Onsite Duo Dengue Ag-IgG/IgM Rapid Test-Cassette (Suero / Plasma / Sangre Total) Página 1 de 2

MATERIALES NECESARIOS PERO NO INCLUIDOS

REF 1. Reloj o Temporizador
C K BIOTECH
SIMPLIFYING DIAGNOSTICS
Catálogo Número R0062C ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
Para uso de Diagnóstico in Vitro
1. Este inserto debe ser leído completamente antes de realizar la prueba. Fallar seguir el inserto podrá
IVD
dar resultados inexactos.
2. No abrir la bolsa sellada, a menos que esté listo para llevar a cabo el ensayo.
Diagnóstico In Vitro 3. No usar dispositivos expirados.
4. Llevar todos los reactivos a temperatura ambiente (15°C-30°C) antes de su uso.
OBJETIVO DE USO 5. No usar los componentes en ningún otro tipo de kit de prueba como sustituto de los componentes
de este kit.
La prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag NS1+IgG/IgGM Rapid Test es un inmunoensayo de flujo lateral
6. No usar sangre hemolizada para la prueba.
para la detección y la diferenciación en simultaneo de IgM anti–virus del dengue, IgG anti-virus del 7. Usar ropa protectora y guantes desechables mientras se manipulan los reactivos del kit y las
dengue y el antígeno NS1 del virus Dengue en suero humano, plasma o sangre total. Está destinado muestras clínicas. Lavarse bien las manos después de realizar la prueba.
para ser usado por profesionales como una prueba de detección y como ayuda en el diagnostico de la 8. Los usuarios de esta prueba deberán seguir las CDC Precauciones Universales de los Estados Unidos
infección de los virus del dengue. Cualquier muestra reactiva con La Prueba Rápida OnSite Duo Dengue para prevenir la transmisión del VIH, VHB y otros patógenos de transmisión sanguínea.
Ag NS1+IgG/IgM deberá ser confirmada con los métodos de exámenes alternativos. 9. No fumar, beber o comer en áreas donde las muestras o los reactivos del kit estén siendo
manipulados.
RESUMEN Y EXPLICACIÓN DE LA PRUEBA 10. Desechar todas las muestras y materiales para realizar la prueba como desechos de riesgo biológico.
11. Manejar el Control Positivo y Negativo de la misma manera que las muestras de los pacientes.
Los virus del Dengue son, una familia de cuatro serotipos de virus distintos (Den 1,2,3,4), virus ARN de 12. Los resultados de la prueba deberán leerse dentro de los 25 minutos después de que la muestra sea
sentido positivo envueltos en una sola cadena. Los virus son transmitidos por mosquitos de picadura aplicada al pozo de ensayo del dispositivo. Leer los resultados después de los 25 minutos

1
diurna de la familia Stegemyia, principalmente del Aedes aegypti, y Aedes albopictus. Hoy en día, mas de
2.5 billones de personas que viven en las áreas tropicales de Asia, África, Australia y América están con
riesgo de contraer la infección del dengue. Un estimado de 100 millones de casos de fiebre del dengue y
250,000 casos en peligro de muerte por la fiebre hemorrágica del dengue ocurre anualmente en todo el
mundo.
La detección serológica es un método común para el diagnostico de la infección con el virus del dengue.
El anticuerpo IgM anti-dengue comienza a aparecer a los 3 días después de la exposición inicial y
permanece en circulación cerca de 30-60 días. El anticuerpo IgG anti-dengue se eleva aproximadamente
en 7 días, máximo a las 2-3 semanas, y persiste de por vida.4-6. La detección de los antígenos NS1
recomendados podría generar resultados erróneos.
13. No realizar la prueba en una habitación con fuertes corrientes de aire, es decir un ventilador
eléctrico o aire acondicionado fuerte.
PREPARACIÓN DE REACTIVOS E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
Todos los reactivos están listos para ser usados tal y como han sido suministrados. Almacenar los
dispositivos no abiertos ni usados entre 2°C- 30°C. Los controles positivos y negativos deberán conservarse
a2°C-8°C.Si son almacenados a2°C-8°C, asegurarse de que el dispositivo de la prueba sea llevado a
temperatura ambiente antes de ser abierto. El dispositivo de la prueba es estable hasta la fecha de
expiración impresa en el sachet sellado. No congelar el kit ni exponerlo a temperaturas sobre los 30°C.

