Revelador. Solucién dcido sulf alcohol. Solueién de referencia. Preparar una solucién de In SRef correspondiente al 0.2 por ciento (m/v) en cloroforme, Preparacién de la muestra. Preparar ona solucién de la muestra al 0.2 por ciento (ty) en cloroformo. Procedimiento. Aplicar en Ia cromatoplaca, por separado, 2 wL de la preparacién de referencia y de la preparacién de la muestra, Desarrollar el eromatograma; sacar la placa de fa mara, dejar secar al aire, examinar bajo lémpara de luz UV 1 365 nm y observar la fluorescencia producida después de unos minutos, Posteriormente rociar el revelador y obsetvar el color producido. Interpretacion. La mancha principal obtenida en el ‘cromatograma con Ta preparacidn de la muestra corresponde fen posicién, fluorescencia y color a la obtenida en el croma- tograma de la preparacién de referencia y tiene una estabili- dd similar por un periodo de por lo menos 20 min después de rociar con el revelador. ico al 10 por ciento en MGA 0451. PRUEBA LIMITE DE HIERRO Esta prueba esti disefiada para demostrar el contenido de hierro tanto en su forma férriea como ferrosa y las canti- dades encontradas no exceden el limite para hierro especi- ficado en la monografia individual. Se basa en la reaccién 4quimica colorida que ocurre, entre el hierro contenido en la sustancia que se analiza y una solucién de tiocianato de nonio, bajo condiciones establecidas. La determinacién se realiza por comparacién visual de la preparacién de la ‘muestra con una solucién de control preparada a partir de une solucién de referencia de hierro, Sino se especifica otra cosa en la monografia individual usar el método A METODO A Preparacién de referencia de hierro concentrada. Disolver 863.4 mg de sulfato fértico de amonio, [FeNH,(S0,)2- 12H,0] en agua, agregar 10 mL de solucién de acide sulfirico 2N y diluir con agua a 100 mL. Tomar una alicuota de 10 mL. de ésta solucién, colocar en un matraz volumétrico de 1.000mL, agregar 10 mL. de solucién de Acido sulfirico 2'N, diluir con agua hasta llevar al aforo y mezelar. Esta solucién contiene el equivalente a 0.01 mg (10 ug\inL de hierro, Solucién de tiocianato de amonio. Pesar 30 g de tiocianato de amonio, pasar a un matraz volumétrico de 100 mL. y llevar al aforo con agua, Preparacién de referencia de hierro diluida. Pasar una alicuota de | mL de la preparacién de referencia de hierro (10 pg de Fe), a un tubo de Nessler de 50 mL, diluir con ‘agua a 45 mL, agregar 2 mL de dcido clorhidrico y mezelar. Métedos Generales de Andlisis 389 Preparacién de la muestra. Usar la solucién preparada como se indica en la prueba para hierro en la monografia individual, o caleular la cantidad, en gramos, de la muestra en andlisis por medio de la formula: 1.0/ (1 000 4) Donde: L= Limite de hierro en por ciento para la muestra en anilisis Disolver y diluir con agua hasta 45mL en un tubo de Nessler. Agregar 2 ml. de acide clothidrico y mezclar Procedimiento. Agregar a cada uno de los tubos de muestra y de referencia 50 mg de cristales de persulfato de amonio, 3 mL. de solucién de tiocianato de amonio y mezelar, el color desarvollado en la preparacién de la muestra no es més intenso que el desarroliado en fa preparacién de referencia, METODO B Solucién de Acido citrico al 20 por ciento (miv); dcido mercaptoacético (écido tioglicdlico); solucién de amonio 10M. Procedimiento. Disolver la cantidad de sustancia en andlisis cen 10 mL de agua, 0 usar 10 mL de la solucién indicada en la monografla, pasar a un tubo de Nessler. Agregar 2 mL de solucién de éeido cltrico al 20 por ciento (avy) y 0.1 mL. de Acido mercaptoacético, mezclar alcalinizar con solucién de amonio 10 M, diluir a 20 mL. con agua, dejar reposar durante S min, Cualquier color producido no es més intenso que el produeido por 10mL de una preparacion de hierro (1 ppm Fe) uatada de manera similar. MGA 0455. PRUEBA DE ABSORCION DE HIERRO EN HIERRO DEXTRANO Absoreién en el sitio de inyeceién, Preparar el sitio de inyeccién sobre el rmisculo semitendinoso de una pierna de ‘cada uno de dos conejos de 1.5 kg a 2.5 kg de peso. Rasurar el pelo y desinfectar fa piel Tnyectat en cala cungjo OA mL/ky de pes corporal que contengan 20mg de hierro. Usar una jeringa de 2mL. provista de una aguja hipodérmica del numero 20mm x 38mm. Insertar la aguja en el extremo distal del masculo semitendinoso, pasando a través del sartorio y entrando al vasto medial. El dngulo de insercién de la aguja es tal que se usa su longitu total Alojar los conejos en jaulas separadas. Siete dias después de la inyeccién sacrificar y disecar las piemas tratadas para examinar los mésculos. El tejido debe hallarse s6lo ligeramente coloreado y no deben observarse depésitos color café oscuro de compuestos de hierro no absorbidos, ni evidencia de escurrimiento a lo largo de los planos fasciaes. MGA 0451. PRUEBA LIMITE DE HIERRO