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RESUMEN
Antecedentes: Las protenas del suero son un subproducto de la industria de derivados lcteos que
actualmente se han convertido en una fuente de contaminacin de los efluentes. Estudios han mostrado
sus excelentes propiedades para la fabricacin de pelculas y recubrimientos con la adicin de antioxidan-
tes, considerada como una alternativa ecolgica que reducira el uso de polmeros sintticos y garantiza la
conservacin de algunos alimentos. Objetivo: El objetivo del presente estudio fue caracterizar las propie-
dades mecnicas, pticas, morfolgicas y de biodegradacin de una pelcula activa, obtenida a partir de las
protenas extradas del suero de quesera y el antioxidante natural alfa-tocoferol, para ser utilizada en la
conservacin de diferentes alimentos. Mtodos: Las pelculas se elaboraron a partir de una solucin 10%
(w/w) de concentrado de protenas de lactosuero (WPC) en agua, se adicion glicerol como plastificante
y alfa-tocoferol al 1 y 2% w/w disuelto en etanol. Se evaluaron las propiedades mecnicas de las pelculas
bajo la norma ASTM D882-01; adems, se analizaron por espectrofotometra, microscopa electrnica de
barrido (SEM) y se realiz un anlisis de biodegradacin por control de la prdida de masa. Resultados:
Las pelculas obtenidas presentaron adecuada apariencia fsica y coloracin ligeramente parda. La tensin
disminuy de manera similar con la adicin de alfa-tocoferol al 1 y 2 %; sin embargo, la ms alta elongacin
se present para pelculas con alfa-tocoferol al 1%. Las pelculas mostraron una excelente propiedad de
barrera, en el rango de 300-400 nm de la regin UV. Las fotografas en SEM mostraron las microgotas
del antioxidante en la superficie de la pelcula y se confirm el proceso de biodegradacin en las pelcu-
las evaluadas. Conclusin: Las propiedades mecnicas, pticas, de morfologa y biodegradacin de las
pelculas fueron directamente afectadas por la cantidad de alfa-tocoferol empleada en la formulacin. La
incorporacin del compuesto natural en las pelculas de protena tiene un potencial uso para extender la
vida til de alimentos grasos.
Palabras clave: Protenas de lactosuero, alfa-tocoferol, pelculas, plastificante, biodegradable.
1
Grupo de Investigacin Biotecnologa de Alimentos BIOALI, Departamento de Alimentos, Facultad de Qumica Farmacutica. Universidad
de Antioquia UdeA. Calle 70 No. 52-21, Medelln, Colombia.
2
Instituto de Ciencia de Materiales. Universidad de Valencia. 46071 Paterna. Valencia, Espaa.
*
Autor a quien se debe dirigir la correspondencia: dianamgranda@gmail.com
12 Vitae d. Granda R. et al.
ABSTRACT
Rationale: Whey proteins are a by-product of the dairy industry that recently have been considered as
a source of contamination of the natural effluents. Several studies have shown their excellent properties
for the manufacture of films and coatings with the addition of antioxidants, and have been considered as
an ecological alternative that would reduce the use of synthetic polymers while ensuring the preservation
of some foods. Objective: The main objective of this study was to characterize the mechanical, optical,
morphological, and biodegradation properties of an active film obtained from whey cheese proteins and
the natural antioxidant alpha-tocopherol, for its use in the preservation of different foods. Methods:
The films were developed from a 10% solution (w/w) of whey protein concentrate (WPC) in water, 7%
w/w of glycerol as plasticizer, and -tocopherol at 1 and 2% (w/w) dissolved in ethanol were added. Me-
chanical properties were evaluated under the ASTM D882-01; furthermore, the films were analyzed by
spectrophotometry, scanning electron microscopy (SEM) and biodegradation analysis was performed by
controlling of mass loss. Results: The obtained films showed adequate physical appearance and slightly
brown coloration. Tension decreased similarly with the addition of -tocopherol at 1 and 2%; however,
the highest elongation was for films with -tocopherol at 1%. The films showed excellent barrier prop-
erty in the range of 300-400 nm of the UV region. The SEM photographs showed the droplets of the
antioxidant on the surface of the film, and the biodegradation of films was confirmed in the evaluated
films. Conclusion: Mechanical, optical, morphology, and biodegradation properties of the films were
directly affected by the amount of -tocopherol used in the formulation. The incorporation of the natural
compound in the films of protein has potential use to extend shelf life of fatty foods.