NS
liberados durante la replicación del virus en el paciente infectado mostró resultados muy prometedores.
Se permite el diagnóstico desde el primer día después de la aparición de la fiebre hasta el día 9, una vez
que la fase clínica de la enfermedad se haya establecido, lo que permite un tratamiento temprano.
La Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag NS1+IgG/IgM Rapid test detecta el anticuerpo IgM, IgG anti-
dengue y la circulación del antígeno NS1 del dengue en una prueba de 25 minutos. La prueba es fácil de
usar, sin equipos incómodos, y requiere solo un personal con un mínimo entrenamiento.

PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La Prueba Rápida Onsite Duo Dengue Ag+IgM/IgG contiene dos dispositivos de ensayo (lado
izquierdo:prueba de Dengue IgG/IgM; lado derecho:prueba Dengue Ag NS1).
Prueba Rápida Dengue IgG/IgM: Es un inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral que está en el lado
izquierdo contiene:1) una almohadilla conjugada de color borgoña que contiene 4 serotipos
recombinantes de dengue envueltos en conjugados antígenos con oro coloidal (conjugados Ag dengue)
bioseguridad estándar.

Plasma
1.

2.
3.

Suero
1.

2.
MANEJO Y RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA

Considere cualquier material de origen humano como infeccioso y manéjelo usando procedimiento de

Recolectar la muestra de sangre dentro de un tubo de recolección de tapa de color azul, verde o
lavanda (usando EDTA, citrato o heparina, como corresponda en Vacutainer® )por venopunción.
Separar el plasma por centrifugación.
Con cuidado separar el plasma dentro de un nuevo tubo pre-etiquetado.

Recolectar la muestra de la sangre en un tubo de recolección de tapa roja (usando no

anticoagulantes en Vacutainer®) por venopunción.
Permitir que la sangre se coagule.
y conejo conjugada con oro IgG; 2) una membrana de nitrocelulosa en tira que contiene dos bandas de 3. Separar el suero por centrifugación.
ensayo (bandas G y M) y una banda de control (banda C). La banda G está recubierta con el anticuerpo 4. Con cuidado remueva el suero en un nuevo tubo pre-etiquetado.
para la detección del IgG anti-dengue virus, la banda M estáre cubierta con IgG de cabra anti conejo.
Analizar las muestras tan pronto como sea posible después de recolectar la muestra. Almacenar las
Prueba Rápida de Dengue Ag NS1:Es un inmunoensayo cromatografico de flujo lateral que está en el
muestras a 2°C-8°C si no son analizadas inmediatamente.
lado derecho contiene: 1)una almohadilla conjugada de color borgoña que contiene anticuerpos de
ratón anti- dengue conjugados con oro coloidal (conjugados Dengue Ab);y conjugado de oro- pollo IgY. Almacenar las muestras a 2°C-8°C hasta 5 días. Las muestras deberán congelarse a 20°C por un largo periodo
2) Una membrana de nitrocelulosa en tira que contiene una banda T de ensayo (banda T) y una banda de de almacenamiento.
Control C (banda C). La banda T está recubierta con anticuerpos de ratón anti dengue virus, y la banda C
Evitar los ciclos múltiples de congelación-descongelación. Antes de la prueba, llevar todas las muestras a
está recubierta con anticuerpo IgY de cabra anti-pollo. Los anticuerpos para el virus del dengue
temperatura ambiente y mezclar suavemente. Las muestras que contengan partículas de materia visibles
reconocen los antígenos de los 4 serotipos del virus del dengue.
