Espectrometría de absorción infrarrojo (IR):

¿Qué es?

La espectroscopia infrarroja es una técnica basada en las vibraciones de los átomos

de una molécula, esto se puede analizar de tres maneras al medir la absorción, la
emisión y la reflexión. Un espectro infrarrojo comúnmente es obtenido por pasando
la radiación infrarroja por una muestra y determinando que fracción de la radiación
de incidente es absorbida en una energía particular. La energía en la cual cualquier
pico en un espectro de la absorción aparece corresponde a la frecuencia de una
vibración de una parte de una molécula de la muestra. Es utilizado por los químicos
para determinar grupos funcionales en moléculas. La espectroscopia IR mide las
vibraciones de los átomos y, en base a esto, es posible determinar los grupos
funcionales. Generalmente, los enlaces más fuertes y los átomos ligeros vibrarán a
una frecuencia de estiramiento alta (número de onda).

Esquema:

Los espectros de reflexión "de espejo" se obtienen en una superficie lisa de la muestra, la reflexión
difusa en una superficie mate o en la muestra triturada. Para los espectros IR de transmisión se
utilizan preparaciones muy finas de la muestra (el espesor óptimo oscila entre unas décimas de
micra y unas micras). En la figura se presenta un esquema de espectrofotómetro de IR.

Métodos:
Espectrómetros infrarrojos dispersivos: Un detector debe tener una sensibilidad
adecuada a la radiación que llega del
muestra y monocromador en toda la región espectral requerida. En adición, la
fuente debe ser lo suficientemente intensa en el rango de números de onda y la
transmitancia distancia. Las fuentes de emisión infrarroja han incluido el Globar,
que está construido de carburo de silicio. También está el filamento Nernst, que es
un mezcla de los óxidos de zirconio, itrio y erbio. Sólo un filamento Nernst conduce
electricidad a temperaturas elevadas. La mayoría de los detectores han consistido
en termopares de diferentes características.
Espectrómetros infrarrojos de transformada de Fourier: La espectroscopía
infrarroja de transformada de Fourier (FTIR) [1] se basa en la idea de interferencia
de radiación entre dos haces para producir un interferograma. El último es una
señal producida como una función del cambio de longitud de camino entre los dos
rayos Los dos dominios de distancia y frecuencia son interconvertibles por el
método matemático de transformación de Fourier.
La radiación que emerge de la fuente se pasa a través de un interferómetro a la
muestra antes de llegar a un detector. Al amplificar la señal, en el cual las
contribuciones de alta frecuencia han sido eliminadas por un filtro, los datos se
convierten a formato digital por un convertidor de analógico a digital y se
transfieren a la computadora para la transformación de Fourier.
Métodos de transmisión: La espectroscopia de transmisión es el método infrarrojo
más antiguo y directo. Esta técnica se basa en la absorción de radiación infrarroja
en longitudes de onda específicas mientras pasa a través de una muestra. Es
posible analizar muestras en las formas líquidas, sólidas o gaseosas cuando se
utiliza este enfoque.
Gases: Los gases tienen densidades que son varios órdenes de magnitud
menores que los líquidos, y por lo tanto las longitudes de ruta deben ser
correspondientemente mayores, por lo general de 10 cm o más Una celda de gas
típica se muestra en la Figura 2.12. Las paredes son de vidrio o latón, con la
elección habitual de ventanas. Las celdas se pueden llenar por descarga o desde
un línea de gas. Para analizar mezclas complejas y trazas de impurezas,
longitudes de ruta más largas son necesarios. Como el tamaño del compartimento
de muestra en el instrumento es limitado, la célula de gas de reflexión múltiple es
necesaria para producir trayectorias de paso superiores. En una celda así, el haz
infrarrojo es desviado por una serie de espejos que reflejan el haz de luz y muchas
veces hasta que sale de la celda después de haber viajado el requerido trayectoria
equivalente. Este tipo de celda permite una longitud de recorrido de hasta 40 m
ser alcanzado.
Métodos de reflectancia: Las técnicas de reflectancia se pueden utilizar para
muestras que son difíciles de analizar por los métodos de transmitancia
convencionales. Los métodos de reflectancia se pueden dividir en dos categorías.
Las mediciones de reflectancia interna se pueden hacer usando una célula de
reflectancia total atenuada en contacto con la muestra. También hay una variedad
de mediciones de reflectancia externa que implican un haz infrarrojo reflejado
directamente desde la superficie de la muestra.