Keywords: Whey proteins, alpha-tocopherol, films, plasticizer, biodegradable.
actuar como barreras selectivas para la migracin disuelta en agua destilada a temperatura ambiente
de humedad, gas y soluto, pueden funcionar como y con agitacin constante hasta la obtencin de
vehculos de muchos ingredientes funcionales, una solucin del 10% (w/w) de protena. La mezcla
tales como antioxidantes, agentes antimicrobianos, se llev a un bao Mara con una temperatura de
sabores, especias y colorantes que mejoran la fun- 85 C por 20 min. La solucin obtenida fue expuesta
cionalidad de los materiales de envase (16). a un choque trmico con hielo por 15 minutos con
Los antioxidantes se pueden incorporar en las agitacin. Inmediatamente, se adicion 7% de gli-
pelculas con el fin de elaborar envases activos que cerol, como plastificante, y se mantuvo la agitacin
permitan mejorar la estabilidad, funcionalidad y se- constante.
guridad de los alimentos contenidos, lo que contri-
Incorporacin del alfa-tocoferol como
buye a la conservacin de la calidad en los productos
antioxidante
(17). Algunas investigaciones se han realizado con el
fin de conocer el efecto de la incorporacin de antio- La solucin formadora de las pelculas fue puesta
xidantes sobre una matriz biopolimrica (18-21). Sin en un agitador Dispermat R11 (Hemel, Herts,
embargo, pocos estudios se han llevado a cabo para U.K) a 3000 rpm por 5 minutos y se agreg el
analizar el efecto de la adicin de alfa-tocoferol en alfa-tocoferol, a concentraciones de 1 y 2%, usando
pelculas de protena de lactosuero (22-23). En este etanol puro como solvente para lograr la dispersin.
contexto, unas adecuadas caractersticas mecnicas, La solucin obtenida fue desgasificada durante
pticas, morfolgicas y de biodegradacin de la pel- 3 minutos usando un SpeedMixer Dac 400FVZ
cula, elaborada a partir de protenas de lactosuero y (Landrum, SC.USA). 10 mL de la solucin obte-
con antioxidantes, permiten un mayor acercamiento nida fueron trasferidos a cajas de Petri (12.5 cm de
a la utilizacin de este subproducto como materia dimetro) de polietileno de alta densidad (HDPE).
prima para la elaboracin de envases activos para Las pelculas se formaron por secado de las solu-
alimentos. Por tanto, el objetivo de este estudio fue ciones, durante 48 horas a 23 C en una campana
desarrollar y caracterizar una pelcula activa biode- de extraccin.
gradable, a partir de las protenas extradas del suero Para las pruebas mecnicas, se realiz una
de quesera y el antioxidante natural alfa-tocoferol, modificacin al procedimiento anterior. En este
con las propiedades adecuadas para la proteccin y caso la solucin obtenida fue vertida en placas
almacenamiento de diferentes alimentos. recubiertas de tefln (20*30 cm) y, para controlar
el espesor, se verti la misma cantidad de solucin
MATERIALES Y MTODOS (40 mL) para cada tratamiento con alfa-tocoferol al
1% y 2%. Como testigo, se elabor una pelcula sin
Materiales incorporacin del antioxidante (alfa-tocoferol 0%).
Estas pelculas se secaron en campana de extraccin
Para la elaboracin de las pelculas se emple a temperatura ambiente por 48 horas y se almace-
protena concentrada de lactosuero con 80% de naron en condiciones controladas con humedad
protena y 7% w/w de lactosa, suministrada por la relativa de 50% y temperatura de 23 C.
empresa Tecnas S.A (Medelln, Ant, COL); alfa-
tocoferol sinttico con 98% de pureza, suministrado Caracterizacin de propiedades en traccin
por Alfa Aesar (Ward Hill, MA, USA); glicerol de
El espesor de las pelculas se determin con un
99% de pureza y etanol al 98%, suministrados por
calibrador digital Mitutoyo Absolute (Aurora, Il.
