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As transies de absoro implicam uma maior mudana na energia dos que as transies
que ocorrem no processo de emisso, pois nesteas ocorre um relaxamento vibratrio no
estado excitado pelo que o eletro relaxa s a partir do nvel vibratrio do solo v=0. Este
fenmeno faz com que as transies verficadas no processo de emisso tenham uma
menor energia e consequentemente maior comprimento de onda do na absoro.

Para fluorforos relativamente grandes contendo mais de 30 tomos, como o orgnico

molculas de corante geralmente usadas em espectroscopia de fluorescncia e imagens,

muitas

vibraes normais de freqncias diferentes so acopladas transio eletrnica.

Alm disso, colises e interaes eletrostticas com molculas de solventes circundantes

alargar as linhas de transies vibracionais . Alm disso, cada vibrao

o subnvel de cada estado eletrnico superps sobre ele uma escada de estados rotativos

que so significativamente ampliados por causa de colises freqentes com molculas

solventes,

o que dificulta seriamente a rotao. Isso resulta em um quasicontinuum de estados

superposto em cada nvel eletrnico. A populao dos nveis em contato com

as molculas solventes termalizadas so determinadas pela distribuio de Boltzmann. Dentro

A imagem mecnica quntica, os nveis vibratrios e as funes das ondas so as de

osciladores harmnicos qunticos e rotores rgidos (com algumas correes para rotao-

acoplamento de vibrao e distoro centrfuga). O potencial anharmnico mais realista (por

exemplo, o potencial Morse) descrevendo o

Em cada estado eletrnico normalmente existe dinmica vibratria diferente. Isto

quando ocorre a excitao de um eletro de orbital HOMO para uma orbital LUMO, o
espao da distrbuio de eletres aumenta e a densidade de eletres torna-se mais difusa
e tambm por vezes mais polarizvel. Dado esta situao o comprimento de ligao entre
dois tomos de uma molcula diatmica maior e a fora da ligao mais fraca
eletronicamente. No caso se existir um vnculo mais fraco, a frequncia das vibraes
menor, ao passo que existe uma maior extenso espacila da curva potencial de energia.
. At room temperature the molecule generally starts from the n 0 vibrational level of the
ground electronic state as the vibrational energy will normally be 10003000 cm1 , many times
the thermal energy kT, which is about 200 cm1 at room temperature.

. temperatura ambiente, a molcula geralmente comea a partir da vibrao n 0

nvel do estado eletrnico terrestre, pois a energia vibratria ser normalmente

1000-3000 cm? 1

, muitas vezes a energia trmica kT, que de cerca de 200 cm? 1 em

temperatura do quarto.

n contrast, pure rotational transitions require energies in the range of 100 cm1 , that is, higher
excited rotational levels are occupied at room temperature.

Em contraste, as transies rotacionais puras exigem energia no

intervalo de 100 cm? 1

, isto , nveis de rotao excitados so ocupados na sala

temperatura. Aps a absoro de um fton da energia necessria, a molcula

faz uma chamada transio vertical para o estado eletrnico excitado. A ocorrncia de

As transies verticais na curva de energia potencial so explicadas pelo Franck-Condon

princpio e aproximao de Born-Oppenheimer. TThe Born-Oppenheimer

A aproximao baseada no fato de que a massa do proto ou do nutron

aproximadamente

1870 vezes o de um eltron e que os eltrons se movem muito mais rpido que os ncleos.
Portanto,

movimentos eletrnicos vistos desde a perspectiva das coordenadas nucleares

ocorrem como se o nucleico fosse fixado no lugar. Aplicando o Born-Oppenheimer

aproximao das transies entre os nveis eletrnicos de energia, levou Franck e

Condon para formular o princpio de Franck-Condon. Classicamente, o Franck-Condon

princpio a aproximao de que uma transio eletrnica mais provvel que ocorra

sem mudanas na posio dos ncleos na entidade molecular e sua ambiente. A formulao
mecnica quntica deste princpio que a

