ANÁLISIS INSTRUMENTAL 2

116070M

Jina Marcela Martínez

Correo electrónico:
Jina.martinez@correounivalle.edu.co
 OBJETIVOS GENERALES

1. Familiarizar a los estudiantes con los principios fisicoquímicos

relacionados con la interacción de la energía radiante con la materia,
para obtener información que les permita identificar compuestos y sus
estructuras, así como también hacer medidas cuantitativas.

2. Estudiar distintas técnicas espectroscópicas y sus aplicaciones.

3. Presentar otras técnicas de interacción de la energía radiante con la

materia y sus aplicaciones para identificar y cuantificar sustancias.

4. Estudiar los principios de los métodos de separación fundamentales.

UNIDAD PRIMERA (DURACION 8 HORAS)
ESPECTROSCOPIA ATÓMICA
Atomizadores para espectroscopia atómica: llama, atomización electrotérmica,
generación de hidruros, vapor frío, interferencias, corrección de la absorción no
especifica, aplicaciones. Espectroscopia de emisión, plasma de argón acoplado por
inducción (ICP), ventajas y desventajas.

UNIDAD SEGUNDA (DURACIÓN 8 HORAS)

ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION INFRARROJA.
Teoría de la absorción en el Infrarrojo. Tipos de vibraciones moleculares. Modelo
mecánico de vibraciones por extensión. Tratamiento cuántico de las vibraciones.
Modos de vibración. Acoplamiento vibratorio. Instrumentos infrarrojos. Fuentes de
infrarrojo, recipientes para muestras y detectores. Espectrofotómetros infrarrojos
para análisis cualitativo. Instrumentos para trabajo cuantitativo. Técnicas para
manipulación de la muestra. Espectroscopía de reflexión interna. Aplicaciones
cualitativas de la absorción IR. Gráficas de correlación. Aplicaciones cuantitativas.
Desviaciones de la Ley de Beer. Espectroscopía IR por medio de la transformación
de Fourier, ventajas. Instrumentación. Aplicaciones.
UNIDAD TERCERA (DURACION 4 HORAS)
ESPECTROSCOPIA RAMAN
Teoría de la Espectroscopía Raman. Excitación de espectros Raman. Modalidades vibratorias
asociadas con el efecto Raman. Intensidad de los picos Raman. Instrumentos. Aplicaciones.

UNIDAD CUARTA (DURACION 4 HORAS)

ESPECTROSCOPIA DE FLUORESCENCIA MOLECULAR
Teoría de las fluorescencias. Estados excitados. Procesos de desactivación. Variables que
afectan la fluorescencia y la fosforescencia. Tipos de transición fluorescencia. Instrumentos.
Aplicaciones. Definición de la Quimioluminiscencia, aplicaciones.

UNIDAD QUINTA (DURACION 8 HORAS)

ESPECTROSCOPIA DE RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR.
Teoría de la resonancia magnética nuclear. Descripción cuántica de la RMN. Procesos de relajación.
Medición de la absorción. Métodos experimentales para la espectroscopía de RMN. Instrumentación.
Efectos ambientales sobre los espectros de RMN de protones. Medición de desplazamiento químico y la
división spín-spín. Correlación de desplazamiento químico con la estructura. División spín-spín. Aplicaciones
de RMN de protones. Identificación de compuestos. Aplicaciones de RMN de protones al análisis
cuantitativo. Estudio de isótopos distintos al protón RMN basada en la transformada de Fourier. RMN del
carbono 13. Espectroscopía de resonancia de spín electrónica. Instrumentación. Espectros.
UNIDAD SEXTA (DURACION 8 HORAS)
ESPECTROMETRIA DE MASAS
Espectrómetro de masas. Componentes del instrumento. Sistema para el manejo de las
muestras. Fuentes iónicas. Analizador de masas. Medida y presentación de los datos de la
corriente iónica. Espectros de masas. Aplicaciones cualitativas y cuantitativas de la
espectrometría de masas.

