1.

Si se quiere determinar un analito cuya concentracin en el extracto de la muestra, se espera que est
comprendida en un margen de 350 a 550 mg/L, se podran preparar e inyectar en el cromatgrafo 4 disoluciones
patrn que adems contuvieran una misma concentracin de patrn interno (p.i.), con las siguientes
concentraciones:
2. En un cromatograma, los tiempos de retencin de los picos A, B y C, donde A es una sustancia no
retenida, son 0.84, 10.60 y 11.08 minutos, respectivamente.

a) Calcular los tiempos de retencin corregidos y los factores de capacidad para B y C.

b) Sabiendo que los anchos de banda en la base para B y C son 1.21 y 2.10 segundos respectivamente,
calcular la resolucin entre estos dos picos.
3. Se obtuvieron los siguientes datos por cromatografa de gases con una columna cromatogrfica de 1.25 m

tr, min w, min Concentracin, rea

mg/L
aire 0.395
isopropilamina 4.59 0.365 1.0 20240
n-propilamina 4.91 0.382 2.5 40530

Calcular:

a) El factor de capacidad o retencin para cada amina

b) El factor de selectividad
c) El nmero de platos y la altura de plato para la n-propilamina
d) Es una separacin eficiente? Justifique.
e) Si se utiliza isopropilamina como patrn interno en una concentracin de 1 mg/L y en un cromatograma de
una muestra se obtienen reas de 23220 para la isopropilamina y de 35421 para la n-propilamina, cul ser la
concentracin de n-propilamina en dicha muestra?
4. En un laboratorio de control de calidad se quiere poner a punto un mtodo de anlisis por HPLC en fase inversa
de una mezcla de dos compuestos A y B. Se sabe que, en columna de octadecil slice de 25 cm de longitud y
utilizando una fase mvil de metanol-agua, los tiempos de retencin son 6.25 y 7.10 min respectivamente, el
tiempo muerto es 1.4 min y la resolucin es 1.05.

a) Calcular los factores de retencin de A y B.

b) A partir de la siguiente tabla calcular la concentracin de A y B en la muestra.

Muestra A, mg/L B, mg/L P.I., mg/L AreaA AreaB AreaPI

1 2.0 2.0 1.0 25542 36216 13320
2 1.0 1.0 1.0 11830 18115 12320
3 2.0 2.0 2.0 24210 35980 26150
4 X X 1.0 21240 15227 11425
5. A partir de estudios de distribucin, se sabe que las especies M y N tienen constantes de distribucin
agua/hexano de 6.01 y 6.20. Las dos especies se deben separar por elucin con hexano en una columna empacada
con gel de slice que contiene agua adsorbida. La proporcin VS/VM para el empaque es 0.422.

a) Indique fase mvil y fase estacionaria y defnalas.

b) Calcular factos de retencin y de selectividad.
c) Cuantos platos se necesitan para lograr una resolucin ptima.
d) Que longitud de columna se requiere si la altura del plato del empaque es 2.2X10-3 cm.
e) Si se emplea una velocidad de flujo de 7.1 cm/min, cunto tardar en eluir las dos especies.
f) A partir de los resultados obtenidos, justifique si son ptimas las condiciones para la separacin de M y N y por
qu.
6.
7. La figura muestra el cromatograma de una mezcla de dos componentes en una columna cromatogrfica de
lquidos empaquetada, de 25 cm. La velocidad de flujo fue de 0.40 mL min-1 .

a) Determina los factores de retencin para los dos componentes

b) Calcula la resolucin de los dos picos
c) Halla la altura media de plato
d) Qu longitud de la columna se necesitara para alcanzar una resolucin de 1,75?
e) Supongamos que la longitud de la columna se ha fijado a 25 cm y que el material de empaquetamiento est
fijo. Qu medidas podra usted tomar a fin de incrementar la resolucin para lograr la separacin en lnea
base?
f) Hay alguna medida que usted pudiera usar para lograr una mejor separacin en menos tiempo con la misma
columna que en el apartado anterior?