Biosíntesis de creatina

La síntesis de creatina ocurre predominantemente en los riñones y el

hígado. La síntesis de creatina comienza en los riñones usando los aminoácidos
arginina y glicina. La formación de guanidinoacetato (GAA) a partir de estos dos
aminoácidos es catalizada por la enzima glicina amidinotransferasa, también
llamada L-arginina: glicina amidinotransferasa (AGAT). La glicina
amidinotransferasa está codificada por el gen GATM ubicado en el cromosoma
15q21.1 y está compuesta por 12 exones que codifican una proteína de 423
aminoácidos que se localiza en las mitocondrias. El guanidinoacetato lo transporta
a la sangre y lo recogen los hepatocitos, donde se encuentra metilado formando
creatina. El donador de metilo para esta reacción es S-adenosilmetionina (SAM o
AdoMet) y la reacción es catalizada por la enzima guanidinoacetato N-
metiltransferasa. Esta última enzima está codificada por el gen GAMT ubicado en
el cromosoma 19p13.3 y está compuesta por 6 exones que generan dos ARNm
empalmados alternativamente que codifican la isoforma a (236 aminoácidos) y la
isoforma b (269 aminoácidos).
Después de la síntesis, la creatina se libera a la sangre, donde la recogen,
predominantemente, el cerebro y las células del músculo esquelético a través de
la acción del miembro de la familia SLC.transportador, SLC6A8. El gen SLC6A8
está ubicado en el cromosoma X (Xq28) y está compuesto por 14 exones que
generan tres ARNm empalmados alternativamente, cada uno de los cuales codifica
una isoforma de proteína distinta. Dentro de las células, la creatina es fosforilada
por la creatina quinasa (CK, también llamada creatina fosfocinasa, CPK) que
genera el compuesto de almacenamiento de alta energía, el fosfato de
creatina. Hay dos genes de creatina quinasa en humanos identificados como el
gen de la creatina quinasa muscular (símbolo: CKM) y el gen de la creatina quinasa
del cerebro (símbolo: CKB). El gen CKM se encuentra en el cromosoma 19q13.32
y está compuesto por 9 exones que codifican una proteína de 381 aminoácidos. El
gen CKB se encuentra en el cromosoma 14q32 y está compuesto por 8 exones
que codifican una proteína de 381 aminoácidos. Las diferentes combinaciones de
las proteínas codificadas por estos dos genes generan isoformas específicas de
tejido de las enzimas funcionales. Para detalles sobre las diferentes formas de CK,
vaya a Página Enzyme Kinetics .
 Síntesis de fosfato de creatina y creatina: la síntesis de creatina comienza
a partir de arginina y glicina a través de la enzima renal glicina amidinotransferasa
(GATM). El producto, guanidinoacetato, se transporta al hígado donde se metila a
través de la acción de guanidinoacetato N -metiltransferasa (GAMT) formando
creatina. El grupo metilo se dona de S-adenosilmetionina (SAM). La creatina se
libera a la sangre y es captada por el cerebro y las células del músculo esquelético
a través de la acción del transportador SLC6A8. La creatina quinasa (creatina
fosfoquinasa) transfiere un fosfato del ATP que genera el intermediario de alta
energía, el fosfato de creatina.

Aunque la creatina sintetizada por los riñones y el hígado puede ser

transportada desde la sangre al cerebro, durante el desarrollo embrionario y
durante la vida postnatal, el cerebro puede sintetizar directamente su propia
 creatina. Los genes GATM y GAMT se expresan en tejidos neurales. Sin embargo,
el nivel de síntesis de creatina en el sistema nervioso embrionario no es suficiente
para las necesidades, por lo que el cerebro en desarrollo requiere creatina
sintetizada materna y periféricamente. En el cerebro adulto, las células gliales y las
neuronas continúan expresando los genes GATM y GAMT, sin embargo, las
células expresan solo el gen GATM mientras que otras expresan solo el gen
GAMT. Por lo tanto, similar al transporte de GAA de los riñones al hígado para la
síntesis de creatina, la GAA producida en ciertas células neuronales debe ser
transportada a células que expresan GAMT para la síntesis de creatina
cerebral. Este último transporte probablemente sea catalizado por SLC6A8. Esto
explica por qué, en pacientes con mutación SLC6A8, hay una falta de suficiente
creatina cerebral. Al igual que en el músculo esquelético, el fosfato de creatina
cerebral desempeña un papel importante en la regulación de un alto equilibrio
energético en el cerebro. La creatina también funciona como un neurotransmisor
en el cerebro al actuar como un agonista parcial en
postsinápticaGABA A receptores .
La creatina se usa como una forma de almacenamiento de fosfato de alta
energía. El fosfato de ATP se transfiere a la creatina, generando fosfato de
creatina, a través de la acción de la creatina fosfoquinasa. La reacción es reversible
de modo que cuando la demanda de energía es alta (por ejemplo, durante el
esfuerzo muscular) el fosfato de creatina dona su fosfato a ADP para producir ATP.
Tanto la creatina como el fosfato de creatina se encuentran en los músculos,
el cerebro y la sangre. La creatinina se forma en el músculo a partir del fosfato de
creatina mediante una deshidratación no enzimática y la pérdida de fosfato. La
cantidad de creatinina producida está relacionada con la masa muscular y
permanece notablemente constante día a día. La creatinina se excreta por los
riñones y el nivel de excreción (tasa de aclaramiento de creatinina) es una medida
de la función renal.
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Síndromes de deficiencia de creatina

