MANUAL PROCEDIMIENTOS UROANÁLISIS

Gerente ESE Metrosalud

Martha Cecilia Castrillón Suárez

Subgerente Red de Servicios

Dirección Gestión Clínica y Promoción y Prevención

Fecha aprobación: 16 de Marzo de 2015

Versión 05
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS
SECCION UROANALISIS

PREPARADO
GLORIA INES MORALES SERNA
JAIME ARTURO GUTIERREZ MORA
BACTERIOLOGOS

REVISADO
CONSUELO GIRALDO JIMENEZ
LIDER PROGRAMA

RED DE LABORATORIOS

ACTUALIZADO 2015
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PROCEDIMIENTOS
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1. UROANALISIS

El análisis de orina es una de las pruebas de Laboratorio más antiguas, sencillas y útiles en la práctica
clínica. Los términos “uroanálisis”, “urianálisis”, “análisis de la orina” “citoquímico de orina”, “parcial de
orina”; describen un perfil o grupo de pruebas tamiz con capacidad para detectar enfermedad renal, del
tracto urinario o sistémica.

Desde el punto de vista de los procedimientos médicos, la orina se ha descrito como una biopsia líquida,
obtenida de forma indolora, y para muchos, la mejor herramienta de diagnóstico no invasiva de las que
dispone el médico.

1.1. METODO
Análisis físico, químico y microscópico del sedimento

1.2. RESPONSABLE
Bacteriólogo (a)

1.3. FUNDAMENTO O PRINCIPIO

1.3.1. Análisis Físico: Comprende los análisis macroscópicos de color y aspecto.

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1.3.2. Análisis Químico:

La hemoglobina y la mioglobina actúan de forma similar a

la peroxidasa catalizando específicamente la oxidación del
SANGRE
indicador por el hidroperóxido orgánico contenido en la tira
de papel que proporciona una coloración azul-verdosa
El ensayo se basa en la unión de la bilirrubina a una sal
BILIRRUBINA diazoica. La más leve coloración rosada indica un resultado
positivo, es decir patológico. Otros elementos de la orina
producen una coloración amarilla de diversa intensidad.
Una sal de diazonio estable reacciona casi inmediatamente
con el urobilinógeno dando lugar a la formación de un
UROBILINÓGENO colorante azoico rojo. La presente prueba es específica
para el urobilinógeno y no se ve afectada por los factores
interferentes que se sabe afectan el ensayo de Ehrlich.
El ensayo se basa en el principio del test de Legal y presenta
CUERPOS CETÓNICOS una mayor sensibilidad frente al ácido acetoacético que
frente a la acetona.
El test se basa en el principio de error proteico de un
indicador del pH. De particular sensibilidad frente a la
PROTEÍNAS
albumina. La quinina, quindina, cloroquina, tolbutamida y
un pH elevado (hasta 9) no afectan el test.
El test se basa en el pricipio del ensayo de Griess y es
específico para el nitrito. La reacción revela la presencia
de nitrito y por lo tanto indirectamente la existencia en orina
NITRITOS
de bacterias formadoras de nitrito tiñendo la zona reactiva
de color rosa rojizo. La más leve coloración rosada indica
una bacteriuria significativa.
La determinación de gluosa se basa en la reacción
específica de la glucosa-oxidasa/peroxidasa (método
GLUCOSA GOD/POD). El ensayo no depende del pH ni de la densidad
específica de la orina ni se ve afectado por la presencia de
cuerpos cetónicos.
El papel de ensayo contiene los indicadores de rojo de
metilo, fenolftaleína y azul de bromotimol y reacciona
PH
específicamente con los iones H+. El pH de la orina fresca
de personas sanas se sitúa normalmente entre 5 y 6.
Este test se basa en el cambio de PKA de una resina de
intercambio iónico respecto a la concentración iónica. En
DENSIDAD presencia de un indicador, el color varía desde azul claro
para orinas con baja concentración iónica hasta el amarillo
– verde para orinas de alta concentración iónica
El test revela la existencia de esterasas de granulocitos.
Estas esterasas segmentan un éster indoxil cuyo indoxil
LEUCOCITOS liberado reacciona con una sal de diazonio para producir
un colorante violeta. Las bacterias, tricomonas o eritrocitos
presentes en la orina no afectan la reacción.
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Nota: Las tirillas reactivas utilizadas en el equipo URISYS 2400 tiene un área de compensación. Esta zona
blanca, sin reactivos, permite la compensación instrumental para el color intrínseco de la orina durante el
análisis de leucocitos, nitrito, proteína, glucosa, cuerpos cetónicos, urobilinógeno y bilirrubina.

