PRÁCTICA ICP-MS

1.- Fundamento teórico

2.- Descripción de las partes del equipo
3.- Encendido del plasma. Visualización de parámetros
4.- Optimización (tunning). Parámetros de optimización
5.- Análisis semicuantitativo
6.- Análisis cuantitativo
7.- Práctica:
7.1- Análisis Semicuantitativo
7.2- Creación de un método
7.3- Preparación de una recta de calibrado
7.4- Crear una secuencia
7.5- Generar un informe.
7.6- Análisis de espectros

1.- FUNDAMENTO TEÓRICO :

Los componentes de la muestra se ionizarán por efecto de un plasma de

argón (plasma: volumen de gas con parte de sus átomos o moléculas
ionizados). Estos iones producidos serán separados en base a su relación
masa/carga en un espectrómetro de masas y posteriormente cuantificados por
un detector multiplicador de electrones. Esta técnica tiene una amplia
aplicación en la determinación de elementos de interés medioambiental,
pudiendo analizar más de 70 elementos de forma simultánea.

1
2.-DESCRIPCIÓN DE LAS PARTES DEL EQUIPO

1.- Introducción de la muestra:

- Nebulizador
- Spray chambers
2.- Fuente de ionización:
- Antorcha
3.-Interfase de extracción
- Cono sampler
- Cono skimmer
4.- Celda de colisión/reacción : Octapolo
5.- Lentes Iónicas
6.- Espectrómetro de masas : Cuadrupolo
7.- Detector : Multiplicador de electrones

Nebulizador : La muestra líquida es introducida en la corriente de gas

en forma de aerosol. La función del nebulizador es crear un aerosol con gotitas
de tamaño pequeño y uniforme, puesto que solo las gotitas pequeñas se
transportan al plasma.

Existen diferentes tipos de nebulizadores en función de sus características:

1. - Eficacia según caudal de la muestra
2. -Tolerancia a sólidos suspendidos o disueltos
3. -Tolerancia a ácidos y bases fuertes y a solventes orgánicos.
4. - Diferentes posibilidades de que las muestras puedan causar efecto
memoria.
5. - Capacidad de aspiración.

Spray chambers: Separa y desecha las grandes gotas de disolución

que se han formado, para que solo las pequeñas se encuentren en suspensión
en el flujo de gas y alcancen el plasma.

2
 Antorcha: Consiste en tres tubos concéntricos de cuarzo a través de
los cuales fluyen corrientes de argon. La antorcha está rodeada por una espiral
de 2-4 vueltas, la cual genera una radiofrecuencia, un campo electromagnético.
En ella se genera el plasma y se produce la ionización de la muestra.

Un plasma es cualquier volumen de gas con parte de sus moléculas o

átomos ionizados, es una mezcla gaseosa conductora de la electricidad que
contiene cationes y electrones. Se produce porque una chispa de alto voltaje
provoca iones de Ar+ y e- en las paredes del tubo más externo de la antorcha
creando el plasma. La radiofrecuencia origina colisiones no elásticas entre Ar+
y e-, dando lugar a más iones de Ar. La interacción campo-iones-electrones
genera movimiento de las especies en juego. La resistencia al movimiento
genera calentamiento. En el núcleo del plasma se alcanzan temperaturas de
10.000K. El plasma de Ar excita los iones positivos de los átomos de la
muestra. Conociendo la temperatura en el canal central y los valores de las
primeras energías de ionización, se sabe que la mayoría de los elementos se
ionizarán.

3
 Sistema de vacío : Los espectrómetros de masas trabajan a baja
presión (alto vacío). El mantenimiento de una alta presión en la región del
analizador es esencial para reducir el fondo y los efectos de dispersión que
causarían altos niveles de moléculas residuales de gas.

La configuración preferida es la de tres etapas diferenciadas por

sistemas de bombas de vacío, que comprenden la zona de la interfase, la
inmediata anterior al analizador y la zona del analizador, en las que las
presiones son progresivamente más bajas.

