ORGENTEC Diagnostika GmbH VAROITUKSET

Carl-Zeiss-Straße 49 1. Kaikki näiden kittien sisältämät reagenssit ovat tarkoitettu käytettäväksi ainoastaan in vitro diagnosti-
55129 Mainz - Germany ikassa.
2. Älä vaihda eri lottien välisiä reagensseja.
Phone: +496131/92580
3. Komponentit/reagenssit, jotka sisältävät ihmisperäistä seerumia ovat testattu ja todettu HBsAg ja HIV
Fax: +496131/925858
negatiivisiksi FDA:n hyväksymin menetelmin. Mikään testi ei takaa 100 % varmuutta HBsAg ja HIV nega-
Internet : www. orgentec.com tiivisuutta, joten kaikkia ihmisperäistä seerumia sisältäviä reagensseja tulee käsitellä ottaen huomioon
mahdollinen tartuntavaara.
4. Vältä kosketusta TMB:n kanssa (3,3´,5,5´-tetrametyyli-bentsidiini). Jos TMB:tä joutuu iholle, pese välit-
tömästi huolellisesti saippualla ja vedellä.
5. Vältä kosketusta Stop-liuoksen kanssa, koska se sisältää happoa. Jos tätä ainetta joutuu iholle pese huo-
lellisesti vedellä ja ota yhteys lääkäriin/terveydenhuollon ammattilaiseen.
Käyttöohje 6. Jotkin kitin sisältämät komponentit (kuten kontrollit, ja näytteen laimennukseen tarvittavat puskurit ja
04 / 2008 puskuroidut pesuliuokset) sisältävät natriumatsidia säilöntäaineena. Natriumatsidi (NaN3) on erittäin
vaarallista suurissa pitoisuuksissa.Vaikka kitin reagenssien sisältäminä pitoisuuksina natriumatsidi ei ole
vaarallinen tulee laboratoriotyöskentelyssä ottaa huomioon huolellinen käsittely (katso kohdat 8., 9.,
10).
7. Jotkin kitin komponentit sisältävät Proclin 300:a säilöntäaineena. Tämä on otettava huomioon kun tuo-
tetta hävitetään viemärin kautta. Tällöin on laskettava runsaasti vettä samassa yhteydessä kun tuotetta
ORG 5FE Ferritin on kaadettu viemäriin, jotta tuotteen sisältämät reaktiiviset aineet laimenisivat.
Immunometrinen entsyymi-immunotesti ferritiinin kvantitatiiviseen 8. Käytä kertakäyttöhanskoja käsitellessäsi kitin sisältämiä reagensseja ja pese kätesi huolellisesti reagens-
määrittämiseen seerumista tai plasmasta sien käytön jälkeen.
9. Älä pipetoi suullasi.
10. Älä syö, juo, tupakoi tai meikkaa sellaisilla paikoilla, joilla kitin reagensseja käytetään.
11. Pidä "peroksidi reagenssit" erillään helposti hapettuvista materiaaleista, liiallinen kuumuus voi saada
aikaan spontaanin palamisen.
Tarkoitettu käytettäväksi vain in vitro diagnostiikassa.
HUOMIOI Lääketieteellisten laboratorioiden laadunvalvontaan liittyvät ohjeistukset kontrolliseerumien
analyyseissä. Testipakkausten reagenssien, kontrollien ja seeruminäytteiden käsittelysssä on huomioitava
KITIN SISÄLTÖ olemassa olevat säädökset.
1 kpl Läpinäkyvä mikrotiitterilevy, joka koostuu 12:sta 8-kaivon stripistä. Jokainen
kaivo on koutattu puhdistetulla spesifisellä anti-humaani-ferritiini vasta-aineel- SÄILYTYS
la (kani, polyklonaalinen). Käyttövalmiita.
1. Säilytä kittiä 2-8 °C lämpötilassa
6 kpl, 0.75 ml /ampulli Ferritiini-Kalibraattorit (A-F) PBS/BSA matriksi (NaN3 <0,1% (w/w)) sisältää ferri-
2. Säilytä mikrotiitterilevy hyvin suljetussa, kuivassa pussissa, jossa on kosteudenpoistaja
tiinä: 0; 15; 50; 150; 500 ja 1500 ng/ml. Käyttövalmiita.
3. Reagenssit säilyvät kitin viimeiseen käyttöpäivään asti
2 kpl, 0.75 ml /ampulli Ferritiini Kontrollit PBS/BSA matriksi (NaN3 <0,1% (w/w)) positiivinen (1) ja
4. Älä altista kitin sisältämiä reagensseja kuumuudelle tai suoralle auringon valolle käytön tai säilytyksen
negatiivinen (2), kaikkien pitoisuudet löytyvät kitin mukana toimitetusta liittee- aikana
stä. Käyttövalmiita.
5. Näyte- ja pesupuskuri säilyvät 30 päivää valmistuksesta/liuotuksesta säilytettäessä 2-8 °C lämpötilassa
1 kpl, 15ml Näytepuskuskuri (Tris, NaN3 <0,1% (w/w)), keltainen, Käyttövalmis.
1 kpl, 15ml Entsyymikonjugaattiliuos (PBS, PROCLIN 300 <0,5% (v/v)), (vaalean punaista)
VAADITTAVAT VÄLINEET / LAITTEET / TARVIKKEET
Sisältää polyklonaalista kanin anti-ferritiini:tä, joka on konjugoitu piparjuuren
peroksidaasi-entsyymillä. Käyttövalmis Tarvikkeet
1 kpl, 15 ml TMB substraatti-liuos, käyttövalmis. · Mikrotiitterilevylukija, jolla on mahdollista mitata ²endpoint"-määrityksiä 450nm allonpituudella.
1 kpl, 15 ml Pysäytysliuos (Stop solution, sisältää happoa). Käyttövalmis. · Monikanavapipetti tai pipetti jolla voi tehdä annostelua sarjassa
1 kpl, 20 ml Pesuliuos (PBS, NaN3 <0, 1% (w/w)), konsentraatio (50x) · Vortex-sekoittaja
· Pipettejä, tilavuusalueet 10ml, 100ml ja 1000ml
· Aikaa ottava kello