UNIDAD SEPTIMA (DURACION 16 HORAS)

SEPARACIONES
Cromatografía, descripción general. Cromatografía de elución. Teoría de la elución
Cromatográfica. Teoría Cinética de la Cromatografía. Separaciones sobre columna.
Resolución de una columna. Optimización del rendimiento de una columna. Análisis
cuantitativo por medios cromatográficos. Cromatografía líquida. Cromatografía en columna:
adsorción, partición, intercambio iónico, de gel. Cromatografía líquida de alto rendimiento.
Instrumentación y aplicaciones. Cromatografía plana en: capa delgada, papel. Cromatografía
de gases: principios. Volumen de retención específico. Relación entre volumen de retención
específico y coeficiente de partición. Instrumentos.
UNIDAD OCTAVA (DURACION 4 HORAS)
ELECTROFORESIS.
Principios básicos de la electroforesis y su clasificación Instrumentación de la electroforesis
capilar: sistemas de inyección, capilares, sistema buffer y detectores. Aplicaciones cuantitativas.

HABILITABLE: SI

EVALUACIÓN

3 Parciales
1 Opcional*

*Al final, el estudiante selecciona el opcional a realizar

Parcial No. 1: Espectroscopía Atómica - Raman

Parcial No. 2: Fluorescencia mol – Espectrometría de masas
Parcial No. 3: Separaciones - Electroforesis
 Unidad 1.
Espectrometría Óptica Atómica

Espectros atómicos
Instrumentación
Aplicaciones para análisis de muestras
 A nivel espectrométrico
¿Cómo se identifican y cuantifican los elementos presentes en una
muestra?

Métodos:
• Espectrometría óptica
• Espectrometría de masas
• Espectrometría de Rayos X

¿Qué es espectrometría óptica?

Atomización

Medida de absorbancia
Emisión
Fluorescencia

Elementos en la Átomos gaseosos o iones

muestra elementales
 Diagramas de niveles de energía
(Diagramas de Grotrian)
Los diagramas de niveles de energía ayudan a describir los procesos que
sustentan los distintos métodos de espectroscopia atómica. En ellos se
muestran las transiciones electrónicas permitidas entre los niveles de
energía de los átomos.

Na
E ionización
5,14 eV
• Las líneas verticales indican algunas de
las transiciones electrónicas comunes
• Longitud de onda de la radiación
resultante.

E orbital A medida que aumenta el número de

electrones en la capa externa, los
diagramas de nivel de energía se
vuelven cada vez más complejos.
 Espectros atómicos de emisión y absorción
Todos los elementos son capaces de presentar transiciones electrónicas
especificas con frecuencias determinadas de emisión. Por tanto, cada
elemento presenta un espectro atómico característico.

Para recordar: La luz blanca visible puede descomponerse en sus diferentes

colores mediante un prisma en un proceso denominado dispersión.

Espectro continuo: entre 400 y 700 nm

 Los espectros de emisión y absorción atómica NO son espectros continuos, son
espectros de LINEAS.

Espectros de emisión atómica

• A temperatura ambiente, todos los átomos de una muestra están en su estado
basal (i.e 3s para el Na).
• Mediante la aplicación de una energía externa se logra la excitación del electrón
en estado basal.
Ej
Llama
El tiempo de vida del átomo excitado
Plasma
es breve y su retorno a Eo produce la
Arco
EMISIÓN de fotones
Chispa electricos Eo

λ de la radiación resultante
 Diagrama de niveles de energía (condensado) para el Na

Potencial de ionización 5.14

4d
4p
Un espectro de emisión
3.5 3d atómica consta de
568.82
excitación. (eV)

4s
Potencial de

Líneas de resonancia:
que resultan de las
transiciones entre un
819.48 estado electrónico
330.2 excitado y el estado
330.3 3p basal.

¿La transición 4d a 3p
es una línea de
589.59
resonancia?
3s 589.99
0.0
 Espectro de Líneas de Emisión

330.3 330.2
819.48 589.59 568.82
589.99

900 800 700 600 500 400 300 nm

Lampara de
sodio Estas dos líneas (dobletes) son las más
intensas y son la razón del color
amarillo que se observa tanto en las
lámparas de sodio o cuando se quema
carbonato de sodio o sales de sodio en
una llama.
Otro ejemplo de emisión…..

