[ANALISIS INSTRUMENTAL ] 29 de agosto de 2017

OBJETIVO
1. Obtención del espectro óptimo para identificar un compuesto
2. Uso del instrumento denominado Espectrofotómetro
3. Calidad de los resultados y su aplicación en el E.E.M

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MARCO TEÓRICO

La espectrofotometría UV-visble es una técnica analítica que permite determinar la

concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas que
absorben las radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz
absorbida dependen de forma lineal de la concentración .Además es usada para
identificar compuestos por su espectro de absorción y conocer la concentración de
un material o sustancia, esto último permite, seguir el curso de reacciones químicas
y enzimáticas así como determinar enzimas y proteínas incluso ácidos nucleicos.

Para hacer este tipo de medidas se emplea un espectrofotómetro, como ya sabemos

es un equipo que mide la cantidad de luz que pasa por medio de una longitud de
onda especifica. La cantidad de luz absorbida por un medio es proporcional a la
concentración de un soluto colorido en solución puede ser determinada en el
laboratorio mediante la medición de su absorción de luz a una longitud de onda
especifica.

Las muestras en estos equipos se utilizan en estado líquido y se colocan en el

compartimiento de las muestras de celdas transparentes de diferentes tamaños y
materiales.
En espectroscopia el termino luz no solo se aplica a la forma visible de radiación
electromagnética, sino también a las formas UV e IR, que son invisibles. En
espectrofotometría de absorbancia se utilizan las regiones del ultravioleta (UV
cercano, de 195- 400nm) y el visible (400- 780nm).
La región UV se define como el rango de longitudes de onda de 195 a 400nm.Es
una región de energía muy alta.

En la región visible apreciamos el color visible de una solución y que corresponde a

las longitudes de onda de luz que transmite, no se absorbe. El color que absorbe es
el complementario del color que transmite.

Por tanto, para realizar mediciones de absorción es necesario utilizar la longitud de

onda en la que absorbe luz la solución coloreada.

La fuente de radiación visible suele ser una lámpara de tungsteno y no proporciona

suficiente energía por debajo de 320nm.

La transmitancia (T)de una solución es la relación entra la cantidad de luz

transmitida que llega al detector una vez que ha atravesado la muestra y la
absorbancia (A) es un concepto más relacionado con la muestra puesto que nos
indica la cantidad de luz absorbida por la misma.
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1. Espectrofotometría
Es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones químicas y biológicas.
El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o
transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que
contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.

Todas las sustancias pueden absorber energía radiante, aun el vidrio que parece ser completamente
transparente absorbe longitud de ondas que pertenecen al espectro visible; el agua absorbe
fuertemente en la región del infrarrojo.

La absorción de las radiaciones ultravioleta, visibles e infrarrojas depende de la estructura

de las moléculas, y es característica para cada sustancia química.

Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energía es absorbida; la energía

radiante no puede producir ningún efecto sin ser absorbida.

El color de las sustancias se debe a que éstas absorben ciertas longitudes de onda de la luz
blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda
no absorbidas.

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2. ¿Por qué tenemos que cambiar el color de la luz al usar el fotómetro?

Debemos recordar algunos aspectos fundamentales de física de la luz y el color: La energía
del sol y la de una bombilla encendida incluye al total de la energía luminosa. Si un rayo de
esa luz pasa por un prisma, se descompone: es el origen del “arco iris”.

ESPECTROFOTÓMETRO DE HAZ SIMPLE: Es igual que la descripción dada para el

espectrofotómetro en general. Consta de los mismos elementos (Ej. Bilirrubinómetro: para
determinar bilirrubina directa en capilar).

ESPECTROFOTÓMETRO DE DOBLE HAZ EN EL ESPACIO: Todos los componentes están

duplicados, menos la lámpara y el medidor. Dos haces de luz pasan al mismo tiempo por los
distintos componentes separados en el espacio. Esto compensa las variaciones de intensidad de luz y
de absorbancia.

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II. DATOS EXPERIMENTALES

2.1 Calibración del equipo y toma de datos.

 El equipo debe ser programado en la opción de luz visible.

 Para la primera solución se calibra el equipo con el blanco que en este caso será
agua porque la solución de cobalto es acuosa, luego de esto empezamos a tomar las
mediciones de cada solución en intervalos desde (500-600) nm.
 De forma similar para la concentración de permanganato de potasio, pues también
es una solución acuosa y el blancos será agua, se prosigue a tomar los datos
correspondientes con cada una de las soluciones preparadas.
 Finalmente para el indicador ácido base, este actúa en un medio básico y por eso se
agregó en hidróxido de sodio y se utilizó esta base como blanco, luego se pasa a
tomar los datos correspondientes brindados por el equipo.

