Cdigo:

Centro Nacional de Asistencia Tcnica a la Industria ASTIN 9230-FP-F-322

Versin: 2
Cromatografa HPLC

1. IDENTIFICACIN DEL INSTRUMENTO:

Programa de Formacin: Ficha de caracterizacin:
Nombre de la Gua: Cdigo de la Gua:
Nombre de aprendices:

Nombre del Instructor: Jaime Alberto Glvez Narvez

Ciudad y fecha:

2. PRESENTACIN E INSTRUCCIONES PARA EL DILIGENCIAMIENTO:

Seor/a Aprendiz:
Se debe presentar quince das despus de realizada la prctica. El informe puede ser elaborado en
computador o a mano siempre que sea letra legible y organizada.

3. CUERPO DEL INSTRUMENTO:

Introduccin.

La cromatografa HPLC permite determinar las caractersticas cualitativas y cuantitativas de un

compuesto, en esta prctica determinamos la concentracin de cido ascrbico tomando muestra
de tableta masticable de vitamina C comercial, la fase que se utiliz fue inversa utilizando una
columna Raptor C18, Se prepararon las soluciones, buffer, estndar y la muestra y estas fueron
depositadas en el equipo, donde se profundiz los conocimientos del funcionamiento del equipo.

Resultados y Discusin.

Grafica 1. Curva de valoracin

Curva de valoracin
20
18 y = 3.0171x + 3.7876
16.9991 17.432
16 R = 0.9259
14 14.5045
12
rea

10
8.8261
8
6 6.4329
4
2
0
0 1 2 3 4 5 6
Concentracin
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Cromatografa HPLC

Tabla 1. Datos para la curva de valoracin

Concentracin rea del pico

1 6,4329
2 8,8261
3 14,5045
4 16,9991
5 17,432

Muestra: 0.75 ml
Concentracin: 2000 ppm

= 0,3802 + 3,7816

9,9302 = 0,5802 + 3,7816

9,9302 3,7816
=
0,5802

C. Muestra = 10.58

1 1 = 2 2

2 2
1 =
1

15 100
1 = = 857.1
1,75

857.1
500 = 428 mg de cido ascrbico
1000

La curva e valoracin se realiz teniendo en cuenta las concentraciones de las disoluciones (5,2
ppm, 10,4 ppm, 15,6 ppm, 20,8 ppm, 26,0 ppm). Se analiz una muestra de vitamina C, Redoxn,
que contena 1000mg/l de vitamina C.

El valor de r2 para el cido ascrbico presente en la vitamina C, representa el margen de error que
tiene nuestro mtodo matemtico para calcular la concentracin a partir del rea bajo la curva.
La columna tiene una polaridad ms parecida a la del cido ascrbico, por eso este sale antes; al
adicionarle la muestra problema, la columna retiene momentneamente al resto de componentes de
la vitamina C, esto se debe a su polaridad y permite el paso del cido ascrbico con el disolvente.
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Cromatografa HPLC

Conclusiones.

De acuerdo a lo realizado en la prctica y los resultados obtenidos, se concluye que el cido

ascrbico presente en la muestra de vitamina C, tiene una concentracin de 15 mg/l de cido
ascrbico.

La ecuacin de la recta arroj un valor de 0,9259, esto nos indica que hubo un error en la
preparacin de las dilusiones.

Referencias.
(HPLC), I. (2017). Identificacin y cuantificacin de parabenos por Cromatografa de Lquidos de
Alta Resolucin (HPLC). [online] Farmupibi.blogspot.com.co. Available at:
http://farmupibi.blogspot.com.co/2011/07/identificacion-y-cuantificacion-de.html [Accessed 9
Oct. 2017].

Scribd. (2017). Determinacin de Vitamina C Por HPLC. [online] Available at:

https://es.scribd.com/document/221023396/Determinacion-de-Vitamina-C-Por-HPLC [Accessed
9 Oct. 2017].

4. PRODUCTO (S):

Observaciones y/o recomendaciones: Entregar quince das despus de realizada la prctica, disear tablas
para presentar todos los datos y resultados de clculos.