Los síndromes de deficiencia de creatina (CDS) representan un grupo de
trastornos que resultan de defectos en la síntesis y el transporte de creatina. Estos
trastornos también se conocen como trastornos metabólicos primarios de la
creatina. Como se discutió en la sección anterior, hay dos enzimas de síntesis de
creatina, glicina amidinotransferasa (codificada por el gen GATM) y
guanidinoacetato N-metiltransferasa (codificada por el gen GAMT), y un
transportador de creatina principal codificado por el gen SLC6A8. El primer
trastorno en el metabolismo de la creatina se caracterizó por mutaciones
involucradas en el gen GAMT. El paciente con deficiencia inicial de GAMT
experimentó un retraso psicomotor severo, epilepsia refractaria y trastorno del
movimiento. El paciente no mostró creatina cerebral junto con altas
concentraciones de GAA en el cerebro y fluidos corporales. El tratamiento de este
paciente se realizó por administración oral de monohidrato de creatina. Después
de esta caracterización inicial del paciente, se encontraron mutaciones en el gen
GATM y el gen SLC6A8 en pacientes que presentaban una patología similar. Los
trastornos asociados con la mutación GATM y GAMT se heredan como
enfermedades autosómicas recesivas. El gen SLC6A8 se encuentra en el
cromosoma X y, por lo tanto, Las deficiencias del transportador de creatina se
heredan de manera recesiva ligada a X. Se han identificado pocos pacientes con
deficiencia de GATM, se han identificado 40 pacientes con deficiencia de GAMT y
hasta la fecha se han identificado alrededor de 150 pacientes con deficiencia de
SLC6A8.
Aunque la síntesis de creatina del músculo esquelético se verá afectada en
individuos con mutaciones GATM y GAMT, la función muscular alterada no es el
síntoma principal en los pacientes con síndrome de deficiencia de creatina. Todos
estos trastornos ejercen efectos dramáticos sobre la función del sistema nervioso
central y, por lo tanto, los síntomas neurológicos son las principales complicaciones
clínicas en estos pacientes. Las características clínicas en los síndromes de
deficiencia de creatina incluyen discapacidad intelectual, retraso del habla y
lenguaje, epilepsia y trastorno del espectro autista. Debido a los diferentes niveles
de defectos enzimáticos con diversas mutaciones y los diferentes genes, existe
una gran variabilidad en la gravedad de los síntomas clínicos. Los pacientes con
deficiencias de GATM tienen manifestaciones clínicas más leves que
generalmente se limitan a una discapacidad intelectual moderada y trastorno del
lenguaje. Los pacientes con deficiencias de GAMT tienen altas concentraciones de
GAA en fluidos corporales y se manifiestan con epilepsia refractaria y trastornos
graves del movimiento. Los pacientes con deficiencias de SLC6A8 presentan
retraso mental, epilepsia, trastorno del espectro autista y retraso grave del
lenguaje.
El tratamiento de pacientes con deficiencia de GATM y GAMT puede llevarse
a cabo con monohidrato de creatina oral. Sin embargo, esta terapia no reduce los
niveles del metabolito intermedio, GAA, que se observa con la deficiencia de
GAMT. En estos últimos pacientes, la adición de suplementos de ornitina y la
restricción dietética en arginina ayudan a reducir la producción de GAA. Las
reducciones en GAA proporcionan un mejor control de la epilepsia refractaria que
es común en la deficiencia de GAMT. Actualmente no existe un tratamiento efectivo
para pacientes con deficiencia de SLC6A8
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Funciones de glutatión
El glutatión (abreviado GSH) es un tripéptido compuesto por glutamato, cisteína
y glicina que tiene numerosas funciones importantes dentro de las células. El
glutatión sirve como un potente reductor eliminando los radicales hidroxi,
peroxinitritos e hidroperóxidos; está conjugado con medicamentos para hacerlos
más solubles en agua; está involucrado en el transporte de aminoácidos a través
de las membranas celulares (el ciclo γ-glutamil); es un sustrato para los
peptidoleucotrienos; sirve como un cofactor para algunas reacciones
enzimáticas; y sirve como una ayuda en la reorganización de enlaces disulfuro de
proteína.
El GSH se sintetiza en el citosol de todas las células de mamífero a través de
la reacción en dos etapas que se muestra en la Figura. La tasa de síntesis de GSH
depende de la disponibilidad de cisteína y la actividad de la enzima limitante de la
velocidad, la γ-glutamilcisteína sintetasa (también llamada glutamato-cisteína
ligasa, GCL). La segunda reacción de la síntesis de GSH implica la enzima
glutatión sintetasa, que condensa γ-glutamilcisteína con glicina. Ambas reacciones
de síntesis de GSH requieren ATP. El GCL funcional es un heterodímero
compuesto por la subunidad catalítica y una subunidad reguladora llamada
subunidad modificadora. La subunidad catalítica de GCL está codificada por el gen
GCLC y la subunidad modificadora está codificada por el gen GCLM. El gen GCLC
se encuentra en el cromosoma 6p12 y está compuesto por 16 exones que generan