1. Solución de cobalto
Primera Toma Segunda Toma Tercera Toma
λ (nm) Abs %T Abs %T Abs %T Abs %T
Prom Prom
500 0.758 17,5 0.728 18,7 0.716 19.2 0.734 18,47
505 0.767 17,2 0.748 17,9 0.736 18.3 0.736 17,80
510 0.772 16,9 0.754 17,7 0.741 18.1 0.741 17,57
515 0.761 17,4 0.741 18,2 0.729 18,6 0.729 18,07
520 0.733 18,5 0.711 19,4 0.701 19,9 0.701 19,27
525 0.690 20,4 0.668 21,5 0.658 22,0 0.658 21,30
530 0.635 23,2 0.616 24,2 0.601 25.1 0.601 24,17
535 0.574 26,7 0.549 28,2 0.534 29.2 0.534 28,03
540 0.502 31,5 0.478 33,2 0.463 34.4 0.463 33,03
545 0.432 37,0 0.410 38,9 0.396 40.1 0.396 38,67
550 0.369 42,8 0.348 44,8 0.340 45.7 0.340 44,43

NOTA:

 Valor de longitud de onda teórico: 510 nm.

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Grafico comparativo de  vs Abs,%T-Cobalto

50 0.8

45
0.7

40
0.6
35

0.5
Absorbancia

30

%T
25 0.4
%T
20 A
0.3

15
0.2
10

0.1
5

0 0
500 505 510 515 520 525 530 535 540 545 550
Longitud de onda (ʎ)

RESULTADOS: El valor optimo según la gráfica es 511nm

Cuando fue comparado gráficamente y con ayuda de una calculadora programable
notamos que la longitud de onda es de aproximadamente 511 nm.

510 − 511
%Error = | | 𝑥100
511
%Error = 0.2504

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2. Soluciones de Níquel
 Calibramos el espectrofotometro con un blanco (agua destilada).
 Tomaremos los datos de absorbancia (A) y tramitancia (%T) en un rango de 550 a
750 nm.

Primera Toma Segunda Toma Tercera Toma

λ (nm) Abs %T Abs %T Abs %T Abs %T
Prom Prom
550 0.080 88,3 0,071 84,8 0.070 85,2 0.074 84,43
570 0.093 80,6 0.089 81,5 0.086 82,0 0.089 81,37
590 0.125 75,0 0.124 75,2 0.120 75,9 0.123 75,37
610 0.174 67,0 0.179 66,2 0.175 66,9 0.176 66,7
630 0.247 56,6 0.253 55,9 0.246 56,7 0.249 56,4
650 0.252 49,0 0.257 48,8 0.308 56,0 0.272 51,27
670 0.310 49,0 0.307 49,3 0.305 49,5 0.307 49,27
690 0.323 47,6 0.323 47,5 0.320 47,8 0.322 47,64
710 0.347 45,0 0.347 45,0 0.345 45,2 0.346 45,07
730 0.346 45,1 0.343 45,4 0.341 45,6 0.343 45,37
750 0.304 49,7 0.300 50,1 0.299 57.7 0.301 50,00

 Graficamos de acuerdo a los datos obtenidos

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Grafico comparativo de  vs Abs,%T-Niquel

90 0.4

80 0.35

70
0.3
60
Absorbancia

0.25
50

%T
0.2
40 %T
0.15 A
30
0.1
20

10 0.05

0 0
550 570 590 610 630 650 670 690 710 730 750
Longitud de onda (ʎ)

RESULTADOS:El valor óptimo estimado según las grafica es 720nm

3. Solución de hidróxido de sodio y fenolftaleína

 Sólo agregamos unas 3 gotas de indicador a la solución de hidróxido hasta que tome
una coloración grosella tenue.
 Calibramos el espectrofotometro con un blanco (NaOH).
 Retiramos la celda delantera y colocamos la fenolftaleina, tomaremos los datos de
absorbancia (A)y tramitancia (%T)en un rango de 500 a 600 nm.

