Prosiding Seminar Nasional dan Workshop “Perkembangan Terkini Sains Farmasi dan Klinik IV” tahun 2014

UJI AKTIVITAS ANTIHIPERURISEMIA EKSTRAK ETANOL SAMBILOTO

(Androgravis paniculata Nees), BROTOWALI (Tinospora crispa (L.) Hook. & Thomson),
MANGGIS (Garcinia mangostana L.), LADA HITAM (Piper ningrum L.) DAN JAHE
MERAH (Zingiber officinale Rosc.) SECARA IN VIVO

{In vivo antihyperurisemic activity of ethanol extract from sambiloto (Androgravis

paniculata Nees), brotowali (Tinospora crispa (L.) Hook. & Thomson), manggis (Garcinia
mangostana L.), lada hitam (Piper ningrum L.) and jahe merah (Zingiber officinale
Rosc.)}

Dira1 & Fifi Harmely1

1Sekolah Tinggi Farmasi Indonesia Yayasan Perintis Padang
Jl. Adinegoro/Simp. Kalumpang KM 17 Lubuk Buaya Padang
email: dira06139060@yahoo.com

ABSTRACT

Indonesia is very rich in various kinds of plants and herbs that can be used as traditional
medicines and condiment dishes by community, including the sambiloto leaves, stem of
brotowali, mangostana’s mesocarp fruit, the fruit of black pepper and red ginger rhizome. In
vivo antihyperuricemia activity testing was done to investigate the effect of ethanol extract to
uric acid level on plasma of the male albino rat which were previously inducted by diet of
high purine food and potassium oxonate. Ethanolic extract was given in suspension in dose
300 mg/kg BW orally. The uric acid level was measured on day 8 th and 16th through
enzymatic photometric method. The result of the research showed that ethanolic extract of
mangostana’s mesocarp fruit and red ginger could decrease the blood uric acid level of male
albino rat significantly (p<0,05). Both of these extracts can be used as a drug substance that
can be made in the form of pharmaceutical preparations which have potential as drug anti
hyperurisemic.

Keywords: antihyperurisemic, medicinal plant, in vivo.

PENDAHULUAN

Hiperurisemia merupakan suatu dan tulang rawan, serta pembentukan batu

keadaan yang menunjukkan kadar asam
urat dalam darah meningkat dan mengalami
kejenuhan. Hiperurisemia bisa timbul
akibat produksi asam urat yang berlebih
atau pembuangan yang berkurang
disebabkan oleh adanya kelainan metabolik
karena adanya perubahan genetik. Selain
faktor genetik, proses biokimiawi berperan
juga sebagai hiperurisemia (Dalimarta,
2002).
Gout merupakan suatu penyakit
metabolit yang ditandai dengan tingginya
kadar asam urat dalam serum, arthritis akut,
endapan monosodium urat di persendian
asam urat di ginjal. Asam urat adalah asam
lemah yang merupakan produk akhir
metabolisme purin. Pada keadaan normal
terjadi keseimbangan antara pembentukan
dan pemecahan nukliotida purin (Murray,
2008). Enzim yang berperan penting dalam
pembentukan asam urat yaitu xanthin
oksidase, dimana tanpa enzim ini asam urat
tidak dapat terbentuk. Asam urat lebih dari
0,42 mmol/L (7mg/dL) pada pria dan 0,36
mmol/L (6mg/dL) pada wanita, maka akan
terjadi hiperurisemia (Sweetman, 2007;
Rodwel, 2000).

