Professional Documents
Culture Documents
I II
Gambar. 1 TLC sidik jari ekstrak rebusan C. fistula daun dari 10 lokasi. Saya terdeteksi di bawah UV 365 nm, II disemprot
dengan 10% KOH. 1 = Sukhothai, 2 = Nan, 3 = Udon Thani, 4 = Roi Et, 5 = Kalasin, 6 = Phuket, 7 = Nakhon Si Thammarat, 8 =
Bangkok, 9 = Saraburi, 10 = Ubon Ratchathani, R = Rhein, E = emodin, AE = Aloe-emodin, C = Chrysophanol, P = Physcione.
Diterima: 14 Agustus 2009. 28 Oktober, 2009. Asli Penelitian Kertas
®
International Journal of Biomedis dan Farmasi Ilmu Pengetahuan 3 (1), 42-45 © Global 2009 Buku Sains
Diterima:.asam chrysophanic dan sennosides (Chowdhury et al 1996; Misra . et al 1996; Rani et al 1998;. Dutta dan
De 2001; Bahorun et al 2005;. Rizvi et al 2009).. Dalam pekerjaan kami, sidik jari TLC dari ekstrak daun rebusan
menunjukkan Rhein sebagai komponen antrakuinon utama (Gambar. 1), sama seperti ekstrak pod matang
(Sakulpanich dan Gritsanapan 2008). Dalam pengobatan tradisional Thailand, polong matang telah digunakan
sebagai obat pencahar untuk waktu yang lama dengan merebus dengan air dan disaring melalui kain muslin. Filtrat
kemudian menguap dan ekstrak lembut dibuat sebagai pil kecil (Pongbunrod 1949). Kegiatan pencahar adalah
tergantung pada tingkat konten total glikosida antrakuinon yang Starr dard Jamu ASEAN direkomendasikan tidak
boleh kurang dari 0,5% dari bahan baku daun kering. Panan yang diperbaiki mengumpulkan waktu untuk obat daun
digunakan dalam pengobatan nal traditio- Thailand adalah periode sebelum berbunga sementara sebagian besar
sampel daun yang mengandung kandungan tinggi glikosida antrakuinon yang sampel yang dikumpulkan di musim
panas dan musim dingin (Gritsanapan et al. 2005). Dengan demikian, sangat menarik untuk inves- tigate kandungan
total glikosida antrakuinon dalam daun C. fistula yang dikumpulkan selama periode direkomendasikan untuk
menunjukkan / sumber yang buruk baik dari obat pencahar. Dalam kasus sumber yang baik, daun C. fistula dapat
digunakan sebagai alternatif sumber polong yang tersedia hanya setahun sekali. Sejak antrakuinon glikosida yang
larut dalam air dan rebusan adalah metode ekstraksi yang tepat (Sakulpanich dan Gritsanapan 2008). Ekstrak
rebusan disiapkan untuk penelitian ini.
BAHAN DAN METODE
Bahan Tanaman
Daun matang C. fistula dikumpulkan dari 10 provinsi yang berbeda di empat wilayah Thailand: utara, selatan, bagian tengah dan
utara-timur di awal musim panas (Februari-Maret) 2008. Mereka diidentifikasi dengan perbandingan dengan herbarium (BKF. No
118.493, BKF. No 114.900) di The Forest Herbarium, ment departemen-departemen dari Taman Nasional, Margasatwa dan
Konservasi Tanaman, Departemen Sumber Daya Alam dan Lingkungan, Bangkok. Voucher spesimen (WCFL001-WCFL010)
diendapkan di departemen-departemen ment Farmakognosi, Fakultas Farmasi, Universitas Mahidol.
Daun yang dibersihkan dan dikeringkan pada 50 ° C selama 6 jam. Setiap sampel daun bubuk dan melewati saringan (mesh #
40). Sampel bubuk disimpan dalam wadah kedap udara di proteksi dari cahaya, pada suhu kamar (28-30 ° C). Wadah disimpan di
dalam desikator selama gel silika dikeringkan sampai digunakan.
Metode ekstraksi
Daun bubuk dari masing-masing sampel dari C. fistula (20,0 g) direbus dengan air suling (200 ml) selama satu jam pada 95-98 °
C. Ekstrak disaring dan marc itu kembali direbus dengan air suling 6-7 kali sampai habis, dipantau oleh reaksi Borntrager ini.
Ekstrak dari setiap sampel digabungkan, disaring dan filtrat diuapkan sampai kekeringan pada bak air mendidih untuk
menghasilkan ekstrak kasar coction de-.