El vacío en la interfase se consigue mediante una bomba rotatoria, que

se desconecta cuando el equipo está en standby, lo cual permite el fácil acceso
a esta zona para su mantenimiento.

El vacío en las otras dos zonas se obtiene gracias al bombeo de dos

bombas turbomoleculares separadas o por una sola bomba dual.

Espectrómetro
1.0 E-05 bar

Plasma
1 bar
1 mm 0.4 mm Haz de iones

Vacío
1.0 E-02 bar

Interfase Plasma/Vacío: La interfase comprende una etapa de bajo

vacío localizada entre dos placas cónicas de metal conocidas como Cono
Sampler (cono de muestreo) y Cono Skimmer (cono de separación) que
llevan perforados un pequeño orificio. El término interfase es aplicado a estos
conos y al espacio formado entre ellos.

El papel de la interfase es extraer una porción representativa de la

población de iones del plasma y transferirla eficientemente a las regiones de

4
 alto vacío, donde se encuentran las lentes de enfoque, el espectrómetro de
masas y el detector.

Cono Sampler: o cono de muestreo, es un cono de níquel con un

pequeño orificio central (1 mm), a través del cual pasa el plasma a una cámara
con una presión de 10 mbar, allí se produce una expansión rápida del gas que
provoca su enfriamiento. Una fracción del gas pasará al Cono Skimmer : o
cono separador que es también de níquel y a través del cual el plasma pasará
a una cámara mantenida a la presión del espectrómetro de masas. En ella el
gas es separado de los iones + y bombeado hacia fuera. Los cationes son
enfocados al MS a través de las lentes iónicas.

Lentes Iónicas : Las lentes iónicas son placas electrostáticas situadas

en la zona intermedia, que enfocan el haz de iones que proviene del skimmer,
se les aplica un voltaje que hará que los iones positivos del plasma sean
atraidos y puedan ser manipulados en la trayectoria requerida. Además de
dirigir y enfocar los iones, el sistema de lentes iónicas es responsable de
separar los iones de las especies neutras y de los fotones gracias a los campos
electrostáticos creados.

• Celda de Colisión Reacción : La celda de colisión/reacción consiste en

un octopolo (ORS) en el que se eliminarán las interferencias poliatómicas por el
efecto de :

• Hidrógeno : gas reactivo, que reacciona con las interferencias

• Helio: gas inerte que colisiona con los interferentes.

La principal fuente de interferencias espectrales en ICP-MS son:

• 1.- Superposición directa de un elemento diferente con un

isótopo de la misma masa nominal, es una interferencia
isobárica. Sn-114 con Cd-114.

• 2.- Superposición de un ión poliatómico formado por la

combinación de especies derivadas del gas del plasma,
disolvente de la muestra y/o matriz de la muestra. Ca 40O16 con
Fe56 .

• 3.- Especies dobles cargadas formadas por la pérdida de dos

electrones en vez de uno. El cuadrupolo separa los iones en
base a su relación m/c, así un ión doble cargado tendrá la
masa M/2. Así 136Ba2+ se solapa con 68Zn+ .

Modos de trabajo celda de colisión/reacción

Modo Hidrógeno reacción :

Utiliza un gas reactivo el hidrógeno.
• Mecanismo de reacción.

5
 • Específico para la eliminación de interferencias poliatómicas de
Argón.
• Específico para determinaciones de Ca ; Fe y Se.

Modo Helio Colisión :

Utiliza un gas inerte el helio, que no reacciona con la matriz de la
muestra y por ello no se producen nuevas interferencias.
• General, elimina múltiples interferencias. Puede ser aplicado a todas
las matrices y a todas las muestras utilizando las mismas
condiciones analíticas.

Modo Normal :
Se opera sin gas añadido en la celda de colisión.
• El oct Apolo solo actúa como guía del haz de iones.
• Este modo se utiliza para el análisis de elementos de masas bajas no
interferidos, como Li, Be y B. También para elementos que no
requieren eliminar interferencias tales como Pb, Tl y U.