Resumen: Varios aspectos de la instrumentación utilizada en espectroscopía

infrarroja se trataron con en este capítulo. Se describieron espectrómetros
dispersivos tradicionales. Los operación y capacidades de los espectrómetros
infrarrojos de transformada de Fourier fueron también discutido. Los métodos de
transmisión para obtener espectros infrarrojos también fueron examinado. Los
métodos de muestreo que se pueden usar para sólidos, soluciones, líquidos y
gases fueron presentados. Los diferentes métodos de reflectancia que están ahora
ampliamente disponible, como espectroscopia ATR, reflectancia especular y difusa
la reflectancia, junto con la espectroscopía fotoacústica, también se introdujeron.
Los varias técnicas de microsampling, que han surgido como métodos efectivos
para investigar pequeñas cantidades de muestras complejas, también se
describieron. Infrarrojo los espectrómetros también se pueden usar junto con otros
métodos analíticos como la cromatografía y las técnicas térmicas y estos se
introdujeron en Este capítulo.
Aplicaciones:
 Aplicaciones biológicas:

Esta técnica ha sido empleada para un número de décadas para la

caracterización de moléculas aisladas biológicas, en particular proteínas y
lípidos. Sin embargo, la década pasada ha visto una subida rápida del
número de los estudios de sistemas más complejos, como tejidos de
enfermo.

Los lípidos: son organizados en bilayers de aproximadamente 40-80 un en el

grosor, ° donde el grupo polar delantero señala hacia la fase acuosa y el
punto de colas hidrófobo hacia las colas de una segunda capa. Las cadenas
pueden estar en un transconformacion que se menciona como la fase de gel,
o una fase líquida cristalina son obtenidos cuando la cadena también
contiene grupos torpes C-C. Los espectros infrarrojos de fosfolípidos pueden
ser divididos en las regiones espectrales que provienen de las vibraciones
moleculares de la cola de hidrocarburo, la región interfacial y el grupo
delantero [12, 13].
El análisis cuantitativo infrarrojo puede ser realizado sobre el suero de sangre
para determinar las cantidades relativas de presente de lípido [16].
Triglicéridos, fosfolípidos y ésteres colesterol son las clases de lípido que
ocurren en el suero de sangre y tales compuestos ocurren naturalmente en
las concentraciones que hacen el análisis infrarrojo atractivo. Estas clases de
compuestos pueden ser caracterizadas por sus cintas de carbonilo: la
máxima aparece en 1742 cm 1 para el triglicéridos, en 1737 cm 1 para el
fosfolípidos y en 1723 cm 1 para los ésteres colesterol. Aunque los picos de
carbonilo pesadamente sean superpuestos, un método de lo-menos-
cuadrados puede ser usado separar los componentes. Las concentraciones
de estos componentes de lípido son por lo general en la gama el 0.03-0.3 %
en la sangre humana, y soluciones estándar puede estar preparado en el
cloroformo.

Proteínas y péptidos: Fourier-transforme la espectroscopia infrarroja (FTIR)

es en particular útil para sondar las estructuras de proteínas de la membrana
[3, 23]. Esta técnica puede ser usada para estudiar las estructuras
secundarias de proteínas, ambos en su entorno natal así como después de
la reconstitución en membranas modelas. La mielina la proteína básica
(MBP) es una proteína principal del sistema nervioso y ha sido estudiada por
usando FTIR la espectroscopia tanto en la solución acuosa como en después
de la reconstitución en lípidos de mielina.
Un acercamiento similar cuantitativo puede ser aplicado a péptidos. Sin
embargo, su pequeño tamaño debe ser tenido en cuenta aplicando tales
métodos, como pequeños péptidos son no necesariamente capaces de
producir las mismas estructuras secundarias observadas en proteínas. El
péptido CiT4 es sacado de una proteína de sistema nerviosa y consiste en
una secuencia de 26 aminoácidos.
El entorno solvente en el cual las proteínas y péptidos son registrados
afectan las estructuras secundarias observadas para estas moléculas.

