfrico
Indicador ferroina
Sulfato de amonio ferroso 0.1N
31

Clculo

6.85 (V2 V1 ) N 20
% Celulosa = 100
V3 m

Donde:
V1=volumen de la titulacin de la muestra, ml.
V2=volumen de la titulacin en blanco, ml.

V3=volumen de la solucin, ml.

m=Peso anhidro de la muestra, g.

N=normalidad exacta del sulfato de amonio ferroso.

d. Determinacin de holcelulosa (Browning, 1967)

Materiales y aparatos

Vaso de precipitado
Matraz de erlenmeyer
Placa porosa para filtrar
Varilla de vidrio
Bao mara

Reactivos

Agua destilada
Clorito de sodio
HAc glacial
Hidrxido de sodio

Clculo


% =

e. Determinacin de la Hemicelulosa

= ( )

La tabla 5.5, se emplear para registrar los datos obtenidos de la determinacin de


composicin lignocelulsica de chillca.
32

Tabla 5.5. Composicin lignocelulsica de chillca Baccharis salicifolia


Composicin Porcentaje (%)
Celulosa
Hemicelulosa
Lignina
Fuente: Elaboracin propia

5.6.2. ETAPA II: SACARIFICACIN

Se realizar este proceso con el fin de liberar los azcares fermentables de la chillca, y
realizar fermentacin simultnea.

a. Determinacin de los azcares totales.

El sustrato es diluido en una relacin 1:1 empleando agua destilada, y con un


refractmetro, que mide rangos de 0 a 40 % Brix de azcar en un material, se
determinar los azcares totales.

b. Determinacin de azcares reductores ( Lane y Eynon, apartado 31.036 del


AOAC [AOAC-1984]).

Principio

Se basa en la determinacin del volumen que se requiere de la solucin problema para


reducir un volumen conocido de un reactivo alcalino de cobre. El punto final se
determina por el uso de un indicador interno (azul de metileno), el cual es reducido a
blanco de metileno por un exceso de azcares reductores.

Materiales y equipos

Matraz de 250mL
Matraz de 100mL
Bureta
Perlas de ebullicin
Balanza electroniza
Termmetro
Bao Mara
Tripode y parrilla
Mechero Bunsen
33

Papel filtro

Reactivos

EtOH al 80% o 2-propanol


Sales de plomo
Solucin saturada de acetato neutro de plomo al 45%
Oxalato de sodio/potasio al 22%
Agua destilada
cido clorhdrico concentrado
Hidrxido de sodio al 40%
Solucin de fehling A
Solucin de fehling B
Azul de metileno al 0.2%
Fenolftalena al 0.1%
Hidrxido de sodio 1 N

Calculo

Cuantificar en g de azcar contenidos en 100 g de muestra y calcular:

( )( )( )()
% =
( )( )( )

La tabla 5.6, se utilizar para tomar los datos que se obtendrn de la determinacin de
los azcares totales y reductores.

Tabla 5.6. Resultados de la hidrlisis cida y enzimtica.

Variables Carbohidratos
N Ac. Sulfrico Tiempo Temperatura Enzima Azcares totales Azcares reductores
(%) (min) (C) (Unid.Int.) (%) (%)
1 13 74 60 13
2 10 70 50 11
3 16 70 50 11
4 10 78 50 11
5 16 78 50 11
6 10 70 70 11
7 16 70 70 11
8 10 78 70 11
9 16 78 70 11
10 10 70 50 15
34

11 16 70 50 15
12 10 78 50 15
13 16 78 50 15
14 10 70 70 15
15 16 70 70 15
16 10 78 70 15
17 16 78 70 15
18 7 74 60 13
19 19 74 60 13
20 13 66 60 13
21 13 82 60 13
22 13 74 40 13
23 13 74 80 13
24 13 74 60 9
25 13 74 60 17
26 13 74 60 13
Fuente: Elaboracin propia. Nota: esta combinacin se utilizar para las variables de respuesta.