dos ARNm empalmados alternativamente que codifican la isoforma GCL a (637
aminoácidos) y la isoforma B de GCL (599 aminoácidos). El gen GCLM se
encuentra en el cromosoma 1p22.1 y está compuesto por 8 exones que codifican
una proteína de 274 aminoácidos. El gen de la glutatión sintetasa (símbolo: GSS)
se encuentra en el cromosoma 20q11.2 y está compuesto por 15 exones que
codifican una proteína de 474 aminoácidos.
En el hígado, los principales factores que determinan la disponibilidad de
cisteína son la dieta, las actividades de transporte de membrana de los tres
aminoácidos de azufre cisteína, cistina y metionina, y la conversión de metionina
en cisteína (consulte la página Metabolismo de aminoácidos ). Numerosas
condiciones pueden alterar el nivel de síntesis de GSH a través de cambios en la
actividad glutamato-cisteína ligasa y la expresión del gen GCLC como el estrés
oxidativo, los niveles de antioxidantes, las hormonas, la proliferación celular y
la diabetes mellitus .
 Síntesis de Glutathione. La síntesis de glutatión, que se produce en el citosol
de todas las células, se produce mediante una reacción en dos etapas que implica
las enzimas glutamato-cisteína ligasa (GCL) y la glutatión sintetasa (GSS) que
requieren ATP. La designación común para glutatión reducido (monomérico) es
GSH. Cuando el glutatión reduce las especies reactivas de oxígeno o nitrógeno, o
tras su participación en muchas otras reacciones de reducción, se oxida a la forma
dimérica que se abrevia GSSG.
 El papel del GSH como reductor es extremadamente importante,
particularmente en el entorno altamente oxidante del eritrocito. El sulfhidrilo de
GSH puede usarse para reducir los peróxidos formados durante el transporte de
oxígeno. El peróxido de hidrógeno producido endógenamente (H 2 O 2 ) se reduce
por GSH en presencia de peroxidasa GSH selenio-dependiente . El peróxido de
hidrógeno también se puede reducir con la catalasa, que está presente solo en los
peroxisomas. En las mitocondrias, GSH es particularmente importante porque las
mitocondrias carecen de catalasa. La forma oxidada resultante de GSH consiste
en dos moléculas disulfuro unidas (abreviado GSSG). La enzima glutatión
reductasa utiliza NADPH como un cofactor para reducir GSSG a dos moles de
GSH. Por lo tanto, laLa vía de la pentosa fosfato es una vía extremadamente
importante de los eritrocitos para la producción continuada del NADPH que
necesita la glutatión reductasa. De hecho, hasta un 10% del consumo de glucosa,
por eritrocitos, puede estar mediado por la vía de la pentosa fosfato.
La desintoxicación de xenobióticos o sus metabolitos es otra función principal
del GSH. Estos compuestos forman conjugados con GSH ya sea de forma
espontánea o enzimática en reacciones catalizadas por miembros de la familia
glutatión S-transferasa (GST). Los conjugados formados generalmente se excretan
de la célula y, en el caso del hígado, se excretan en la bilis. Existen varias enzimas
GST que se dividen en tres familias principales que comprenden miembros de la
familia citosólica, mitocondrial y microsómica. Las enzimas GST citosólicas
comprenden la familia más grande y, basándose en las secuencias de aminoácidos
y especificidades de sustrato, esta familia se ha dividido en siete subclases
identificadas como alfa (α, A), mu (μ, M), omega (ω, O), pi ( π, P), sigma (σ, S),
theta (θ, T) y zeta (ζ, Z). El genoma humano contiene cinco genes GST alfa, cinco
genes mu, dos genes omega, un gen pi, un gen sigma, dos genes theta y un gen
zeta. Las enzimas citosólicas son funcionales como dímeros y dado que las
proteínas alfa y mu pueden formar heterodímeros funcionales, la complejidad de
las enzimas funcionales es mayor que la cantidad de genes de subunidades
individuales. Otra enzima GST soluble que no se encuentra en el citosol es la
enzima GK kappa (κ, K) humana (codificada por el gen GSTK1) que está localizada
en los peroxisomas. Las enzimas GST no solo funcionan en la desintoxicación y
las reacciones antioxidantes, sino también en la biosíntesis y el metabolismo de la
complejidad de las enzimas funcionales es mayor que la cantidad de genes de
subunidades individuales. Otra enzima GST soluble que no se encuentra en el
citosol es la enzima GK kappa (κ, K) humana (codificada por el gen GSTK1) que
está localizada en los peroxisomas. Las enzimas GST no solo funcionan en la
desintoxicación y las reacciones antioxidantes, sino también en la biosíntesis y el
metabolismo de la complejidad de las enzimas funcionales es mayor que la
cantidad de genes de subunidades individuales. Otra enzima GST soluble que no
se encuentra en el citosol es la enzima GK kappa (κ, K) humana (codificada por el
gen GSTK1) que está localizada en los peroxisomas. Las enzimas GST no solo
funcionan en la desintoxicación y las reacciones antioxidantes, sino también en la
biosíntesis y el metabolismo deeicosanoides y esteroides , así como en la
modulación de los procesos de transducción de señales .

