Ao de la consolidacin del Mar de Grau

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERA

FACULTAD DE INGENIERA AMBIENTAL

LABORATORIO N01:
Calibracin del
micrmetro de ocular-
Medicin de los
microorganismos
Curso: Microbiologa Sanitaria II
Docente: Jorge Tello Cebreros
Alumno:
Cdigo: 20130060H
18/09/2014
 I. RESUMEN:

En el laboratorio realizamos mediciones que tienden a ser exactas, para

asegurarnos de ello tenemos que corroborar primeramente el estado en
que se encuentran los materiales para luego ajustarlos o calibrarlos
segn sus usos.

En el laboratorio es primordial poseer un microscopio y este debe estar

en buenas condiciones, en tanto debemos verificar ello para realizar la
calibracin.

Para realizar la calibracin usamos el micrmetro de platina y el

micrmetro de ocular, ya que con esas dos herramientas y con alguna
muestra de un microorganismo que en este caso usaremos una muestra
de algas de un estanque perteneciente a la facultad de Arquitectura de
la Universidad Nacional de Ingeniera, teniendo todo listo procedemos a
usar los micrmetros y superponer lo observado, encontrar una relacin
en sus medidas para luego tomar la muestra de algas y conlleva a
obtener mediciones de los microorganismos, teniendo estas mediciones
encontramos un error en la calibracin ya que tenemos diferentes
objetivos en el microscopio.

En el clculo del error, se comprueba si los microscopios estn

calibrados correctamente para poder usarlos correctamente.

En caso no pueda realizarse una correcta calibracin depender tanto

del microscopio por algn error de fbrica o el error humano.

II. INTRODUCCION:

pg. 1
 OBJETIVOS:

Realizar correctamente la medicin de las dimensiones de los

microorganismos con su respectivo error de medicin.

Realizar la calibracin correcta del micrmetro ocular respecto al

de la platina.

Saber calcular el error de medicin al medir las dimensiones de

los microorganismos.

FUNDAMENTO TEORICO

MICROSCOPIO:
Un microscopio es un aditamento mecnico creado en 1590 por Zacharias
Janssen y consiste en el acomodo de dos lentes cncavos que permiten ver
las cosas pequeas que existen y as es utilizado en trminos mdicos en
1665 cuando William Harvey lo usa para ver los capilares sanguneos. En
forma inmediata, fue utilizado por los cientficos para poder ver los seres
microscpicos, influenciando directamente sobre la salud y sobre la
industria, llegando hasta nuestros das. La estructura y funcionamiento del
microscopio es por refraccin fsica de la luz. Los ms modernos utilizan
componentes electrnicos y piezas ms sofisticadas para obtener una
resolucin ms clara.

Hoy en da existen variantes de los

microscopios, como:

Microscopio compuesto.

Microscopio ptico.

pg. 2
 Microscopios digitales.

Microscopios fluorescentes.

Microscopios electrnicos.

a) MICROSCOPIO PTICO:

Es un microscopio basado en lentes pticos. Tambin se le conoce

como microscopio de luz, (que utiliza luz o "fotones") o microscopio de
campo claro. El desarrollo de este aparato suele asociarse con los
trabajos de Anton van Leeuwenhoek. Aumenta el tamao de los objetos
que son realmente muy pequeos y que no se pueden ver a simple
vista, a su vez puede ser monocular, binocular entre otros

b) PARA QU SIRVE EL MICROSCOPIO?:

Por su estructura y funciones, el microscopio es usado en infinidad de

campos, desde la medicina, hasta la ciberntica. El microscopio juega un
papel muy importante en la
microbiologa en el
reconocimiento de
microorganismos dentro de
diferentes cuerpos u objetos.

Fue una herramienta

indispensable en la elaboracin
de las vacunas, con este
dispositivo, se observaron los
diminutos seres que componan
el virus, lo que lo llev a
desarrollar las tcnicas de la
vacuna, y de igual manera lo uso
para pasteurizar el vino y la
cerveza.

