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Curso: Microbiología
•105-106 pb.
•Haploide.
•Aproximadamente 90%
codifica para proteínas y el 10%
para regulación.
•Operones poligénicos o
policistrónicos (que tienen
muchos genes estructurales) y
operones monocistrónicos.
El ADN de E. coli tiene una longitud de 1 mm, unas 400 veces su tamaño.
Se encuentra organizado en dominios (100) supererrollados, estabilizados
cada uno por proteínas específicas.
ADN superenrollado
•Topoisomerasas clase I.
•107-109 pb
•Haploide y diploide
*Los plásmidos son raros en eucariotas. Brock. Biología de los Microorganismos, 12ª edición, 2009
Dogma Central
Replicación de ADN
• Replicación semiconservativa
Hebra original
Hebra nueva
Enzimas:
Estructura Theta
Replicación en
procariotes
• Circulo rodante.
Cadena
continua
Cadena
discontinua
Replisoma
Esta compuesto por:
Dos copias de ADN-pol III,
•Una helicasa y una primasa
(primosoma),
•Proteínas de unión a ADNss.
La ADN-girasa elimina el
superenrrollamiento.
*Arqueobac teria.
Brock. Biología de los Microorganismos, 12ª edición, 2009
Plásmido conjugativo con
multirresistencia
Estructura molecular de un
plásmido de multirresistencia
conjugativo circular de un
Enterococcus faecalis aislado de
una salchicha fermentada cruda.
La molécula se compone de una
parte que se origina de
Streptococcus (símbolos azules) y
Enterococcus (símbolos negros).
Los genes de resistencia a los
antibióticos están en blanco; se
indica el segmento responsable
de la transferencia de resistencia
conjugativa. Los elementos de
inserción se muestran como
cuadros: son potentes
herramientas para eliminar e
insertar genes en el ADN.
Un total de 58 genes potenciales
están presentes.
(© M. Teuber)
Elementos
transponibles en •Secuencias de inserción
Los factores de
virulencia pueden
estar codificados en
elementos genéticos
móviles.
•100kb.
•Replicación autónoma.
•Formación del pili sexual.
•Funciones de conjugación.
•Contiene secuencias de inserción.
•Episoma.
•Una a tres copias.
Región tra (E. coli)
Aproximadamente 25 genes.
F-
F+
F-
F+
F+
F+ F+
Modelo del círculo rodante.
Células Hfr
(High frequency of recombination)
•Integración del
plásmido F para formar
la cepa Hfr
•Se ha demostrado en
Streptococcus,
Enterococcus, Bacillus,
Clostridium y Streptomyces.
•Agrobacterium tumefaciens
transfiere parte del plásmido
Ti a plantas (T-DNA) a la
planta donde se producen
auxinas y citocinas
(producen un tumor), y
opinas (derivados de aa),
que sirven como fuente de
energía a A. tumefaciens.
Transformación
Involucra la adquisición de AND
libre del medio extracelular, y la
competencia genética es la
habilidad de llevar a cabo la
transformación.
Experimento de Griffithcon
Streptococcus pneumoniae.
Competencia
Natural
•Streptococcus pneumoniae. Durante
el crecimiento se produce la proteína
CSP (competence-estimulating
peptide), se forma el translocasoma
que incluye la endonucleasa EndA
que degrada una cadena y facilita la
entrada de una hebra.
•Bacillus subtillis. Las células producen
un péptido, bajo ciertas condiciones
de estrés (alta densidad celular) la
acumulación induce la competencia
en las células.
Inducida
•Bacterias Gram negativas
•Electroporación
Haemophilus influenzae y Neisseria sp.
•CaCl 2 y bajas temperaturas.
El transporte ocurre cuando
secuencias específicas DUS (DNA
uptake sequences ) son detectadas
por receptores.
SSTIIy competencia
Transferencia de marcadores
genéticos bacterianos de una
célula a otra por medio de
bacteriófagos.
Transducción generalizada
(cualquier fragmento) y
especializada (secuencias
específicas).