5.6.3. ETAPA III: PROCESO DE FERMENTACIN LA CHILLCA

a. ADQUISICIN DE LA CEPA

La levadura Saccharomyces cerevisiae, que se utilizar para la investigacin ser, las


cepas nativas aisladas que se cuenta en el laboratorio de Bioetecnologia, de la Escuela
Acadmica de Ingeniera Agroindustrial, Facultad de Ingeniera Agroindustrial.

MANTENIMIETO DE LA CEPA

Para mantener el inoculo, a lo largo de todo el estudio, y disminuir las variaciones


genticas en los cultivos, se generarn un banco de clulas con cepas que tengan las
caractersticas deseadas para la obtencin de bioetanol de chillca, para conservar estas
caractersticas genticas de la cepa se emplear el mtodo de repique.

b. INSTALACIN DE EQUIPO DE FERMENTACIN

Descripcin del equipo: El equipo de fermentacin, permitir el control de la


temperatura y pH principalmente, lo cual se har cada 5hr. El equipo de fermentacin
tambin estar provisto por dispositivos que controlan el oxgeno.
35

c. DETERMINACIN DEL GRADO ALCOHLICO DEL CALDO


FERMENTADO

Para determinar el grado alcohlico se emplear el mostimetro. La Tabla 5.7, se


utilizar para registrar los resultados obtenidos de la determinacin del grado
alcohlico producido en el medio de fermentacin.

Tabla 5.7. Resultados del grado alcohlico del caldo fermentado.


N Variables Caldo fermentado
Ac. Sulfrico Tiempo Temperatura Enzima Grado alcohlico (Gay
(%) (min) (C) (Unid.Int.) Lussac)
1 13 74 60 13
2 10 70 50 11
3 16 70 50 11
4 10 78 50 11
5 16 78 50 11
6 10 70 70 11
7 16 70 70 11
8 10 78 70 11
9 16 78 70 11
10 10 70 50 15
11 16 70 50 15
12 10 78 50 15
13 16 78 50 15
14 10 70 70 15
15 16 70 70 15
16 10 78 70 15
17 16 78 70 15
18 7 74 60 13
19 19 74 60 13
20 13 66 60 13
21 13 82 60 13
22 13 74 40 13
23 13 74 80 13
24 13 74 60 9
25 13 74 60 17
26 13 74 60 13
Fuente: Elaboracin propia. Nota: esta combinacin se utilizar para las variables de
respuesta.
36

5.6.4. ETAPA IV: OBTECIN DEL BIOETANOL DE LA CHILLCA


a. DETERMINACIN DEL GRADO ALCOHOLICO TOTAL

Para obtener el bioetanol, se destilar en un destilador simple, luego se har la


rectificacin del bioetanol hasta llegar a 99.6Gay Lussac. El destilado del bioetanol se
determinara el grado alcohlico total por areometra. Se usan aremetros,
expresamente graduados en % vol. llamados alcohmetros o alcoholmetros. La tabla
5.8, se utilizar para el registro de datos de volumen para determinar el rendimiento
del bioetanol.

Tabla 5.8. Resultados de volumen obtenido del bioetanol.


N Variables Destilado
Ac. Sulfrico Tiempo Temperatura Enzima Volumen del Rendimiento del
(%) (min) (C) (Unid.Int.) bioetanol (L) bioetanol (%)
1 13 74 60 13
2 10 70 50 11
3 16 70 50 11
4 10 78 50 11
5 16 78 50 11
6 10 70 70 11
7 16 70 70 11
8 10 78 70 11
9 16 78 70 11
10 10 70 50 15
11 16 70 50 15
12 10 78 50 15
13 16 78 50 15
14 10 70 70 15
15 16 70 70 15
16 10 78 70 15
17 16 78 70 15
18 7 74 60 13
19 19 74 60 13
20 13 66 60 13
21 13 82 60 13
22 13 74 40 13
23 13 74 80 13
24 13 74 60 9
25 13 74 60 17
26 13 74 60 13
Fuente: Elaboracin propia. Nota: esta combinacin se utilizar para las variables de respuesta.
37

5.7. PROCESAMIENTO Y ANALISIS DE DATOS


5.7.1. SACARIFICACIN

El tratamiento de datos para la seleccin de la buena disponibilidad de azcares


fermentables se realiza con empleo del software de Microsoft office Excel 2010.