Panreac (Montcada i Reixac, Barna, ESP). Para las
USA). El porcentaje de elongacin, la fuerza de
soluciones formadoras de las pelculas se emple
tensin y el mdulo de Young se determinaron uti-
agua destilada.
lizando probetas rectangulares (25.4* 150 mm) y un
Preparacin de la solucin formadora de las espesor promedio de 0.28 mm con una separacin
pelculas entre mordazas de 100 mm, utilizando una mquina
universal Multitest 1-i (Slinfold, West S. U.K), con
Para la elaboracin de la solucin formadora de una velocidad de 50 mm/min y un porcentaje de
pelculas se sigui el procedimiento descrito pre- cada del 10% segn la norma ASTM D882-01. Se
viamente (23), con algunas modificaciones. En este realizaron 10 ensayos de cada sistema.
sentido, la protena concentrada de lactosuero fue
14 Vitae d. Granda R. et al.
La adicin del antioxidante alfa-tocoferol tiene tos. Se observ que a valores menores de 350 nm, las
efecto sobre las propiedades mecnicas de las pel- pelculas con tocoferol o sin tocoferol transmitieron
culas (tabla 1). En este sentido, la muestra elaborada la menor cantidad de luz; adems, en todo el barrido,
sin adicin de alfa-tocoferol result ser ms rgida se evidencia que a mayor porcentaje de tocoferol adi-
que las pelculas a las que se les incorporaron alfa- cionado, menor es la medida de la transmitancia en
tocoferol en concentraciones de 1 y 2 %. La rigidez las muestras y, por tanto, se present un mejor efecto
ms alta en las pelculas sin alfa-tocoferol se corro- protector sobre los alimentos envasados.
bor con el resultado del Mdulo de Young, debido
a que en dichas muestras se obtuvo estadsticamente Tabla 2. Comparacin de propiedades pticas de las
pelculas de protena de lactosuero con incorporacin de
el valor ms alto. A su vez, se evidenci un efecto
alfa-tocoferol a concentraciones de 0%,1% y 2%.
plastificante, ejercido por el antioxidante natural
sobre las muestras despus de su incorporacin.
alfa-tocoferol Espesor (mm) Absorbancia a 600 nm
Figura 3. Imgenes de microscopa electrnica de barrido de superficie de las pelculas de protenas de lactosuero
con incorporacin de alfa-tocoferol a concentraciones de 0% (A), 1% (B) y 2% (C).
DISCUSIN
Figura 4. Masa residual de pelculas de lactosuero con En el proceso de la mezcla y homogenizacin de
alfa-tocoferol al 0%, 1% y 2% en funcin del tiempo de los componentes para la elaboracin de las pelculas,
degradacin.
a partir de protenas de lactosuero con incorpora-
cin de alfa-tocoferol al 0%, 1% y 2%, se encontr
En la figura 4 se observa que las pelculas de
que la viscosidad de esta solucin coincide con la
protena de lactosuero con alfa-tocoferol al 1 y 2%
descrita en el estudio de Krochta y sus colaborado-
tienen un comportamiento muy similar, pues am-
Desarrollo y caracterizacin de una pelcula activa biodegradable con antioxidantes (alfa-tocoferol) ... 17
res (23), quienes evaluaron soluciones de protena tocoferol debe ser del 1% mnimo, segn Wessling
de lactosuero con incorporacin de alfa-tocoferol y sus colaboradores (28), y del 4% mximo, segn
y palmitato de ascorbilo, y reportaron una dismi- Granda (29) y Graciano (30) con sus respectivos
nucin de la viscosidad atribuido al incremento en colaboradores. Estos resultados muestran que las
la concentracin de estos antioxidantes. Hallazgo pelculas de lactosuero con alfa-tocoferol pueden
que puede deberse a que se utiliza etanol como ayudar a retardar la oxidacin lipdica inducida
solvente proporcional, segn la concentracin de por la luz UV en los alimentos. Los resultados son
alfa-tocoferol en la pelcula y, por tanto, a mayor similares a los reportados en otros estudios con
cantidad de tocoferol en la formulacin menor ser protena de lactosuero (31), escamas de pescado
la viscosidad de la solucin. (32) y pelculas a partir de surimi (33). Estos es-
Los plastificantes reducen la cantidad de inte- tudios muestran que, las pelculas elaboradas con
racciones entre las distintas cadenas moleculares, materiales orgnicos, presentan las mejores barreras
aumentando as los espacios intermoleculares y a la luz UV, debido a que se presenta una menor
causando un incremento en las propiedades dctiles transmisin de luz al alimento. Por su parte, para
del material por un descenso de su rigidez, aunque pelculas de polietileno de baja densidad (PEBD),
tambin pueden disminuir sus propiedades de ba- la transmitancia a una longitud de onda de 350 nm
rrera debido a un incremento en el volumen libre es de 79,9% (24); mientras que, para las pelculas
(25). Los plastificantes ms habituales para este tipo de lactosuero con alfa-tocoferol al 0%,1% y 2%, a
de pelculas, a partir de protenas, son los polioles, la misma longitud de onda, los valores fueron de
azcares o almidones debido a su compatibilidad 5,66%, 3,85% y 0,48% respectivamente. Por tanto,
con las protenas y su capacidad para favorecer la es evidente una mejor barrera a la luz de las pelculas
elasticidad y flexibilidad de las biopelculas obte- elaboradas con materiales orgnicos respecto a las
nidas (25). La adicin de alfa-tocoferol al 1% w/w derivadas de polmeros sintticos.