Ciclo lítico y lisogénico de un
bacteriófago
Transducción generalizada
Bacteriófago p22
Transducción especializada
Bacteriofago
Recombinación
La recombinación es el
proceso por el que la
información genética se
ve redistribuida, tras la
transferencia de material
genético externo al
interno.
La recombinación permite
intercambiar grandes
conjuntos de genes,
suministrando una fuente
de variación y selección
para la evolución, más
rápida que la mutación.
http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/17transforma.htm
Recombinación homóloga
Implica la ruptura física y posterior unión de hebras de ADN de forma tal
que se intercambia el contenido de ADN resultando en dos hebras
distintas.
•Mutaciones
espontáneas. Se dan
manera natural por
radiaciones, radicales
de oxígeno y por
replicación.
•Mutaciones
inducidas. Son
generalmente
producidas por
mutágenos o agentes
físicos.
Fenotipos
bacterianos
Utilización de fuentes de carbono
y energía. Capacidad de las
bacterias para utilizar
determinados sustratos como
galactosa (gal-/gal+),
lactosa (lac-/lac+), etc.
Resistencia/Susceptibilidad.
Capacidad de crecen en
Las cepas silvestres son protótrofas presencia de inhibidores, como
(crecimiento en medio mínimo), se antibióticos como estreptomicina
pueden identificar mutantes (strR/strS), ampicilina (ampR/ampS),
auxótrofas incapaces de sintetizar kanamicina (kanR/kanS), etc.
algún metabolito esencial, por lo que
este debe ser añadido al medio Otras características como
como biotina (bio-), arginina(arg-), morfología colonial y pruebas
metionina (met-), etc. bioquímicas también se emplean.
Mutaciones
•Mutaciones puntuales. Un par de bases remplaza a otro.
Mutaciones polales. Ocurren en un operón por una mutación sin sentido, afecta
la síntesis de proteínas alejadas.
http://www.ucm.es/info/genetica/grupod/Mutacion/mutacion.htm
Reparación post replicativa
•Reparación posterior a
la replicación
•Reparación por
recombinación
http://www.ucm.es/info/genetica/grupod/Mutacion/mutacion.htm
Reparación por recombinación
•Cuando la ADN-polimerasa-III
bacteriana se encuentra, en la cadena
que está usando como molde, con un
dímero de pirimidina, deja de replicar esa
zona, y salta unos 1000 nucleótidos más
adelante para seguir la replicación y deja
una mella de unos 1000 nucleótidos.
•Esta discontinuidad (llamada mella post
replicativa) se puede rellenar por el
mecanismo de reparación por
recombinación general, recurriendo a la
proteína RecA, que verifica una
recombinación con la hebra parental
homóloga intacta.
http://www.mun.ca/biochem/courses/3107/Topics/Repair.html
Mecanismo de la reparación
por recombinación
•Numerosas unidades de
proteína RecA recubren la
zona de cadena sencilla de la
mella post-replicativa,
formando estructuras
helicoidales.
•Los genes estructurales llevan información para polipéptidos. Se trata de los genes cuya expresión
está regulada. Los operones bacterianos suelen contener varios genes estructurales, son
poligénicos o policistrónicos. Hay algunos operones bacterianos que tienen un solo gene
estructural. Los operones eucarióticos suelen contener un sólo gen estructural siendo
monocistrónicos.
•El promotor (P) se trata de un elemento de control que es una región del ADN con una secuencia
que es reconocida por la ARN polimerasa para comenzar la transcripción. Se encuentra
inmediatamente antes de los genes estructurales.
•El operador (O) se trata de otro elemento de control que es una región del ADN con una
secuencia que es reconocida por la proteína reguladora. El operador se sitúa entre la región
promotora y los genes estructurales.
•El gen regulador (i) secuencia de ADN que codifica para la proteína reguladora que reconoce la
secuencia de la región del operador. El gen regulador está cerca de los genes estructurales del
operón pero no está inmediatamente al lado.
•Proteína reguladora. Proteína codificada por el gen regulador. Está proteína se une a la región
del operador.
• Correpresor: triptófano.
Operón de Triptófano
Operón de Triptófano
Sin triptófano
Operón de Triptófano
Con triptófano
Operón Lux
Operón Lux
Vibrio fischeri