MICROSCOPIO ELECTRONICO DE TRANSMISION (TEM)

Está constituido por las siguientes partes:

1. Cañón de electrones
2. Sistema de lentes
3. Pantalla fluorescente

Estos se encuentran en una columna vertical a alto vacío.

El cañón de electrones, es la fuente emisora del haz de electrones. Se encuentra en la

parte superior de la columna. Esta constuido por un filamento que es cátodo, un cilindro
con apertura central, llamado cilindro de Wehnelt que rodea al filamento. El ánodo se
encuentra por debajo del cilindro de Wehnelt.

El filamento es calentado por el paso de corriente (alrededor de 2800K). Los electrones

emitidos termoiónicamente por el cátodo son llevados hacia el ánodo, estos pasan por la
apertura del cilindro central y un haz de alta energía es emitido hacia la columna del
microscopio.

El sistema de lentes constituido por lentes condensadores objetivo, intermedia y

proyectora.

La lente objetivo forma la primera imagen, está localizada debajo del espécimen. Es
considerado el componente más importante del microscopio electrónico. Cualquier
defecto en ésta, será magnificado y transmitido al resto del sistema óptico. De ella
depende la resolución final.

La lente intermedia y proyectora son las encargadas de amplificar la imagen dada por la
lente objetivo y proyectarla sobre la pantalla fluorescente.

La pantalla del microscopio electrónico de transmisión está recubierta por una pintura
de fluoruros de Zn y Cd, que fluoresce cuando es bombardeada por electrones,
generando una imagen en el rango de las longitudes de onda del visible.

La resolución depende del espesor del corte del tejido. Es por eso que el empleo de
micrótomos es fundamental para realizar cortes ultra finos.

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

1. Fijación: La muestra debe ser fijada, endurecida y preservada con tetraóxido de osmio
(OsO4) y glutaraldehído, con un cuidadoso manejo del pH, para mantener las membranas
y las proteínas celulares. Los aldehídos crean puentes cruzados entre sí y enlaces
covalentes con los grupos amino que estén libres en las proteínas. De esta manera se
previene la degradación oxidativa por la muerte del espécimen.

2. Contraste: Los orgánulos y estructuras de interés deben ser electrón-densas y

contrastar con el fondo (background). La electrondensidad se incrementa con el número
atómico de los elementos y solo átomos pesados crean contraste. Se contrasta con
tetraóxido de osmio, acetato de uranilo o citrato de plomo.

3. Deshidratación: El espécimen va a estar en el vacío y no puede contener agua, pues

esta se evaporará y dispersará los electrones. El agua se elimina mediante alcoholes en
grado creciente de concentración.

4. Inclusión: El espécimen deshidratado se coloca en óxido de propileno y resinas

epóxicas o acrílicas, las cuales se endurecen y forman un bloque sólido de plástico muy
duro.

5. Corte: Se emplea un ultramicrótomo que permite rebanar el tejido en cortes ultrafinos

con una cuchilla de diamante, logrando cortes del orden de los 100 nm. Los electrones
tienen un bajo poder de penetración y no es conveniente usar cortes gruesos.

APLICACIONES

 Determinación de estructura cristalina en minerales, metales, etc.

 Estudio de catalizadores.
 Determinación de impurezas, precipitados, etc.
 Identificación de bordes de grano e interfaces en metales.
 Estudio de fases y zonas cristalinas en polímeros.
 Determinación de tamaño de partícula en catalizadores, minerales, etc.
 Identificación de planos cristalinos.
 Cambios estructurales de materiales sometidos a diferentes tratamientos
térmicos.
 Realización de estudios de histoquímica para identificar compuestos
específicos.
 Estudios de ultra estructura de tejidos vegetales y animales.
 Reconocimiento de virus.
 Estudios de cito química.
 Estudios de estructuras moleculares.
IMAGENES OBTENIDAS DE TEM

Células de un polímero

Cloroplastos
 Referencias Bibliográficas

 MICROSCOPIO ELECTRÓNICO Y CORTES: http://webs.uvigo.es/mmegias/6-tecnicas/6-

electronico.php 0104/11; 22:35
 RESOLUCIÓN Y NATRURALEZA DE LAS
ONDAS: http://www.criba.edu.ar/cribabb/servicios/secegrin/microscopia/apunte_col.htm 01/04/1
1 ; 23:05
 EL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO MET Y
SEM: http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo5_5.htm#1
02/04/11 ; 22:15
 PREPARACIÓN MUESTRAS: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?pid=S1726-
46342005000400007&script=sci_arttext 02/04/11 ; 22:35
 BROCK.(2004). Biología de los Microorganismos. 10ed.