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 Tabla de datos tomados del equipo

Primera Toma Segunda Toma Tercera Toma

λ (nm) Abs %T Abs %T Abs %T Abs %T
Prom Prom
500 0.047 89,8 0.050 89,2 0.057 87,6 0.051 88,9
510 0.064 86,2 0.068 85,6 0.077 83,7 0.069 85,2
520 0.034 82,4 0.088 81,6 0.100 79,4 0.091 81,1
530 0.110 77,6 0.116 76,5 0.133 73,6 0.120 75,9
540 0.144 71,8 0.153 70,4 0.168 67,9 0.155 70,0
550 0.163 68,8 0.169 67,7 0.170 67,6 0.167 68,0
560 0.128 74,4 0.129 74,3 0.115 76,8 0.124 75,2
570 0.069 85,4 0.066 85,8 0.054 88,3 0.063 86,5
580 0.027 94,0 0.026 94,2 0.019 95,7 0.024 94,6
590 0.007 98,4 0.007 98,4 0.004 99,1 0.006 98,6
600 0.000 99,9 0.00 100 000 100 0.000 100

NOTA:Valor de longitud de onda teórico: 540 nm

Pero cuando lo comparamos gráficamente y con ayuda de una calculadora

programable notamos que la longitud de onda es de aproximadamente 544.23 nm

Valor teórico − Valor real

%Error = | |𝑥100
𝑉𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑡𝑒ó𝑟𝑖𝑐𝑜
540 − 550
%Error = | | 𝑥100
540
%Error = 1.85

 Graficamos de acuerdo a los datos obtenidos

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Grafico comparativo de  vs Abs,%T-

Fenoftaleina
120 0.18

0.16
100
0.14

80 0.12

0.1
Abs

%T
60
0.08

40 0.06

0.04
20
0.02

0 0
500 510 520 530 540 55 560 570 580 590 600


RESULTADOS: El valor óptimo estimado según las grafica es 550nm

4. Soluciòn de Manganeso (500-600) nm

- Diluimos la solucion de KMnO4.
- Calibramos el espectrofotometro con un blanco (agua destilada).
- Retiramos la celda delantera y colocamos nuestra solucion de Manganeso,
tomaremos los datos de absorbancia (A) y tramitancia (%T) en un rango de 500
a 600 nm.

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 Tabla de datos tomados del equipo

Λ nm A(prom) %T(prom)
500 2,074 0,8
505 2,091 0,8
510 2,127 0,7
515 2,436 0,3
520 2,712 0,2
525 2,659 0,3
530 2,340 0,5
535 2,425 0,4
540 2,608 0,2
545 2,474 0,3
550 1,982 1,0
555 1,627 2.4
560 1,572 2,7
565 1,535 2,9
570 1,270 5,1
575 0,862 13,9
580 0,560 27,6
585 0,415 38,5
590 0,355 44,2
595 0,327 47,1
600 0,307 48,3

NOTA: Valor de longitud de onda teórico: 525 nm

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Grafico comparativo de  vs Abs,%T-

manganeso
1.2 3

1 2.5

0.8 2
Absorbancia

%T
0.6 1.5

0.4 1

0.2 0.5

0 0
500 505 510 515 520 525 530 535 540 550 555


RESULTADOS: El valor óptimo estimado según las grafica es 522nm

Valor teórico − Valor real

%Error = | |𝑥100
𝑉𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑡𝑒ó𝑟𝑖𝑐𝑜
525 − 522
%Error = | | 𝑥100
525
%Error = 0.5714

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CONCLUSIONES

1. Se pudo determinar de manera experimental que la longitud de onda de las

sustancias coloreadas son casi similares con un error casi insignificante al de
la bibliografía consultada.
2. La absorbancia es la capacidad que tienen algunos compuestos para absorber
la radiación electromagnética, pudimos observar como dependiendo de la
concentración y longitud a la cual se le aplique un rayo, puede alcanzar un
punto máximo de absorción Según esto la longitud y la absorción son
proporcionales hasta el alcanzar el punto máximo y de ahí empieza a
descender.

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RECOMENDACIONES:

1. Para tener una mejor lectura del espectrofotómetro se debe limpiar

correctamente la cuba.
2. Al momento de coger la cuba, cogerla por la parte pavoneada ya que si no se
afectará la lectura de la longitud.
3. Usar papel tisúes para secar la cuba.

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BIBLIOGRAFIA:

 http://www.google.com.pe/
 ANÁLISIS DE ELEMENTOS-TRAZA POR ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN
MOLECULAR. Francisco Pino Pérez. Editorial San Pablo.
 MÉTODOS ÓPTICOS DE ANÁLISIS. Eugene D. Olsen. Editorial Reverté

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