UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA CELULAR Y DE LOS

TEJIDOS I

ALUMNOS:
BURGOS GARCIA IRVIN
MANDUJANO SANCHEZ GULLERMO
PUEBLA LUNA MAGALY
RODRIGUEZ PEREZ EBER

GRUPO: 1451 EQUIPO: O9

ASESOR: ADRIANA HERNÁNDEZ REYES

*ANÁLISIS DE LÍPIDOS EN LA YEMA DE

HUEVO
*CROMATOGRAFÍA DE LÍPIDOS
Objetivos:

 Analizar las propiedades de los lípidos.

 Extraer los lípidos de la yema de huevo.
 Cuantificar fosfatos de lípidos fosforilados y no fosforilados.
 Analizar la importancia biológica de los lípidos presentes en la yema de huevo.

RESULTADOS

Tabla1. Concentración de fosforo contenida en cada muestra

Matraz Volumen de patrón Absorbancia Masa de fosforo

(ml) (µg)
1 0.2 0.007 2
2 0.6 0.045 6
3 1.0 0.053 10
4 2.0 0.124 20
5 3.0 0.144 30
6 (Lípidos no _ 0 0
fosforilados)
7 (Lípidos fosforilados) _ 0.10 18.81

Curva estándar para la determinación de fosfato en la yema de huevo.

0.18
Absorbancia

0.16
0.14
0.12
0.1
0.08
0.06
0.04
0.02
0
0 5 10 15 20 25 30 35

Masa de fosforo (µg)

Cálculos18.81 µg/ 5mL = (3.762 µg/mL)(50)= 188.81 µg/ mL = 0.18881 g/mL

Se pesaron 0.4394 g de fosfato mono potásico para realizar la curva lo cual equivale a 0.1 g de
fosforo ya que

136g KPO4  31 g P

04394g KPO4  0.1 g P

Se obtuvo casi el doble de lípidos fosforilados con respecto al valor teórico en la yema de huevo
analizada, esto puede ser debido a un error en la preparación de las muestras principalmente en la
digestión para eliminar materia orgánica o la concentración en fosforo de la yema de huevo es
muy elevada.

Para el trabajo de análisis de rutina, diez o más muestras se pueden aplicar a una placa de 20 x
20 cm y luego la cantidad de lípidos presentes pueden ser cuantificadas por carbonización-
densitometría, que consiste en pulverizar la placa con un oxidante y calefacción para carbonizar
los lípidos. Antes de usarlo, se recomienda que las placas se activa con el calor a una
temperatura de 110 F por una hora. Los lípidos migran a lo largo de la placa formando manchas
únicas e independientes en la placa. Entonces, para la detección de puntos después de una
carrera, en la que el disolvente elegido en frente es capaz de migrar hasta la mitad de la placa
(aproximadamente 30 minutos) las placas se secan en el aire en una campana de químicos a
temperatura ambiente durante 20 minutos. Todos los lípidos pueden ser fácilmente visualizados
con un solo medio de contraste soluble en agua.

1. Reactivo con yodo: Esta imagen muestra el revelado con yodo en el

cual se aprecia todo los tipos de lípidos contenidos en la yema de huevo
separados uniformemente sobre toda la placa y de un tono tojo amarillo.

2. Reactivo con bismuto: En esta imagen se puede apreciar la

diferenciación de los diferentes tipos de colinas que preexisten en la yema
de huevo como la fosfatidilcolina de color naranja algunos ácidos grasos
esparcidos en la toda placa pero en general las manchas muestran los
diferentes tipo de colinas que existen en la yema.
 3. Reactivo con Molibdato: Esta imagen nos muestra el
revelado con molibdato en este nos muestra todo los lípidos
fosforilados presentes en la yema de huevo divididos en toda la
placa de color azul y con algunas manchas transparentes de ácidos
grasos.

4. Reactivo de ninhidrina: Se muestra lípidos que contienen

aminoácidos, útiles para la identificación de la fosfatidiletanolamina y
la fosfatidilserina de un tono rojo ladrillo.

CONCLUSION

Se logró cuantificar los lípidos fosforilados de la yema de huevo, así como su identificación en una
cromatografía en capa fina usando como reveladores yodo, bismuto, molibdato y ninhdirina para
identificar lípidos fosforilados, lípidos totales, lípidos con aminoácidos, colinas.