134
 Prosiding Seminar Nasional dan Workshop “Perkembangan Terkini Sains Farmasi dan Klinik IV” tahun 2014
Penyebab utama terjadinya
peningkatan asam urat adalah
meningkatnya kadar purin dalam tubuh,
yang salah satunya berasal dari makanan
yang mengandung purin tinggi, seperti
jeroan (hati, ginjal, dan paru), ikan, udang,
kepiting dan bayam. Makanan ini paling
digemari masyarakat Indonesia.
Obat sintetik yang biasa dikonsumsi
untuk mengobati asam urat oleh masyarakat
adalah allopurinol yang menginhibisi
aktivitas xantin oksidase. Enzim yang
mengubah hipoxantin menjadi xantin dan
selanjutnya menjadi asam urat. Melalui
mekanisme umpan balik allopurinol
menghambat sintesis purin yang merupakan
prekursor xantin. Penggunaan allopurinol
yang terlalu sering atau berlebihan dapat
menimbulkan efek samping, yaitu
timbulnya ruam di kulit, hepatitis,
gangguan pencernaan, berkurangnya jumlah
sel darah putih dan kerusakkan hati. Oleh
sebab itu, diperlukan obat yang lebih aman
dengan harga terjangkau.
Beberapa jenis tumbuhan yang
digunakan sebagai obat tradisional untuk
mengobati penyakit asam urat diantaranya
adalah daun sambiloto, batang brotowali,
kulit buah manggis, buah lada hitam dan
rimpang jahe merah. Batang tanaman
Brotowali (Tinospora crispa (L.) Hook. f.
& Thomson) biasanya dijadikan oleh
masyarakat sebagai jamu (Heyne, 1987).
Manggis (Garcinia mangostana L.) atau
yang biasa dikenal ”Queen of fruits”
mengandung senyawa xanthone yaitu
substansi kimia alami yang tergolong
senyawa polifenol. Senyawa ini mempunyai
aktivitas antioksidan yang dapat menangkal
radikal bebas dan mencegah kerusakan sel
METODE PENELITIAN
Bahan-bahan
Daun sambiloto, batang brotowali,
kulit buah manggis, buah lada hitam,
rimpang jahe merah, hati ayam mentah,
allopurinol, NaCL fisiologi, etanol, aquadest,
Carboxyl Methyl Cellulosa (CMC), kalium
135
sehingga proses degenerasi sel terhambat
(Untung, 2012).
Sambiloto (Andrographis paniculata
Nees) juga merupakan salah satu tanaman
yang berkhasiat dalam menyembuhkan
berbagai macam penyakit turutama
disebabkan oleh adanya senyawa aktif
andrografolid dan turunannya.
Rimpang jahe merah mengandung
senyawa oleoresin yang lebih dikenal
sebagai gingerol yang bersifat sebagai
antioksidan. Jahe Merah memiliki
kandungan minyak atsiri tinggi dan rasa
paling pedas, sehingga cocok untuk bahan
dasar farmasi dan jamu. Jahe digunakan
untuk meningkatkan nafsu makan,
pengobatan influenza, gangguan saluran
pernapasan, batuk, masuk angin, gangguan
pencernaan atau mulas, diare, muntah-
muntah, obat gosok penyakit encok, terkilir,
bengkak, gatal-gatal, digigit ular, dan kolera
(Ahcmad, dkk., 2009).
Lada Hitam mengandung senyawa
scoponin, flavonoid, amilum, limonene,
piperidina, dan minyak lemak. Lada hitam
umumnya digunakan untuk mengatasi perut
kembung, tekanan darah tinggi, sesak nafas,
asam urat, disentri, kolera, kaki bengkak,
nyeri haid, rematik, salesma, sakit kepala
(Wijayanti, 2012), dan sebagai antimikroba
(Aldaly, 2010).
Berdasarkan penggunaan beberapa
tumbuhan obat ini secara tradisional maka
dilakukan penelitian untuk mengetahui
aktivitas antihiperurisemia dengan
pemberian ekstrak etanol masing masing
tanaman secarain vivo dengan pengukuran
kadar asam urat darah tikus putih jantan
kemudian dibandingkan dengan sedian
yang beredar yaitu allopurinol.
oksonat, reagen Uric Acid FS TBHBA
(DiaSys®), pellet makanan hewan.
Alat-alat
Botol maserasi, rotary evaporator,
