Práctica de Genética General (BI 346) Laboratorio de Biología y Genética

PRÁCTICA 06
CRUCE DE PRUEBA, RETROCRUZAMIENTO, LIGAMIENTO Y RECOMBINACIÓN

I. INTRODUCCIÓN

1. CRUCE DE PRUEBA: El cruzamiento de prueba es una metodología diseñada por Mendel, que
se utiliza en experiencias de crías de animales y vegetales, para poder determinar si un individuo
es puro o híbrido.

Cuando se estudia descendencia que difiere en una o más

características y que presentan dominancia completa, se
observa un mismo fenotipo para dos genotipos diferentes
(homocigote dominante o heterocigote). Para poder
determinar el genotipo verdadero se emplea el cruce de
prueba, que consiste en cruzar al individuo de genotipo
desconocido con un homocigote recesivo.

El propósito del cruzamiento de prueba es descubrir cuántas

clases de gametos diferentes son producidos por el individuo
cuyo genotipo es desconocido. Un individuo homocigótico dominante producirá solamente una
clase de gametos; un individuo monohíbrido (heterocigoto para un locus) genera dos tipos de
gametos con igual frecuencia.

Ejemplo 01: Si una oveja de pelaje negro se le somete a un cruzamiento de prueba y se observa
que en la descendencia aparecen individuos blancos y negros en número aproximado e igual;
determine el genotipo de la progenitora negra.

Solución:
Progenitores (P) Hembra x Macho
Fenotipo negra blanco
Genotipo N_ nn
Gametos ½ N, ½ ? 1n

Proporción genotípica ½ Nn : ½ nn
Proporción fenotípica ½ negro: ½ blanco

Respuesta: La progenitora negra debe producir dos tipos de gametos y por lo tanto ella es de
genotipo heterocigote (Nn).

2. RETROCRUZAMIENTO: Consiste en cruzar un

individuo descendiente (F1 o F2) con uno de sus
progenitores o con un individuo con genotipo x
idéntico al de sus progenitores. El propósito del
retrocruzamiento es conservar una x
característica determinada en la descendencia.

Ejemplo 02: Perras homocigotas negras son cruzadas con machos blancos. Prediga las
proporciones genotípicas y fenotípicas esperadas del retrocruzamiento de la F1 con el progenitor
negro.

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Solución:
Progenitores (P) Hembra x Macho
Fenotipo negras blancos
Genotipo MM mm
Gametos 1M 1m

Proporción genotípica: Mm
Proporción fenotípica: Todos negros (hembras y machos)

Retrocruzamiento:
Progenitores (P) Hembra x Macho
Fenotipo negras negras
Genotipo Mm MM
Gametos ½ M, ½ m 1M

Proporción genotípica: ½ MM : ½ Mm
Proporción fenotípica: Todos negros

Descendencia del retrocruzamiento: 1/2 MM (homocigotas dominantes)

1/2 Mm (heterocigotos)
Proporciones fenotípicas del retrocruzamiento: 100 % negros

Ejemplo 03. Una mariposa de alas grises se cruza con una de alas negras y se obtiene un
descendencia formada por 81 mariposas de alas negras y 79 mariposas de alas grises. Si la
mariposa de alas grises se cruza con una de alas blancas se obtienen 37 mariposas de alas blancas
y 34 mariposas de alas grises. Determine el tipo de herencia y razonar e intérprete ambos
cruzamientos, indicando cómo son los genotipos de las mariposas progenitores que se cruzan y
de la descendencia, así como sus proporciones genotípicas y fenotípicas.

Solución:

Una mariposa de alas grises se cruza con una de alas negras y se obtiene un descendencia formada
por 81 mariposas de alas negras y 79 mariposas de alas grises.
Progenitores (P) Hembra x Macho
Fenotipo grises negras
Genotipo B 1B 2 B 1B 1
Gametos ½ B 1, ½ B 2 1B1

Número observado 79 grises : 81 negras

Proporción genotípica ½ B1B2 : ½ B1B1
Proporción fenotípica ½ grises : ½ negras

Si la mariposa de alas grises se cruza con una de alas blancas se obtienen 37 mariposas de alas
blancas y 34 mariposas de alas grises.
Progenitores (P) Hembra x Macho
Fenotipo grises blancas
Genotipo B 1B 2 B 2B 2
Gametos ½ B 1, ½ B 2 1B2