1.3.3. Análisis del sedimento: análisis microscópico del sedimento urinario luego de que se centrifuga y se
decanta el sobrenadante. Se homogeniza la muestra y de lo que queda se prepara un montaje en
fresco para lectura en microscopio en 10X y 40X.

1.4. MATERIAL DE PRUEBA - ESTABILIDAD

En general, se requieren de 10 ml a 15 ml de orina. Las muestras deben refrigerarse si no pueden estudiarse
de inmediato, pero antes de utilizar las tiras reactivas, es necesario que alcancen la temperatura
ambiente. Las muestras deben estar libres de cualquier contaminación fecal o vaginal.

1.5. METODO DE RECOLECCION DEL ESPECIMEN

• La muestra idónea para uroanálisis es la primera orina de la mañana
• Para exámenes urgentes se puede utilizar una muestra al azar con 4 horas de retención urinaria.
• Utilizar el frasco entregado por el laboratorio, no destaparlo hasta el momento de tomar la muestra.

1.5.1. Micción espontánea:

1.5.1.1. Recolección de la muestra en mujeres:
• Lavar las manos con agua y jabón.
• Realizar un aseo minucioso de los genitales externos con abundante agua y jabón, utilizando una
gasa o toalla limpia, de adelante hacia atrás y tratando de limpiar el orificio uretral y perianal;
repetir este procedimiento varias veces y enjuagar cuidadosamente para eliminar los restos de
jabón. Secar con gasa o toalla limpia.
• Separar los labios mayores, orinar descartando la primera parte de la orina en el sanitario (primeros
20 a 25 ml) y sin interrumpir la micción continuar recogiendo la muestra directamente en el frasco.
• Evitar el contacto del frasco con genitales. Los dedos no deben tocar el borde del frasco.
• Tapar el frasco.
• Marcar con nombres y apellidos.
• Refrigerar mientras se lleva al laboratorio.

1.5.1.2. Recolección de la muestra de orina en hombres:

• Retraer completamente el prepucio, que se mantendrá así hasta que se haya recogido la muestra.
• Lavar el glande con toalla o gasa impregnada en solución jabonosa.
• Enjuagar con abundante agua para eliminar los restos de jabón.
• Indicar al usuario que orine desechando los primeros 20 mililitros (primera parte de la orina) y sin
interrumpir la micción se recoge el resto de orina en el frasco.
• Tapar el frasco y marcar con nombre y apellidos.
• Refrigerar mientras se lleva al laboratorio.

1.5.1.3. Recolección de muestras de orina en niños:

En niños y niñas pequeños, las muestras se recogen en bolsas estériles especialmente diseñadas para ellos,
proceder de la siguiente forma:
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• Lavar cuidadosamente los genitales y área perianal igual que en los adultos.
• Colocar la bolsa de plástico o el colector.
• Vigilar la bolsa cada 30 minutos y tan pronto como el niño haya orinado se retira.
• Vaciar la muestra a frasco nuevo tapa rosca.
• Marcar con nombres y apellidos.
• Refrigerar mientras se lleva al laboratorio.
• Si la micción no se ha realizado a los 30 minutos se debe colocar nueva bolsa; si a la hora el niño no
ha eliminado se debe repetir el aseo de los genitales y colocar nueva bolsa.
• Una vez recogida la muestra se deposita en el recipiente para recolección de muestras de orina, no
se debe remitir en la bolsa porque hay mayor riesgo de derrame y de contaminación.

1.5.2. Sonda vesical permanente:

Pinzar la sonda a 5 cm del meato urinario, esperar a que esta parte se llene de orina.
Desinfectar con alcohol al 70% el área de la sonda comprendida entre el meato urinario y la pinza,
puncionar con una jeringa estéril, aspirar y depositar la orina en un frasco estéril, tapar, rotular y llevar al
laboratorio.
OBSERVACIÓN: Nunca tome una muestra de orina directamente de la bolsa conectada a la sonda, ni
directamente de la sonda abriendo la llave.

1.5.3. Punción vesical suprapúbica

Para realizar la punción de debe tener un buen conocimiento de la técnica y las precauciones necesarias,
y una rigurosa asepsia. Procedimiento realizado por el personal médico.