Analizador de masas : Cuadrupolo: Son cuatro barras de

metal que se encuentran paralelas y equidistantes, a las cuales se les aplica un
potencial de corriente continua y un potencial de radiofrecuencia. La
combinación de estos campos hace que solo aquellos iones de una
determinada relación m/z tengan una trayectoria estable y lleguen al detector .
Por lo tanto, el cuadrupolo separa los iones en base a su relación m/z.

Detector : Multiplicador de electrones : Cuando los iones chocan

con su superficie se originan electrones secundarios que se moverán ,debido
al cambio de potencial, hacia otras zonas donde originarán más electrones
secundarios, los cuales provocarán una señal eléctrica.

3.- ENCENDIDO DEL PLASMA. VISUALIZACIÓN DE

PARÁMETROS

De forma habitual el equipo se mantiene en modo Standbye, es decir

con el vacío conectado. Al comenzar una sesión de trabajo debemos conectar
el plasma, pero antes debe estar encendido el sistema de refrigeración y el
extractor. Una vez encendida la antorcha el equipo pasará al modo análisis y ya
podemos empezar a trabajar. Es importante comprobar el estado de todos los
parámetros en el panel de control :

- vacío : presión en la interfase y en el analizador

- agua de refrigeración : flujo, temperatura
- presión y flujo del plasma gas y del carrier gas.

6
4.- OPTIMIZACIÓN (TUNING). PARÁMETROS DE OPTIMIZACIÓN

La sintonía es una operación básica que se realiza antes de una sesión

analítica. El objetivo es conseguir una señal estable y sensible usando una
solución de sintonía de 1 ppb de Li, Y, Ce y Tl.
Los parámetros de sintonía a tener en cuenta son sobre todo la posición de la
antorcha, flujo de gas y posición de las lentes extractoras e iónicas.

- Sensibilidad : Con Li-7 ; Y-89 y Tl-205 cubriremos

prácticamente todo el rango de masas y podremos ver la señal
obtenida ( cps: cuentas por segundo). La RSD% no puede ser
mayor del 15%.

- Formación de Óxidos : El nivel de óxidos (MO+) se mide a

partir de la relación CeO/Ce , puesto que el CeO es muy
estable en el plasma y tiene un fuerte enlace. Es deseable un
bajo nivel de óxidos en un ICP-MS y la medida del cociente
CeO/Ce da una referencia sobre la robustez del equipo

Formación de especies dobles cargadas : Aquellos elementos

con una segunda energía de ionización más baja que la
primera de Ar alcanzará un grado significativo de formación de
carga 2+. Estos elementos son los alcalino-térreos, metales de
transición y REE.

Forma de los picos espectrales.

5.- ADQUISICIÓN E INTERPRETACIÓN DE DATOS

• El ICP-MS proporciona dos tipos de medidas:

• 1.- “Scanning” : Realiza una exploración de un rango de
masas definido y el cuadrupolo camina secuencialmente a

7
 través de todo el rango de masas definido. Es el método de
adquisición más adecuado para la investigación de
muestras desconocidas, donde la matriz es desconocida y
se precisa conocer la posible presencia de analitos que
puedan originar interferencias en la medida de las
muestras.

• 2.- “Peak jumping” : Donde el operador selecciona los

isótopos a ser medidos y las masas no seleccionadas son
saltadas. Es el método de medida utilizado cuando los
analitos objeto de estudio son conocidos y no se requiere
otra información adicional ( por ejemplo, la presencia o no
de otros analitos).

5.- ANÁLISIS SEMICUANTITATIVO

En un análisis semicuantitativo, el equipo da unos valores de concentración

para cada masa en base a una curva de respuesta molar.