Glutatión S-Transferasas Citosólicas Humanas

Subunidades Codificación
Clase Comentarios
de enzimas de genes
los genes GSTA están agrupados en el
GSTA1, GSTA2,
cromosoma 6; la clase de GST expresada más
Alfa 1, 2, 3, 4, 5 GSTA3, GSTA4,
abundantemente en el hígado;también se
GSTA5
expresa en riñón y testículo
los genes GSTM están agrupados en el
cromosoma 1; los genes mu son altamente
polimórficos y representan un alto grado de
variabilidad en la capacidad de un individuo dado
GSTM1, GSTM2,
de desintoxicar ciertas toxinas y
Mu 1, 2, 3, 4, 5 GSTM3, GSTM4,
carcinógenos; Expresión GSTM2 más alta en el
GSTM5
músculo; La expresión de GSTM3 más alta en el
cerebro; polimorfismos en el gen GSTM1
asociados con hipertensión y mayor riesgo de
esquizofrenia
Omega 1, 2 GSTO1, GSTO2 ambos genes se encuentran en el cromosoma 10
la expresión es más alta en el cerebro, pulmón y
Pi 1 GSTP1 corazón;polimorfismos en el gen GSTP1
asociados con un mayor riesgo de esquizofrenia
la enzima sigma GST es una prostaglandina-D
sintasa codificada por el gen de la prostaglandina
Sigma 1 HPGDS
D sintasa hematopoyética; cataliza la conversión
de PGH 2 a PGD 2
los genes GSTT están agrupados en el
cromosoma 22; el gen GSTT1 está ausente en el
GSTT1, GSTT2, 38% de la población; en algunas poblaciones, el
Theta 1, 2
GSTT2B gen GSTT2B es un pseudogen; polimorfismos en
GSTT1 asociados con hipertensión y mayor
riesgo de esquizofrenia
este GST cataliza la conversión de
maleylacetoacetato en acetato de fumarilato en el
catabolismo de fenilalanina y
Zeta 1 GSTZ1
tirosina ; originalmente identificado como 4-
maleylacetoacetate isomerase o
maleylacetoacetate cis -trans -isomerase
 Existen varios mecanismos para el transporte de aminoácidos a través de las
membranas celulares. Muchos son mecanismos de simportamiento o antiportuario
que acoplan el transporte de aminoácidos al transporte de sodio. El ciclo de γ-
glutamil es un ejemplo de un mecanismo de transferencia de grupo de transporte
de aminoácidos. Aunque este mecanismo requiere más energía, es rápido y tiene
una gran capacidad. El ciclo funciona principalmente en el riñón, particularmente
las células epiteliales renales. La enzima γ-glutamil transpeptidasa se encuentra
en la membrana celular y lanza GSH a la superficie de la célula para interactuar
con un aminoácido. La reacción con un aminoácido libera cisteinilglicina y genera
un aminoácido γ-glutamil que se transporta a la célula y se hidroliza para liberar el
aminoácido. El glutamato se libera como 5-oxoprolina y la cisteinilglicina se divide
en sus aminoácidos componentes. La regeneración de GSH requiere una
conversión dependiente de ATP de 5-oxoprolina a glutamato y luego los dos moles
adicionales de ATP que se requieren durante la generación normal de GSH.
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Biosíntesis de poliaminas
Las poliaminas son moléculas altamente catiónicas que tienden a unir ácidos
nucleicos con alta afinidad. Debido a esta actividad de interacción, se cree que las
poliaminas son participantes importantes en la síntesis de ADN o en la regulación
de ese proceso. Además de su función en la replicación del ADN, las poliaminas y
los derivados de poliamina están implicados en los procesos de síntesis
proteica , función del canal iónico , regulación de la expresión génica , proliferación
celular y apoptosis (muerte celular programada).
Una de las primeras señales de que las células han ingresado en su ciclo de
replicación es la aparición de niveles elevados de ARNm para la ornitina
descarboxilasa 1 (ODC1), y luego mayores niveles de la enzima. La ornitina
descarboxilasa es la primera enzima en el camino hacia la síntesis de las
poliaminas. El genoma humano contiene dos secuencias ODC con solo el gen
ODC1 funcional. El otro locus, identificado como ODCP, es un pseudogen. El gen
ODC1 se encuentra en el cromosoma 2p25 y está compuesto por 13 exones que
generan cuatro ARNm empalmados alternativamente. Tres de las variantes de
empalme ODC1 codifican la misma enzima identificada como isoforma 1 (461
aminoácidos). La isoforma ODC 2 está compuesta por 332 aminoácidos. La ODC
funcional es un homodímero y requiere fosfato de piridoxal (PLP), derivado de
la vitamina B 6, como un cofactor. La actividad catalítica de ODC produce la diamina
saturada de 4 carbonos, putrescina.

Vía principal de la síntesis de poliaminas en humanos. Las características

clave de la vía son que implica putrescina , un catabolito de ornitina y S-
adenosilmetionina (SAM; AdoMet) como donante de dos residuos de
propilamina. La primera conjugación de propilamina produce espermidina y la
adición de otra a la espermidina produce espermina . La forma de SAM utilizada
en la ruta de biosíntesis de poliaminas es SAM descarboxilada (abreviado dcSAM
o dcAdoMet).

