FROTIS DE SANGRE, TINCIONES WRIGHT Y GIEMSA Y CÉLULAS

SANGUÍNEAS

Daniela Suárez Trujillo, Duvalier Valencia Gaspar, Estudiantes Segundo

Semestre de Biología, grupo B, Facultad de Ciencias Básicas, Universidad de
la Amazonia,

RESUMEN
La sangre es un tejido líquido que circula a través de una serie de conductos
denominados vasos sanguíneos, los cuales se ramifican profusamente con el fin
de llevar dicha sangre a todos los tejidos de la economía corporal. En este
sentido, la sangre es un medio de trasporte, que le permite a las células
sanguíneas recircularlo entre los diferentes tejidos del cuerpo. Normalmente en
la sangre se encuentra cinco tipos de leucocitos; monocitos, linfocitos,
neutrofilos, eosinofilos y basofilos. Además de estas células se encuentran
también las plaquetas o trombocito. Para la identificación de ella, se realizó una
extensión de forma homogénea de la sangre donde consistía en quedar sobre el
porta objetos, un perfecto frotis con una cabeza, cuerpo y cola posteriormente
se aplicó dos técnicas de coloración ( tincion Wrigt y Giemsa ). Que permite
destacar sus diferencias morfologicas.
Palabras Claves: leucocitos; monocitos, linfocitos, neutrofilos, eosinofilos,
basofilos, plaquetas frotis periférico, coloración wright y Giemsa.
ABSTRACT
Blood is a tissue liquid flowing through a series of ducts called blood vessels,
which branch profusely in order to bring this blood to all tissues of the economy
body. in this sense, blood is a means of transportation, which allows blood cells
recircularlo between the different body tissues. usually in the blood is five types
of leukocytes, monocytes, lymphocytes, neutrophils, eosinophils and basophils.
in addition to these cells are also platelets or trombocito. for the identification of
it, was an extension evenly of blood where was to be on Porta objects, a perfect
swab a head, body and tail later was applied two techniques color (staining wrigt
and giemsa). allowing highlight your morphological differences.
keywords: leukocytes, monocytes, lymphocytes, neutrophils, eosinophils,
basophils, platelets smear peripheral, coloring Wright and giemsa.
INTRODUCCIÓN
La sangre es un tejido conectivo especializado en que sus células se incuentran
inmersas en una sustancia fundamental que es diferente alos demás tejidos,
debido a que es líquida, carece de fibras y hay en ella una gran variedad de
componentes químicos disueltos. (Hill R. 2006)
Cada unos de los distintos componentes que integran la sangre cumplen
funciones muy especializadas. Es así como los glóbulos rojos se encargan de
transportar gases y participan en la determinación de los grupos sanguíneos, los
glóbulos blancos tienen como función primordial defender nuestro organismo de
agentes extraños, las plaquetas intervienen en la coagulación sanguínea y la
sustancia fundamental, denominada plasma, además de transportar las células
sanguíneas, metabólitos para el buen funcionamiento del organismo. En la
sangre se encuentran los leucocitos o glóbulos blancos que son las células del
sistema inmunitario. Todos ellos difieren en cuanto a su función y morfología.
Los leucocitos no desempeñan sus funciones cuando se encuentran en la
sangre, sino cuando abandonan esta y entran a los tejidos linfoides o a las zonas
donde hay inflamación intensa. En este sentido, la sangre es un medio de
trasporte, que le permite a las células sanguíneas recircularlo entre los diferentes
tejidos del cuerpo. Normalmente en la sangre se encuentra cinco tipos de
leucocitos; monocitos, linfocitos, neutrofilos, eosinofilos y basofilos. Además de
estas células se encuentran las plaquetas o trombocitos. (BARCO J.2002)
Neutrofilos: son los más abundantes, constituyen el 55%. Su núcleo tiene
lóbulos que aumentan en número con la edad de la célula, se les conoce con el
nombre polimorfonucleares. Su citoplasma presenta gránulos muy finos que
corresponden a lisosomas, en cuyo interior hay enzimas hidroliticas entre las que
se destaca las lisozimas y peroxidasa. Los neutrófilos constituyen las primeras
líneas de defensa del organismo, principalmente contra un ataque bacteriano.
Eosinofilos: constituyen el 3% de leucocitos. Su núcleo es bilobulado y en el
citoplasma se encuentran gran cantidad de gránulos grandes de color púrpura
que consisten en lisosomas, en los qué hay enzimas hidroliticas como
histomidasa y peroxidasa. El número de estas células se incrementa
generalmente cuando hay una infección parasitaria.
Basofilos: son los leucocitos más escasos, solo representa el 0.5%. Su núcleo
es sinuoso. Ósea en forma ondulada, y en su citoplasma también se encuentra
gránulos grandes, pero en este caso son de color morado y contienen heparina
e histamina. Este tipo de células se incrementa en los procesos alérgicos.
Linfocitos: constituyen el 35% de leucocitos. Su núcleo es grande y redondeado
ocupando la mayor parte de la célula; su citoplasma es escaso y de un color
azulado en el que también se encuentran gránulos que no son visibles al
microscopio de luz convencional. Existen varios tipos de linfocitos; entre ellos los
linfocitos B que participan en mecanismos de defensa humoral, produciendo
anticuerpos que circulan libremente en la sangre ayudando en el mecanismo de
defensa de otras celulas; y los linfocitos T que intervienen en procesos de
defensa celular, ósea que ejercen efectos citotocicos sobre otras células y no
requieren la ayuda de anticuerpos circulantes.
Monocitos: estas son las células más grandes de todos los glóbulos blancos,
constituyen el 6% de leucocitos, con un núcleo de forma arriñonada y un
citoplasma abundante y de color grisáceo que presenta pequeños gránulos que
no son visibles al microscopio de luz. Los monocitos pueden salir de la
circulación atravesando los capilares sanguíneos para ingresar al tejido
conectivo, en donde se diferencian y se transforman en macrofagos con gran
actividad fagocitarla.
Trombocitos: tambien conocidos como plaquetas. Se originan de la médula
ósea a partir de a partir de una celulas gigantes llamadas megacarioblastos, las
que después de madurar sufren un proceso de fragmentación ingresando a la
corriente sanguínea pequeños trozos de dichas células que reciben el nombre
de trombocitos. Consisten en pequeñas bolsas membranosas de 2 a 3 micras de
diámetro que contienen poca cantidad de citoplasma y una pequeña porción del
núcleo de la célula madre. (CÁCERES, A.)
El analisis del tejido sanguíneo es un recurso muy importante y valioso en la
práctica clínica, ya que a través de este se puede llegar a un diagnóstico más
acertado a algunas patologías. “Cabrera, F. 2002” . Por eso es necesario conocer
y familiarizarse con las técnicas de tincion y perfecto extendido de un frotis
sanguíneo teniendo en cuenta despliegue de cabeza, cuerpo y cola en el porta
objeto, su posterior coloración y el reconocimiento en el microscopio de las
diferentes células sanguíneas.