Esta técnica es empleada en evidencia clínica del cuadro urinario con recuentos bajos o nulos, neonatos y
lactantes, búsqueda de anaerobios y urocultivo repetidos con dos o más tipos de bacterias.

Realizar la punción mínimo dos horas después de la última micción.

Limpiar el área de la punción con alcohol al 70%
Tomar entre 10 y 30 ml de orina
Depositar la muestra en frasco estéril, tapar y rotular.

1.6. INDICACIONES PARA EL TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS

Las muestras para el estudio de la orina deben ser recientes y deben ser analizadas dentro de la 1ª hora
después de la micción, o bien refrigerar la orina para posterior estudio o traslado.

Las muestras se refrigeran mientras se realiza la remisión y se transportan en la nevera marcada con
“muestras con cadena de frío”.

1.7. CONDICIONES DEL PACIENTE

Recoger la primera orina de la mañana, y en pacientes hospitalizados o en caso de que se requiera el
examen de manera urgente se debe obtener la orina luego de cuatro (4) horas de retención urinaria.
Limpiar la región periuretral (extremidad del pené, labios, vulva) por medio de lavados sucesivos con agua
y jabón, enjuagando y secando muy bien.
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Limpiar la uretra dejando pasar la primera parte de la micción, la cual se desecha.

1.8. EQUIPO NECESARIO

• Equipo lector de tirillas (URISYS 2400 – cobas u 411)
• Microscopio
• Centrífuga.
• Pipeta automática de 20 µL.

1.9. REACTIVOS Y MATERIALES

• Tiras calibradoras
• Control de orinas (normal y anormal)
• Tirillas reactivas comerciales (URISYS 2400 Cassette – Combur 10 test M)
• Puntas desechables amarillas.
• Tubos de vidrio (Con capacidad mínima de 10mL)
• Láminas portaobjetos
• Laminas cubreobjetos

1.10. METODO DE ESTANDARIZACIÓN Y CALIBRACIÓN

• Se debe adoptar un sistema uniforme tanto para el análisis físico químico como para el estudio
microscópico
• Mezclar bien la orina.
• La cantidad de muestra debe ser de 10 ml
• La centrifugación debe ser de 5 minutos a 2.500 r.p.m.
• El tiempo de lectura de las tiras reactivas debe ajustarse a los sugeridos por la casa comercial.
Sumergir 1 a 2 Segundos. Leer a los 60 segundos y 2 minutos para los leucocitos.
• Los equipos deben ser calibrado con las tirillas dispuestas para ello cada vez que se cambie de lote
de tirillas reactivas o cada que se requiera
• Para la lectura del sedimento urinario se recomienda mezclar adecuadamente la muestra de orina.
• Para asegurar óptimos resultados, se recomienda analizar controles positivo y negativo cada vez
que se inicie un nuevo envase de tirillas, cambio de lote o por lo menos una vez por semana

1.11. CRITERIOS Y PROCEDIMIENTOS DE CONTROL QUE DEFINEN RESULTADOS INACEPTABLES

• Limpieza del recipiente de recolección de la muestra (afecta la calidad de la muestra en cuanto a
contaminación).
• Tiempo transcurrido entre la recolección de la muestra y su análisis (influye en el cambio de las
estructuras y cambio en los componentes y metabolitos).
• Utilización de medicamentos y diferentes sustancias (causa interferencia en algunas pruebas).
• Volumen insuficiente de la muestra de orina
• Tiempo y velocidad en el proceso de centrifugación
• Falta de calibración de los diferentes equipos (afecta la calidad de los resultados).
• Utilizar reactivos vencidos o deteriorados
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1.12. ACCIONES CORRECTIVAS PARA RESULTADOS INACEPTABLES

• Asegurarse de que el recipiente de la muestra este limpio y que cumpla con las características
adecuadas.
• El tiempo transcurrido para el análisis de la muestra no debe sobrepasar 1 hora. Si no va a
analizarse inmediatamente, debe conservarse refrigerada.
• Si el paciente está ingiriendo medicamentos debería estar escrito en la orden medica para
descartar interferencias técnicas
• Verificar que el volumen de orina sea adecuado para el análisis
• Respetar los tiempos de centrifugación y la velocidad a la que se realiza este procedimiento
• Verificar las fechas de vencimiento de las tirillas reactivas y su estado

