BAB II

1. Tujuan Penelitian

Untuk mengetahui poli (asam laktat-co-glikolat) (PLGA) nanopartikel sarat dengan

paclitaxel dan STAT3 siRNA berhasil disintesis, dan aplikasi mereka di sel kanker.

2. Metode
Pertama, paclitaxel dikelilingi oleh nanopartikel PLGA melalui penguapan pelarut.
Mereka kemudian dilapisi dengan kationik polyethylenimine polimer (PLGA-PEI-
PAJAK), memungkinkan untuk melakukan STAT3 siRNA pada permukaannya
melalui interaksi elektrostatik (PLGA-PEI-PAJAK-S3SI). Ukuran, potensi zeta,
memberikan khasiat, dan melepaskan profil dari nanokompleks PLGA dikarakterisasi
in vitro. Serapan seluler, intraseluler nanopartikel lintasan, dan acara seluler
berikutnya dievaluasi setelah pengobatan dengan berbagai nanokompleks PLGA di
paru-paru manusia sel A549 kanker dan A549 yang diturunkan paclitaxel-tahan baris
sel A549 / T12 dengan mutasi α-tubulin.
3. Polimer yang digunakan
 Antibodi berikut digunakan: anti-STAT3 (Tyr705), anti-Stat1, anti-α-tubulin
(Sel Signaling Teknologi, Beverly, MA), anti-STAT3 (Santa Cruz
Biotechnology, Santa Cruz, CA), dan anti-aktin (Chemicon International Inc,
Pittsburgh, PA). Paclitaxel dan PEI polimer (rata-rata berat molekul 25 kDa)
berasal dari Sigma-Aldrich Corporation (St Louis, MO), Oregon Green® 488
paclitaxel adalah dari Molekuler Probes® Life Technologies (Carlsbad, CA),
dan PLGA kopolimer (5050 DLG 4.5a ; berat molekul 66 kDa) adalah dari
Evonik Industries AG (Darmstadt, Jerman). Semua reagen yang dibeli dari
Sigma-Aldrich.
 Manusia paru sel kanker A549 dan A549 yang diturunkan paclitaxel-tahan
baris A549 / T12 sel dengan mutasi α-tubulin diperoleh dari Dr Susan Horwitz
(Departemen Farmakologi Molekuler, Albert Einstein College of Medicine,
Bronx, NY) .21 Semua kultur sel reagen -terkait dibeli dari Gibco® Life
Technologies.
 siRNA manusia menargetkan STAT3 RNA label dengan cyanine-5 (Cy5)
dibeli dari Ambion® Life Technologies (akal: 5'-
GGAUCUAGAACAGAAAAUGTT-3 ', antisense: 5'-
CAUUUUCUGUUCUAGAUCCTG-3'). kontrol bergegas untuk STAT3
 siRNA dibeli dari Terapan Biosystems ™ Life Technologies. sel tumor
transfected dengan STAT3 siRNA atau orak-arik kontrol menggunakan
Lipofectamine ™ 2000 (Invitrogen ™ Life Technologies) untuk STAT3
pembungkaman dan dievaluasi setelah 48 jam.

4. Hasil Penelitian dari Polimer yang digunakan

A549 dan A549 / T12 sel berisi konstitutif diaktifkan STAT3, dan membungkam
STAT3 oleh siRNA membuat kedua sel kanker lebih sensitif terhadap paclitaxel.
Oleh karena itu, PLGA-PEI-PAJAK-S3SI disintesis untuk menguji peran terapi di
A549 dan A549 / T12 sel. mikroskop elektron transmisi menunjukkan ukuran PLGA-
PEI-PAJAK-S3SI berada di sekitar 250 nm. PLGA-PEI nanopartikel yang beracun.
PLGA-PEI-PAJAK diambil oleh A549 dan sel A549 / T12 lebih dari paclitaxel gratis,
dan mereka diinduksi lebih bundel kental mikrotubulus dan memiliki sitotoksisitas
yang lebih tinggi dalam sel kanker tersebut. Selain itu, fluoresensi kekuningan
diamati dalam sitoplasma sel-sel kanker menunjukkan bahwa nanopartikel PLGA-PEI
masih secara bersamaan memberikan Oregon Hijau paclitaxel dan cyanine-5-label
STAT3 siRNA 3 jam setelah perawatan. Selanjutnya, setelah sel-sel kanker
diinkubasi dengan nanokompleks PLGA yang disintesis, PLGA-PEI-PAJAK-S3SI
ditekan ekspresi STAT3 dan induksi apoptosis lebih selular di A549 dan sel A549 /
T12 dibandingkan dengan PLGA-PEI-PAJAK.
BAB III

Kesimpulan

Sebuah penguapan pelarut dan metode stabilizer bebas dikembangkan untuk

mensintesis PLGA-PEI-PAJAK-S3SI nanocomplex, yang dapat diambil oleh sel-sel
kanker untuk downregulate STAT3 protein dan membunuh sel-sel kanker paru-paru
secara efektif. PLGA-PEI NP dapat menyediakan platform untuk integrasi obat
antikanker dan siRNA untuk meningkatkan pengobatan kanker.