Número observado 34 grises : 37 blancas

Proporción genotípica ½ B1B2 : ½ B2B2
Proporción fenotípica ½ grises : ½ blancas

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Ejemplo 04. El pelaje del ganado Shorton depende de un locus cuyos alelos muestran dominancia
intermedia de manera que los colores están controlados de la siguiente manera: rojo (R1R1),
Blanco (R2R2) y rocillo (R1R2). Un segundo atributo, ausencia o presencia de cuernos esta
condicionado por otro locus con dos alelos que muestran dominancia completa. Los genotipos HH
y Hh carecen de cuernos o son “mochos” mientras que el genotipo hh tiene cuernos.

a. Se cruza una línea pura de vacas de pelaje blanco con cuernos con un semental homocigoto de
pelaje rojo y mocho y posteriormente se cruzan hembras y machos de la F1 para producir una F2.
Indicar el arreglo fenotípico de esa F2.

b. Determine el arreglo fenotípico de retrocruzar vaquillonas de la F1 con un toro homocigoto de

pelaje blanco y con cuernos.

Solución:

a. El cruce indicado R2R2hh x R1R1HH produce una F1 R1R2Hh de fenotipo rocillo y mocho.
La F2 tendrá el siguiente arreglo fenotípico:
Fenotipo Frecuencia Características
R1R1H_ (1/4)(3/4)=3/16 Rojo, mocho
R1R1hh (1/4)(1/4)=1/16 Rojo, cuernos
R1R2H_ (2/4)(3/4)=6/16 Rocillo, mocho
R1R2hh (2/4)(1/4)=2/16 Rocillo, cuernos
R2R2H_ (1/4)(3/4)=3/16 Blanco, mocho
R2R2hh (1/4)(1/4)=1/16 Blanco, cuernos

b. R1R2Hh x R2R2hh
Genotipos Frecuencia Fenotipos
R1R2Hh (1/4)(1)= 1/4 ¼ Rocillo, mocho
R1R2hh (1/4)(1)= 1/4 ¼ Rocillo, cuernos
R2R2Hh (1/4)(1)= 1/4 ¼ Blanco, mocho
R2R2hh (1/4)(1)= 1/4 ¼ Blanco, cuernos

Para las experiencias en laboratorio se utilizaran moscas de la F1 del cruzamiento correspondiente

a la herencia autosómica y que se asume es heterocigota, por lo tanto llevan enmascarado en su
genotipo el alelo recesivo.

3. LIGAMIENTO Y RECOMBINACIÓN
Ejemplo 04: En una especie vegetal existen tres genes situados sobre el mismo cromosoma. Los
genes A, B y C están situados en un cromosoma de hembra y los genes a, b y c están en el
cromosoma homólogo del macho. Representar diagramáticamente los tipos de gametos que se
producirán en la meiosis.

Respuesta:

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Clases de gametos

Caso 1: No cross over

Caso 2: Cross over

simple entre A y B

Caso 3: Cross over

simple entre B y C

Caso 4: Cross over doble

entre A y B y entre B y C

Ejemplo 05. En el conejillo de Indias el pelaje blanco (w) es recesivo respecto del pelaje negro
(W) y el pelaje ondeado (v) es recesivo respecto del pelaje lacio (V). Un criador cruza un conejillo
de Indias que es homocigótico para pelaje blanco y para pelaje ondeado con un conejillo de
Indias que es negro y con pelaje lacio. Luego se cruza la generación F1 con conejillos de Indias
que tienen el pelaje blanco y ondeado en una serie de cruzamientos de prueba. El resultado de
estos cruzamientos de prueba es la siguiente progenie:

negro, lacio 30
negro, ondeado 10
blanco, lacio 12
blanco, ondeado 31
total 83

a. ¿Los genes que en este caso determinan el color del pelaje y el tipo del pelaje se
distribuyen de manera independiente? Desarrollar la prueba de X2, para probar la hipótesis.

b. Si los genes no se distribuyen de manera independiente, ¿cuál es la frecuencia de

recombinación entre ellos?

Solución

a. ¿Los genes que en este caso determinan el color del pelaje y el tipo del pelaje se
distribuyen de manera independiente? Desarrollar la prueba de X2, para probar la hipótesis.

