DETERMINACIÓN DE NITRÓGENO TOTAL EN SUELOS USANDO EL MÉTODO

KJELDAHL

I. OBJETIVOS

a. Determinar el porcentaje de nitrógeno total en suelo, utilizando el método

Kjeldahl.
b. M

II. MATERIALES Y EQUIPO

Materiales

 Muestra de suelo
 Matraz Kjeldahl
 Mechero Bunsen
 Trípode
 Malla con asbesto
 Soporte universal
 Pinza
 Vidrios de reloj
 Beaker 50, 100 y 400 mL
 Bureta de 50 mL
 Pinza para bureta
 1 matraz aforado de 500 mL
 1 matraz aforado de 50 mL
 Horno de desecación
 Matraz Erlenmeyer de 100 mL
 Embudo de vidrio de vástago largo
 Matraz de destilación
 Tubos de vidrio
 Condensador
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  Tubo de goma
 Pipeta y pipeteador electrónico
 Probeta
 Mortero y pistilo
 3 perlas de ebullición
 Tapones de hule
 Espátulas

Reactivos:

 Ácido clorhídrico concentrado (HCl)

 Verde de bromocresol sólido
 Alcohol etílico al 96%
 Hidróxido de sodio (NaOH)
 Sulfato de potasio (K2SO4)
 Ácido sulfúrico concentrado (H2SO4)

III. INTRODUCCIÓN

El nitrógeno es un elemento indispensable para la vida, forma parte de las

principales biomoléculas de todos los seres vivos. Es también uno de los
elementos más abundantes en la Tierra, pues en su forma gaseosa (N 2) constituye
el 78% de la atmósfera. Sin embargo, la cantidad de nitrógeno presente en
muchos suelos es escasa, debido a su propia dinámica y a su ciclo biogeoquímico.
El nitrógeno puede llegar al suelo gracias a los aportes de materia orgánica y a la
fijación bacteriana a partir del aire.

Dentro del suelo es aprovechado por las plantas, animales y microorganismos que
lo incorporan a sus tejidos. Cuando dichos organismos se mueren, el nitrógeno
reingresa al suelo completando el ciclo. Este ciclo es complejo e involucra una
serie de reacciones y organismos con diferentes metabolismos. Siempre comienza
con compuestos orgánicos sencillos (NH4+, NO2-, NO3-, N2, NH3) y termina con

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compuestos orgánicos complejos; que a través de la descomposición regresan a
la etapa de compuestos sencillos.

En los microorganismos la carencia de nitrógeno puede afectar el crecimiento, por

lo que la población microbiana no tendrá un desarrollo óptimo. En contraste,
demasiado nitrógeno permite el crecimiento microbiano rápido y acelera la
descomposición; pero puede crear problemas de olor en condiciones anaerobias.
Además, el exceso de nitrógeno puede ser liberado como amoniaco; en tanto que
el nitrógeno aprovechable escapará en forma de gas.

En los suelos normalmente el contenido de nitrógeno varía de 0.05 a 2% en sus

diferentes formas.

En la siguiente tabla se presentan valores de nitrógeno que sirven para evaluar la

calidad de un suelo.

Tabla 1: Criterios para evaluar un suelo con base en su contenido de

nitrógeno total

Categoría Valor (%) de nitrógeno en el suelo

Extremadamente pobre  0.032
Pobre 0.032 – 0.063
Medianamente pobre 0.064 – 0.095
Medio 0.096 – 0.126
Medianamente rico 0.127 – 0.158
Rico 0.159 – 0.221
Extremadamente rico  0.221
Fuente: Moreno, 1978.

El método de Kjeldahl, desarrollado en 1883 por Johan Kjeldahl, sigue siendo uno
de los más exactos y ampliamente utilizados para la determinación de nitrógeno.
Este método fue modificado a método Micro-Kjeldahl por Bremner en 1965.
Comprende tres fases fundamentales:

1) Digestión de la muestra

La muestra de suelo se somete a digestión por calentamiento de ácido sulfúrico y

por una mezcla de sales que aceleran y facilitan la oxidación de la materia
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orgánica y la conversión de todas las formas de nitrógeno N+3 a radicales amonio
(NH4+).

A continuación se muestra la ecuación química que describe el proceso de

digestión:

N orgánico + H2SO4  (NH4)2SO4 + H2O + CO2 + otros ………

2) Destilación

Una vez transformado el nitrógeno en NH4+, se expone a una base fuerte como el
hidróxido de sodio para formar hidróxido de amonio, que por la acción del calor se
descompone en amoniaco (NH3) y agua.

A continuación se muestra la ecuación química que describe el proceso de

destilación:

(NH4)2SO4 + 2NaOH  2NH3 + Na2SO4 + 2H2O

3) Valoración o titulación

El amoniaco desprendido por la reacción se recoge en un volumen conocido de

solución valorada de ácido clorhídrico y por comparación con un blanco se
determina la cantidad de ácido que reaccionó con el NH3.