1.13. PROCEDIMIENTO Y LECTURA

• Marque los tubos donde va a servir las muestras o coloque el código de barras de la manera
correcta.
• Mezclar bien la orina
• Servir 10 mL de orina aproximadamente en un tubo
• Programar las muestras en el equipo cobas u 411, (en el equipo URISYS, luego de inicializado, se
colocan las muestras en los rack, se programa y el equipo procesa todo el examen físico químico)
• Sacar una tirilla reactiva del envase y sumérjala en la muestra hasta el último segmento de
reacción.
• Elimine el exceso de orina sacudiendo suavemente el borde longitudinal de la tira contra un papel
absorbente
• Leer la tirilla poniéndola en la bandeja de lectura del equipo cobas u 411 (este realiza el examen
químico)
• Verificar que la muestra que está ingresando en el equipo sea la que está programada según el
orden que muestra en la pantalla
• Realizar el examen físico (color y aspecto)
• Centrifugar las muestras por 5 minutos a 2500 r.p.m.
• Descartar el sobrenadante de tal manera que quede en el tubo más o menos 1 mL de sedimento.
• Resuspender el sedimento dando golpecitos suaves en la parte inferior del tubo para mezclarlo.
• Colocar 20µL del sedimento con una pipeta automática en un portaobjeto, colocar una laminilla y
llevar al microscopio
• Leer un mínimo de 10 campos en 40X para sacar un promedio de los elementos formes que
contenga la orina
• Reportar lo observado en la orina en la hoja de trabajo

Nota: La luz del microscopio debe estar amortiguada para dar un contraste adecuado. Es importante
anotar que si hay demasiada luz, algunas estructuras se pueden pasar por alto. El examen debe hacerse
primero en 10x y luego en 40x.

1.14. CALCULOS
No aplica

1.15. EXPRESION DEL RESULTADO

1.15.1. Análisis Físico:

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• Color: Incoloro, Amarillo claro, Amarillo fuerte, Anaranjado, Verdoso, Marrón, Rojo
• Aspecto: Transparente, Ligeramente turbio, Turbio

1.15.2. Análisis Químico:

• Densidad: Se informa desde 1000 hasta 1030, cuando supera este valor se informa “mayor de 1035”.
• PH: puede oscilar entre 5 y 9
• Proteínas: Se informa como negativo, desde 10 hasta 1000 mg/dL
• Glucosa: Se informa en mg/dl. Entre negativo y 2000
• Cetonas: desde negativo hasta 100 mg/dL
• Sangre oculta: va desde negativo hasta 250 RBC/µL
• Bilirrubina: Se informa como negativo hasta 3.0 mg/dL
• Urobilinógeno: varía desde Normal hasta 12.0 mg/dL
• Nitritos: Se reporta como Negativo o Positivo.
• Estearasa leucocitaria: Se informa como leucocitos/µL
• Varía desde negativo hasta 500 WBC/ µL

1.15.3. Sedimento urinario

Elementos formes de la orina:
Los eritrocitos, leucocitos y células epiteliales altas y bajas se reportan en alto poder (AP 40x) promediando
la cantidad observada mínimo en 10 campos microscópicos significativos.

Las bacterias, hongos y moco se registran por cantidad escasa, media o abundante.

La presencia de espermatozoides en la orina masculina se debe informar por cantidad escasa, media, o
abundante

Para los cristales se debe reportar su presencia en cantidad escasa, media o abundante. La formación de
cristales depende del PH, clasificándolos de la siguiente manera:
• Cristales en orinas ácidas (menor de 6.5)
Ácido úrico, oxalato de calcio, uratos de sodio y uratos amorfos, cristales de sulfato de calcio, uratos
de sodio, ácido hipúrico, cistina, leucina, tirosina, colesterol y sulfamida.
• Cristales de orinas alcalinas (pH mayor a 6.5): Fosfatos triple, fosfatos amorfos, carbonatos de calcio,
fosfato de calcio y uratos de amonio.

Los cilindros se cuentan y se reportan en bajo poder (BP10x) pero se identifican y clasifican en alto poder
(AP 40x), se debe reportar el promedio de las estructuras vistas en 10 campos microscópicos. Podemos
encontrar los siguientes: Cilindros hialinos, Cilindros eritrocitarios, Cilindros leucocitarios, Cilindros granulosos,
Cilindros epiteliales, Cilindros céreos, Cilindros grasos y cilindros mixtos.

Los parásitos que se encuentren en la orina debido a la contaminación fecal o vaginal se reportan como
presencia.