Pepinillo eléctrico Espectro de emisión (dobletes

similares a la lampara)

Se conecta a la red de corriente alterna y debido a que después del proceso de

decapado están presentes iones Na+ y Cl- la corriente eléctrica excita los iones de
sodio, produciendo una luz similar al de una lámpara de sodio.
Espectros de absorción atómica
Si la excitación se da por absorción de radiación electromagnética, los átomos sólo
absorberán cantidades definidas de energía (es decir, radiación a determinadas
longitudes de onda o frecuencia),

Las frecuencias a las que absorbe son

precisamente las mismas en las que emite
cuando se estimula mediante calor (Ley de
Absorción Kirchoff).

Los espectros de absorción y de emisión

Emisión resultan ser, pues, el negativo uno del otro.
 Diagrama de niveles de energía (condensado) para el Na

Potencial de ionización 5.14

Un espectro de absorción
4d atómica consta de Líneas de
resonancia que resultan de
las transiciones entre un
4p estado basal a un estado
excitado.
3.5 3d
excitación. (eV)

Líneas muy nítidas a 589.0,

4s
Potencial de

589.6, 330.2, 330.3.

Línea a 819.5 casi no se
detecta.
330.2 819.48
330.3
3p
¿Por qué las líneas de
transición de 3p a 3d o
a 5d son tan débiles?
589.6
Átomos de Na en este
3s 589.0
nivel son muy pocos
0.0
 Amplitudes de las líneas atómicas

Como se mostró en el diagrama del Na, parece ser que las líneas atómicas
contienen únicamente una longitud de onda. Sin embargo, existen distintos
fenómenos por los que las líneas atómicas tienen en realidad anchuras finitas.

La anchura de línea efectiva

Δλ1/2, de una línea de emisión
o absorción atómica se define
λ como la anchura en unidades
“Teoría” de longitud de onda medida a
la mitad de la señal máxima.

Realidad
Factores que dan origen al ensanchamiento de línea
1) El efecto de incertidumbre,
2) El efecto Doppler,
3) Los efectos de presión debidos a las colisiones entre átomos de la misma
clase y con átomos extraños (Ensanchamiento Lorentz)
4) Efectos de campos eléctricos y magnéticos (Stark y Zeeman).

1 .Ensanchamiento natural

Todos los espectros atómicos lo presentan, es llamado de esta manera porque

su origen está intrínsecamente relacionado con las transiciones atómicas
y está relacionado con el principio de incertidumbre de Heisenberg

¿Qué dice el principio de

incertidumbre de Heisenberg?

Es imposible medir con exactitud la velocidad y la posición de una partícula a

la vez.
En este caso, la incertidumbre se centra en la dificultad de medir la
frecuencia de radiación (Δv) y el tiempo de vida media en los estados
excitados (Δt).

Ej La anchura natural de una línea está determinada por el

TIEMPO DE VIDA de los estados inicial y final que
involucran las transiciones.

El tiempo de vida de un electrón en Eo es infinito, los

Eo tiempos de vida en sus estados excitados son muy breves
(10-7 a 10 -8 s).

Ese tiempo exacto durante el cual permanece en ese estado no es el mismo en cada
decaimiento; es ALEATORIO, por lo que no se puede calcular analíticamente.

2 v
Ancho de banda natural N 
c

λ: longitud de onda de la radiación

Δv: Incertidumbre en la frecuencia de radiación emitida
c: Velocidad de la luz
 ¿Cómo determinar la anchura de una línea de emisión atómica a partir del
tiempo de vida media del estado excitado y su correspondiente incertidumbre?

Ejemplo:

El tiempo de vida promedio del estado excitado producido al irradiar vapor de

mercurio con un pulso de radiación de 253.7 nm, resulta ser de 2 x 10-8 s. Calcule el
valor aproximado del ancho de la línea de fluorescencia producida de esta manera.

R/ De acuerdo con el principio de incertidumbre, el tiempo mínimo para una

medición de un pulso de radiación está dado por:
1
∆𝑡 ≥ −−− − ∆𝑡 × ∆𝑣 ≥ 1
∆𝑣

Sustituyendo Δt por 2 x 10-8 s, se obtiene la incertidumbre de la frecuencia

emitida:
∆𝒗= 1/(2 x 10-8 s)= 5 x 107 s-1

¿Cómo se calcula la incertidumbre en unidades de longitud de onda?

