FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

PROCESO PLAN CURRICULAR

INFORME DE LABORATORIO
Código: FCQ-P05-F06; Versión: 01; Fecha: 16 de enero de 2017

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA I

Asignatura: Bioquímica I NOTA

Número de práctica: 3
Fecha de realización: 11/07/2018 Fecha de entrega: 18/07/2018
Integrantes / Grupo N°: Criollo Edwin, Remache Karla, Urbano Brayan, Villarroel Diana,
Zúñiga Karolyn

1. Título: Vitamina B1 y caseína de la leche

2. Objetivos:

 Obtener la caseína de la leche

 Separar algunos constituyentes de la leche e identificar la presencia de
vitamina B1.
 Identificar mediante la precipitación de la caseína la presencia de la vitamina
B1.

3. Fundamento teórico:

3.1. La Leche

La leche contiene vitaminas (principalmente tiamina, riboflavina, ácido pantotéico y

vitaminas A, D y K), minerales (calcio, potasio, sodio, fósforo y metales en pequeñas
cantidades), proteínas (incluyendo todos los aminoácidos esenciales), carbohidratos
(lactosa) y lípidos. Los únicos elementos importantes de los que carece la leche son
el hierro y la vitamina C.
Las proteínas se pueden clasificar de manera general en proteínas globulares y
fibrosas. Las proteínas globulares son aquellas que tienden a agregarse en formas
esferoidales y no establecen interacciones intermoleculares como son los puentes de
hidrógeno (característicos de las proteínas fibrosas) siendo solubilizadas en
suspensiones coloidales.
En la leche hay tres clases de proteínas: caseína, lacto albúminas y lacto globulinas
(todas globulares)

3.1.1. La caseína

La caseína está compuesta de proteínas fosfatadas y contiene también calcio con el

cual forma un complejo calcio-caseína. La caseína es el componente principal de la
proteína de la leche y representa cerca del 80% de la proteína total, además de
participar en muchos procesos tecnológicos, por ejemplo la producción de quesos. La
caseína es única en su naturaleza y no existe ninguna sustancia parecida en la
sangre ni en los tejidos del animal.
La caseína obtenida comercialmente tiene un color blanco amarillento y forma
granular, pero la obtenida en forma pura es blanca, inodora e insípida; el color blanco
contribuye al color de la leche. La caseína se encuentra en la leche en forma de
pequeñas partículas o micelas de caseína en suspensión y carece de homogeneidad
ya que consta de varias fracciones.

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Tabla Nº 1: Componentes de la caseína

Fracción Porcentaje
Alfa caseína 45 a 63
Beta caseína 19 a 28
Gamma caseina 3a7
Elaborado por: Zúñiga K. y otros.

La caseína puede ser precipitada en la leche por medio de ácidos diluidos que bajen
el pH a 4,6, con alcohol o con la enzima renina.
Cuando es precipitada con ácidos se libera del calcio; con alcohol se precipita en
forma de caseinato de calcio y con renina, normalmente considerada como cuajo, lo
hace en forma de paracaseinato de calcio y contiene más calcio que el caseinato de
calcio.
La caseína pura no se precipita con la aplicación de calor, pero cuando se encuentra
en la leche puede precipitarse a 100ºC después de 12 horas, aunque si la leche esta
ligeramente ácida la aplicación de poco calor precipita la caseína (Revilla, 1982).

La caseína se trata de una sustancia de textura áspera y bastante espesa, que

aunque no es perjudicial para la salud, se utiliza en la industria para la fabricación de
pinturas especiales y en el apresto de tejidos, la clarificación de vinos, la elaboración
de preparados farmacéuticos y la fabricación de plásticos. La pintura de caseína ha
sido usada desde la antigüedad por los egipcios (Miller, 2001).

Precipitación de la caseína: debido a que la caseína es una proteína, la adición de

ácido acético a este tipo de sustancias produce la desnaturalización de la misma, lo
que se denota como el precipitado o filtrado en la práctica.

A la Vitamina B1 se le identifica en el filtrado de la caseína al mezclarse con el KCl, el

Ferrocianuro de Potasio y el NaOH al 10%, al reaccionar con el alcohol isobutilico,
causa la precipitación de la Vitamina B1 (Pràctica de la caseina, 2014).

3.2. Vitaminas

Las vitaminas pertenecen a uno de los grupos constituyentes de los alimentos que
provocan más controversias, debido al gran desconocimiento de su función. Las
vitaminas adquirieron importancia cuando se observó que la carencia de estas
sustancias en la dieta provocaba cuadros dramáticos. Enfermedades como el
raquitismo, beriberi, entre muchas.

Las vitaminas son substancias químicas no sintetizables por el organismo, presentes

en pequeñas cantidades en los alimentos y son indispensables para la vida, la salud,
la actividad física y cotidiana.

Las vitaminas no producen energía y por tanto no implican calorías. Intervienen como
catalizador en las reacciones bioquímicas provocando la liberación de energía. En
otras palabras, la función de las vitaminas es la de facilitar la transformación que
siguen los sustratos a través de las vías metabólicas.

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Identificar las vitaminas ha llevado a que hoy se reconozca, por ejemplo, que en el
caso de los deportistas haya una mayor demanda vitamínica por el incremento en el
esfuerzo físico, probándose también que su exceso puede influir negativamente en el
rendimiento.