A intensidade de uma transio vibratria proporcional ao quadrado da integral de

sobreposio

entre as funes de ondas vibracionais dos dois estados que esto envolvidas na

transies. Em outras palavras, as transies eletrnicas so essencialmente instantneas

em comparao com a escala de tempo de movimentos nucleares. Portanto, se a molcula

para se mudar para um novo nvel de vibrao durante a transio eletrnica, esta nova
vibrao

o nvel deve ser instantaneamente compatvel com as posies nucleares e os momentos de

o nvel vibracional da molcula no estado eletrnico de origem. No

imagem semiclsica de vibraes de um simples oscilador harmnico, o necessrio

podem ocorrer condies nos pontos de rotao, onde o momento zero. Porque a
configurao eletrnica de uma molcula muda aps a excitao

(Figura 1.6b) os ncleos devem se mover para se reorganizar para a nova configurao
eletrnica,

que instantaneamente configura uma vibrao molecular. Esta a razo pela qual

Transies eletrnicas no podem ocorrer sem dinmicas vibratrias. Aps a excitao

levou a uma transio para um estado de no-equilbrio (estado de Franck-Condon), a

abordagem

ao equilbrio trmico muito rpido em solues lquidas temperatura ambiente, porque

uma

grande molcula, como um fluorforo, experimenta pelo menos 1012 colises por segundo

com molculas de solvente, de modo que o equilbrio atingido em um tempo da ordem de

um

picossegundo. Assim, a absoro praticamente contnua em toda a absoro

banda. No estado excitado eletrnico, as molculas rapidamente se relaxam nas vibraes

mais baixas

nvel (regra de Kasha ?? s). Dependent on their fluorescence quantum yield they can then
decay to the electronic ground state via photon emission. The FranckCondon principle is
applied equally to absorption and to fluorescence. Kasha s rule states that emission will
always occur from the lowest lying electronically excited singlet state S1,n0.

Dependendo do seu rendimento quntico de fluorescncia, eles podem ento

Decorrer para o estado fundamental eletrnico via emisso de ftons. O Franck-Condon

O princpio aplicado igualmente absoro e fluorescncia. Os estados da regra de Kasha

Essa emisso sempre ocorrer a partir do singlete eletronicamente excitado eletronicamente

estado S1, n0. A aplicabilidade do princpio de Franck-Condon em absoro e

A emisso, juntamente com a regra de Kasha, leva simetria do espelho da absoro

e o espectro de fluorescncia de molculas de corantes orgnicas tpicas (Figura 1.7a). Devido

perda de energia de excitao vibracional durante o ciclo de excitao / emisso

a emisso de fluorescncia sempre ocorre em menor energia, ou seja, deslocada de forma

espectral
(o chamado deslocamento de Stokes). A mudana de Stokes, com o nome do fsico irlands
George. G. Stokes, representa a base para a alta sensibilidade da espectroscopia de
fluorescncia

em comparao com outros mtodos espectroscpicos, porque a disperso elstica do

luz de excitao (Rayleigh-scattering) pode ser eficientemente suprimida usando o apropriado

filtragem.

Absorption and Emission of Ligh

Como os fluorforos desempenham o papel central na espectroscopia de fluorescncia e na

imagem, ns

comear com uma investigao de suas mltiplas interaes com a luz. Afluorophore

um componente que faz com que uma molcula absorva energia de um comprimento de
onda especfico e

ento re-remita energia em um comprimento de onda diferente, mas igualmente especfico. O

montante e

O comprimento de onda da energia emitida depende do fluorforo e do produto qumico

ambiente do fluorforo. Os fluorforos tambm so denotados como cromforos,

Historicamente, a parte ou frao de uma molcula responsvel por sua cor. Dentro

Alm disso, o cromforo de denotao implica que a molcula absorve a luz enquanto

fluorforo significa que a molcula, da mesma forma, emite luz. O termo guarda-chuva usado

em emisso de luz luminescncia, enquanto a fluorescncia denota transies permitidas

com uma vida na faixa de nanosegundos de estados de singlete excitados mais altos para
menos