Ácidos nucleicos: son las moléculas vitales que llevan el código genético y
son responsables de su expresión por la síntesis de proteína. Los ácidos
nucleicos, el ácido desoxirribonucleico (el ADN) y el ácido ribonucleico
(ARN), pueden ser estudiados por el uso de la espectroscopia infrarroja [25-
29]. Los espectros de ácidos nucleicos pueden ser divididos en los
parámetros debido a la base constituyente, el azúcar y los grupos de fosfato.
Las bases (timina, adenina, citosina, guanina y uracilo) dan lugar a purinic y
vibraciones pyrimidinic en la 1o gama de 1800-1500 cm y estas cintas
sonrenas sensibles para basepairing y efectos que apilan base. Las bandas
en la región de 1500-1250 cm-1 de ácidos nucleicos se deben al
acoplamiento vibratorio entre una base y un azúcar, mientras que en el
intervalo de 1250-1000 cm-1 se observan vibraciones de la cadena azúcar-
fosfato. Estas bandas proporcionan información sobre las conformaciones de
la red troncal. En la región de 1000-800 cm-1, se observan vibraciones de
azúcar / azúcar-fosfato.
Enfermedad Diagnóstico: La dependencia de la presión de parámetros como el
número de onda, la intensidad y la forma de la banda puede proporcionar más
información sobre los cambios estructurales asociados con la malignidad. Por
ejemplo, es posible detectar el cáncer cervical que surge de un estado pre maligno
denominado displasia mediante el uso de las diferencias de banda infrarroja entre
las células cervicales normales, displasias y malignas.
Células microbianas: La espectroscopia infrarroja ha demostrado ser una
herramienta valiosa para caracterizar y diferenciar las células microbianas [4,
6, 45-48]. Dada la naturaleza compleja de tales microorganismos, los
espectros pueden contener una superposición de cientos de infrarrojos
modos. Sin embargo, los espectros FTIR de bacterias muestran bandas
predominantemente debido al componente proteico [6]. Aunque las células
también contienen estructuras de ADN y ARN, carbohidratos y lípidos, las
diversas proteínas celulares y de membrana se forman la mayor parte de la
masa celular. La figura 7.15 muestra partes de los espectros infrarrojos de
Escherichia coli y una proteína típica, es decir, ribonucleica ha, que ilustra su
similitud. También se pueden observar bandas debido a carbohidratos y
lípidos en espectro infrarrojo bacteriano en menor medida.

Plantas: El análisis infrarrojo del material vegetal tradicionalmente se ha

basado en el uso de Químicos "duros" y modificación de las paredes
celulares intratables. Las plantas comprenden hasta el 80% de su peso seco
de carbohidratos, incluyendo las más importantes celulosas, almidones,
pectinas y azúcares, tales como glucosa y sacarosa. El advenimiento de la
microspectroscopía FTIR ha permitido la investigación de regiones
localizadas de células vegetales que no requieren modificación.

 Aplicaciones industriales y ambientales:

Aplicaciones farmacéuticas: La espectroscopia infrarroja se ha utilizado

ampliamente tanto en términos cualitativos como cuantitativos análisis
farmacéuticos. Esta técnica es importante para la evaluación de las materias
primas utilizadas en la producción, los ingredientes activos y los excipientes
(los ingredientes inertes en una formulación de fármaco, por ejemplo, lactosa
en polvo, hidroxipropilo Cápsulas de celulosa, etc.). Aunque la
espectroscopia de resonancia magnética nuclear y la espectrometría de
masas son ampliamente utilizadas en la industria farmacéutica para
identificación de sustancias medicamentosas, la espectroscopia infrarroja
puede proporcionar valiosos información estructural, como la presencia de
ciertos grupos funcionales.