Un intermedio importante requerido para la síntesis de espermidina y

espermina de putrescina se deriva de S- adenosilmetionina (SAM). La enzima
adenosilmetionina descarboxilasa 1 (AMD1, también conocida como S-
denosilmetionina decarboxilasa o SAM-descarboxilasa) escinde el residuo
carboxilo SAM, produciendo SAM descarboxilada ( S- adenosilmetiltiopropilamina,
también conocida como S descarboxilada-adenosilmetionina, dcAdoMet o dcSAM),
que retiene el grupo metilo usualmente involucrado en la actividad de
metiltransferasa de SAM. La actividad de la adenosilmetionina descarboxilasa 1
está regulada por la inhibición del producto y estimulada alostéricamente por la
putrescina. El gen AMD1 se encuentra en el cromosoma 6p21 y está compuesto
por 10 exones que generan cuatro ARNm empalmados alternativamente que
codifican cuatro isoformas distintas de la enzima. La espermidina sintasa cataliza
una reacción de condensación entre dcAdoMet y putrescina, produciendo
espermidina y 5'-metiltioadenosina. La espermidina sintasa está codificada por el
gen SRM (también conocido como SPDSY) ubicado en el cromosoma 1p36-p22. El
gen SRM está compuesto por 8 exones que codifican una proteína de 302
aminoácidos. Se agrega un segundo residuo de propilamina de dcAdoMet a la
espermina produciendo espermina mediante la enzima espermina sintasa
codificada por el gen SMS (también conocido como SPMSY). El gen SMS está
ubicado en el cromosoma X (Xp22.1) y está compuesto por 13 exones que generan
dos ARNm empalmados alternativamente que codifican la isoforma 1 de SMS (366
aminoácidos) y la isoforma 2 de SMS (313 aminoácidos).
Las señales para regular la producción de ODC son complejas. El promotor del
gen ODC1 contiene elementos que están regulados por factores de crecimiento,
hormonas y promotores tumorales. La producción de proteína ODC también está
regulada a nivel de traducción por el producto de la reacción, putrescina. El ARNm
de ODC1 contiene una región larga 5 'no traducida (5'-UTR) que se pliega en una
estructura secundaria compleja. Dentro del 5'-UTR hay dos dominios que reducen
la eficiencia de traducción. Un dominio es una secuencia rica en GC, el otro es un
pequeño marco de lectura abierto upstream funcional (uORF). Otro mecanismo
significativo para regular la traducción de ARNm de ODC1 es particularmente
importante durante la mitosis. La traducción dependiente de casquillo se reprime
frecuentemente durante la mitosis y el ARNm de ODC1 contiene un sitio interno de
entrada al ribosoma (IRES) que permite que el ARNm se traduzca bajo estas
condiciones.
La estabilidad de la proteína ODC1 también contribuye al nivel de actividad de
la enzima en las células. La vida media de la proteína ODC es corta (<1hr) y esta
vida media está controlada por la degradación proteosómica. Sin embargo, la
entrada en el proteosoma, en el caso de ODC, no requiere ubiquitilación previa. La
capacidad del proteosoma para reconocer y degradar ODC no ubiquitiladas implica
una familia de proteínas llamadas antizymes. Las proteínas antizyme interactúan
con los monómeros ODC previniendo la formación de homodímeros funcionales
mientras que simultáneamente alteran la conformación de los monómeros para que
sean reconocidos por el proteosoma. Los seres humanos expresan tres antizimos
diferentes de ODC identificados como antizyme 1, 2 y 3. Antizyme 1 está codificado
por el gen OAZ1 (ornitina decarboxilasa antizimétrica 1) que se encuentra en el
cromosoma 19p13.3 y está compuesto por 5 exones que generan dos ARNm
empalmados alternativamente . Estos dos ARNm codifican la isoforma 1 de
antizyme 1 (228 aminoácidos) y la isoforma 2 de antizyme 1 (226 aminoácidos). La
traducción de las proteínas funcionales antizyme 1 está regulada por un