A continuación se muestra la ecuación química que describe el proceso de

titulación:

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 2NH3 + 2H2SO4  (NH4)2SO4 + H2SO4
Sin cambio de color

IV. PREVIO A LA EJECUCIÓN DE LA PRÁCTICA DE LABORATORIO

 Lea cuidadosamente la práctica de laboratorio, analizando cada paso del

procedimiento hasta asegurarse de entender el porqué de cada uno de
ellos.
 Investigue sobre los daños que puede causar el ácido sulfúrico por
ingestión, inhalación y contacto con la piel.
 Complete la siguiente tabla:

Intervalo de
Color de la Color de la
Indicador transición o
forma ácida forma básica
viraje (pH)
Verde de
bromocresol

V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Preparación de la muestra

 Pesar una muestra de suelo (aproximadamente 5.00 g) y pasarla por un

tamiz para eliminar objetos grandes como rocas, restos de vegetales, etc.
 Secar la muestra de suelo en horno de desecación a 100°C durante 90
minutos.

Preparación de los reactivos

 H2SO4 98%(v/v): medir con una pipeta 9.8 mL de ácido sulfúrico

concentrado y transferirlo a un matraz aforado de 10 mL, diluir con agua
destilada y llevar hasta marca de aforo.
 NaOH 6 M: medir 11.9 g de hidróxido de sodio en un beaker y diluir con
agua destilada. Transferir a un matraz aforado de 50.00 mL y enjaguar el

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 beaker por lo menos tres veces y recoger los lavados en el matraz; llevar el
matraz a marca de aforo.
 Verde de bromocresol: medir 0.10 g del indicador y disolverlo en 14.3 mL
de NaOH 0.01 M. Después agregar aproximadamente 225 mL de agua
destilada (Nota: hacer una sola preparación en todo el curso).
 NaOH 0.1 M: pesar 0.40 g de hidróxido de sodio en beaker, diluir con agua
destilada y transferir el líquido a un matraz aforado de 100.00 mL. Lavar
con agua el beaker y colocar los lavados en el matraz, aforar.
 NaOH 0.01 M: pesar 0.02 g de hidróxido de sodio y

Digestión

 Montar un equipo de digestión como el que se muestra en la Fig. 1.

Fig. 1: montaje de digestión Kjeldahl.

 Pesar una muestra de suelo seco de 0.25 a 1.00 g, que dependerá de la

materia orgánica contenida en el suelo, entre más materia orgánica tenga
un suelo, menos serán los gramos de la muestra.
 Colocar la muestra de suelo en un matraz Kjeldahl seco, este debe estar
formando parte de un montaje de digestión.

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  Adicionar 10.0 g de sulfato de potasio (K2SO4).
 Agregar 25.00 mL de ácido sulfúrico (H2SO4) al 98% (v/v).
 Calentar la muestra con ebullición suave durante 30 minutos. El matraz
Kjeldahl debe estar a 30° de inclinación, hacia el lado opuesto del operador;
el matraz debe estar colocado dentro de una campana o extractor de
gases, en caso de no haber, utilice un tapón de hule para evitar la fuga de
gases. (Nota: tome en cuenta que los gases de ácido sulfúrico son
peligrosos).
 Una vez terminada la digestión, apagar el digestor y dejar enfriar la
muestra.

Destilación

 Montar un equipo de destilación como el que se muestra en la Fig. 2.

 Añadir al matraz Kjeldahl frío 50.00 mL de agua destilada y mezclar
vigorosamente hasta una disolución completa.
 Filtrar el líquido y transferir al matraz para destilación mostrado en el
montaje de la Fig. 2.
 Añadir 50.00 mL de NaOH 6 M, sosteniendo el matraz inclinado de modo
que se deposite en el fondo.
 Colocar en la salida del aparato de destilación un vaso de precipitados de
400 mL que contenga 50.00 mL de HCl patrón. Colocar un embudo de
vidrio sobre el vaso de precipitados, sujetándolo por debajo del nivel del
líquido para evitar fuga de gases (véase Fig. 2).
 Conectar el flujo de agua al condensador e iniciar la destilación. Una vez
terminada la destilación, retirar el embudo del vaso de precipitados antes
de alejar el mechero del matraz (para evitar que el destilado regrese por
vacío hacia el condensador). Se enjuaga completamente el embudo con
agua destilada y se recogen los lavados en el vaso de precipitados.

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Titulación

 Transferir el destilado a un matraz Erlenmeyer de 100 mL. Enjuague el

vaso de precipitados con agua destilada y recoja los lavados en el
Erlenmeyer.
 Añada seis gotas de la solución del indicador verde de bromocresol al
Erlenmeyer.
 Realizar un montaje para titulación, utilice una bureta con capacidad de 50
mL.
 Titular el nitrógeno amoniacal con una solución de hidróxido de sodio
(NaOH) 0.1 M. Titule hasta el punto final, de color azul; lo que se busca es
la primera aparición del color azul pálido.

Cálculos

VI. CUESTIONARIO

 M
VII. BIBLIOGRAFÍA

 Benton, J. (1991). A guide to Kjeldalh nitrogen determination methods and

apparatus. Houston: LABCONCO.
 Fernández, L. et al (2006). Manual de técnicas de análisis de suelos
aplicadas a la remediación de sitios contaminados. México: Secretaría de
Medio Ambiente y Recursos Naturales.
 Harris, D. (____). Análisis químico cuantitativo. Grupo Editorial
Iberoamérica.
 Moreno, D. (1978). Clasificación de pH del suelo, contenido de sales y
nutrientes asimilables. México: INIA-SARH.

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