ERYTHROPOIESE ANnoo, Introduction : > Lérythropoiése est ensemble des processus de production des érythrocytes (globules rouges) dans la moelle osseuse rouge & partir de cellules souches hématopotétiques totipotentes, sous fa dépendance de érythropoiét re (owEPO).- a Uérythropoitse dure environ $ jours, mais en cas d2 stimulation par 'érychropotétine, sa durée peut atteindre 2 jours % Fonction par laquelle lorganisme assure le renouvel ement des globules rouges (GR) : > Chaque jour 200 milliards de GR sont produits par la moelle osseuse de l'zdulte sain, afin de compenser les pertes physiologiques et I'élimination des GR vieillis (= hémolyse physiologique). Ontogénie A. Cher Membryor das la 3eme semaine de la vie intra —utérine appari:ion les premiers érythroblastes Ce sont des mégaloblaste qui synthétisent des hémoglobines embryonnaires Hb Gower 1 et Gower 2et Hb Portland 1. Chez le foetus : Frythropoiése hépatosplénique a partir du 3¢me mois, + Production de normoblastes + Synthese des hémoglobines foatale et adulte A1 + Exythropoiése médullaire a partir du 4éme mois . Aprés la naissance Erythropoiése exclusivement médullaire Disparition de la synthése de 'hémoglobine feetaloiése Etude dynamique d’érythropoiése Compartiment de cellule souche : c'est & partir dela cellule souche multipotente que débute | érythropoiése Ce sont des cellule indifférenciées ;multipotente jen morphologiquement recennaissables Pouvant rester indifférenciées ou se différenciées en cellules erythroblastique ; gfanuleuse ou mégaloblastiques Engagement de la cellule souche vers une voie de différenciation myéloide donnant naissance 2 un pro géniteur multipotent le CFU-GEMVI 7 CFU-GEMM (Colony Forming UnitGranulocyte, Erytluoid, Macrophage, Megacaryocyte) qui va se différencier vers un progeniteur restreint dans la voie érythropoitse appelé BFU-E % BFU-E va se proliférer ct se différencier par étapes successives pour aboutir a fa formation de CFULE (pro géniteurs tardifs) puis des érythroblastes médullaire2 vyyvv yv compartiment du pro gén'teur: ; Ce sont des cellules issues de cellule souche ; engagées de fagon irreversible vers Vérythropoiése Elles ne sont pas morphologiquement reconnaissables Représentent 1/1600 cellule nucléée médullaire Elles sont mises en évidence indirectement par culture en milieu semi solide existe 02 types EU-E(bruste forming unit colonies éclatées) precoce Capacité proliférative importante ;vont donner des grosses colonies erythoides Contenant plusieurs centaines de millers d érythroblastes matures aprés 21 j de culture Peu sensible a Epo mais sensible aux facteurs de croissance :SCF,iI3;GM-CSF,iI9,iI11 ilonies éclatées) tardifs BEU-E(bruste_ forming unit color La capacité proliférative est faible ; sont sensible a Erp qui devient indispensable a la poursuite de la maturation ; donnant des colonies de plus petite taille en 14j de culture CFU-E{colonie forming unit); Sont les pro géniteurs les pls matures vont donner en d une semaine de colonies de 30-0 érythroblastes Leur survie sont dépendante de Erpo; Faible capacité de prolifératien Etude stati A Proérythroblaste Cellule arrondie Taille = 20-30 um de diamétre Rapport nucléo cytoplasmique élevé Noyau = rond ; chromatine fine et nucléoles nets Cytoplasme = bleu foncé (richesse en ARN}que érythropoiése Erythroblaste basophile : Taille : 15-18 wm Noyau rond la chromatine se condense Le cytoplasme reste basophile {deux divisions successives 4 ce stade Erythroblaste polychromatophile : Taille : 25 um Noyau rond dont la chromat’ne se condense plus nettement Le cytoplasme devient gris (superposition du bleu de I’ARN et de orangeé de hemoglobins) Erythroblaste acidophile : Petite cellule (10 um) Petit noyau rond et dense Cytoplasme qui a presque la couleur d'une hématie ‘"cette cellule per son noyau et devient wn GR (en réalté un réticulcete pie un g GR) s de la différenciation on observ » réduction progressive de la taille cellulaire et de la tallie du noyau, condensation progressive de la chromatine dans un noyau qui reste rond et centro cellulai. a tout au long de la différenciation, hémoglobinisation progressive du cytoplasme : la synthése d'Hb (acidophile) masque pro ots érythroblastiques : Dans la moelle osseuse les érythroblastes sont regroupés, formant une double (parfois triple) couronne autour d'un