1.16. VALORES DE REFERENCIA

1.16.1. Análisis físico:

• Color: Puede variar de una amarillo pálido a un ámbar oscuro.
• Aspecto: La orina normal es transparente.
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1.16.2. Análisis Químico:

• Densidad: en adultos con ingesta normal de líquidos, oscila entre 1016 y 1022. La densidad decrece
con la edad.
• pH: puede oscilar entre 5 y 8, aunque con dietas normales el pH suele ser de 6.
• Proteínas: Pequeñas cantidades pueden detectarse en individuos sanos hasta 20 mg/dL;
Normalmente es negativo.
• Glucosa: pequeñas cantidades no significativas (hasta 30mg/dL) pueden detectarse en orinas
normales.
• Cetonas: Normalmente no debe existir en orina.
• Sangre oculta: Normalmente no existe sangre en orina, ni hemoglobina libre (por lisis del eritrocito).
De 2 a 3 hematíes al microscopio se considera normales.
• Bilirrubina: No debe existir en orinas normales.

• Urobilinógeno: Normalmente existen en orina en concentraciones de 0.1 mg/dL o menos.

• Nitritos: Normalmente son negativos
• Estearasa leucocitaria: debe ser negativo

1.16.3. Análisis microscópico

• En un examen de sedimento urinario se puede encontrar hasta 3 hematíes por campo.
• El promedio de leucocitos en una orina normal es de 2 leucocitos por campo.
• Se puede encontrar células escamosas bajas, de transición y células altas en pocas cantidades.
• Por lo general no se encuentran cristales en la orina recién emitida y la presencia de ciertas
cantidades no se considera patológica.
• Cilindros hialinos pueden encontrarse en pequeñas cantidades. La presencia de otros cilindros se
considera patológica.

1.17. LINEALIDAD DEL MÉTODO

No aplica

1.18. ANOTACIONES SOBRE INTERFERENCIA TÉCNICA

• Densidad: La densidad puede verse afectada por sustancias como glucosa o urea en
concentraciones mayores de 1%, ya que dan valores bajos, mientras que cantidades superiores de
proteínas pueden determinar lecturas elevadas. Orinas fuertemente básicas pueden producir
resultados ligeramente bajos mientras que orinas fuertemente ácidas pueden producir resultados
ligeramente altos.
• El pH puede aumentarse en orinas viejas por la pérdida de Dióxido de carbono y a que el
crecimiento bacteriano produce amoníaco a partir de la urea. Si queda un exceso de orina sobre
la tira o se realiza el test de manera incorrecta, el tampón ácido del segmento de proteínas puede
contaminar el segmento de medición de pH, obteniéndose un valor inferior al real.
• La lectura de las proteínas puede dar resultados falsos positivos en orinas con pH mayor o igual a 9,
si se deja mucho tiempo sumergida la tirilla reactiva, restos de desinfectantes con amoníaco. Los
resultados falsos negativos pueden darse en orinas diluidas y con otras proteínas diferentes a la
albúmina.
• En la sangre oculta puede presentarse falsos positivos en presencia de Hipoclorito en el envase que
contiene la orina, al igual que en orinas con alta concentración de bacterias puede haber una
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reacción positiva falsa por acción de las peroxidasas bacterianas. Si la muestra de orina no se
mezcla bien puede presentarse un falso negativo ya que los hematíes suelen ubicarse en el fondo.
Concentraciones de ácido ascórbico superiores a 50 mg/dL puede producir falsos negativos en
caso de pequeñas cantidades de hematíes en la orina.
• En las bilirrubinas se pueden presentar falsos negativos en presencia de elevada concentración de
ácido ascórbico, de nitrito o si se oxidó la bilirrubina. Los falsos positivos dan en pacientes con altas
dosis de clorpromacina y otros fármacos.
• Orinas fuertemente pigmentadas o con alta concentraciones de metabolitos de levodopa pueden
producir falsos positivos débiles. Orinas con alta densidad y bajo pH puede dar falsos positivos. La
fenolsulfonftaleina puede producir falsos positivos.
• En la glucosa, la reactividad del test puede estar influenciada pos la densidad y la temperatura.

1.19. BIBLIOGRAFÍA

Graff, Sister Laurine. Análisis de orina, Atlas de color. Ed Panamericana. 1987.

Henry, Jhon Bernard. Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el Laboratorio. Ed. Salvat. ed. 8°. 1988.

Navarrete, Silvia M., Gladys Villamil de G. Química Clínica y Orinas, Manual de Procedimientos. Ministerio
de Salud, Instituto Nacional de Salud, 1986.