deberán ser clarificadas por centrifugación antes de la prueba. No usar muestras que muestren lipemia,
Cuando un volumen adecuado de la muestra del ensayo es suministrado en el pocillo de la muestra, la
hemolisis o turbidez con el fin de evitar interferencias en la interpretación de los resultados.
muestra migra por acción capilar a través del cassete. El IgG anti-dengue si está presente en la muestra se
Ag
unirá a los conjugados del Ag del virus dengue. El inmunocomplejo es luego capturado por el reactivo PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO
recubierto en la banda G, formando una banda G de color borgoña, el cual indica el resultado positivo de
Paso 1: Llevar la muestra y los componentes del ensayo a temperatura ambiente si están refrigeradas o
la prueba del virus del dengue lo que indica una infección reciente o repetida.
congeladas. Mezcle el pocillo de la muestra antes del ensayo una vez descongeladas.
Si el IgM anti-dengue, está presente en la muestra, se unirá a los conjugados del dengue. El
Paso 2: Cuando esté listo para la prueba, abra la bolsa por el corte remueva el dispositivo. Coloque
inmunocomplejo es luego capturado por el reactivo recubierto en la banda M, formando una banda M
de color borgoña lo cual indica un resultado IgM positivo a la prueba del virus del dengue, sugiriendo una el dispositivo de la prueba en una superficie limpia y plana.
infección aguda. Paso 3: Asegúrese de etiquetar el dispositivo con el numero de identificación de la muestra.
Si el Dengue Ag NS1 está presente en la muestra se unirá a Paso 4:
los conjugados del Dengue Ab. El inmunocomplejo es Para la detección del Dengue IgG/IgM Para la detección del Dengue Ag (NS1)
luego capturado en la membrana del anticuerpo de ratón Llenar el tubo capilar con la muestra (suero, plasma Llenar el gotero con la muestra.
anti dengue virus recubierto, formando una banda T de o sangre total) sin exceder la línea de muestra tal y Sujetando el gotero verticalmente, dispense 1 gota
color borgoña, lo cual indica un resultado Dengue Ag como está mostrado en la figura debajo. (aprox. 30-45µl) de suero/plasma ó 2 gotas (aprox.
NS1positivo. Sujetando el tubo capilar verticalmente, dispense 80-100µl) de sangre total al pocillo de muestra
La ausencia de las bandas G, M o T indica un resultado Línea de Control
toda la muestra en el centro del pocillo de (pocillo S) asegurándose de que no hayan burbujas
Línea Línea
negativo de Prueba IgM de Control muestra(Pocillo S) asegurándose de que no hayan de aire.
Línea
de Prueba IgG Línea de Inmediatamente añada 1 gota (aprox. 35-40 µL)
La prueba contiene un control interno (bandaC) la cual Prueba AgNS1 burbujas de aire.
Pocillo de de Diluyente de Muestra en el pocillo de muestra
deberá mostrar una banda de color borgoña del Luego añada 3 gotas(aprox. 90-100µL) de Diluyente
muestra (pocillo S) con el frasco en posición vertical.
inmunocomplejo de cabra anti-pollo IgY / conjugado pollo Identificación del
de Muestra dentro del pocillo Buffer (pocillo B) con
oro- IgY en el panel izquierdo y en el panel derecho espécimen el frasco en posición vertical.
independientemente del color que desarrolle cualquiera Pocillo de
Pocillo de Buffer
de las bandas Test. Por otro lado, si el resultado de la muestra
prueba es inválido, la muestra deberá volver a analizarse
con otro dispositivo.