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Progenitores (P) Madre X Padre

Fenotipo blanco, ondeado negro, lacio
Genotipo w v W V

w v W V
Gametos w v W V

F1
Fenotipo negro, lacio
Genotipo W V

w v
Retrocruza
F1 x Recesivo W V X w v

w v w v
negro, lacio blanco, ondeado

Padre
Gametos w v

W V W V negro, lacio
Parental w v
W v W v negro, ondeado
Recombinante w v
w V w V blanco, lacio
Madre
Recombinante w v
w v w v blanco, ondeado
Parental w v

En la segregación de 2 loci independientes, una retrocruza al progenitor doble recesivo debería

producir una segregación 1 : 1 : 1 : 1. Sobre esta base se calcularía los resultados esperados para
compararlos con los resultados observados y se procede a efectuar una prueba de hipótesis
utilizando la distribución de X2 con gl = 3 y α = 0.05 para efectuar la prueba estadística respectiva.
Tabla. Test de hipótesis para cruces en fase de acoplamiento.
Gametos Resultados Resultados
F1 Observado Esperados (O-E)2/E
WV 30 (1/4)x83=20.75 4.12
Wv 10 (1/4)x83=20.75 5.57
w V 12 (1/4)x83=20.75 3.69
w v 31 (1/4)x83=20.75 5.06
Total 83 X c2 =18.45
X t2 = 7.815 , siendo los grados de libertad gl = número de clases - 1 =4-1=3 y el nivel de
confianza de 95 %.
Si X c2 > X t2 ; no se acepta la hipótesis nula.
Si X c2 < X t2 ; se acepta la hipótesis nula.

Puesto que el X c > X t , no se acepta la H0

2 2

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Se concluye que los resultados observados discrepan de los esperados y que la segregación de los
loci color del pelaje y el tipo del pelaje no es independiente.

b. Si los genes no se distribuyen de manera independiente, ¿cuál es la frecuencia de

recombinación entre ellos?

Padre
Gametos w v

W V W V 30 individuos con pelaje negro, lacio

(progenie no recombinante o
Parental w v parental)
W v W v 10 individuos con pelaje negro,
ondeado (progenie recombinante)
Recombinante w v
w V w V 12 individuos con pelaje blanco, lacio
Madre (progenie recombinante)
Recombinante w v
w v w v 31 individuos con pelaje blanco,
ondeado (progenie no recombinante o
Parental w v parental)

número de progenie recombinante

La frecuencia de recombinación es de: × 100
número total de progenie

10 + 12
Frecuencia de recombinanción= × 100
30 + 10 + 12 + 31

22
Frecuencia de recombinanción= × 100 = 26.5%
83

PRÁCTICA CALIFICADA DE DEMOSTRACIÓN DE LA HERENCIA AUTOSÓMICA: CRUCE BE

PRUEBA, RETROCRUZAMIENTO Y RECOMBINACIÓN

1. Supongamos que en el hombre el color de los ojos está controlado por un solo gen con dos
alelos. (B_), que produce ojos color marrón y es dominante sobre (b), que produce ojos de color
azul.

a) ¿Cuál es el genotipo de un individuo de ojos marrones que se casa con un individuo de ojos
azules y produce un primer individuo de ojos azules?

b) Considerando el mismo apareamiento anterior ¿Qué proporción de los dos colores de ojos
cabría esperar en los siguientes descendientes?

c) ¿Qué proporción cabría esperar en cuanto al color de los ojos en la progenie de un

apareamiento entre dos individuos de ojos marrones, cada uno de los cuales tenía un progenitor
con ojos azules?

2. En la especie vacuna, la falta de cuernos (F_), es dominante sobre la presencia (ff). Un toro sin
cuernos se cruza con tres vacas:
Con la vaca A que tiene cuernos se obtiene un ternero sin cuernos.
Con la vaca B también con cuernos se produce un ternero con cuernos.
Con la vaca C que no tiene cuernos se produce un ternero con cuernos.

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a) ¿Cuáles son los genotipos del toro y de las tres vacas y qué descendencia cabría esperar de
estos cruzamientos?

b) Determine las proporciones genotípicas y fenotípicas de la descendencia.

3. En la mosca del vinagre, la longitud de las alas puede ser normal o vestigial, siendo el carácter
vestigial recesivo respecto del normal. Al cruzar dos razas puras con las alternativas para este
carácter; determine.

a). ¿qué proporciones genotípicas y fenotípicas aparecerían en F1, F2 y F3 (resultado del cruce de
todos los individuos de F2)?

b). Si a la descendencia normal portadora de la F2, se le hace un cruzamiento de prueba, ¿cuáles

serán las proporciones genotípicas y fenotípicas de la descendencia?

