PELAKSANAAN PRAKTIKUM

Waktu dan Tempat Praktikum

Praktikum ini dilaksanakan pada hari Selasa, 10 April 2018 di Laboratorium
Mikrobiologi Pangan Fakultas Teknologi Pangan dan Agroindustri Universitas
Mataram.

Alat dan Bahan Praktikum

a. Alat-alat Praktikum
Adapaun alat-alat yang digunakan pada praktikum ini adalah incubator,
jarum ose, cawan petri, tabung reaksi, rak tabung reaksi, vortex, pipet mikro,
kertas cakram, pelubang, jangka sorong, penggaris.
b. Bahan-bahan pPraktikum
Adapun bahan-bahan yang digunakan pada praktikum ini adalah susu
kuda liar, susu kemasan Bear Brand, bakteri uji Escherichia coli dan Bacillus
cereus.

Prosedur Kerja
1. Persiapan Inokulum
Bakteri uji (E. coli dan Bacillus cereus)

Ditumbuhkan pada media Nutrient Agar (NA)

Diinkubasi pada T = 35°C ,t = 24 jam

Diambil 1 ose

Diinokulasi ke 10 mL media Nutrient Broth (NB)

diinkubasi pada T=35°C, t= 24 jam

Diambil 1 ml
 Dimasukkan ke dalam 9 ml Nutrient Broth (NB)

Diinkubasi pada T=35°C, t= 24 jam

Disubkultur sebanyak 3 kali

2. Persiapan Media Uji

1 ml kultur

Dimasukkan ke dalam 9 ml Buffer phosfat

Diambil 1 ml

Dimasukkan kedalam 99 ml Nutrient Agar (NA)

diplating

3. Uji difusi cakram

Cakram steril ukuran 6 mm

Senyawa Dimasukkan ke media padat Nutrient Agar (NA)

antimikroba
20 µl
Cawan Diteteskan

petri
Diinkubasi pada T=35°C, t= 10 jam
 Diukur diameter zona hambat dengan rumus :
d I + d II
∑ zona hambat : 2
{(a -b) + (a -b) + (a -b}
u1= 1 2 3
3
a1 = diameter zona hambat a1 (mm)
a2 = diameter zona hambat a2 (mm)
a3 = diameter zona hambat a3 (mm)
b = diameter cakram/sumuran (mm)
dI = Diameter U1 (mm)
dII = Diameter U2 (mm)

4. Uji Metode Sumuran

Tip steril ukuran 6 mm

Ditekan pada medium berisi biakan sampai dasar

cawan

Diangkat sisa medium

Senyawa Dimasukkan
antimikroba
30 µl
Diinkubasi pada T=35°C, t= 18 jam

Diukur diameter zona hambat dengan rumus :

d I + d II
∑ zona hambat :
2
{(a1 -b) + (a2 -b) + (a3 -b}
u1=
3
a1 = diameter zona hambat a1 (mm)
a2 = diameter zona hambat a2 (mm)
a3 = diameter zona hambat a3 (mm)
b = diameter cakram/sumuran (mm)
dI = Diameter U1 (mm)
dII = Diameter U2 (mm)