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CROMATOGRÁFICOS
Cromatografia
em Coluna
Prof. Dr. Marcelo Galindo Lahoud 1
Cromatografia em coluna
• É a técnica de separação cuja fase estacionária acontece
dentro de um tubo.
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
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Cromatografia em coluna
Adsorventes
• A polimerização de estireno e divinilbenzeno resulta em um
adsorvente com característica apolares ou baixa polaridade.
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
Processos de adsorção em coluna
• Para se conhecer a natureza do processo de adsorção, deve-se
considerar a atividade do adsorvente (atividade cromatográfica)
que, de uma maneira geral, se traduz em força de adsorção.
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
Processos de adsorção em coluna
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
Escolha do eluentes
A função das fases móveis na CL por adsorção tem um sentido amplo.
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
Escolha do eluentes
• SEGUNDO, é promover o desenvolvimento dos componentes da
mistura na coluna e remover ou dessorver esse componentes do
adsorvente seletivamente.
Hexano
Éter de petróleo
Cicloexano
Tolueno
Diclorometano
Clorofórmio
Éter etílico
Acetato de etila
Piridina
Acetona
Etanol
Metanol 17
Ácido acético
Cromatografia em coluna
Método por adsorção
Escolha do eluentes
• Pode se fazer uso de eluição por gradiente.
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
Escolha do eluentes
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
Enchimento da coluna e aplicação da amostra
• Quanto mais uniforme for o enchimento da coluna, maior será sua
eficiência.
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
Enchimento da coluna e aplicação da amostra
• Nessa operação, espera o assentamento do adsorvente obtendo uma
homogeneidade no enchimento.
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
Enchimento da coluna e aplicação da amostra
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
• Atividade do adsorvente.
• Temperatura da coluna.
• Empacotamento da coluna.
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
Aplicação da amostra
• Uma vez montada a coluna, a amostra deve ser colocada no seu
topo.
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Cromatografia em coluna
Método por adsorção
Vantagens C.L.
• Pode separar qualquer substancia.
• Automatização é possível
Desvantagem C.L.
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Como ocorre a separação (quem elui primeiro e depois)
quando usamos alumina básica ou sílica como fase
estacionária na separação por coluna das seguintes
substâncias:
Mais retido
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