Analisis TLC dari ekstrak daun rebusan C. fistula dari 10 lokasi
TLC sidik jari dilakukan pada plat aluminium Precoated silika gel 60F
254
Metode Validasi untuk analisis kuantitatif total glikosida antrakuinon oleh UV-vis metode spektrofotometri
Linearitas
Komponen utama, rhein, adalah digunakan sebagai standar untuk analisis kuantitatif total glikosida antrakuinon. Kurva kalibrasi
standar Rhein dibuat dari 5 konsentrasi (1,92 × 10-6 untuk 9,60 × 10-6 g / ml). Mereka kemudian ditambahkan dengan 0,5% b / v
dari magne- sium asetat dan disesuaikan dengan volume dengan metanol. Semua ini centrations con diukur dengan metode
spektrofotometri UV-vis pada 515 nm (Lambda 35 UV / VIS spektrofotometer, Perkin Elmer, USA). Sebuah sel kuarsa 1,0 cm
dan software UV Winlab digunakan. Pengukuran dilakukan dalam rangkap tiga. Hubungan antara konsentrasi dan absorbansi
diplot. Linearitas itu Eva- luated dengan analisis regresi dan jumlah residual kuadrat dan koefisien korelasi (r2) dihitung.
Pengulangan dan reproduktifitas
Ketepatan metode ini ditentukan oleh pengulangan dan reproduktifitas. Pengulangan dievaluasi dengan pengujian sampel 6 kali
pada konsentrasi yang sama, dua kali sehari. The ducibility repro- dievaluasi dengan membandingkan tes pada tiga hari ferent
dif-. Persentase relatif standar deviasi (% RSD) dihitung. Nilai harus kurang dari 5%.
Analisis kuantitatif dari jumlah glikosida antrakuinon dalam ekstrak daun rebusan C. fistula dari berbagai
lokasi dengan metode spektrofotometri UV-vis
Prosedur untuk analisis total glikosida antrakuinon dimodifikasi dari metode untuk analisis derivatif hidroksiantrasena dari Senna
alata (L.) Roxb . dijelaskan dalam Standar Jamu ASEAN. Prosedur ini ditunjukkan dalam Skema 1.
HASIL
TLC sidik jari ekstrak rebusan C. daun fistula dikumpulkan dari 10 lokasi yang berbeda menunjukkan pola lar
Serupa sementara Rhein ditemukan menjadi unsur utama pada nilai HRF 36 (Gbr. 1).
Metode spektrofotometri UV-vis divalidasi untuk linearitas dan presisi. Hubungan diperoleh dalam dengan korelasi
rentang koefisien konsentrasi (r2) dari dari 1,92-9,60 0,9992. The ug / ml representa- dari Rhein
persamaan linear tive adalah y = 49,209.3254x - 0,0049 (Tabel 1). Presisi (% RSD dari pengulangan dan bility
reproduci-) dari Rhein ditunjukkan pada Tabel 2. Ketepatan metode ini dapat diterima seperti diungkapkan oleh%
RSD kurang dari 2%.
Sepuluh sampel daun C. fistula dikumpulkan selama periode mengumpulkan direkomendasikan untuk obat daun
digunakan dalam pengobatan tradisional Thailand. Isi total glikosida tidak anthraqui-, dihitung sebagai Rhein, dalam
semua ekstrak rebusan berkisar antara 0,6212 ± 0,0006-2,0077 ± 0,0016% b / b (rata-rata 1,5162 ± 0,4642% b / b),
sedangkan di daun kering yang 0,0877 ± 0,0006-0,6340 ± 0,0016% b / b (rata-rata 0,3632 ± 0,1618% b / b) (Tabel
3).
Isi rata-rata tertinggi dari jumlah antrakuinon cosides gly- dalam ekstrak rebusan daun dan daun kering yang (10 ×
20 cm) menggunakan etil asetat: metanol:
ditemukan dalam sampel pusat (1,7768 ± 0,1667% b / w
dan air (100: 17 : 13) sebagai fase gerak Perkembangan jarakcm..
0,4627 ± 0,0586% b / b, masing-masing) dan terendah 8,0
Setelah mengeluarkan piring dari ruangan, pelat
rata-rata isi (0,8374 ± 0,3058% b / b dan 0,1304 ±
dikeringkan menggunakan pengering udara dan semprot dengan 10% alkohol potas-
0,0604% b / b, masing-masing) ditemukan di selatan
solusi hidroksida sium. Antrakuinon menunjukkan bintik-bintik merah muda.
Sampel(Tabel 3). nilai-nilai HRF komponen utama
ditentukan dengan membandingkan dengan nilai HRF standar Rhein.