molculas. Abaixo de um comprimento de onda de 200 nm, a energia de um fton nico

suficiente para

ionizar molculas. Portanto, a decomposio fotoqumica mais provvel de ocorrer

quando compostos insaturados, onde todas as ligaes so formadas por s-eltrons, so

irradiado com energias de ftons As ligaes duplas e triplas tambm utilizam

p-eltrons, alm de um enlace s para ligao. Em contraste com os eltrons s, que

so caracterizados pela simetria rotacional de sua funo de onda em relao a

a direo da ligao, os eltrons p so caracterizados por uma funo de onda com um n

no ncleo e simetria rotacional ao longo de uma linha atravs do ncleo. p-bonds. Acima de
200 nm, apenas as duas transies de energia mais baixas, ou seja, n! p e p! p
so alcanados como resultado da energia disponvel nos ftons. Quando a amostra

as molculas esto expostas luz com uma energia que corresponde a uma possvel

transio dentro da molcula, parte da energia da luz ser absorvida

O eltron promovido para um orbital de energia mais alta. Como uma regra simples,
emergeticamente favorecida

A promoo de eltrons ser do orbital molecular ocupado mais alto (HOMO)

geralmente o estado solitrio single, S0, para o menor orbital molecular desocupado

(LUMO), e as espcies resultantes so chamadas de estado excitado de singlet S1.portanto,

provvel que

Os fluorforos com absoro e emisso de longo comprimento de onda mostraro menos

calor

e estabilidade fotoqumica, devido a reaes com molculas solventes, como dissolvido

oxignio, impurezas e outros fluorforos.

Os fluorforos com ligaes duplicadas conjugadas (corantes de polimetina) so

essencialmente

planar, com todos os tomos da cadeia conjugada que se encontram em um plano comum
ligado por

s-bonds. Os eltrons p, por outro lado, tm um n no plano da molcula e

formar uma nuvem de carga acima e abaixo deste plano ao longo da cadeia conjugada

(Figura 1.2). As bandas visveis para corantes de polimetria surgem de transies eletrnicas

envolvendo os p-eltrons ao longo da cadeia de polimetina. O comprimento de onda destes

bandas depende do espaamento dos nveis eletrnicos. A absoro de luz por

fluorforos tais como corantes de polimetina podem ser entendidos semiquantitativamente

por

aplicando o modelo de livre-eltrons proposto por Kuhn. O arranjo de

alternar ligaes duplas simples em uma molcula orgnica geralmente implica que a

Os eltrons p so deslocalizados sobre a estrutura do sistema conjugado. Como estes

Os eltrons p so mveis em todo o esqueleto do tomo de carbono que contm a alternncia

dupla ligao, um modelo terico muito simples pode ser aplicado a esse sistema

a fim de explicar a energia desses eltrons na molcula. Se algum fizer o. Suposio

aparentemente drstica de que os vrios eltrons p que compem o sistema

no so interagindo. estrutura, eles se espalham, minimizando a repulso entre

eles), ento pode-se ver a energia desse sistema como resultado do simples
montagem mecnica quntica de nveis de energia de um eltron apropriados para o

partcula no modelo de caixa. Neste caso, considera-se a energia potencial do

O eltron constante ao longo do comprimento da caixa molecular e depois aumenta

at o infinito em cada extremidade da poro conjugada da molcula. Assim, todos os laos ao

longo desta cadeia podem ser

considerado equivalente, com uma ordem de ttulos de 1,5, semelhante s ligaes C? C em

benzeno.