4. En la calabaza, la forma discoide (D_) es dominante a la forma esférica (dd), y el color blanco
de la cáscara (B_) es dominante a la verde (bb).

a). Si en la F2 usted tiene 640 calabazas ¿cuántas de ellas serán blancas discoides y verdes
esféricas?, b). Si usted retrocruza una planta heterocigota para los dos caracteres con una doble
recesiva, ¿qué proporción espera obtener de cada uno de los cuatro fenotipos posibles?

5. En Drosophila melanogaster, el alelo dominante Hairless (H_) reduce el número normal de

quetas y es letal en homocigosis. Otro gen dominante, Supressor of Hairless (S_), que se transmite
independientemente del anterior y que también es letal en homocigosis, suprime el efecto de
Hairless. a) ¿Cuál será la composición fenotípica de la descendencia obtenida a partir de un
cruzamiento entre un individuo de fenotipo Hairless y otro de fenotipo normal portador de S, pero
no de H? b) ¿Qué proporciones fenotípicas se esperan al retrocruzar con el progenitor Hairless la
fracción fenotípica menos abundante de la descendencia del cruzamiento anterior? c) ¿Y si se
retrocruza con el progenitor portador de S_? d) ¿Y si se cruza con una cepa homocigótica para los
alelos normales de ambos loci?

6. El estado normal de patas hendidas en el cerdo es producido por el genotipo recesivo (mm).
Las patas equinas son producidas por el genotipo dominante (M_). El color blanco de la piel es
determinado por el alelo dominante de otro locus (B_) y el color negro por su alelo recesivo (bb).
Un cerdo blanco con patas equinas se cruza con una hembra con el mismo fenotipo. En la F1 se
obtuvo 12 lechones blancos con patas hendidas; 14 negros con patas equinas; 30 blancos con
patas equinas y 6 negros con patas hendidas, a). Si a todos los descendientes negros con patas
equinas de la F1 se les somete a un cruce de prueba, ¿qué proporción fenotípica podría esperarse
entre sus descendientes?, b). Si a la hembra progenitora se le somete a un cruce de prueba, ¿qué
proporción fenotípica se esperaría en su descendencia?, c). Si a todos los descendientes hembras,
blancos con patas hendidas de la F1 se les somete a un cruzamiento retrógrado con el progenitor
paterno, ¿qué proporción fenotípica podría esperarse entre sus descendientes?

7. Dos caracteres dominantes, alas rizadas (R_) y ojos de color ciruela (C_), están ligados en
acoplamiento en el cromosoma 2 de Drosophila y están asociados con una inversión cromosómica
que impide el entrecruzamiento. R y C son letales en estado homocigótico. ¿Qué descendencia
cabe esperar del cruzamiento entre hembras y machos de alas rizadas y ojos ciruela?

8. Entre las gallinas, la cabeza con cresta es producido por el gen dominante (G_) y la cabeza sin
cresta por su alelo recesivo (gg). El gen de las plumas de color negro (N_) es dominante al rojo
(nn). Un gallo homocigótica de plumaje negro y cabeza sin cresta es cruzada con otra ave

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homocigótica de plumaje rojo y cabeza con cresta. a). ¿Qué proporciones fenotípicas y genotípicas
podemos esperar del cruzamiento de prueba de sólo las aves negras con cresta de la F2? b). ¿Qué
proporciones fenotípicas y genotípicas podemos esperar del cruzamiento retrogrado de sólo las
aves rojas con cresta de la F2 con el progenitor paterno?

9. En las gallinas, el alelo P produce el tipo de cresta arveja que es dominante sobre el alelo p que
produce una cresta simple. En otro locus, el alelo dominante O produce un color azulino en la
cáscara de los huevos mientras que el recesivo, oo, produce color blanco.

El cruce de dos líneas puras produce la F1 PpOo la que se retro cruza al progenitor doble recesivo
ppoo.

a. En el cruce de la F1 PpOo x ppoo se observó la siguiente distribución fenotípica:

Fenotipo N° observado
Cresta Color del huevo
Arveja Azul 8
Arveja Blanco 192
Simple Azul 192
Simple Blanco 8
N° total observado 400
¿Cuál es la frecuencia de recombinación?
b. Identificar los gametos parentales y recombinantes de la F1
c. Determinar la fase de ligamiento en la que se encuentran los dos loci.

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