PEMBAHASAN
sumber penting dari antrakuinon adalah Cassia / Senna genera seperti Senna alata, Cassia angustifolia, dan Cassia
fistula. Tanaman ini mengandung antrakuinon baik sebagai kerucut agly- dan glikosida dan telah digunakan sebagai
obat pencahar. Glikosida antrakuinon berada di pencahar aktif bentuk
43
glikosida antrakuinon dalam daun fistula Cassia. Sakulpanich dan Gritsanapan
Sampel (0,3 g)
Tambahkan 30 ml H
2
O, campuran, menimbang dan refluks selama 15 menit
campuran encer
Biarkan dingin, menimbang, sesuaikan dengan berat asli dengan air dan centrifuge pada 4000 rpm selama 10 menit
Residu Supernatan
1. 20 ml supernatan + 2 M HCl 0,1 ml 2. Ekstrak dengan kloroform 15 ml × 3 kali
lapisan berair
chloroform lapisan (discard) 1. 2. Tambahkan Centrifuge 0,1 g NaHCO
4000 rpm
3,kocok selama selama 3 menit 20 menit
Glikosida fraksi
1. 10 ml supernatan + 20 ml 10,5% (w / v) 2. Tambahkan 1 ml conc. HCl, refluks selama 20 menit
yang menunjukkan tingkat potensi pencahar bahan tanaman / ekstrak. Standar ASEAN Jamu merekomendasikan
bahwa persentase cosides gly- hidroksiantrasena di daun kering dari S. alata tidak boleh kurang dari 0,5% b / b.
Dalam Farmakope Eropa, persentase glikosida hidroksiantrasena di C. angustifolia daun kering dianjurkan tidak
boleh kurang dari 2,5. Karena kandungan total glikosida antrakuinon dalam daun kering dari C.
FeCl
3
· 6H
2
O, refluks selama 20 menit
aglycone
Extract dengan eter 25 ml × 3 kali
lapisan Eter
1. Cuci dengan 15 ml H
2
encer lapisan (discard)
Tabel 1 data kurva kalibrasi standar acuan Rhein di 0,5% magnesium asetat dalam metanol. No Konsentrasi
Absorbance Rhein (g / ml) 1 2 3
O × 2 kali 2. Sesuaikan dengan 100 ml denganeter
lapisan Ether(100 ml)
Divide untuk 25 ml dan menguap sampai kering
Residu
Larutkan dengan 10 ml 0,5% (w / v) magnesium asetat dalammetanol
Solusiyang mengandung aglikon antrakuinon
Ukur absorbansi pada 515
nm%dari total glikosida antrakuinon (dihitung sebagai rhein)
Skema 1 analisis kuantitatif dari jumlah glikosida antrakuinon dalam ekstrak daun rebusan.
Tabel parameter validasi 2 Metode untuk analisis kuantitatif total glikosida antrakuinon dalam jangka Rhein denganUV-spectro-
Rata-rata ± SDyang
metodefotometrikdiusulkan.Parameter Hasil 1 1,92 × 10-6 0,0810 0,0835 0,0846 0,0830 ± 0.00
Rentang linearitas 1,92-9,60 ug / ml 2 3,84 × 10-6 0,1864
0,1856 0,1872 0,1864 ± 0.00
Regresi equationa y = 49,209.3254x - 0,0049 3 5,76 ×
10-6 0,2853 0,2763 0,2744 0,2787 ± 0,01
koefisien korelasi (r2) 0,9992 4 7,68 × 10-6 0,3695 0,3673
0,3654 0,3674 ±
0.00%RSD dari pengulangan 1,21 5 9,60 × 10-6 0,4702
0,4726 0,4741 0,4723 ±
0.00%RSD dari reproduksi 1.21
kapak adalah konsentrasi Rhein di ug / ml, y adalah absorbansi pada 515 nm
44
fistula itu 0,09-0,63% b / b (rata-rata 0,36% b / b), ketika membandingkan isi dari glikosida hidroksiantrasena di
daun kering dari S. alata, C. angustifolia , dan C. fistula, kandungan glikosida antrakuinon dalam daun C. fistula
sekitar 72 dan 15% dari isi glikosida antrakuinon di S. alata dan C. angustifolia daun, masing-masing.