5.7.2. FERMENTACIN

Los datos obtenidos de esta etapa sern tratados y analizados con el empleo del
software Statistics Graphic para realizar la optimizacin durante la fermentacin.

5.7.3. DETERMINACIN DE BIOETANOL PRODUCIDO AL FINAL


DE LA FERMENTACIN
Los datos obtenidos de esta etapa sern tratados con el software Statistics
Graphic, para determinar el tiempo ptimo de fermentacin, con un
rendimiento alto de bioetanol.

5.7.4. OBTENCIN DEL BIOETANOL (RENDIMIENTO).


Para los datos de esta etapa se emplear el software Statistics Graphic y el
software Microsoft Excel 2010, para determinar el rendimiento del bioetanol.
38

6. CAPITULO VI: ADMINISTRACIN DEL ANTEPROYECTO


6.1. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

N ETAPAS TIEMPO Unidad


1 Caracterizacin de la chillca mes
2 Sacarificacin 3 mes
3 fermentacin 4 meses
4 Obtencin de bioetanol 2 mes
Total 9 mes

6.2. DIAGRAMA DE GANTT

Etapas
1
2
3
4
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

tiempo
39

BIBLIOGRAFIAS

[1] Organizacin de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentacin-FAO.


Bosques y energa, cuestiones principales. Roma, Italia, 2007.

[2] Garca Camus, J. M. y Garca Laborda, J. A. Biocarburantes lquidos: biodiesel y


bioetanol. Universidad Rey Juan Carlos. Madrid, Espaa. 2006.

[3] Garca. Obtencin de fuentes alternativas de energa: bioetanol, 2004.

[4] Romero Garca, A. S. Desarrollo de una cepa etanolognica a partir de Bacillus


subtilis. Tesis para optar maestro en ciencias. Instituto de Biotecnologa, Universidad
Nacional Autnoma de Mxico. Cuernavaca, Mor. 2003.

[5] Hernndez Prez Y. y Melo Rodrguez C. I. Fermentacin alcohlica, bioetanol.


2006.

[6] Martnez Jimnez A. The future of fuel ethanol. Instituto de Biotecnologa,


Departamento de ingeniera celular y biocatlisis. Mxico, 2007.

[7] Hernndez Prez Yballa, Melo Rodrguez C. Irene. Fundamentos de la biomasa,


Fermentacin alcohlica-bioetanol. 2007

[8] Mondragn Pichardo, Juana http://www.conabio.gob.mx/malezasdemexico


/asteraceae/baccharis-salicifolia/fichas/ficha.html. ltima modificacin: 16 de agosto de
2009.

[9] http://es.wikipedia.org/wiki/Baccharis_salicifolia. Modificada por ltima vez el 7


setiembre 2010,

[10] Utrilla Carrieri, J. Evaluacin de la Sobreexpresin de gnes del metabolismo


central de Escherichia coli etanolognica usando xilosa como fuente de carbono. Tesis
para optar ttulo de ingeniero. Instituto Tecnolgico de Tuxtela Gutirrez. Tuxtla
Gutirrez, Chiapas. 2004.

[11] Chacn Ovando S. L., Waliszewski K. N., Preparativos de celulasas comerciales y


aplicaciones en procesos extractivos. Veracruz, Mxico. 2005.

[12] VirtualPro, Revista virtual. I seminario taller biocombustibles-biodiesel-bioetanol.


Bogot, Colombia. 2007.

[13] Quintero Ramrez R. Uso de biomasa: Hidrlisis paso fundamental. Campinas, Sao
Paulo. 2008.
40

[14] Monsalve G. John F., Medina de Perez V. Isabel, Ruiz Colorado A. Adriana.
Produccin de etanol a partir de la cscara de banano y de almidn de yuca. Universidad
Nacional de Colombia. Medellin, Colombia. 2006.