REACTIVOS Y MATERIALES PROVISTOS Línea de Línea de

muestra muestra
1. Sachets de aluminio individualmente sellados conteniendo:
a. Un dispositivos cassete.
b. Un desecante. 5 µl de muestra en el pocillo 1 gota de Suero/Plasma 2 gotas de Sangre Total
al pocillo S al pocillo S
2. Tubo capilar 5 µL (Para prueba Dengue IgG/IgM)
3. Dispensadores plásticos (Para prueba Dengue Ag NS1)
4. Diluyente de Muestra (5 ml)
5. Un inserto (instrucciones de uso).

MATERIALES QUE PUEDEN SER REQUERIDOS Y DISPONIBLES PARA COMPRA

Kit de control POSITIVIA DENGUE Ag (Cat. # C0063) contiene 01 vial de Control Positivo y 01 vial de
3 gotas de Diluyente 1 gota de Diluyente
Control Negativo. de muestra en el de muestra
pocillo B
 Onsite Duo Dengue Ag-IgG/IgM Rapid Test-Cassette (Suero / Plasma / Sangre Total) Página 2 de 2

4. Reactividad Cruzada.
Paso 5: Establecer el temporizador
Muestras de otras enfermedades infecciosas fueron probadas para reactividad cruzada con el Onsite Duo
Paso 6: Los resultados podrán leerse en 25 minutos.
Dengue Ag-IgG/IgM Rapid Test de acuerdo al procedimiento standard. Los resultados mostraron que las
siguientes muestras no tuvieron reacción cruzada con la prueba Onsite Duo Dengue Ag-IgG/IgM Rapid Test
No leer los resultadosdespués de los 25 minutos. Para evitar confusiones, desechar el dispositivo de
Tamaño de
muestra después de interpretar los resultados. Muestras la Muestra Prueba IgM Prueba IgG Prueba Ag (NS1)
Suero Positivo HBsAg 10
Suero Positivo HAV 10
CONTROL DE CALIDAD Suero Positivo HCV 10
Suero Positivo Sifilis 10
Utilizando cada Casete de Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag NS1+ IgG/IgM como se describe en el
Suero Positivo TB 10
Procedimiento del Ensayo anterior, ejecutar el Control Positivo 1 y el Control Negativo 1 (incluido bajo
pedido) bajo las siguientes circunstancias para supervisar el rendimiento de la prueba: Suero Positivo H. Pylori 10
1. Un nuevo operador utiliza el kit, antes de realizar el ensayo de las muestras. 5. Interferencia.
2. Un nuevo kit de prueba ha sido utilizado. Sustancias comunes (tales como medicación para dolor y fiebre, componentes de la sangre) podrían afectar el
3. Un nuevo envío del kit es utilizado. rendimiento del Onsite Duo Dengue Ag-IgG/IgM Rapid Test. Esto fué investigado para rechazar estas
4. La temperatura usada durante el almacenamiento del kit esta fuera de los 2°C-30°C. sustancias dentro de los controles standard del Dengue Ag., Dengue IgG e IgM. Los resultados son mostrados
5. La temperatura del área donde se realiza el ensayo esta fuera de los 15°C-30°C. en la siguiente tabla y demuestran que las sustancias investigadas no afectan el rendimiento del Onsite Duo
Dengue Ag-IgG/IgM Rapid Test.
Nota: (-): Negativo; (+): Positivo Débil.
INTERPRETACIÓN DEL RESULTADO DEL ENSAYO Prueba IgM Prueba IgG Prueba Ag
Sustancias
Interferentes Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo
1. RESULTADO NEGATIVO: 2. RESULTADO INVÁLIDO:
- + - + - +

1
Si solo la banda C está presente, la ausencia de Si la banda C no se desarrolla, el Control
cualquier color borgoña en las bandas G, M o T Ensayo es inválido. Independientemente de Bilirrubina 20 mg/dL - + - + - +
indica que no hay anticuerpos del virus anti- cualquier color borgoña en las bandas G, M o T Glucosa 55 mmol/L - + - + - +
dengue detectados. El resultado es negativo o no como se indica a continuación. Repetir el ensayo - - -
Albumina 60 g/L + + +
reactivo con un nuevo dispositivo.
Ac. Salicílico 4.34 mmol/L - + - + - +
Heparina 3,000 U/L - + - + - +
- + - + - +
IgG Humana 150 mg/dL - + - + - +
LIMITACIONES DE LA PRUEBA

3. RESULTADO POSITIVO:
IgG
Positivo
IgM
Positivo
IgG/IgM
Positivo
NS Ag NS1
Positivo
Ag NS1/IgM
Positivo
Ag NS1/IgG/IgM
Positivo
1.

2.

3.

4.