Untuk ekstrak air, kandungan total glikosida antrakuinon dalam ekstrak daun rebusan C. fistula
International Journal of Biomedis dan Farmasi Ilmu Pengetahuan 3 (1), 42-45 © 2009 Ilmu global Books
Tabel 3 Isi total glikosida antrakuinon dalam ekstrak rebusan daun dan daun kering dari C. fistula dari berbagai lokasi dihitung
sebagai Rhein. Bagian dari Thailand Provinsi
Jumlah glikosida antrakuinon dihitung sebagai Rhein% b / b dalam ekstrak
rebusan * Rata-rata% b / b di daun kering * Rata-rata Utara Sukhothai (1) 1,8960 ± 0,0014 1,6206 ± 0,3894 0,2868 ±
0,0014 0,3293 ± 0,0601
Nan (2) 1,3453 ± 0,0024 0,3717 ± 0,0024 Timur Laut Udon Thani (3) 1,8533 ± 0,0005 1,6731 ± 0,4035 0,4496 ± 0,0005 0,4469
± 0,1490
Roi Et (4) 1,0906 ± 0,0029 0,2698 ± 0,0029 Kalasin (5) 2,0077 ± 0,0016 0,6340 ± 0,0016 Ubon Rajchathani (10) 1,7409 ±
0,0015 0,4342 ± 0,0015 Central Bangkok (8) 1,8946 ± 0,0013 1,7768 ± 0,1667 0,5041 ± 0,0013 0,4627 ± 0,0586
Saraburi (9) 1,6589 ± 0,0018 0,4212 ± 0,0018 Selatan Phuket (6) 1,0536 ± 0,0008 0,8374 ± 0,3058 0,1732 ± 0,0008 0,1304 ±
0,0604
Nakhon Si Thammarat (7) 0,6212 ± 0,0006 0,0877 ± 0,0006 rata 1,5162 ± 0,4642 0,3632 ± 0,1618
* dinyatakan sebagai mean ± SD (n = 3)
adalah 0,62-2,01% w / w (rata-rata 1,52% b / b) yaitu sekitar 3.5- 5.0 kali lebih kecil dari hidroksiantrasena glikosida
konten dalam daun senna ekstrak (5,5-8,0% b / b) (Dewan Eropa 2000).
Dosis yang dianjurkan dari sisi glyco- hidroksiantrasena di ekstrak daun senna adalah 15-30 mg (komite ahli
khusus dari lembaga federal Jerman untuk obat dan alat kesehatan 1998; European Medicines Agency 2006).
Dengan demikian, dosis C. daun fistula rebusan ekstrak equiva- lents dengan dosis ekstrak daun senna harus 1-2 g
(0.99- 1,97 g) sedangkan dosis daun kering harus 4-9 g (4,17-8,33 g).
Wilayah dan cuaca budidaya merupakan faktor penting yang mempengaruhi jumlah total glikosida antrakuinon
dalam daun C. fistula. The wilayah North-East of Thailand, Tengah dan di mana cuaca hangat di musim panas dan
tidak terlalu dingin di musim dingin, daun mengandung jumlah yang lebih tinggi (rata-rata 0,46 dan 0,45% berat
kering, masing-masing) dari jumlah antrakuinon glikosida dari sampel daun dikumpulkan dari Selatan, di mana
cuaca dingin dan hujan sepanjang tahun. Semua ekstrak rebusan menunjukkan pola yang sama sidik jari TLC,
sementara Rhein adalah komponen utama seperti ekstrak pod (Sakulpanich dan Gritsanapan 2008). Dengan
demikian, sampel daun tengah dan utara-timur C. fistula, yang berisi sekitar 0,5% dari total antrakuinon sisi glyco-,
dapat digunakan sebagai sumber alternatif untuk obat pencahar. Juga, daun C. fistula, yang tersedia sepanjang tahun,
dapat digunakan sebagai pengganti polong yang tersedia hanya setahun sekali, untuk tujuan pencahar.
KESIMPULAN
Isi glikosida antrakuinon dalam daun dan ekstrak daun rebusan C. fistula akan berguna untuk fin- ding sumber yang
baik dari obat pencahar herbal alternatif dan mempromosikan standardisasi bahan baku tanaman dan saluran mantan
nya. Konten antrakuinon glikosida menunjukkan potensi tive laxa- C. daun fistula dan ekstrak mereka. The-abad
netral dan Utara-Timur sampel daun kering mengandung sekitar 0,5% b / b dari jumlah glikosida antrakuinon.
Dengan demikian, mereka memiliki lity abi- untuk dikembangkan sebagai obat pencahar herbal alternatif dan
digunakan sebagai pengganti C. fistula polong yang tersedia setahun sekali.
UCAPAN TERIMA KASIH
Proyek ini diberikan oleh The Thailand Research Fund (TRF) dengan Kantor Kecil dan Menengah Promosi Usaha (OSMEP).