mecanismo de cambio de marco de ribosoma regulado por poliamina. Los ARNm
de antizyme 1 contienen dos marcos de lectura abiertos superpuestos
(ORF). Estos ORF se identifican como ORF1, que es el más corto de los dos, y
ORF2. El marco de lectura de ORF2 está en el marco +1 relativo al marco de
lectura de ORF1. El marco de lectura de ORF2 no contiene un codón de iniciación
de traducción AUG y, como tal, la traducción a través de ORF2 requiere que el
ribosoma no termine al final de ORF1 y cambie al marco de lectura +1. Este evento
ribosomal frameshifting es estimulado por poliaminas. En presencia de altas
concentraciones de poliaminas, se produce el desplazamiento del ribosoma que
produce la síntesis del antizima funcional 1 que comprende aminoácidos tanto de
ORF1 como de ORF2.
Antizyme 2 está codificado por el gen OAZ2 que se encuentra en el cromosoma
15q22.31 y está compuesto por 5 exones que generan dos ARNm empalmados
alternativamente que codifican dos isoformas proteicas distintas. Aunque se
expresa ampliamente como el gen OAZ1, el nivel de expresión de OAZ2 es mucho
menor. Antizyme 3 está codificado por el gen OAZ3 que se encuentra en el
cromosoma 1q21.3 y está compuesto por 7 exones que generan tres ARNm
empalmados alternativamente que codifican tres isoformas proteicas distintas. La
isoforma 1 de Antizyme 3 es la proteína más larga codificada por el gen OAZ3 y la
traducción de esta forma de la enzima comienza a partir de un codón CUG y no de
un codón AUG. La expresión del gen OAZ3 está restringida a células germinales
haploides en el testículo.
Como se discutió, la síntesis de las poliaminas está regulada por varios
mecanismos independientes. Además de estos mecanismos de control, los niveles
de poliaminas intracelulares también se regulan a través de su catabolismo. La
putrescina es catabolizada por la amina oxidasa, el cobre contiene 1 codificado por
el gen AOC1, mientras que la espermidina y la espermina son catabolizadas por la
espermidina / espermina N 1-acetiltransferasa 1 (también conocida como diamina
acetiltransferasa 1) codificada por el gen SAT1 (también conocido como SSAT). El
gen SAT1 está ubicado en el cromosoma X (Xp22.1) y está compuesto por 7
exones que generan dos ARNm empalmados alternativamente. Solo uno de los
ARNm codifica una enzima SAT1 funcional ya que el otro ARNm se somete a una
desintegración de ARNm mediada por un sin sentido. La enzima funcional SAT1
es una proteína de 171 aminoácidos. Además de la putrescina, la enzima
codificada AOC1 es responsable del catabolismo de la histamina y otras aminas
biogénicas relacionadas.
El grupo butilamino de la espermidina se usa en una reacción de modificación
postraduccional importante para el proceso de traducción . Se modifica un residuo
de lisina específico en el factor de iniciación de la traducción eIF-5A . Después de
la modificación, el residuo se hidroxila y produce un residuo en la proteína
denominada hipusina . El término hipusina se deriva de hy droxy pu trescine y
ly sine. La hipotinación de eIF-5A es necesaria para la promoción del alargamiento
traslacional. La hipotinación de eIF-5A implica un proceso de reacción en dos
pasos. La primera reacción implica la enzima desoxihipusina sintasa que transfiere
el resto de butilamina de la espermidina al residuo específico de lisina eIF-5A. La
segunda reacción implica la enzima desoxihipusina hidroxilasa que hidroxila la
desoxihiprina a hipusina. La desoxihipusina sintasa está codificada por el gen
DHPS ubicado en el cromosoma 19p13.2 que está compuesto por 13 exones que
generan tres ARNm empalmados alternativamente, cada uno de los cuales codifica
una isoforma distinta de la enzima. La desoxihipusina hidroxilasa está codificada
por el gen DOHH (desoxihipusina hidroxilasa / monooxigenasa) ubicado en el
cromosoma 19p13.