timbangan digital, pipet mikro, vorteks,
 Prosiding Seminar Nasional dan Workshop “Perkembangan Terkini Sains Farmasi dan Klinik IV” tahun 2014
kuvet, fotometer, dan blender serta alat gelas
laboratorium.
Hewan Percobaan
Hewan percobaan yang digunakan
pada penelitian ini adalah tikus putih jantan
yang berumur 2-3 bulan, sehat, dan berat
badan 150-350 gram. Hewan uji berjumlah
24 ekor dibagi menjadi 8 kelompok dengan
masing-masing kelompok terdiri dari 3 ekor
tikus.
Penyiapan Ekstrak
Lima tumbuhan yang diteliti terlebih
dahulu diidentifikasi di Herbarium
Universitas Andalas. Sampel dikeringkan dan
dimaserasi untuk mendapatkan ekstrak
kental. Ekstrak kental ini dilakukan
standarisasi dengan parameter yang ada pada
Materia Medika Indonesia.
Pembuatan Larutan Hati Ayam
(Makanan Diet Purin Tinggi) MDPT
Hati ayam segar sebanyak 300 gram
dicuci, dipotong kecil-kecil lalu masukkan
dalam blender, kemudian tambah air suling
75 mL. Haluskan dengan blender, saring dan
masukkan dalam wadah. Larutan ini dibuat
baru setiap hari.
Pembuatan Suspensi Pottasium Oksanat
Pottasium oksonat ditimbang
sebanyak 150 mg/kgBB, gerus dalam
lumpang dan tambahkan suspensi Na CMC
0,05 gram yang telah dikembangkan dalam
air panas sebanyak 20 kalinya dan digerus
homogen, setelah tersuspensi dengan baik
volume dicukupkan dengan penambahan
NaCL fisiologis sampai 10 ml.
Pembuatan suspensi sediaan uji
Konsentrasi ekstrak yang dibuat
adalah 3%. Ekstrak ditimbang sebanyak 300
mg gerus dalam lumpang dan tambahkan Na
CMC 0,05 gram yang telah dikembangkan
dalam air panas sebanyak 20 kalinya dan
gerus hingga homogen, kemudian diencerkan
dengan aquadest sampai 10 ml.
Pembuatan Larutan Pembanding
136
Pembanding yang digunakan adalah
allopurinol dosis 90 mg/kg BB. Ditimbang
allopurinol 90 mg lalu gerus dalam lumping
dan tambahkan Na CMC 0,05 g yang telah
dikembangkan dengan air panas sebanyak 20
kalinya, cukupkan volume dengan aquadest
hingga 10 ml.
Pemberian Dosis
Dosis sediaan uji yang diberikan
adalah 300 mg/kg BB tikus. Untuk tikus
dengan berat badan 200 gram adalah 300
mg/1000 g x 200 g = 60 mg/200 g BB.
Pembanding yang digunakan adalah
allopurinol 90 mg/kg BB tikus. Dosis
pottasium oksonat yang digunakan adalah
150mg/kgBB tikus.
Perlakuan hewan percobaan
Hewan percobaan dikelompokkan
menjadi 8 kelompok, tiap kelompok terdiri
dari 3 ekor.Pengelompokkan hewan
percobaan tersebut adalah sebagai berikut:
Hewan percobaan diaklimatisasi selama satu
minggu.
1. Kelompok 1: kelompok control negatif
yang hanya diberi pembawa sediaan uji
yaitu suspensi Na CMC 0,5%.
2. Kelompok 2: kelompok control positif
yang diberi jus hati ayam dan suspensi
Na CMC 0,5 % secara oral.
3. Kelompok 3: kelompok pembanding
yang diberi jus hati ayam dan alopurinol
dengan dosis 90 mg/kg BB secara oral.
4. Kelompok 4: kelompok yang diberi jus
hati ayam dan suspense ekstrak etanol
daun sambiloto dengan dosis 300 mg/kg
BB secara oral.
5. Kelompok 5: kelompok yang diberi jus
hati ayam dan suspense ekstrak etanol
batang brotowali dengan dosis 300
mg/kg BB secara oral.
6. Kelompok 6: kelompok yang diberi jus
hati ayam dan suspense ekstrak etanol
kulit buah manggis dengan dosis 300
mg/kg BB secara oral.
7. Kelompok 7: kelompok yang diberi jus
hati ayam dan suspense ekstrak etanol
buah lada hitam dengan dosis 300 mg/kg
BB secara oral.
 Prosiding Seminar Nasional dan Workshop “Perkembangan Terkini Sains Farmasi dan Klinik IV” tahun 2014