PUSTAKA
Negara ASEAN (1993) Standar ASEAN Herbal Medicine Vol. 1,
ASEAN, Jakarta, pp 116-128
45
Bahorun T, Neergheen VS, Aruoma OI (2005) konstituen fitokimia
Cassia fistula. Afrika Journal of Biotechnology 4, 1530-1540 Bennett A (1975) Farmakologi otot kolon. Gut 16, 307-311
Bruneton J (1995) Farmakognosi, Fitokimia, Tanaman Obat, Lavoi-
SIER Publishing, Paris, pp 349-354 Chowdhury S, Chowdhury A, Mustafa AKM (1996) Sennoside B kaya konsentrat aktif dari
Cassia fistula. Jurnal Penelitian Ilmiah dan Industri 31 (2), 91-97 Dewan Eropa (2000) Eropa Farmakope-Tambahan (3 Ed),
Dewan Eropa, Strasbourg, pp 1173-1176 Departemen Taman Nasional, Margasatwa dan Konservasi Tanaman (2005 )
Ratchaphruek. Tersedia online: http://www.dnp.go.th/EPAC/plant/Golden_Shower.htm Departemen Ilmu Kedokteran,
Departemen Kesehatan Masyarakat (1995) Thai
dirinya-balPharmacopoeia (Vol 1), Prachachon Co, Ltd, Bangkok, pp 21-23 De Witte P, Lemli L (1990) metabolisme obat
pencahar antranoid. Hepato-
gastroenterologi 37, 601-605 Dutta A, De B (2001) Cassia Sebuah sumber dari sennoside B (kromosom
fistula:.morfologi dan konten sennoside Acta Horticulturae 576, 45-48 European Medicines Agency (grafik mono herbal 2006)
Komite Komunitas pada daun senna (Sennae folium) [Draft] London:.. Komite Herbal Produk Obat, EMEA Tersedia online:
http://www.emea.europa.eu/pdfs/human/hmpc/sennae_folium/5186906en.pdf Gritsanapan W, . Phadungrakwitya R, Nualkaew S
(2005) Investigasi sumber antrakuinon alternatif dari Cassia spp tumbuh di Thailand in:. Mukherjee PK (Ed) Konferensi
Internasional tentang Promosi dan mengembangkan- ment dari Botanicals dengan International Koordinasi, Badan Book Sekutu,
Kolkata, pp 120 -126 Misra TN, Singh RS, Pandey HS, Pandey RP (1996) konstituen kimia
dari fraksi heksan Cassia fistula polong. Fitoterapia 67 (2), 173-174 Moreau JP, Moreau S, Skinner S (1985) Perbandingan
disposi- fisiologis tion beberapa glikosida antrakuinon dan aglikon. B iopharmaceutics dan Obat Disposisi 6, 325-334
Pongbunrod S (1949) Mai Tet Meuang Thailand, Kasembannakit, Bangkok, pp
137-139 Rani M, Kalidhar SB (1998) Sebuah antrakuinon turunan baru dari Cassia lanjutnya retak tula Linn. polong. India
Journal of Chemistry, Bagian B: Kimia Organik Termasuk Obat Kimia 37B (12), 1314-1315 Rizvi MMA, Irshad M, Hassadi Gel,
Younis SB (2009) Bioefficacies dari Cas- sia fistula: sebuah labrum India. Afrika Jurnal Farmasi dan pharmaco- logi 3, 287-292
Sakulpanich A, Gritsanapan W (2008) Metode Ekstraksi untuk konten yang tinggi
antrakuinon dari Cassia fistula polong. Thai Jurnal Penelitian Kesehatan 22, 167-172 Shi L, Xu L, Hou S, Lin S, Yang H, Ma T
(2006) efek Aktivasi katarsis Rhein senyawa alami ke saluran CFTR klorida. Penelitian Kimia di Universitas Cina 22, 312-314
Komite Ahli Khusus Federal Institute Jerman untuk Obat dan Alat Kesehatan (1998) The Complete Jerman Komisi E
Monogragh: Panduan Terapi untuk Obat-obatan herbal, Amerika Botanical Council, dana BOS ton, pp 204- 208 The Forest
Herbarium, Royal Departemen Kehutanan (1984) Flora of Thailand
(Vol 4, Bagian I) Leguminosae-Caesalpinioideae, Bangkok, pp 102-103 Thomson RH (1971) Tentu Terjadi quinines (2 Edn),
Academic Press,
London, pp 367, 402-403 Van Gorkom BA, de Vries EG, Karrenbeld A, Kleibeuker JH (1999) Anthra- obat pencahar noid dan
potensi efek karsinogenik mereka. Pencernaan Pharma-cology dan Terapi 13, 443-452