Endotelial NOS, eNOS

El NOS endotelial (eNOS) se expresa más en las células endoteliales. Sin

embargo, la expresión de eNOS también se detecta en plaquetas, miocitos
cardíacos, células epiteliales tubulares renales específicas, ciertas neuronas
dentro del cerebro y en células sincitiotrofoblasto placentarias. Como se indicó, el
principal regulador de la actividad de eNOS (y nNOS) es el ion Ca 2+ . Sin embargo,
otros factores regulan la actividad de eNOS que no están relacionados con los
cambios en las concentraciones de calcio. Varias proteínas, como caveolin-1
y hsp90, interactuar con y afectar la actividad general de eNOS. Además, la
actividad de eNOS puede ser modulada por fosforilación. El desencadenante
predominante para la fosforilación de eNOS es el estrés de cizallamiento fluido en
la vasculatura. Los factores desencadenantes adicionales para la fosforilación de
eNOS incluyen la transducción de señal inducida por el factor de crecimiento
endotelial vascular (VEGF), la activación de PKB / AKT mediada por insulina y la
activación inducida por bradiquinina de Ca 2+ / proteína cinasa II dependiente de
calmodulina (CaMKII). La fosforilación de eNOS mejora el flujo de electrones a
través del dominio reductasa de la enzima. Los efectos predominantes del NO
producido en respuesta a la activación de eNOS son la vasodilatación y la
inhibición de la adhesión y agregación plaquetarias.
El NO endotelial derivado de NOS induce la dilatación de todos los tipos de
vasos sanguíneos tanto por la S-nitrosilación de las proteínas como a través de la
estimulación de la guanilatociclasa soluble (sGC) y el aumento de la producción de
GMPc en las células del músculo liso . S- nitrosylation de proteínas altera su
actividad directamente. Los aumentos en cGMP dan como resultado la inhibición
de los canales de Ca2 + de tipo Llocalizados en la membrana plasmática , lo
que resulta en la disminución global del Ca2 + intracelular que normalmente sirve
para activar la cinasa de la cadena ligera de la miosina que conduce a la
vasoconstricción. Los mismos canales de Ca 2+ de tipo L pueden inhibirse
directamente por NO a través de S-nitrosilación. El cGMP también activa las
isoformas de PKGI dando como resultado la fosforilación y activación de la
fosfatasa de la cadena ligera de la miosina que da como resultado la eliminación
de fosfato de las cadenas ligeras de miosina que contribuyen a la vasodilatación. El
cGMP también activa los canales de K + induciendo la hiperpolarización del
músculo liso dando como resultado la relajación.
La capacidad de eNOS de producir NO para evitar la adhesión y agregación de
plaquetas reduce la propensión al desarrollo de coágulos de fibrina anormales
(trombos) y, por lo tanto, contribuirá a un potencial reducido para el desarrollo de
la aterosclerosis. El NO producido por las células endoteliales también puede
interferir con la adhesión de los leucocitos al endotelio, contribuyendo así a una
reducción en el potencial de aterosclerosis.