Conociendo la relación entre el aporte de nutrientes y el aporte energético, para

asegurar el estado vitamínico correcto, es siempre más seguro privilegiar los
alimentos de fuerte densidad nutricional (legumbres, cereales y frutas) por sobre los
alimentos meramente calóricos. (Vitaminas, 2010)

3.2.1. Vitamina B1
La vitamina B1, también conocida como Tiamina, es una molécula que consta de 2
estructuras cíclicas orgánicas interconectadas: un anillo pirimidina con un grupo
amino y un anillo tiazol azufrado unido a la pirimidina por un puente metileno. Es
soluble en agua e insoluble en alcohol. Su absorción ocurre en el intestino delgado
(yeyuno, íleon) como tiamina libre y como difosfato de tiamina (TDP).
En forma activa, el pirofosfato de tiamina o difosfato de tiamina, es sintetizado por la
enzima tiamina-pirofosfoquinasa, la cual requiere tiamina libre, magnesio y ATP
(Trifosfato de adenosina), actuando como coenzima en el metabolismo de los hidratos
de carbono, permitiendo metabolizar el ácido pirúvico o el ácido alfa-cetoglutárico.
Además participa en la síntesis de sustancias que regulan el sistema nervioso.
(Pràctica de Bioquimica, 2015)

4. Procedimiento:

4.1. Equipos, materiales y reactivos

MATERIALES REACTIVOS
Vaso de precipitación Leche
Probeta de 50ml KCl
Erlenmeyer de 100ml Ferrocianuro de potasio al 1%
Pipeta de 10ml NaOH al 10%
Tubos de ensayo Alcohol isobutílico
Gradilla Ácido acético
Embudo de vidrio

4.2. Procedimiento

a) Preparación de caseína: En un vaso de precipitación de 400ml; agregar 50ml de

leche y 50ml de agua destilada, añadir con una pipeta gota a gota y con agitación
constante ácido acético al 10% hasta la formación de un precipitado flocúlento de
caseína. Dejar decantar y filtrar; descartar la caseína que no es de interés en la
presente práctica y conservar el filtrado para las posteriores pruebas cualitativas
de vitamina B1 (tiamina) y minerales.

b) Vitamina B1: Vierta 2.5ml del filtrado en un tubo de centrifuga; añada una
pequeña cantidad de KCl y 0.5ml de ferrocianuro de potasio al 1% y 1ml de NaOH
al 10%, mezcle y disuelva totalmente el KCl. Agregar 2.5ml de alcohol isobutílico,

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agitar cuidadosamente por 2min y centrifugar por 5 minutos a 2000 rpm. La
formación de precipitado indica la presencia de vitamina B1.

5. Resultados:

Precipitación de la caseína: En este procedimiento se obtuvo de la leche un

precipitado flocúlenlo perteneciente a la caseína y un filtrado perteneciente a la tiamina
(Vitamina B1 y otros minerales).

Vitamina B1: En esta reacción al adicionar al filtrado, KCl, Ferrocianuro de potasio,

NaOH se obtuvo pequeñas partículas de color rojo, las cuales luego de agregar el alcohol
isobutílico y agitar se lograron como un color más visible pudiendo observar que en el
tubo se encontraba pequeñas partículas lo que indicó la formación de precipitado
indicando la presencia de vitamina B1.

+ KCl + K4Fe(CN)6 + NaOH precipitado positivo

6. Discusiones :

7. Conclusiones:

8. Bibliografía:

Practica de Bioquimica. (28 de Mayo de 2015). Recuperado el 21 de enero de 2018, de

https://es.slideshare.net/carlosp09/practica-deellaboratorio
Practica de la caseina. (19 de Octubre de 2014). Recuperado el 21 de enero de 2018,
de
https://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/biotec_FQbiomol/Practica3F
QB.pdf
Vitaminas. (12 de Enero de 2010). Recuperado el 21 de enero de 2018, de
www.zonadiet.com/nutricion/vitaminas.htm
Jonas, V. (27 de julio de 2014). SlideShare. Recuperado el 21 de enero de 2018, de
https://es.slideshare.net/vegabner/aislamiento-de-la-casena-de-la-leche
Plumer, D.T.Introducción a la bioquímica practica.Mexico.MaGraw-Hill
Latinoamericana , S.A.
Miller, D. (2001). Extracciòn de la caseìna. Mexico: Limusa.
Revilla, A. (1982). Tecnologìa de la leche. Texto Ltda.

9. Anexos

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Img1.- Reactivos utilizados para la practica Img2.- Muestra de leche utilizada

Elaborado por: Remache K y otros. Elaborado por: Remache K y otros.

Img3.- Agregar 50ml de leche y 50ml de agua Img4.-Formación de un precipitado flocúlento

destilada, añadir con una pipeta gota a gota y de caseína.
con agitación constante ácido acético al 10%. Elaborado por: Remache K y otros.
Elaborado por: Remache K y otros

Img5.- Proceso de filtración del decantado.
Elaborado por: Remache K y otros
Img6.- Vierta 2.5ml del filtrado en un tubo de
centrifuga; añada una pequeña cantidad de
KCl y 0.5ml de ferrocianuro de potasio al 1% y
1ml de NaOH al 10%.
Elaborado por: Remache K y otros

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Img7.- Agregar 2.5ml de alcohol isobutílico, Img8.- Formación de precipitado que indica la
agitar cuidadosamente por 2min y centrifugar presencia de vitamina B1.
por 5 minutos a 2000 rpm.
Elaborado por: Remache K y otros Elaborado por: Remache K y otros

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