1/3 5FE-0804-02-fin
· Tulosten käsittelyyn sopiva ohjelmisto KÄYTTÖOHJE
Reagenssien valmistuksessa tarvitaan 1. Ota riittävästi strippejä kontrolleja ja esilaimennettuja potilasnäytteitä varten
· Deionisoitua vettä 2. Pipetoi 25 µl standardeja (kalibraattorit), kontrolleja ja esilaimennettuja potilasnäytteitä, pipetoi kaikista
· Mittalasi, tilavuusalueet 100ml ja 1000ml näytteistä myös rinnakkaisnäytteet

· Muovinen säilytysastia "wash solutionille" 3. Pipetoi 100 µl näytepuskuria jokaiseen kaivoon

4. Inkuboi 30 minuutjan huoneenlämmössä

NÄYTTEEN OTTO, SÄILYTYS JA KÄSITTELY 5. Poista kaivojen sisältö ja pese kaivot 3 x 300 µl:lla pesuliuoksella (wash solution)

1. Kerää kokoverinäytteet käyttäen hyväksyttyjä lääketieteellisiä tekniikoita välttääksesi hemolyysin 6. Pipetoi 100 µl entsyymi konjugaattia jokaiseen kaivoon

2. Anna veren hyytyä ja erottele seerumi sentrifugoimalla 7. Inkuboi 15 minuutjan huoneenlämmössä

3. Testiseerumin tulee olla kirkasta ja ei-hemolysotunutta. Parasta on, jos testiseerumi ei hemolysoidu tai
ole lipeeminen, mutta hemolyysi tai lipeemisuus ei häiritse analyysia. Näytteitä voidaan säilyttää jääkaa-
pissa 2-8 °C:ssa viiden päivän ajan tai pakastaa 20 °C:seen jopa 6 kk:n ajaksi
4. Vältä seeruminäytteiden toistuvaa sulattamista ja pakastamista, koska tämä voi johtaa eriasteisiin vasta-
aineiden inaktivoitumiseen näytteistä
5. Kuumuudella inaktivoidun seerumin testaamista ei suositella
KÄYTTÖÖN LIITTYVIÄ OHJEITA
1. Älä käytä kitin sisältämiä reagensseja viimeisen käyttöpäivämäärän jälkeen
8. Poista kaivojen sisältö ja pese kaivot 3 x 300 µl:lla pesuliuoksella (wash solution)
12. Pipetoi 100 µl TMB-substraatti-liuosta jokaiseen kaivoon
13. Inkuboi 15 minuutjan huoneenlämmössä
14. Pipetoi 100 µl pysäytysliuosta (stop solution) jokaiseen kaivoon ja inkuboi 5 minuutjan huoneenläm-
mössä
15. Mittaa kaivojen absorbanssit 450nm ja laske tulokset. Bi-chromatic-mittausta (referenssvulla) välillä 600
- 690 nm suositellaan tehtäväksi
Muodostunut värikompleksi on stabiili korkeintaan 30 minuutjan, joten absorbanssit tulee mitata viimei-
stään 30 minuutin kuluttua stop-liuoksen inkuboinnin jälkeen.