[19] Hernndez Bustos, C. I. Crecimiento y formacin de productos en cultivos


aerbicos y anaerbicos de Bacillus subtilis con glucosa, xilosa y celobiosa. Tesis para
optar ttulo de ingeniero. Instituto Tecnolgico de Zacatepec. Zacatepec, Mor. 2003.

[16] Torrescano lvarez, Jeanette Marcela Obtencin de etanol a partir de buffel. Tesis
(ingeniero qumico, especialidad ingeniera de procesos). Divisin de Ingeniera,
Departamento de Ingeniera Qumica y Metalurgia. Universidad de Sonora. 2009.

[17] Alejandra Restrepo, Maria. Obtencin de etanol a partir de renuevos de guadua


(angustifolia Kunth). Tesis para optar el titulo de Tecnlogo Qumico. Universidad
tecnolgica de Pereira, facultad de tecnologa, escuela de qumica Pereira, 2007.

[18] Garcia Breijo F.J., y Primo Yfera E. Alcohol de Biomasa. III. Hidrlisis de la
fraccin lignocelulsica obtenidad de residuos agrcolas y cosechas de sorgo.
Departamento de biotecnologa, Universidad Politcnica de valencia. Camino de vera.
1989.

[19]Abad Arranz E. Seleccin de levaduras autctonas para la elaboracin de vinos


tintos para bodegas y viedos de Trujillo S.L. Universidad Politcnica de Madrid,
Escuela tcnica superior de ingenieros agrnomos. Madrid, 2006.

[20]Vsquez H. J. y Dacosta O. Fermentacin alcohlica: una opcin para la produccin


de energa renovable a partir de desechos agrcolas. Universidad Nacional Autnoma de
Mxico. Federal, Mexico. 2007.

[21]Huerta Beristain G., Manipulacin del metabolismo central de Escherichia coli para
incrementar la productividad de etanol. Instituto de Biotecnologa, Universidad
Nacional Autnoma de Mxico. Cuernavaca, Mor. 2004.

[22] Doran M. P., Principios de ingeniera de los bioprocesos. Editorial acribia, S.A.
Espaa, 1998.

[23] Ruz leza H. A., Rodrguez Jasso R. M., Rodrguez Herrera, Contreras Esquivel
J.C. y Aguilar C. N. Diseo de biorreactores para la fermentacin en medio slido.
Revista Mexicana de Ingeniera Qumica, vol.6, nmero 001, Distrito Federal, Mxico,
2007.

[24] Mitchell D., Lonsane B., Durand R., Renaud S., Maratray J., Desgranges C.,
Crooke P., Hong K., Tanner R., Malaney G., General principales of reactor design and
operation for salid substrate cultivation. In Rolz (Ed.), Solid substrate cultivation.
Elsevier Applied Science. Amsterdam, 1992.
41

[25] A. Marcilla Gomis, Introduccin a las operaciones de separacin. Editorial


Compobell, S. L. Murcia, 1998.

[26] McCabe Warren L., Smith Julian C., Peter Harriot, Operaciones Unitarias en
Ingenira Qumica, Cuarta Edicin, Editorial McCraw-Hill, Mxico, 1991.

[27] Treybal Robert E., Operaciones de transferencia de masa, Segunda Edicin,


Editorial McCraw-Hill. Mxico, 1998.

[28] Valderrama Mendoza Santiago. Pasos para elaborar proyectos y tesis de


investigacin cientfica. Primera Edicin Lima, Per: Editorial San Marcos, 2007, Pag.
29.

[29] Caldern Saldaa J. Pahola, Alzamora De los Godos Urcia Luis. Metodologa de la
investigacin cientfica. Per, 2008.

[30] Riveiros Hector G., Rosas Lucia. El mtodo cientfico aplicado a las ciencias
experimentales. 2da edicin Mexico: Editorial Trillas, 2004, Pag. 49.

[31] Sanchez Carlessi Hugo, Reyes Meza Carlos. Metodologia y Diseos en la


investigacin cientfica. 3ra edicin Per: Editorial universitaria, 2002, Pag. 84, 95,100.