Supondo que a cadeia conjugada estende aproximadamente um comprimento de ligao para

o

esquerda e direita alm dos tomos de nitrognio terminais, aplicao do Schroedinger

A equao para este problema resulta em expresses bem conhecidas para as funes de onda

e energias, a saber: Cada funo de onda pode ser referida como um orbital molecular, e seus
respectivos

a energia a energia orbital. Se as propriedades de rotao do eltron forem tomadas em

conta juntamente com a invocao ad hoc do princpio de excluso de Pauli, o modelo

ento refinado para incluir nmeros qunticos de rotao para o eltron (), juntamente com
o

restrio de que no mais de dois eltrons podem ocupar uma determinada funo ou nvel de
onda,

e os nmeros qunticos de rotao dos dois eltrons que ocupam um determinado nvel de
energia

so opostos (gire e gire para baixo). A probabilidade de uma molcula mudar o seu estado pela
absoro ou emisso de um fton

depende da natureza das funes de onda dos estados inicial e final, como

fortemente leve pode interagir com eles e com a intensidade de qualquer luz incidente. o

a probabilidade de uma transio ocorrer comumente descrita pela transio

fora. Para uma primeira aproximao, as foras de transio so regidas pela seleo

regras que determinam se uma transio permitida ou no permitida. No clssico

Teoria da absoro de luz, a matria consiste em uma srie de cobranas que podem ser
definidas em

movimento pelo campo eletromagntico oscilante da luz. Aqui, o dipolo eltrico

Os osciladores colocados em movimento pelo campo de luz possuem caractersticas naturais

especficas, isto ,

freqncias, ni, que dependem do material. Quando a freqncia da radiao

perto da freqncia do oscilador, ocorre a absoro e a intensidade da radiao. diminui ao
passar pela substncia. A intensidade da interao conhecida

como a fora do oscilador, fi, e pode ser pensado como caracterizando o nmero de

eltrons por molcula que oscilam com a freqncia caracterstica, ni. Assim sendo,

As medidas prticas da fora de transio so geralmente descritas em termos de fi.

A fora do oscilador de uma transio um nmero adimensional que til para

comparando diferentes transies. Por exemplo, uma transio totalmente permitida

O quantum mecanicamente dito ter uma fora de oscilador de 1,0. Experimentalmente,

a fora do oscilador, f, est relacionada intensidade de absoro, isto , rea

sob uma banda de absoro plotada versus a frequncia:

A descrio mecnica quntica, que a mais satisfatria e completa

descrio da absoro de radiao pela matria, baseada em onda dependente do tempo

mecnica. Aqui, uma transio de um estado para outro ocorre quando a radiao

campo conecta os dois estados. Na mecnica ondulatria, a conexo descrita pela

momento de dipolo de transio.

The transition dipole moment will be nonzero whenever the symmetry of the ground and
excited states differ. For example, ethylene (CH2CH2) has no permanent dipole moment, but
if yG is a p-molecular orbital and yE is a p-molecular orbital, then mpp is not zero. The direction
of the transition moment is characterized by the vector components: mx h iGE; my D E GE ,
and mz h iGE. It has to be pointed out that for most transitions the three vectors are not all
equal, that is, the electronic transition is polarized. The ethylenep ! p transition, for example, is
polarized along the CC double bond. The magnitude of the transition is characterized by its
absolute-value squared, which is called the dipole strength, DG

Uma peculiaridade dos espectros de absoro de corantes orgnicos em oposio aos

espectros atmicos

a largura da banda de absoro, que geralmente cobre vrias dezenas de nanmetros.

Isso fcil de entender lembrando que uma molcula de corante tpica composta por vrios

dezenas de tomos, dando origem a mltiplas vibraes do esqueleto. Essas vibraes

juntamente com os seus toques densamente cobrem o espectro entre algumas ondas

nmeros e 3000 cm? 1

Ou seja, aps a excitao eletrnica, o eltron

mudanas de densidade, que est associada a uma alterao no comprimento da ligao.
Quantum

mecanicamente, isso significa que as transies ocorreram de forma eletrnica e

estado fundamental vibratrio S0 da molcula para uma via eletrnica e vibracional

estado excitado S1. Isso resulta em amplos espectros de absoro como os mostrados para o

fluorescein dianion na Figura 1.3 e depende da quantidade de vibrao

subnveis espaados em hn (n ), com n 0, 1, 2, 3, ..., so alcanados e o que o

Os momentos de transio desses subnveis so.