8. Kelompok 8: kelompok yang diberi jus Pengukuran Kadar Asam Urat

hati ayam dan suspense ekstrak etanol
rimpang jahe merah dengan dosis 300
mg/kg BB secara oral.
Masing-masing kelompok diberikan
sediaan seperti perlakuan di atas pada hari
ke-1 sampai hari ke-7. Pada hari ke-8,
diberikan suspensi potassium oksonat dosis
150 mg/kg BB secara intraperitoneal (volume
pemberian untuk masing-masing tikus adalah
0,6 mL/200 g BB). Satu jam kemudian
diberikan Na CMC, allopurinol, dan sediaan
uji secara oral sesuai alokasi pengelompokan.
Setelah satu jam, darah tikus diambil melalui
pembuluh darah vena ekor yang terlebih
dahulu direndam dengan air hangat (sebelum
pengambilan darah, tikus dipuasakan terlebih
dahulu).
Perlakuan pada hari ke-9 sampai hari
ke-15 perlakuannya sama dengan hari ke-1
sampai hari ke-7, begitu juga perlakuan pada
hari ke-16 sama dengan hari ke-8.
Darah tikus diambil dengan
menggunakan pipet hematokrit. Pengambilan
darah dilakukan melalui vena ekor yang
terlebih dahulu direndam dengan air hangat.
Darah yang diperoleh disentrifus selama 10
menit dengan kecepatan 11.000 RPM.
Plasma yang terpisah diambil dan ditentukan
kadar asam uratanya.
Untuk pengukuran asam urat dengan
photometer terlebih dahulu disiapkan tabung
reaksi, tabung reaksi pertama berisi aquadest
sebanyak 20µl (blanko), tabung reaksi yang
kedua berisi asam urat standar sebanyak 20
µl (standar), dan tabung reaksi yang lain
berisi plasma uji sebanyak 20 µl. Pada
masing-masing tabung reaksi ditambahkan
1000 µl reagen uric acid (buffer posfat,
TBHBA, 4-aminoantipirin, peroksidase,
urikase), dikocok homogen dan dibiarkan
selama 10 menit pada suhu 20-25 °C,
selanjutnya diukur dengan alat photometer
pada panjang gelombang 546 nm.

HASIL DAN DISKUSI

Hasil metode pengukuran secara enzimatis

Hasil penentuan kadar asam urat ditunjukkan dalam tabel I.
dalam plasma tikus putih jantan dengan

Tabel I. Kadar Asam Urat Tikus Putih Jantan

Kadar Asam Urat (mg/dL)
Kelompok Tikus
Hari ke-8 Hari ke-16
1 1.3 1.4
2 1.5 1.6
Kontrol negatif (-)
3 1.7 1.7
Rata-rata 1.50 1.57
1 3.0 3.6
2 3.2 3.8
Kontrol positif (+)
3 3.3 4.2
Rata-rata 3.17 3.87
1 1.2 1.3
Pembanding
2 1.5 1.6
(Allopurinol Dosis 90
3 1.6 1.6
mg/kg BB)
Rata-rata 1.43 1.50
1 2,0 2,2
Ekstrak daun
2 2,3 3,2
sambiloto Dosis 300
mg/kg BB 3 2,6 3,4
Rata-rata 2,3 2,93

137
 Prosiding Seminar Nasional dan Workshop “Perkembangan Terkini Sains Farmasi dan Klinik IV” tahun 2014

1 2,9 3,1
Ekstrak brotowali 2 2,9 3,4
Dosis 300 mg/kg BB 3 3,0 3,9
Rata-rata 2,9 3,46
1 1.4 1.5
Ekstrak Kulit Buah
2 1.8 2.0
Manggis Dosis 300
3 1.9 2.2
mg/kg BB
Rata-rata 1.70 1.90
1 2,4 3,3
Ekstrak lada hitam 2 2,6 3,8
Dosis 300 mg/kg BB 3 2,6 3,5
Rata-rata 2,53 3,53
1 1,7 1,6
Ekstrak Jahe merah 2 1,8 2,2
Dosis 300 mg/kg BB 3 2,0 2,2
Rata-rata 1,83 2,0