2. Älä vaihda eri lottien välisiä reagensseja

3. Kaikki reagenssit tulee olla huoneenlämpöisiä (testattaessa) Valmistaudu testaukseen siten, että kaikki
tarvittavat välineet ja reagenssit ovat helposti ja nopeasti saatavilla, koska kun on aloitettu se tulee
tehdä loppuun asti ilman pidempiä keskeytyksiä, jotta tulokset olisivat mahdollisimman luotettavia
4. Tee testi annettujen ohjeiden mukaisesti, ja tee työvaiheet työohjeen järjestyksen mukaisesti
5. Käytä aina tuoretta näyte liuosta (katso säilyvyys)
6. Pipetoi kaikki näytteet kuoppalevyn kaivojen pohjalle
7. Välttääksesi kontaminaatioita, vaihda pipetinkärki aina kun pipetoit eri reagensseja
8. On tärkeää pestä ja kuivata mikrotiitterilevyn kaikki kaivot kunnolla varmistaaksesi parhaimman loppu-
tuloksen
9. Kaikki inkubaatioajat tulee tehdä ns. kellontarkasti
10. Kontrolliseerumi tai kontrollipooli tulee tarkistaa tietyin väliajoin näytteenä, jotta testin toimivuus voi-
daan todeta
11. Älä käytä mikrotiitterilevyn kaivoja uudelleen
Kaikille kontrolleille on annettu tietty konsentraatio, joka on merkitty kunkin pullon kylkeen. Näitä konsen-
traatioita käyttämällä voidaan piirtää kalibrointikäyrä, jonka avulla voidaan laskea potilasnäytteiden pitoisu-
udet semi-kvantitatiivisesti.
TULOSTEN TULKINTA
Laadun kontrollointi
Tämän testin tulokset ovat luotettavia ainoastaan silloin, kun positiivisen kontrollin (1), ja negatiivieen kon-
trollin (2) sekä stjaardien (Kalibraattorit) A ja F mittaustulokset menevät raja-arvojen sisälle 450 nm mittau-
salueella. Raja-arvot löytyvät jokaisen kitin mukana toimitettavasta laatusertifikaatista (Quality Control
Certificate). Jos näiden kolmen kontrollin tulokset ovat asetettujen arvojen ulkopuolella, ei testin tulokset
ole luotettavia, ja testi tulee tehdä uudelleen.
Tulosten laskeminen
Tämän testin tulosten laskemiseksi suositellaan 4-Parametri vakiokuvaajan sovitusta, mutta myös spline ja
log-log koordinaatit soveltuvat.
Lin-Log Plot (suositeltava)
Ensiksi lasketaan kaikkien kalibraattoreiden rinnakkaisnäytteiden keskiarvotulokset.
Potilasnäytteiden/näytteiden pitoisuudet voidaan tulostaa tältä käyrältä interpoloimalla.
Tulosten tulkinta

REAGENSSIEN VALMISTUS Female: 20 – 50 years 22 – 112 ng/ml Female: 65 – 90 years 13 – 651 ng/ml
"Pesu-liuoksen" valmistus Male: 20 – 50 years 34 – 310 ng/ml Male: 65 – 87 years 4 – 665 ng/ml
Liuota jokainen "wash solution" ampulli (konsentraatio 50x) deionisoituun tai tislattuun veteen niin, että Umbilical cord blood: 30 – 276 ng/ml Infants: 0,5 month 90 – 628 ng/ml
lopputilavuus on 1000 ml. Tämä liuos on käyttövalmis. Säilytä jääkaapissa, liuos pysyy stabiilina 2-8 °C:ssa Infants: 1 month 144 – 399 ng/ml Infants: 2 month 87 – 430 ng/ml
vähintään 30 päivää valmistuksesta tai vanhentumispäivään, joka on merkitty etikettiin. Infants: 4 month 37 – 223 ng/ml Infants: 6 month 19 – 142 ng/ml
Infants: 9 month 14 – 103 ng/ml Infants: 12 month 1 – 99 ng/ml
Children: 6 mon. – 15 Years 7 – 142 ng/ml

2/3 5FE-0804-02-fin
Positiiviset tulokset pitää todentaa huomioimalla potilaan kliininen status, samoin hoitoihin liittyvät päätök-
set ovat potilaan yksilöllisistä näkökohdista riippuvaisia.

TOISTETTAVUUS
Tarkkuus (toistettavuus): Kitin levyjen välinen:3.4 - 5.0 %; Kittien välinen: 1.7 - 5.9 %
Herkkyys: 5 ng/ml

3/3 5FE-0804-02-fin