Posteriormente se estudiaron la tuberculosis, y los hongos, aprendiendo

los beneficios y daos que producen.

pg. 3
 c) PARTES DEL MICROSCOPIO PTICO:

- SISTEMA PTICO:

OCULAR: Lente situada cerca de ojo del observador, ampla la

imagen del objetivo.
OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen
de esta.
CONDESNADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la
preparacin.
DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el
condensador.
FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

- SISTEMA MECNICO:

SOPORTE: Mantiene la parte ptica. Tiene dos partes: el pie o base

y el brazo.
PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin.

pg. 4
 CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser
monocular, binocular.
REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al
girar, cambiar los objetivos.
TORNILLOS DE ENFOQUE: Macro mtrico que aproxima el enfoque
y micro mtrico que consigue el enfoque correcto.

- MICRMETRO OCULAR:

El micrmetro ocular consiste en una placa circular de vidrio que se

coloca entre las dos lentes del ocular de Huygens, en el diafragma, que
es donde se forma la imagen producida por el objetivo y donde est el
foco del ocular. Posee una escala
numerada, en este caso del 0 al
10 con 10 divisiones entra cada
nmero. Si colocamos
simultneamente ambos
micrmetros podremos asignar a
las divisiones del micrmetro
objetivo, un nmero de divisiones
del micrmetro ocular, por
ejemplo, a 10 divisiones del
objetivo (10 x 0,01 mm = 0,1
mm) le corresponden 13 del
micrmetro ocular. Conocida esta
equivalencia, sustituimos el
micrmetro objetivo por cualquier
preparacin que queramos medir, sin alterar las condiciones, bastar
contar las divisiones que ocupa del micrmetro ocular y efectuar un
simple clculo ya que sabemos que 13 corresponden a 0,1mm.

- MICRMETRO DE LA PLATINA:

Un micrmetro es simplemente un
portaobjetos de microscopio con
una finamente dividido escala
marcada en la superficie. En este
laboratorio, nuestra platina tena
10 divisiones donde cada una
meda 0.1mm.

pg. 5
 III. METODOLOGIA

Materiales

MICRMETRO DE LA PLATINA

MICROSCOPIO N 12

MUESTRA DE ESTANQUE DE
MICRMETRO DEL ARQUITECTURA: ALGAS
OCULAR
pg. 6
 PROCEDIMIENTO:

Muestras: Muestra de algas (estanque de arquitectura).

MICRMETRO DE PLATINA: En el microscopio se ven las rayas de color

blanco, de 0 a 10 es una divisin compuesta por 10 subdivisiones, cada
uno de 0.1mm, entonces el micrmetro de la platina mide 1mm.

MICRMETRO
DEL OCULAR: En el microscopio se ven las rayas negras, tiene 50
divisiones

Teniendo esas consideraciones pasamos a los pasos del procedimiento:

1. Colocar el micrmetro del ocular en el objetivo de nuestro
microscopio. Tener cuidado de colocarlo de tal manera que se pueda
ver los nmeros de manera correcta.

pg. 7
 2. Proceder a colocar el micrmetro de platina en el microscopio y
seguidamente proceder a calibrar el microscopio con el objetivo de
10X.
3. Hacer que las lneas del micrmetro ocular concuerden con las del
micrmetro ocular, y hacer lo mismo con el objetivo de 43X.
4. Superponer el micrmetro del ocular sobre el micrmetro de platina
para determinar el N de divisiones equivalentes de ambos
micrmetros. (Los clculos se mostraran ms adelante).
Calibracin del micrmetro ocular:
5. Determinar cuntas divisiones del micrmetro ocular coinciden con
las divisiones del micrmetro de platina. Con objetivo de 10x y 43x.

x ser divisin de platina y y ser la divisin del ocular.

Medicin de los microorganismos:

6. Con el micrmetro del ocular, se realiza la medida de
microorganismos, calculando el ancho y el largo tanto con el objetivo
de 10x y 43x.