[32] Enric Mateu y Jordi Casal. Tamao de la muestra. Centre de Recerca en Sanitat
Animal / Dep. Sanitat i Anatomia Animals, Universitat Autnoma de Barcelona,
Barcelona, 2003.

[33] Ibaez Quispe Vladimiro. Diseo central compuesto (DCC) con statistica y
statgraphics. Maestra ciencia y tecnologa de alimentos, escuela de post grado,
Universidad Nacional del Altiplano. Puno, 2005.
42

ANEXOS

ndice tentativo

NDICE

RESUMEN

INTRODUCCIN

CAPITULO I: MARCO TERICO

1.1. GENERALIDADES DEL BIOCOMBUSTIBLE.

1.2. BIOETANOL Y SU PROCESO DE OBTENCIN.

1.3. FUENTES DE MATERIA PRIMA PARA LA PRODUCCIN DE


BIOETANOL.

1.4. LA CHILLCA.

1.5. COMPOSICIN DE LA LIGNOCELULOSA.

1.6. HIDLISIS DE LA LIGNOCELULOSA

1.7. PROCESO DE FERMENTACIN

CAPITULO II: OBEJETIVOS

2.1. OBJETIVO GENERAL

2.2. OBJETIVOS ESPECFICOS

CAPITULO III: MATERIALES Y MTODOS

3.1. MTODO Y DISEO DE LA INVESTIGACIN

3.1.1. MTODO

3.1.2. DISEO DE INVESTIGACIN

3.2. POBLACIN

3.3. MUESTRA

3.3.1. TCNICAS DE MUESTREO

3.3.2. TAMAO Y CLCULO DEL TAMAO

3.4 DESCRIPCIN DE LA EXPERIMENTACIN

3.5 TCNICA E INSTRUMENTOS DE RECOLECCON DE DATOS


43

3.5.1. ETAPA I: DETERMINACIN DE LA COMPOSICIN DE


POLISACRIDOS DE CHILLCA.

3.6.2. ETAPA II: SACARIFICACIN

3.7.3. ETAPA III: PROCESO DE FERMENTACIN LA CHILLCA

3.8.4. ETAPA IV: OBTECIN DEL BIOETANOL DE LA CHILLCA

CAPITULO VI: RESULTADOS Y DISCUSIONES

4.1. SACARIFICACIN

4.2. FERMENTACIN

4.3. DETERMINACIN DE ETANOL AL FINAL DE LA

4.4. OBTENCIN DEL BIOETANOL

4.5. PODER COMBURENTE DEL BIOETANOL

CAPITULO V: CONCLUSIONES

CAPITULO VI: RECOMENDACIONES

BIBLIOGRAFIA

ANEXOS

APENDICE

BIBLIOGRAFA PROPUESTA

[1] FAO (2007). Bosques y energa, cuestiones principales. Obtenido el 26 de abril


2008: ftp://ftp.fao.org/docrep/fao/009/y4705s/ 20_k1136s00.pdf.

[2] Garca Camus, J. M. y Garca Laborda, J. A. Biocarburantes lquidos: biodiesel y


bioetanol. Universidad Rey Juan Carlos. Madrid, Espaa. 2006.

[3] Garca Obtencin de fuentes alternativas de energa: bioetanol, 2004.

[4] Romero Garca, A. S. Desarrollo de una cepa etanolognica a partir de Bacillus


subtilis. Tesis para optar maestro en ciencias. Instituto de Biotecnologa, Universidad
Nacional Autnoma de Mxico. Cuernavaca, Mor. 2003.

[5] Hernndez Prez Y. y Melo Rodrguez C. I. Fermentacin alcohlica, bioetanol.


2006.

[6] Martnez Jimnez A. The future of fuel ethanol. Instituto de Biotecnologa,


Departamento de ingeniera celular y biocatlisis. Mxico, 2007.
44

[7] Hernndez Prez Yballa, Melo Rodrguez C. Irene. Fundamentos de la biomasa,


Fermentacin alcohlica-bioetanol. 2007.