macrophage, qui fournit des éléments nutritifs et un peu de fer et phagocyte les noyaux expulsés (ces flots sont habitvellement détruits lors de la ponction aspiration et I'étalement du suc médullaire]gressivenient la basophille cytoplasmique liée & VARN éticulocyte: obtenu apr’s expulsion du noyau de l'érythroblaste acidophile (aspect de gros GR un peu bleuté). «© Iquitte la moelle osseuse aprés 2-5 j et se retrouve dens le sang ol il évolue en GR définitif en 1-2 par diminution de la taille et perte de ARN résiduel IV. METHODES D’EXPLORATION 1) Hémogramme et numération des réticulocytes. La valeur de hémoglobine & I"hmogramme, ainsi que celle des indices érythrocytaires (VGM, CCMH) permet une premiére approche des percurbations d hématopolése. ¥ Landes réticulocytes 2) Le myétogramme (et la bicpsie ostéo-médullaire) Il permet : de quantifier I'érythropoiése (N = 15 - 30 % des cellulas myéloides sont des érythroblastes) étude morphologique, qui oriente vers une pathologi2 éventuelle Les antigenes de la lignée érythroblastiqu : a) En surface des progéniteurs* ‘des antigénes des cellules souches myéloides primitives: CD 34, CD 33, CD 117 des molécules d'adhésion : intégrines (CD 1:1a/CD 18), ICAM (CD 54), et VLA 4 qui contrélent Vadhésion aux autres cellules et & la matrice extracellutaire. HLA-DR sur les BFU~E, qui disparait sur les CFU ~, bh). En surface des progéniteurs et précurseur: des récepteurs pour I'EPO et pour le TNF alpha (jusqu'au stade basophile inclus), le récepteur de la thrombospondine (CD 36 ou Gp IV) (jusqu’au GR), + Les antigones de groupes sanguins, rhésus apparaissent dés le stade CFU-E % le récepteur de la transferrine CD 71. (mais comrrtn a toutes les cellules en cycle)pans le cytoplasme : Hb et diverses enzymes (anhydrase carbonique), dont les premieres molécules sont retrouvées au stade CFU-E tardif 4) Culture in vitro des progénitetrs érythroblastiques : Les techniques de culture mises au point en 1970 permettent d'objectiver le pool de progéniteurs érythroide VY Culture in vitro des progéniteurs érythroblastiques L'aspect des colonies et son contenu en cellules différe selon de progéniteur en cause, ce qui permet lidentification de celul-ci. En outre, plus une colonie apparait tardivement, plus elle correspond a un progéniteur précoce. Y trois milieux peuvent étre utilisés (Plasmaclot, Méthyl-cellulose, Collagene). V. REGULATION DE L'ERYTHROPOIESE A, REGREGULATION SPECIFIQUE Erythropoiétine (EPO) LEPO est le facteur de croissance majeur de I'érythropoiése C’est une protéine de 166 AA possédant de nombreux sites de glycosylation . Elle est secrétée par des cellules endothéliales des capillaires des tubes proximaux rénaun La demi-vie de I'EPO dans l'organisme est de 447 heures. Sa production est stimulée par 'hypoxie rénale. Le taux circulant normal est cle 108 20 U/L de sérum, et peut auginenter de plus de 30 fois en cas d'anémie b) Les récepteurs de I'EPO. ce sont des récepteurs associé & une tyrosine kinase, ils cont présents sur les BFU-E tardives et leur nombre est maximal aux stades proérythroblastes, et érythroblastes basophiles, la fixation de I'EPO sur son récepteur induit l'activation {cad la phosphorylation) d'une rotéine de la transduction du signal), laquelle molécule sous membranaire appelée JAK2 phosphoryle la molécule STAT 5, facteur de transcription qui induit la prolifération des érythroblastes. > Remarque : il existe également une faible production hépatique (10% du total) (le site hépatique est prépondérant chez le foetus).v * SCF, IL3, GM-CSF , IL9, IL11. v BFUE, CFUE: + ILL en présence cle 13 b) Autres facteurs de régulation ¥ Hormones * Androgenes, hormones thyroidiennes, GH, ACTH, Insuline, Corticoides (stimulation) * Estrogénes (inhibition) Lymphocytes 78 (inhibition) ¥ Vitamines 812 et BY: synthése de !ADN + BG: synthase de I'heme Vitamtine C: absorption du fer et incorporation dans la protoporphyrine de I’héme vy Métaux Fer: constituant essentiel de !'hémoglobine (1L de sang = 500 mg de fer) Cobalt: constituant du noyau de la B12 + Cuivre: absorption du fer Zn; absorption du fer et des folatesy Hématopoiese ——@ cau ee LEE Epiggéinliourele lymphoides MOELLE Brue OSSEUSE | lewyes Bo SANG ss t ® @ © 6 @ 0 plaqueltes - monacytes: Gosinophilos J. noutophiles, _basgopiles —ymphocyles o erythrocytes macrophages