7. Graficar los datos en papel milimetrado.

8. Mostrar la tabla de resultados.

IV. RESULTADOS

CLCULO, TABLA Y GRFICA DE RESULTADOS: Microscopio N 12

Calibracin del micrmetro ocular:

1. OBJETIVO 10x:

1 divisin de platina< 10 divisiones delocular

Dato:

Divisin de platina :0.1 mm=x

Divisin del ocular : y

pg. 8
 0.1
x=10 y y= =0.010 mm 10 ( factor de conversin ) .
10

2. OBJETIVO 43x:

1 divisinde platina< 43 divisiones del ocular

Dato:

Divisin de platina :0.1 mm=x

Divisin del ocular : y . x=43 y

0.1
y= =0.00232 mm 2.32 ( factor de conversin ) .
43

Medicin del microorganismo:

Cuerpo del microorganismo

ANCHO

LARGO

OBJETIVO 10x:

pg. 9
 Largo=4 divisiones del ocular=4 10 =40
Ancho=2 divisiones del ocular=2 10 =20

OBJETIVO 43x:

Largo=19 divisiones del ocular=19 2.32 =44.08

Ancho=10 divisiones del ocular=10 2.32 =23.20

Calculo del error

Se tomar como base el objetivo de 10x como valor real:

e(10 X )e(43 X )
% = 100%
e(10 x )

Error del largo:

4044.08
% = 100% = 10.2%
40

Error del ancho:

2023.2
% = 100% = 16%
20

TABLA DE RESULTADOS DEL LABORATORIO

pg. 10
 V. DISCUCIONES

El error encontrado de medicin de muchos de los microscopios es mucho

mayor a 2% sin embargo en algunos no es el caso, tanto largo como ancho
difieren en el error, algunos poseen un error menor al 2% en el ancho y un
error mayor en el largo, siendo el mismo microscopio.

Algunos resultados tienen errores muy grandes, como es el caso del

microscopio 7, cuyo funcionamiento segn el personal de laboratorio est en
buenas condiciones, por tanto no debera haber un error enorme.

VI. CONCLUSIONES :

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 El error del microscopio nmero 12 el cual hice uso, en el largo el error
nos dio de 10.2%. En el caso del ancho el error es de 16%, lo que se
concluye que no est dentro del rango admisible. por lo tanto est fuera
de los valores admisibles y se debe volver a realizar el laboratorio ya que
supera el 2%.

En el grfica Excel podemos notar que la pendiente de la recta de 10x es

menos con respecto a la de 43x, concluyendo que a mayor sea el
objetivo, menor ser la medida de una divisin del micrmetro ocular.

Concluimos que conociendo el tamao de los microorganismos podemos

saber qu tipo de filtro usar para el tratamiento de aguas.

Se concluye que los dems microscopios (todos) se encuentran fuero del

rango admisible bien en la medida del ancho o del largo, por lo tanto
debe volver a hacer el laboratorio con mayor precisin.

VII. RECOMENDACIONES:

Tener mucho cuidado con micrmetro del ocular y de la platina, ya que

son sumamente delicados al hacer uso de estos.

Verificar la calidad de cada microscopio y de sus objetivos al solicitar el

prstamo para no tener dificultades en el futuro.

Si ya encontr el alga con el objetivo de 10x, para pasar al objetivo de

43x no mueva el portaobjetos y cambie de objetivo ligeramente,
levantando y bajando el lente hasta encontrar el alga.

Diferenciar claramente el micrmetro del ocular y de la platina para su

correcto uso y calibracin.

Tener las precauciones al trabajar con lmparas ya que se calientan muy

rpido y algunas estn defectuosas lo cual puede ocurrir un corto
circuito.

Al calcular el error de calibracin necesitamos un microscopio patrn

para guiarnos y poder realizar esta medicin adecuadamente.

pg. 12
 VIII. BIBLIOGRAFA:

Pelczar, J, Reid R, Chan Ch. Microbiologa. 4 ed.Mxico: Mc Graw Hill;

1982 Temas utilizados (Cuestionario Bacterias, Hongos,
Protozoarios).

Ingeniera de acueductos y tratamiento de aguas - Hernando

Snchez Montenegro Temas utilizados (Cuestionario Filtracin y
filtracin por percolador).