[8]http://www.conabio.gob.mx/malezasdemexico/asteraceae/baccharis-
salicifolia/fichas/ficha.htm

[9] Utrilla Carrieri, J. Evaluacin de la Sobreexpresin de gnes del metabolismo central


de Escherichia coli etanolognica usando xilosa como fuente de carbono. Tesis para
optar ttulo de ingeniero. Instituto Tecnolgico de Tuxtla Gutirrez. Tuxtla Gutirrez,
Chiapas. 2004.

[10] Chacn Ovando S. L., Waliszewski K. N., Preparativos de celulasas comerciales y


aplicaciones en procesos extractivos. Veracruz, Mxico. 2005.

[11] VirtualPro, Revista virtual. I seminario taller biocombustibles-biodiesel-bioetanol.


Bogot, Colombia. 2007.

[12] Quintero Ramrez R. Uso de biomasa: Hidrlisis paso fundamental. Campinas, Sao
Paulo. 2008.

[13] Monsalve G. J. F., Medina de Perez V. I., Ruz Colorado A. A., Produccin de
etanol a partir de la cscara de banano y de almidn de yuca. Universidad de Colombia.
Colombia, Medelln. 2006

[14] Hernndez Bustos, C. I. Crecimiento y formacin de productos en cultivos


aerbicos y anaerbicos de Bacillus subtilis con glucosa, xilosa y celobiosa. Tesis para
optar ttulo de ingeniero. Instituto Tecnolgico de Zacatepec. Zacatepec, Mor. 2003.

[19] Abad Arranz E. Seleccin de levaduras autctonas para la elaboracin de vinos


tintos para bodegas y viedos de Trujillo S.L. Universidad Politcnica de Madrid,
Escuela tcnica superior de ingenieros agrnomos. Madrid, 2006.

[16] Vsquez H. J. y Dacosta O. Fermentacin alcohlica: una opcin para la


produccin de energa renovable a partir de desechos agrcolas. Universidad Nacional
Autnoma de Mxico. Federal, Mexico. 2007.

[17] Huerta Beristain G., Manipulacin del metabolismo central de Escherichia coli
para incrementar la productividad de etanol. Instituto de Biotecnologa, Universidad
Nacional Autnoma de Mxico. Cuernavaca, Mor. 2004.

[18] Doran M. P., Principios de ingeniera de los bioprocesos. Editorial acribia, S.A.
Espaa, 1998.

[19] Ruz leza H. A., Rodrguez Jasso R. M., Rodrguez Herrera, Contreras Esquivel
J.C. y Aguilar C. N. Diseo de biorreactores para la fermentacin en medio slido.
Revista Mexicana de Ingeniera Qumica, vol.6, nmero 001, Distrito Federal, Mxico,
2007.
45

[20] Mitchell D., Lonsane B., Durand R., Renaud S., Maratray J., Desgranges C.,
Crooke P., Hong K., Tanner R., Malaney G., General principales of reactor design and
operation for salid substrate cultivation. In Rolz (Ed.), Solid substrate cultivation.
Elsevier Applied Science. Amsterdam, 1992.

[21] Casas Lpez J. L. Produccin de lovastatina a partir de Aspergillus terreus en un


reactor de lecho fluidizado. Tesis doctoral. Universidad de Almeria, Facultad de
Ciencias Experimentales, Departamento de Ingeniera Qumica. Almeria, 2004.

[22] Merchuk, J.; Beer Sheva. Microbiologa Industrial. Israel. 2004.

[23] Marcilla Gomis A. Introduccin a las operaciones de separacin. Editorial


Compobell, S. L. Murcia, 1998.

[ 24] McCabe Warren L., Smith Julian C., Peter Harriot, Operaciones Unitarias en
Ingenira Qumica, Cuarta Edicin, Editorial McCraw-Hill, Mxico,1991.

[25] Treybal Robert E., Operaciones de transferencia de masa, Segunda Edicin,


Editorial McCraw-Hill. Mxico, 1998.