RM = (Señal x Potencial ionización) / (Abundancia x Concentración)

m/z = masa/carga

Originariamente, los fabricantes del equipo con una solución

multielemental de concentraciones conocidas elaboraron una curva de
respuesta molar que es la que dispone el software del equipo. Al hacer un
análisis semicuantitativo, el cuadrupolo irá barriendo todo el espectro y para
cada masa obtendremos una señal, es decir un número de cuentas o de
cuentas por segundo, que aplicada a la curva nos dará una respuesta molar.
Conociendo todos los términos de la fórmula despejará la concentración. Pero
debemos tener en cuenta que el estado del equipo varía cada día, por lo que
las señales obtenidas serán diferentes y por lo tanto también lo será la curva de
respuesta molar. Una forma de obtener una curva real en cada momento es
hacer un ajuste de la misma con patrones de concentración conocida e
inmediatamente después realizar el análisis de la muestra.

8
 En la práctica, este método sirve para conocer la matriz y para
investigar en qué rango de concentraciones nos encontramos y nos da un
error del 5 al 30%.

6.- ANÁLISIS CUANTITATIVO

La cuantificación se obtiene a través de la comparación de las cuentas

medidas de la muestra desconocida con aquellas de una sustancia que
contiene una cantidad conocida del elemento o isótopo de interés. Existen
diversos métodos para realizar un análisis cuantitativo, utilizaremos el método
de calibración externa con el uso de soluciones standards que cubran todo el
rango de concentraciones esperado. También emplearemos patrones internos
que nos permitirán compensar la deriva de la señal y algunos efectos de la
matriz. Como norma general, el patrón interno no debe estar presente en la
muestra y debe poseer una masa y un potencial de ionización similar al
elemento a determinar.

7.- PRÁCTICA : Determinación de Mn, Cu, As, Cd, y Pb en una muestra

de suelo y de agua de riego.

7.1- Análisis Semicuantitativo :

7.2- Creación de un método : En la tabla periódica marcaremos los

isótopos de los elementos a determinar y el modo de medida (normal,
hidrógeno o helio) y haremos tres repeticiones de cada análisis. El programa
nos da la opción de analizar todos los isótopos de cada uno de los elementos,
como norma general, marcaremos el isótopo recomendado por el equipo que
es el que menos interferencias presenta, aunque cuando sospechemos que el
analito pueda estar interferido por iones poliatómicos procedentes de la matriz
o del propio plasma, seleccionaremos varios isótopos y analizaremos los
espectros.

7.3- Preparación de una recta de calibrado : A partir de soluciones patrón

comerciales de 1000 ppm preparamos una solución intermedia de 5 ppm.

Elemento Peso acumulado Peso real Concent. ppm

Mn
Cu
As
Cd
Pb

Peso volumen total

Conc. ppm = ( peso real * 1000 ) / Peso volumen total

9
 Conc. Ideal ppb Peso Peso vol.total
P0 0
P1 2
P2 5
P3 10
P4 25
P5 50
P6 100
P7 200

Calcularemos la concentración real de cada patrón :

Conc ppb = (Peso patrón * ppm sol.interm. * 1000 ) / Peso vol.total

P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7
Mn
Cu
As
Cd
Pb

Metemos los datos y después de analizar los patrones preparados mediante

una secuencia, ajustamos las rectas hasta obtener una buena regresión.
Los estándares internos serán añadidos tanto a muestras como a patrones en
igual concentración.

7.4 – Análisis de las muestras : Creamos una secuencia y analizamos

las muestras con el método y la calibración que se creó anteriormente. El
equipo lo hemos programado para que haga 3 análisis de cada muestra y para
que nos de cómo resultado final el promedio de las tres medidas.

7.5 – Análisis de espectros : El espectro de masas es la representación

de la señal obtenida frente a la masa. Se puede analizar el espectro obtenido
en un análisis, mediante el acceso a la información contenida en la base de
datos de los elementos que dispone el equipo.

7.6 – Generación de un informe : Todos los datos del análisis.

10