Diskusi asam urat. Jika enzim urikase sudah

Pengujian aktivitas antihiperurisemia
secara in vivo dengan menggunakan hewan
percobaan yaitu tikus putih jantan galur Asia
sebanyak 24 ekor dengan berat badan kira-
kira 150-250 gram, dengan usia 2-3 bulan,
dimana pada umur tersebut perkembangan
tubuhnya sempurna. Alasan pemilihan tikus
karena tikus mudah didapat, mudah dalam
pemeliharaannya serta mempunyai sifat
fisiologis yang hampir sama dengan manusia.
Pemilihan jenis kelamin jantan karena tikus
jantan tidak mempunyai hormon estrogen,
walaupun ada hanya dalam jumlah yang
relatif sedikit serta kondisi hormonal pada
tikus jantan lebih stabil jika dibandingkan
dengan tikus betina. Sebelum dilakukan
penelitian, tikus terlebih dahulu
diaklimatisasi selama 7 hari yang bertujuan
agar tikus dapat menyesuaikan diri dengan
lingkungannya. Setelah itu tikus diberi
makanan diet purin tinggi (MDPT) yaitu jus
hati ayam secara oral serta potassium oksonat
150 mg/kg BB dalam bentuk suspensi
dengan Na CMC 0,5% secara intraperitoneal.
Potassium oksonat bekerja untuk
menghambat enzim urikase. Hewan tingkat
rendah seperti tikus mempunyai enzim
urikase yang akan mengubah asam urat
menjadi allantoin, dimana allantoin ini lebih
mudah diekskresikan dibandingkan dengan
dihambat, maka kadar asam urat akan
meningkat sehingga bisa digunakan sebagai
model keadaan hiperurisemia. Keadaan
hiperurisemia ini diperlukan untuk
mengetahui apakah sediaan uji yang
digunakan dapat menurunkan kadar asam
urat atau tidak (Katzung, 2002). Pengambilan
darah dilakukan 2 jam setelah pemberian
potassium oksonat karena berdasarkan
penelitian Katrin dkk (2009) kadar asam urat
pada waktu tersebut mencapai kadar
tertinggi, kemudian kadar asam urat akan
menurun dan mencapai normal dalam waktu
24 jam. Adanya penurunan kadar asam urat
merupakan parameter untuk mengukur
potensi aktivitas antihiperurisemia suatu
senyawa uji secara in vivo.
Sediaan yang diberikan kepada
hewan percobaan berupa suspensi, yang
bertujuan untuk mensuspensikan sediaan
sehingga konsistensi sediaan pada saat
diambil merata. Pensuspensi yang digunakan
adalah Na CMC 0,5 % karena bersifat inert,
maka diharapkan dapat diperoleh suspensi
yang stabil, resistensi terhadap mikroba
cukup baik dan kejernihannya tinggi.
Pembanding yang digunakan adalah suspensi
allopurinol dosis 90 mg/kg BB. Pemilihan
allopurinol sebagai pembanding karena
allopurinol adalah obat modern yang paling
umum digunakan dalam menurunkan kadar