Tratamiento y depuracin de las aguas residuales METCLAF & EDDY

Temas utilizados (FILTRACIN)

IX. ANEXOS

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 X. CUESTIONARIO:

1. Sealar el tamao relativo de los microorganismos:

Bacterias, hongos, protozoarios, algas y virus.
1
Bacterias: Las bacterias que se estudian ms a menudo en el
laboratorio miden aproximadamente 0.5 a 1.0 x 2.0 a 5.0 um
(micrmetros).
2
Hongos: Los cuerpos usualmente alargados o filamentosos miden de
5 a 10 um de grosor y por lo general ramificados.
3
Protozoarios: De dimetro tienen aproximadamente de 1 a 4 um
(dimetro mayor).
Virus: De tamao relativo de 20-300 nm.

2. Describa las principales caractersticas de bacterias,

hongos, protozoarios, algas, virus, rotferos y
microcrustceos.

pg. 14
 BACTERIAS:

El primer nombre de una bacteria corresponde al gnero y el

segundo la especie.
Las bacterias en un principio se clasificaron por su forma, la
tincin Gram y por sus necesidades de oxgeno, lo que se
complementaba con los caracteres bioqumicos y serolgicos. En
la actualidad se utiliza la gentica para establecer relaciones
fundamentales.
Las bacterias son procariotas, con ADN circular libre, ribosomas,
sin mitocondrias y una pared celular de peptidoglucano.

PROTOZOARIOS:

Los Protozoos incluyen parsitos intestinales y genitales, por

ejemplo, Entamoeba histoytica y Tricomonas vaginalis y parsitos
de la sangre y los tejidos por ejemplo Toxoplasma gandii y
parsitos del paludismo.

Los protozoos son unicelulares y tienen estructuras celulares

eucariotas. Todos tienen una etapa de trfozoito frgil y la mayora
tienen una forma qustica resistente.

Todos tienen signos vitales fuera del husped humano y la

mayora puede multiplicarse en el ser humano. La infeccin es por
ingestin, por inhalacin, por picaduras de insectos o por el
contacto sexual.

Sus ciclos de vida varan desde la transmisin directa del

trofozoito durante el coito (Trichomonas) o la eliminacin de
quistes en las heces y la ingestin Los protozoos incluyen
parsitos intestinales y genitales, por ejemplo, Entamoeba
histoytica y Tricomonas vaginalis y parsitos de la sangre y los
tejidos por ejemplo Toxoplasma gandii y parsitos del paludismo.

ROTFEROS:

pg. 15
 Filo de invertebrados acuticos, pluricelulares, de tamao pequeo,
generalmente microscpicos, provistos en la cabeza de una corona
de cilios que parece una rueda girando al moverse los cilios.

El nombre rotferos, que significa portadores de ruedas, proviene

precisamente de ese aparato rotador.

Son de las primeras formas de vida microscpicas que se estudiaron,

y se les conoca como animlculos rueda. Oscilan entre 40 m y 3mm
y comprenden unas 1.500 especies.

Los rotferos son muy numerosos en todo el mundo y se encuentran

principalmente en ecosistemas dulceacucolas, como charcas o lagos
de agua dulce, aunque tambin hay algunas especies marinas o
terrestres.

Se alimentan de otros microorganismos y unas pocas especies son

parsitas. Los rotferos presentan sexos separados, aunque los
machos son escasos y salvo en condiciones adversas se desarrollan
por partenognesis.

Clasificacin cientfica: los rotferos constituyen el filo Rotferos

(Rotifera), formado por 3 clases: Seisonceos, Bdeloideos y
Monogonontos.

VIRUS:
Los virus son entidades no celulares de muy pequeo tamao
(normalmente inferior al del ms pequeo procariota), por lo que
debe de recurrirse al microscopio electrnico para su
visualizacin.

Son agentes infectivos de naturaleza obligadamente parasitaria

intracelular, que necesitan su incorporacin al protoplasma vivo
para que su material gentico sea replicado por medio de su
asociacin ms o menos completa con las actividades celulares
normales, y que pueden transmitirse de una clula a otra.

Cada tipo de virus consta de una sola clase de cido nucleico

(ADN o ARN, nunca ambos), con capacidad para codificar varias
protenas, algunas de las cuales pueden tener funciones
enzimticas.