mejora sustancialmente la elasticidad de la pelcula, La caracterizacin morfolgica de las pelculas
comparando con las pelculas sin alfa-tocoferol. Los con alfa-tocoferol permiti observar que la mi-
resultados presentados en la tabla 1 y obtenidos en croestructura es el resultado de las interacciones,
la deformacin de las pelculas de protena de suero entre sus componentes y los posibles fenmenos
con alfa-tocoferol fueron muy similares a los ob- de desestabilizacin que pueden ocurrir durante la
tenidos por Muoz y colaboradores (26) para una etapa de secado. En esta direccin, a mayor propor-
pelcula elaborada a partir de la mezcla de protenas cin del antioxidante en el sistema se observaron
del suero y muclago de Salvia hispnica L, la cual se huecos ms numerosos, los cuales corresponden a
compone principalmente de xilosa, glucosa y cido gotas de alfa- tocoferol y se deben a los fenmenos
glucurnico, formando un polisacrido ramificado de floculacin y coalescencia, durante la etapa de
donde el muclago tambin acta como plastifican- secado de las pelculas (34). Adems, en la superficie
te. El mdulo de Young o mdulo de elasticidad de la pelcula se observ la presencia de pequeas
(relacin de tensin a la deformacin sobre la parte burbujas, generadas durante el secado, por el des-
lineal de la curva de esfuerzo-deformacin) es una plazamiento del vapor, generado el interior de la
medida de la rigidez de la pelcula (27). Como se estructura de la pelcula, hacia arriba, formando
observa en la tabla 1, el mdulo de Young disminuye una gota que va produciendo orificios en las paredes
al introducir alfa-tocoferol en las pelculas. delgadas a medida que asciende (35).
La incorporacin de alfa-tocoferol, como antio- Las pelculas basadas en biopolmeros naturales
xidante natural en la formulacin para la elaboracin se asumen biodegradables; sin embargo, la tasa de
de las pelculas a partir de protenas de lactosuero, degradacin puede decrecer en pelculas biopolim-
tiene un efecto favorable en las propiedades pticas, ricas formadas a travs de enlaces covalentes (36).
debido a que disminuye la transmitancia y permite Despus de la prdida de masa inicial en los pri-
inferir que, la adicin de alfa-tocoferol en mayores meros 3 das, la actividad microbiana (degradacin
proporciones, aumentara an ms la proteccin de enzimtica) y la hidrlisis empezaron a dominar, lo
los alimentos envasados contra el efecto perjudicial que resulta en una mayor tasa de biodegradacin
de la luz UV. Sin embargo, con el fin de promover y, por consiguiente, prdida de masa (37). En las
una interaccin positiva (migracin), entre el en- pelculas con incorporacin de alfa-tocoferol se
vase activo y el alimento, la concentracin de alfa- observa una tasa de degradacin menor a partir del
18 Vitae d. Granda R. et al.
da 10, comparado con las pelculas testigo, debido 2011-2012. As mismo, se agradece a la Universidad
principalmente a que la presencia de alfa-tocoferol, de Valencia, Espaa por la Beca para la formacin
como compuesto apolar, disminuye la cantidad de especializada de jvenes investigadores de pases en
agua disponible en la pelcula, afectando las con- va de desarrollo 2012. Los investigadores dan su
diciones de crecimiento de los microorganismos agradecimiento a Geciel Patio, David Gutirrez,
y al mismo tiempo reduciendo la posibilidad de Francisca Manzanares y al Doctor Rafael Gavara
hidrlisis (38). El estudio de biodegradacin en por todo su apoyo y colaboracin durante la reali-
protena aislada de soya (37) confirma la tendencia zacin de este estudio.
de biodegradacin en matrices biopolimricas si-
milares, mostrando una curva de prdida de masa
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