METODOLOGÍA
En el laboratorio de Biología de la Universidad de la Amazonia, se realizó la
práctica de frotis de sangre, tinciones wright y Giemsa y observación de células
sanguíneas. Primero se realizó un frotis periferico en un porta objetos en él, se
agregó una gota de tinta china, para ensayo del extendido homogéneo donde
deba tener cabeza, cuerpo y cola. Una vez realizado los ensayos se realizó con
el extendido de la sangre y dejándolo secar. Posteriormente se procede a la
técnica de tincion wrigt, donde Después de seco el porta objetos se colocó en
una rejilla y se agrego abundante coloración wright dejandolo en reposo 5
minutos, luego se agregó amortiguador y luego se dejó por 6 minutos, terminado
el tiempo se lavó el colorante con agua destilada, teniendo el portaobjetos
horizontalmente. Luego procedimos con la tincion de Giemsa, para ello, se
realizó un nuevo frotis de sangre, una vez hecho esto, se llevó a la rejilla
aplicando métanol y se dejó por 3 minutos, luego adicionamos el colorante de
Giemsa por 10 minutos, pasado el tiempo lavamos con agua destilada y lo
dejamos secar. Finalmente Ya realizado las tinciones, se procedió al microscopio
para la localización de las células utilizando primero el objetivo fuerte (40x), luego
cambiándolo al objetivo de inmersión (100x), pero antes se agregó una gota de
aceite de inmersión en la parte central del porta objetos. Posteriormente se
realizó búsquedas de los diferentes tipos de células sanguíneas y esquemas de
cada una de ellas.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Tabla 1: Tinción WRIGHT Donante 1
OBJETIVO Imagen Células Descripción
sanguíneas
100X
Poseen
Basófilos generalmente dos
o tres lóbulos
unidos por puentes
cromáticos.
Adquieren una
coloración rojo
violeta oscuro,
disponen en el
interior citoplasma.

100X
Circulan en forma
Neutrófilos madura y poseen
segmentados un núcleo dividido
o segmentado

100X Eosinófilos Es un bilobulado

más grandes que
otra células de la
sangre como los
eritrocitos. La
morfología de su
núcleo puede
cambiar según la
especie.
 100X Linfocitos Tienen gran
tamaño el cual
depende
principalmente de
la cantidad del
citoplasma, estas
células se
clasifican como
linfocitos grandes y
pequeños

100X Neutrófilos Suelen ser lóbulos

que se
interconectan
mediante finas
bandas de material
nuclear, el núcleo
suele ser menos
lobulado.