Otras son estructurales, disponindose stas en cada partcula

virsica (virin) alrededor del material gentico formando una
estructura regular (cpsida); en algunos virus existe, adems, una
envuelta externa de tipo membranoso, derivada en parte de la

pg. 16
 clula en la que se desarroll el virin y en parte de origen
virsico (protenas).

HONGOS:

La estructura es eucariota y, por ende, a diferencia de las

bacterias procariotas, los hongos tienen un ncleo con una
membrana nuclear, y el citoplasma contiene mitocondrias,
aparato de Golgi, lisosomas y retculo endoplasmtico.

La morfologa consiste en pequeas levaduras redondas o mohos

filamentosos con un micelo de hifas. Algunos hongos son dimorfos
con una forma de levadura en los tejidos y una forma miceliar en
el medio ambiente.

Todos los hongos se reproducen en forma asexuada con clulas

haploides que se dividen mediante mitosis para formar esporas.

Los hongos imperfectos, en los que slo se conoce la replicacin

asexual, incluyen algunos microorganismos patgenos humanos.

La reproduccin sexual mediante meiosis constituye la base de la

clasificacin y la denominacin definitiva.

Los microorganismos patgeno primarios son hongos que pueden

infectar a huspedes anormales.

Los microorganismos patgenos oportunistas slo pueden infectar

a huspedes anormales con las defensas alteradas.

Los hongos producen enfermedad mediante micotoxinas,

hipersensibilidad o infeccin invasiva con lesin hstica.

3. Por qu es importante conocer el tamao de los

microorganismos? Explique.

Conociendo el tamao de los microorganismos podemos

elaborar papeles o membranas de filtro que retengan
bacterias, algas, por ejemplo para el tratamiento de
determinada aguas.
4
Se sabe que la filtracin es la etapa de la purificacin que
tiene por objeto eliminar del agua las materias en
suspensin, microorganismos, etc. Es ah en donde el

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 tamao de los microorganismos es indispensable para
saber qu tipo de filtracin hacer, el material del filtro entre
otros.

El tamao microscpico de los microorganismos est

determinado genticamente, y de las condiciones
ambientales. Por lo general, a ms tamao hay una mayor
complejidad en su estructura, y por lo tanto mayor funcin.
Adems determina algunas propiedades biolgicas, de su
ecologa y su evolucin. Entre ellos tenemos a las bacterias,
virus y protozoarios.

En la lucha contra la contaminacin tambin se ha

encontrado aplicacin a distintos tipos de microorganismos
capaces de metabolizar y degradar determinadas sustancias
contaminantes, gracias al tamao podemos clasificarlos.

El tamao de los microorganismos est muy relacionado

con la relacin superficie-volumen. O sea, cuanto menos
sea el radio mayor ser esta relacin. Esto significa que el
pequeo tamao de las bacterias condiciona un mayor
contacto directo con el medio ambiente inmediato que los
rodea, lo que se traduce en que reciben las influencias
ambientales de forma directa.

Podemos hacer una clasificacin de los microorganismos

segn su tamao, viendo de que formas pueden
contribuirnos con sus propiedades.

4. Describa las aplicaciones prcticas referentes a la

informacin sobre la medicin de microorganismos.

a) Proceso de filtracin de tratamiento de agua.

b) Proceso de filtracin mediante membrana.
c) Proceso biolgico de tratamiento de aguas
residuales: Filtro percolador, Wetland.
d) Mtodo de filtro de membrana (determinacin de
coliformes).

a) 5La filtracin se usa para preparar el agua residual para procesos de

tratamientos posteriores o para su utilizacin directa como agua con
un grado de clarificacin muy elevado. Puede aplicarse directamente
al efluente de planta de un tratamiento biolgico, o a continuacin

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 del proceso coagulacin sedimentacin, segn el grado de
clarificacin requerido.