138
 Prosiding Seminar Nasional dan Workshop “Perkembangan Terkini Sains Farmasi dan Klinik IV” tahun 2014
asam urat. Allopurinol bekerja menghambat
enzim xantin oksidase sehingga
pembentukan asam urat dapat terganggu
(Price dan Wilson, 2003).
Kadar asam urat dalam plasma tikus
putih jantan diukur dengan metode enzimatik
dengan menggunakan reagen uric acid FS
TBHBA (2,4,6-tribromo-3hydroxy-benzoic
acid). Mekanisme reaksi yang terjadi adalah
asam urat yang ada dalam plasma dioksidasi
oleh enzim urikase dengan bantuan H2O dan
O2 menjadi alantoin, CO2, dan H2O2.
Hidrogen peroksida (H2O2) yang terbentuk
akan bereksi dengan 4-amino antipirin dan
TBHBA (2,4,6-tribromo-3hydroxy-benzoic
acid) menjadi quinonimin yang berwarna
merah muda, dimana reaksi tersebut
dikatalisis oleh enzim peroksidase (POD).
Warna yang terbentuk tersebut diukur dengan
dengan photometer pada panjang gelombang
546 nm. Besarnya intensitas warna yang
dihasilkan oleh quinonimin tersebut ekivalen
dengan kadar asam urat dalam darah
(Thomas, 1998). Plasma yang mengandung
asam urat direaksikan dengan reagen uric
acid dan diinkubasi selama 10 menit pada
suhu 25ºC. Tujuan inkubasi adalah untuk
memperoleh serapan yang optimum dan
stabil dari quinonimin yang telah terbentuk
KESIMPULAN
Hasil penelitian menunjukkan bahwa
ekstrak etanol kulit buah manggis dan
rimpang jahe merah dapat menurunkan kadar
asam urat tikus putih jantan secara signifikan
(p<0,05). Kedua ekstrak ini dapat
UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih kepada Direktorat
Pembinaan Penelitian dan Pengabdian
kepada Masyarakat, Direktorat Jenderal
DAFTAR PUSTAKA
Achmad, A.S.,Hakim, H. E., Makmur, L.,
Syah, M.Y., Juliawati, D.L., dan
Mujahidin, D., 2009, Ilmu Kimia
139
sempurna. Pengukuran kadar asam urat
dilakukan pada dua titik waktu yaitu hari ke-
8 dan hari ke-16.
Berdasarkan hasil pengamatan pada
hari ke-8 dan hari ke-16, menunjukkan
bahwa kadar asam urat rata-rata pada
kelompok 2 sampai kelompok 8 mengalami
peningkatan. Hal ini disebabkan karena
penginduksi tetap diberikan selama 16 hari,
sehingga tidak mengimbangi kemampuan
ekstrak dalam menurunkan kadar asam urat
tikus putih jantan. Secara statistik kenaikan
tersebut tidak signifikan (p>0,05). Walaupun
demikian, dari hari ke-8 sampai hari ke-16
terjadi penurunan kadar asam urat
dibandingkan kontrol positif.
Berdasarkan hasil penelitian, ekstrak
etanol kulit buah manggis dan rimpang jahe
merah memiliki aktivitas antihiperurisemia
secara in vivo yang sebanding dengan obat
sintetis Allopurinol. Kadar asam urat tikus
putih jantan pada hari ke-8 setelah diberi
ekstrak kulit buah manggis dan rimpang jahe
merah masing masingnya adalah 1.70 dan
1.83 mg/dL. Sedangkan pemberian
Allopurinol kadarnya adalah 1.43 mg/dL.
Sementara itu pada control negative dan
positif kadarnya masing masing adalah 1.50
dan 3.17 mg/dL
dimanfaatkan sebagai bahan obat yang dapat
dibuat dalam bentuk sediaan farmasi yang
memiliki potensi sebagai obat
antihiperurisemia
Pendidikan Tinggi yang telah membiayai
penelitian ini.
Kegunaan Tumbuhan Obat Indonesia,
Jilid I, ITB: Bandung.
Aldaly, Zainab T.K. 2010. Antimicrobial
Activity of Piperine Purified From
 Prosiding Seminar Nasional dan Workshop “Perkembangan Terkini Sains Farmasi dan Klinik IV” tahun 2014
Pipper Nigrum. Journal of Basrah
Researches ((Sciences)), Vol. 36 (5).
Dalimartha S, 2002. Resep Tumbuhan Obat
untuk Asam Urat, Swadaya, Jakarta.
Heyne, K., 1987, Tumbuhan Berguna
Indonesia, Jilid III, diterjemahkan oleh
Badan Penelitian dan Pengembangan
Kehutanan, Yayasan Sarana Wahajaya,
Jakarta.
Katrin, Elya, B., Amin, J., Permawati, M.,
2009, Aktivitas Ekstrak Air Daun
Gandarusa (Justicia gendarusa Burm.f)
Terhadap Penurunan Kadar Asam Urat
Darah Tikus, Jurnal Bahan Alam
Indonesia, 7(1):1412-2855.
Katzung, B. G., 2002, Farmakologi Dasar
dan Klinik, Edisi 8, alih bahasa oleh
Bagian Farmakologi Kedokteran
Universitas Indonesia, Salemba
Medika, Jakarta.
Murray, R. K., D. K. Graner, dan V. W.
Rodwell, 2008, Biokimia Harper, Edisi
27, Fakultas Kedokteran EGC, Jakarta.
140
Price dan Wilson, 2003, Patofisiologi Konsep
Klinis Proses-proses Penyakit, Edisi 6,
Fakultas Kedokteran EGC, Jakarta.
Rodwell, V.W.,2000,”Metabolism of Purine
and Pyrimidine Nucleotides”, in
R.K.Murray, Harpers Biochemistry,
23th Edition, Mc Graw Hill, USA.
Sweetman, Sean C., 2007, Martindal, The
Complete Drug Referece, 35th edition,
Pharmaceutical Press, 498-503 P,
London.
Thomas, L., 1998, Clinical Laboratory
Diagnostic, 1st Edition. Franfurt: TH-
Books Verlagsgesellschaft.
Untung, O., 2012, Manfaat Kulit Manggis
Andal Hadapi Kanker dan Jantung
503, Surabaya: Trubus.
Wijayanti, Itha, K., 2012, Ramuan
Tradisional Lengkap Untuk Berbagai
Penyakit, Aulya Publishing,
Yogyakarta.