5.
El Procedimiento del Ensayo y la Interpretación del Resultado deberá seguirse muy de cerca cuando se
analice la presencia de anticuerpos contra el virus del dengue y Dengue Ag en suero o plasma de
sujetos individuales. Su incumplimiento puede generar resultados inexactos.
La Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag NS1+IgG/IgM se limita a la detección cualitativa de
anticuerpos contra el virus del dengue y el Dengue Ag en suero humano o plasma. La intensidad de la
banda de ensayo no tiene correlación lineal con el título del anticuerpo y con el titulo Ag NS1 en la
muestra.
La Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag NS1+IgG/IgM no puede ser usada para diferenciar si la
infección es primaria o secundaria. No hay información acerca de los serotipos del dengue que esté
incluida con esta prueba.
La reactividad serológica cruzada con otros flavivirus es común(por ejemplo: Encefalitis japonesa, Nilo
occidental, fiebre amarilla, etc.), por lo tanto es posible que los pacientes infectados con estos virus
puedan mostrar algún nivel de reactividad con esta prueba.
Un resultado negativo o no reactivo de un sujeto individual indica la ausencia de anticuerpos del virus
del dengue detectable o antígeno. Sin embargo, un resultado negativo o no reactivo no excluye la
posibilidad de exposición a la infección con el virus del dengue.
6. Un resultado negativo o no-reactivo puede ocurrir si la cantidad de los anticuerpos del virus del
dengue o Dengue Ag que están presentes en la muestra está por debajo de los limites de detección del
ensayo, o los anticuerpos y el Ag detectados no están presentes durante la etapa de la enfermedad en
la cual la prueba es recolectada.
7. Si los síntomas persisten mientras el resultado de la Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag
NS1+IgG/IgM es negativo o no-reactivo, se recomienda remuestrear al paciente pocos días después o
Las muestras con resultados positivos deberán confirmarse con los métodos de pruebas analizarlo con un dispositivo de prueba alternativo.
alternativos y los hallazgos clínicos, antes de determinar un diagnóstico. 8. Algunas muestras que contengan un titulo inusualmente alto de anticuerpos heterofilos o factores
reumatoides tales como2000 IU/mL pueden afectar los resultados esperados.
9. Los resultados obtenidos con la prueba deberán ser interpretados en conjunto con otros
CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO
procedimientos de diagnósticos y los hallazgos clínicos.
Ag
1. Rendimiento Clínico para la Prueba IgM
REFERENCIAS
Un total de 387 muestras de pacientes de sujetos susceptibles fueron analizadas por la Prueba Rápida
1. Gubler DJ, Clark GG.　Dengue/Fiebre hemorrágica del Dengue. La aparición de un problema de salud
OnSite Duo Dengue Ag NS1+IgG/IgM y por un EIA comercial. Las comparaciones de todos los sujetos es
mostrada en la siguiente tabla: global.Aparición de enfermedades infecciosas. 1995;1(2):55–57.
2. Gubler DJ, Trent DW.La aparición de la epidemia del dengue /fiebre de dengue hemorrágico como un
Onsite Duo Dengue Ag+IgG/IgM problema de salud en América. Agentes de enfermedades infecciosas 1994;2:383–393
Prueba IgM EIA Positivo Negativo Total 3. Monath TP. Dengue: El riesgo para los paises desarrollados y en desarrollo. Proc Natl Acad Sci U S A
Positivo 121 5 126 1994;91:2395–2400.
4. Price DD, Wilson SR, Infección Severa del dengue, Medscape Referencia de Drogas, Enfermedades y
Negativo 7 254 261
procedimientos, Mayo 2,011 Web http://www.emedicine.com/EMERG/topic124.htm.
Total 128 259 387 5. Innis BL, and Nisalak A, et al: Un ensayo immunoabsorbente ligado a una enzima que se caracteriza en
Sensibilidad Relativa: 96%, Especificidad Relativa: 97.3%, Acuerdo General: 96.9% despojar las infecciones del dengue y la encefalitis japonesa en co-circulación. Am. J. Trap. Med.
Hygiene. 1989: 40: 418-427.
2. Rendimiento Clínico para la prueba IgG 6. Anónimo. Fiebre hemorrágica del Dengue. Diagnostico, tratamiento, prevención y control. 2da ed.
Geneva: Organización Mudial de la Salud, 1997.
Un total de 441muestras de pacientes de sujetos susceptibles fueron analizadas por la Prueba Rápida 7. Alcon S, Talarmin A., Debruyne M., et al: Ensayo Especifico Inmunoabsorbente enzimático contra el
OnSite Duo Dengue Ag NS1+IgG/IgM y por un EIA comercial. Las comparaciones de todos los sujetos es
virus del Dengue Tipo 1 Proteínas NS1 no estructurales revelan la circulación del antígeno en la sangre
mostrada en la siguiente tabla:
durante la fase aguda de la enfermedad en pacientes con experiencia de infecciones primarias y
Onsite Duo Dengue Ag+IgG/IgM secundarias. DIARIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA, 2002, 40: 376–381
IgG EIA Test Positivo Negativo Total Indice de Símbolos
Positivo 153 7 160 Para uso de diagnostico Fecha de
Consulte instrucciones IVD
Negativo 11 270 281 i para su uso In Vitro solamente vencimiento
Total 164 277 441 REF Catálogo # LOT Número de lote Pruebas por kit
N
Sensibilidad Relativa: 95.6%, Especificidad Relativa: 96.1%, Acuerdo General: 95.9% 30ºC

Almacenar entre 2-30ºC EC REP

Representante 2 No re-usar
2 autorizado
3. Rendimiento Clínico para la prueba Ag NS1
Un total de 438muestras de pacientes de sujetos susceptible fueron analizados por la Prueba Rápida Onsite Manufacturador
Fecha de manufactura
Duo Dengue Ag NS1+IgG/IgM y por un EIA comercial. Las comparaciones de todos los sujetos es mostrada en
la siguiente tabla:
Representante Exclusivo:
Onsite Duo Dengue Ag+IgG/IgM
CTK Biotech, Inc.
Ag EIA Test Positivo Negativo Total 10110 Mesa Rim Road
Positivo 135 5 140 San Diego, CA 92121, USA
Tel: 858-457-8698, Fax: 858-535-1739 IMPORTACION DE REACTIVOS PARA LABORATORIO CLINICO

Negativo 12 286 298 E-mail: info@ctkbiotech.com Jr. Toribio Rodriguez de Mendoza N°270 Urb. San Agustín Lima 07
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www.importadoraamericana.com
Sensibilidad Relativa: 96.4%, Especificidad Relativa: 96%, Acuerdo General: 96.1%