Procesos de filtracin en las plantas de tratamiento de agua En el

proceso de filtracin el agua residual es roseada sobre la piedra y se
deja que se filtre a travs del lecho, este filtro consiste en un lecho
formado por un medio sumamente permeable al que los
microorganismos se adhieren y a travs del cual se filtra el agua
residual. El tamao de las piedras de que consta el medio filtrante
est entre 2.5 10cm de dimetro, la profundidad de estas vara de
acuerdo al diseo particular, generalmente de 0.9 2.4m con un
promedio de profundidad de 1.8m.

b) 6El concepto del filtro percolador naci del uso de los filtros de
contacto, que eran estanques impermeables rellenos con piedra
machacada. En su funcionamiento, el lecho de contacto se llenaba
con el agua residual desde la parte superior y se dejaba que se
pusiese en contacto con el medio durante un corto perodo de
tiempo. El lecho se vaciaba a continuacin y se le permita que
reposase antes de que se repitiese el ciclo. Un ciclo tpico exiga 12
horas de las cuales haba 6 horas de reposo. Las limitaciones del filtro
de contacto incluyen una posibilidad relativamente alta de
obturaciones, el prolongado perodo de tiempo de reposos necesario,
y la carga relativamente baja que poda utilizarse" En el filtro
percolador el agua residual es roseada sobre la piedra y se deja que
se filtre a travs del lecho, este filtro consiste en un lecho formado
por un medio sumamente permeable al que los microorganismos se
adhieren y a travs del cual se filtra el agua residual. El tamao de
las piedras de que consta el medio filtrante est entre 2.5 10cm de
dimetro, la profundidad de estas vara de acuerdo al diseo
particular, generalmente de 0.9 2.4m con un promedio de
profundidad de 1.8m. Ciertos filtros percoladores usan medios
filtrantes plsticos con profundidades de 9 12m. - Wetland La
importancia de los wetland ha variado con el tiempo. Los wetland son
zonas de transicin entre el medio ambiente terrestre y acutico y
sirven como enlace dinmico entre los dos. El agua que se mueve
arriba y abajo del gradiente de humedad, asimila una variedad de
constituyentes qumicos y fsicos en solucin, ya sea como detritus o
sedimentos, estos a su vez se transforman y transportan a los
alrededores del paisaje. Los wetland proveen sumideros efectivos de
nutrientes y sitios amortiguadores para contaminantes orgnicos e
inorgnicos. Esta capacidad es el mecanismo detrs de los wetland

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 artificiales, tambin denominados wetland, para simular un humedal
natural con el propsito de tratar las aguas residuales de empresas y
municipios. La solucin biotecnolgica consiste en la instalacin de
wetland artificiales que actan como filtros naturales. Ubicados entre
la planta y los recursos acuticos (ros, lagos, lagunas), estos
sistemas, adems de no necesitar mantenimiento ni consumir
energa elctrica, cuestan menos que la cuarta parte de un sistema
de tratamiento tradicional.

c) Mtodo de filtro de membrana (determinacin de coliformes) Los

filtros de membrana con profundidad ordinaria contienen poros
tortuosos que capturan microorganismos atrapndolas de forma
aleatoria. El resultado es que se capturan fracciones de
microorganismos en el interior (intersticios) de la membrana y por
tanto, no se puede utilizar para su observacin en superficie por
microscopa de luz o microscopa electrnica de barrido. En contraste,
los filtros de policarbonato contienen poros cilndricos uniformes,
preferencialmente embebidos en la membrano, permitiendo as una
distribucin uniforme de la muestra en un plano a travs de la
superficie completa de la membrana. Por tanto, todas las muestras
son capturadas en una superficie plana, uniforme y sin defectos. La
precisin en el tamao de los poros en una estrecha distribucin
asegura una separacin adecuada, o fraccin de las muestras por su
tamao. Al estar libres de contaminantes, estas pantallas micro
porosas son biolgicamente inertes, ofreciendo excelente resistencia
qumica y estabilidad trmica. Proveen una resistencia superior y
adsorcin del sustrato prcticamente nula. Estos factores combinados
con las capacidades nicas de las membranas de policarbonato, las
hacen ideales para una serie de aplicaciones en LM y SEM, tales
como: Anlisis de partculas en el aire (incluyendo asbestos),
quimiotaxis, citologa, histologa, paleontologa, parenterales y
anlisis de aguas para asbestos y otros agentes inorgnicos en
suspensin.

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