Neuronal NOS, nNOS

Neuronal NOS (nNOS) se expresa constitutivamente en neuronas específicas
dentro del cerebro y la médula espinal. Las neuronas que expresan nNOS y, por lo
tanto, producen NO, se llaman nervios nitrérgicos. Neuronal NOS también se
expresa constitutivamente dentro de las glándulas suprarrenales, las células de los
islotes pancreáticos, las células epiteliales de numerosos tejidos, el músculo liso
vascular, el músculo esquelético y las células de la mácula densa renal. Dentro del
cerebro, las funciones principales de nNOS producido NO se encuentran en la
mediación de la transmisión sináptica a largo plazo. La producción de NO en el
cerebro, a través de nNOS, también es importante para la regulación central de la
presión arterial.
La expresión de nNOS en el sistema nervioso autónomo que inerva el corazón,
así como el propio tejido cardíaco, desempeña un papel central en la fisiología
cardíaca. Además de los nervios, nNOS se expresa en las arterias aórtica y
pulmonar, las arterias coronarias y el miocardio auricular y ventricular. La expresión
de nNOS en el tejido cardíaco le permite, a través de la producción de NO,
desempeñar papeles esenciales en la modificación del tono simpático y
parasimpático dentro del corazón mismo, en la regulación de la frecuencia cardíaca
y en la administración de nutrientes esenciales a través de la coronaria. arterias,
así como a través de la regulación de la contractilidad miocárdica. El nNOS
cardíaco se localiza en el retículo sarcoplásmico (SR) donde participa en
los procesos de manejo de Ca 2+ del acoplamiento de excitación-contracción
cardiaca.
Neuronal NOS también se expresa dentro de las células del músculo liso del
cuerpo cavernoso del pene y, por lo tanto, el NO producido por esta enzima está
involucrado en la erección del pene. La relajación del músculo liso inducida por NO
en el cuerpo cavernoso está mediada por GMP cíclico (cGMP). El cGMP que se
produce mediante la activación del NO de la guanilatociclasa soluble (sGC) en este
tejido se degrada por una fosfodiesterasa de nucleótido cíclico específica (PDE)
identificada como PDE5A. La actividad residual de nNOS del cuerpo cavernoso es
esencial para las acciones de promoción eréctil de los inhibidores selectivos de
PDE5, como sildenafil (Viagra), vardenafil (Levitra) y tadalafil (Cialis).

Inducible NOS, iNOS

Las principales funciones de la producción de NO a través de la activación de
iNOS están asociadas con las acciones bactericidas y tumoricidas de los
macrófagos. La sobreproducción de NO a través de iNOS está asociada con el
choque séptico inducido por citoquina, tal como ocurre postoperatoriamente en
pacientes con infecciones bacterianas. Las bacterias producen endotoxinas tales
como lipopolisacáridos (LPS) que activan iNOS en macrófagos. Aunque
predominantemente se induce en macrófagos, en condiciones de estimulación
apropiadas, muchos otros tipos de células expresarán el gen iNOS. Una vez
expresada, la enzima iNOS es catalíticamente activa y no responde con cambios
en la actividad de la enzima a cambios en los niveles de calcio intracelular como
es el caso de nNOS y eNOS. La producción de grandes cantidades de NO por
activación de la expresión de iNOS en macrófagos representa la principal actividad
citotóxica de estas células. El NO producido se une al hierro en numerosas
enzimas que contienen el metal en sus sitios activos. Los ejemplos de enzimas
inhibidas NO incluyen las actividades dependientes de clones Fe-S de
mitocondrialfosforilación oxidativa y ribonucleótido reductasa . El NO generado por
los macrófagos también puede causar roturas y fragmentación de la cadena de
ADN. Estos efectos de los macrófagos NO explicaron, en gran medida, los efectos
citotóxicos y citostáticos del NO sobre los parásitos invasores así como sobre
ciertas células tumorales.
Inhibidores químicos de NOS están disponibles y pueden disminuir
marcadamente la producción de NO. El efecto es un aumento dramático en la
presión sanguínea debido a la vasoconstricción. Otro efecto cardiovascular
importante del NO se ejerce a través de la producción de cGMP, que actúa para
inhibir la agregación plaquetaria.