2 v Las anchuras de línea debidas a ensanchamiento por

N  incertidumbre se denominan anchuras naturales de línea
c
 𝑐 Derivar con 𝑐
𝑣= 𝑑𝑣 = − 𝑑λ
λ respecto a 𝑣 λ2
Tomando Δ𝑣 como 𝑑𝑣 y Δλ1/2 como 𝑑λ

λ2 ∆𝑣
Δλ1/2 =
𝑐

(253.7 ×10−9 m)2 ×5×107 s−1

Δλ1/2= = 1.1 × 10−14 m ≅ 𝟏 × 𝟏𝟎−𝟒 𝐀ሶ
3×108 m/s

Anchura natural de línea

Los ensanchamientos de línea debido a ésta incertidumbre son más

pequeños que los que se observan para los debidos a otros efectos
(ensanchamientos de 10-4 y 10-5 A).

Efecto por presión

Efecto Doppler

Efecto natural
 2 .Ensanchamiento Doppler

¿Qué es el efecto Doopler?

Se denomina el efecto por el cual al acercarse una fuente

vibratoria en movimiento a un observador fijo, la
frecuencia de las vibraciones que éste percibe pasa a ser
Físico austriaco mayor que la que percibiría si entre la fuente y él no
Christian Doppler hubiera ningún desplazamiento relativo

Cuando una ambulancia se acerca a gran velocidad

produciendo un ruido con su sirena, escuchamos el
sonido con cierto tono más grave. Pero en cuanto la
ambulancia se empieza a alejar de nosotros, el tono
del sonido se vuelve más grave.

Más oscilaciones
por unidad de
tiempo
 ¿Qué le pasa a los átomos?

En éste caso, el Observador es el detector.

Observador Este ensanchamiento proviene del hecho de

que los átomos o moléculas emisores y
absorbentes se mueven en todas las
direcciones y con velocidades variables con
relación a los instrumentos de observación.

Observador

La longitud de onda de una radiación emitida o absorbida por un átomo que se

mueve rápidamente, disminuye si el movimiento es hacia el detector y aumenta si
se aleja del detector.
El ensanchamiento de una línea atómica (a la mitad de la altura) por este
efecto viene dado por la expresión:

2𝑣𝑜 2𝑙𝑛2 𝑅𝑇
∆v =
𝑐 𝑀

Donde:
𝑣𝑜 : Frecuencia del fotón absorbido
T: Temperatura absoluta de las especies absorbentes
M: Peso atómico
R: Constante de los gases
c: Velocidad de la luz

¿Qué se puede deducir de la anterior ecuación?

Se deduce que este efecto es más intenso cuanto mayor es la

temperatura y más ligero el elemento en cuestión (velocidades más
altas).

El ensanchamiento Doppler es del orden de 0.001-0.005 nm (dos ordenes de

magnitud mayores que las anchuras naturales de linea).
 3 . Efectos de presión

Se debe a colisiones entre átomos similares o entre los átomos del

elemento de interés con átomos extraños.

Colisiones con átomos del medio Ensanchamiento Lorentz

Colisiones con átomos similares Ensanchamiento Holtsmark

Estas colisiones provocan pequeños cambios en los niveles energéticos

atómicos y, en consecuencia, se origina una dispersión de las longitudes
de onda emitidas o absorbidas.
El ensanchamiento de una línea espectral por efecto Lorentz se expresa
por:
2𝑅𝑇(𝑀1 + 𝑀2 )
∆𝑣 = 𝛿 2 𝑁
𝑀1 𝑀2 𝜋
Donde,
𝜹𝟐 es un parámetro relacionado con el diámetro de las especies que
colisionan,
N el número de átomos o moléculas extrañas por unidad de volumen,
M1 el peso atómico o molecular de la especie extraña,
M2 el peso atómico o molecular de la especie absorbente,
R la constante de los gases
T la temperatura absoluta.

Las colisiones se dan entre los átomos del analito y

En una llama los productos de combustión (Ensanchamiento 2 o 3
veces mayor al ensanchamiento natural)

Con lámparas Se produce principalmente las colisiones entre

átomos que emiten y otros del mismo tipo.
 4. Efectos producidos por campos eléctricos y magnéticos

La presencia de campos eléctricos (efecto Stark) o magnéticos (efecto

Zeeman) origina ciertas perturbaciones en las líneas de absorción o emisión,
si bien, únicamente se ponen de manifiesto al operar en presencia de
campos muy intensos o cuando el medio está muy ionizado, como en un
plasma.