[26] Jstesten P., Paul G. C., Nienow A. W. y Thomas C. R. Dependence of mycelia


morphology on impeller type and agitation intensity. Biotechnol, Bioeng. 1996.

[27] Garca Arvalo A., Mendoza Contreras J. J., Nocedal J. Asociaciones vegetales de
los bosques del municipio de Guanacev, Durango. Instituto de ecologa A. C. Mxico.
2004.

[28] Almada M. Anlisis de la produccin de materias primas para la elaboracin de


bioetanol y biodiesel, y de estos biocombustibles, presente y esperada hasta 2020, en
pases potencialmente proveedores de chile. Chile. 2006.

[29] Fernndez Rojas M. Anlisis comparativo de polticas y legislaciones referentes a


bioenerga. Chile. 2006.

[30] Ochoa Martnes I., Miranda Herazo G. Bioetanol alcohol carburante. Colombia.
2006.

[31] Bransby I. D. Cellolosic biofuel technologies. Auburn University. 2007.

[32] Rhys T. D., Wallace E. T. Analysis of ethanol dry milling: Model description.
Agricultural Economics Department Purdue University. 2006.

[33] Andrea Grisales P., Andrs Rios L., Triana M., Diseo de un proceso de
produccin de etanol anhidro a partir de jugo de caa. Escuela de Ingeniera Qumica,
Universidad del valle. Colombia. 2000.

[34] Casas Lpez J. L. Produccin de lovatatina a partir de Aspejillus terreus en un


reactor de lecho fluidizado. Universidad de Almera, Departamento de Ingeniera
Qumica. Almera. 2004.
46

[35] Rueda Ferreiro A. Modelado y simulacin dinmica de una columana de


destilacin de etanol de la industria azucarra. Universidad Valladolid, Centro de
Tecnologa Azucarera. Burgos.

[36] Masera Cerutti O. Potenciales y viabilidad de uso de Bioetanol y biodiesel para el


transporte en Mxico. Mxico. 2006.

[37] G. Cerpa M. Produccin del etanol anhidro como aditivo para la gasolina a partir
de la caa de azcar de la regin del ro Huallaga. Universidad de Valladolid,
Departamento de Ingeniera Qumica y tecnologa del Medio Ambiente. Espaa,
Valladolid.

[38] Gonzales A., Valenzuela L. Sacharomyces cerevisiae. Universidad Autnoma de


Mxico, departamento de Gentica Molecular. Mxico. 2003.

[39] Holst Jorgensen B. Tecnologias clave para la energa en Europa. Departamento de


Riso National Laboratory. Madrid. 2005.

[40] Gonzales Roca E. Estudi funcional de la butanodiol deshidrogenasa (Bdh1p) de


Sacharomyces cerevisiae, aplicacions bioetecnolgiques a la industria cervecera. Tesis
Doctoral. BioUniversidad Autnoma de Barcelona, Departamento de Biologia
Molecular. Barcelona, Ballaterra. 2004

[41] Brbara Martnez B. La ruta de la protena quinasa C en Sacharomyces cerevisiae,


conexiones con el control del ciclo celular. Tesis Doctoral. Universidad de Valencia,
Departamento de Bioqumica y Biologa Molecular. Valencia. 2006.

[42] Garro C., A. O. Alcohol a partir de sorgo dulce, Sacarificacin y fermentacin.


Universidad Nacional del Nordeste, Facultad de Agroindustrias. Argentina. 2004.

[43] S. Kompala D. Maximizing ethanol production by engineered pentose-fermenting


Zymomonas mobilis. University of Colorado, Department of Chemical Engineering.
2001.

[44] Sadae Tano M. Batista Buzato J. Effect of the presence of initial ethanol on ethanol
production in sugar cane juice fermented by Zymomonas mobilis. Universidad de
Londrina, Departamento de Bioqumica. Londrina, Brasil. 2003.

[45] Quinteo L. O., Di Sciascio F. Aplicacin del filtro de kalman extendido a un


proceso de fermentacin alcohlica en continuo. Universidad Nacional de San Juan,
Instituto de Automtica. Argentina. 2005.

You might also like