Ciencia de los Alimentos: Se pueden usar técnicas de infrarrojo cercano y

medio infrarrojo para obtener información cualitativa e información
cuantitativa sobre muestras de alimentos. Los alimentos son complejos
mezclas, con los principales componentes son agua, proteínas, grasas e
hidratos de carbono.La espectroscopia infrarroja se ha utilizado durante
mucho tiempo para estudiar grasas y aceites. Uno método infrarrojo
importante es la determinación de tras-isómeros en grasas y aceites (que
consisten principalmente en triglicéridos). Aunque los dobles enlaces en
forma natural las grasas y los aceites que se presentan muestran una
configuración predominantemente cis, durante la industria procesando la
isomerización sustancial desde una configuración cis a una trans ocurre. Es
comercialmente importante para el etiquetado determinar el contenido trans
de grasas y aceites.

Aplicaciones agrícolas: Los granos comerciales se analizan comúnmente

mediante el uso de espectroscopia NIR. Los principales constituyentes de los
granos son agua, proteínas, aceites, fibras, minerales e hidratos de carbono
y es comercialmente importante cuantificar la composición. Los espectros
NIR de tales materiales están, por lo tanto, dominados por los armónicos y la
combinación bandas de enlaces C-H, N-H, O-H y C = O.

Industrias de celulosa y papel: La espectroscopia infrarroja juega un papel

importante en el control de calidad en la pulpa e industria papelera El papel
está compuesto de fibras de celulosa, rellenos inorgánicos y aglutinantes En
la región del infrarrojo medio, aditivos, como polímeros y calcio carbonato, se
puede identificar en papel. La mayoría de las bandas en un espectro de papel
se deben a la celulosa. Este último muestra una banda elástica O-H de
aproximadamente 3330 cm-1, Las bandas de estiramiento C-H en la región
de 3000-2900 cm-1, C-H bandas de flexión en rango 1500-1300 cm-1, y una
banda elástica de C-O éter a 1030 cm-1.
Aunque el agua es un componente importante del papel, la interferencia del
agua en el espectro infrarrojo se minimiza mediante el uso de reflectancia
total atenuada (ATR) espectroscopia. La técnica de reflectancia difusa
infrarroja (DRIFT) también es particularmente Útil para examinar muestras
de papel, ya que puede usarse para Muestras que son difíciles de moler en
polvos finos. Espectroscopía fotoacústica (PAS) también se puede utilizar
para análisis de papel, como aditivos como el carbonato de calcio exhiben
fuertes espectros fotoacústicos. Además, debido a la heterogeneidad
naturaleza del documento, microscopía FTIR en un enfoque eficaz para el
análisis de tales Las muestras de espectroscopía NIR se han convertido en
otro enfoque para el análisis de papel durante el control de calidad,
particularmente debido a la capacidad de usar esta técnica para el análisis
remoto. Además, se pueden usar métodos de calibración multivariados para
determinar la composición de componentes tales como lignina, carbohidratos
y aditivos inorgánicos.
Industria de la pintura: Las técnicas de muestreo de infrarrojos más comunes
utilizadas para examinar muestras de pintura son reflectancia total atenuada
y espectroscopias fotoacústicas. Pinturas líquidas, las películas secas y las
virutas de pintura se pueden investigar de esta manera. El perfilado de
profundidad puede ser útil al examinar pintura, ya que las propiedades de la
superficie variarán de manera importante de las propiedades a granel.
Además, la mayoría de las películas de pintura contienen dos o más capas
con diferentes composiciones, por lo que las técnicas de reflectancia son
necesarias para caracterización de capas individuales.

Bibliografía:
http://www.kinetics.nsc.ru/chichinin/books/spectroscopy/Stuart04.pdf
http://blog.utp.edu.co/docenciaedwin/files/2014/03/INSTRUMENTACION-
IR-I-14.pdf