Tabla 1. El total de muestras que fueron sometidas a esta tinción fueron 2. Una
por cada estudiante al aplicar directamente el colorante de Wright. Se observó
que la laminas tomaron un color azul oscuro pasados los 5 minutos el colorante
se impregno en la sangre. Al aplicar el amortiguador de Wright, se observó que
en las partes donde habian coloraciones débiles el color se intensifico. Y al lavar
las laminillas la coloración solo permaneció en la sangre.

TABLA 2: Tinción GIEMSA donante 1

Objetivo Imagen Célula sanguínea Descripción

100X Neutrófilo Se caracterizan

por tener un
núcleo ovulado y
gran cantidad de
glándulas y
lisosomas en su
citoplasma con
diferentes
contenidos.
100X Linfocito Presenta un gran
núcleo esférico
que se tiñe de
violeta azul y su
citoplasma se
observa como un
anillo esférico.

100X Plaquetas Presentan un

núcleo altamente
poliploide a un
citoplasma
subdividido por
capas de
membrana
onduladas y se
forman a partir de
vesículas.

100X Monocitos Presenta un

núcleo en forma
de riñón y
expresa el
antígeno D14

100X Granulocito Contiene una

neutrófilo gran cantidad de
gránulos y
lisosomas
 100X Trombocitos Fragmentos del
(plaquetas) citoplasma
limitados por
membrana, no
son células y no
contiene material
nuclear

Tabla 2. Al aplicar el metanol a la muestra y dejandolo durante 3 minutos no se

notó un gran cambio en específico solo que la sangre de la muestra estaba más
fija. Cuando se le agrego el colorante de Giemsa. Pasados 10 minutos La
muestra tomo una tonalidad violeta oscura y en la parte de la sangre, algunas
partes se tiñeron de rosado y al lavar las muestras su coloración final fue rosada.

DISCUSIÓN
Las células que conforman el sistema hematopoyético se derivan de la célula toti
potencial hematopoyética (CTH), la cual por procesos de proliferación y
diferenciación, dan lugar a las células maduras que se localizan en la
sangre1.Estas se dividen en dos grupos: mieloides y linfoides. Las primeras
conforman los eritrocitos, neutrófilos, eosinófilos, basófilos y monocitos,
mientras que los linfoides comprenden los linfocitos B, linfocitos T y células NK2,
las cuales tienen características diferentes que permiten identificarlas tales como
la morfología y el tamaño que estas presentan. “Benítez A.2015”.El frotis
sanguíneo realizado se utiliza para el estudio de las características citológicas
de las células de la sangre, lo cual permite valorar el funcionamiento general de
la médula ósea a través de sus componentes celulares. “Cabrera, F 2002.” La
observación de los frotis sanguíneos nos permite identificar los tipos de glóbulos
presentes en las muestras de sangre de esta manera nos lleva a reconocer que
tan importantes son que cada uno circulen por nuestro organismo, cada glóbulo
o célula que posee nuestro cuerpo es de vital importancia, cada una tiene una
función diferente.

CONCLUSIÓN

 Se identificaron las principales líneas celulares (hematíes, Leucocitos y

plaquetas) que componen el tejido sanguíneo a partir de la observación de
la microscópica de extendidos de sangre periférica.
 Se desarrollaron destrezas en la toma de muestras en la realización de
extendidos de sangre periférica.
 Se logró aplicar las técnicas de tinción diferencial a células sanguíneas.
 Se identificaron y se asociaron las características principales de los
diferentes tipos celulares presentes en los extendidos de sangre periférica.
BIBLIOGRAFIA
Hill R, Wyse G, Margaret Anderson. Fisiologia Animal. Ed. Médica
Panamericana, 2006 - 1038 páginas

BARCO RIOS JOHN. Fundamentos Teórico-Prácticos de Biología Celular" En:

Colombia 2002. ed:LITOAS ISBN: v. 1 pags. 250.

BENÍTEZ A. Morfologia de Células Sanguineas. 2015

https://es.scribd.com/document/291725260/Laboratorio-Morfologia-de-Celulas-
Sanguineas-2-Copia

CABRERA, F. Guía Teórica de Tejidos Básicos y Tejido Sanguíneo. Universidad

Central de Venezuela, Facultad de Ciencias Veterinarias, Cátedra de Histología
Veterinaria, Maracay, Edo. Aragua. 23 p. 2002.
CÁCERES, A. Características morfológicas, citoquímicas y ultraestructurales de
las células sanguíneas de la especie Caiman crocodilus crocodilus en vida
silvestre. Tesis de Maestría, Postgrado de Medicina Veterinaria, mención
Morfología, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Central de
Venezuela, Maracay, Aragua, Venezuela, 56 p. 2010.