Nama : Geraldin Ester Manarisip

NIM : 16101105031, Farmasi A

Tugas Fitokimia 2

Review Jurnal

Karakterisasi dan Evaluasi Antioksidan Senyawa Fenolik yang Diekstrak

dari protein konsentrat dan protein isolat yang dihasilkan dari biji pepaya
(Carica papaya Linn.)

PENDAHULUAN

Pawpaw adalah buah Carica papaya yang termasuk genus Carica. Ini adalah tanaman
yang tak ternilai harganya lazim di seluruh Afrika tropis dan Nigeria dan telah menjadi
produsen terbesar ketiga secara global. Caricaceae telah digunakan sebagai obat melawan
berbagai penyakit dalam beberapa kali. Itu telah diperdebatkan oleh para ilmuwan bahwa
semua bagian dari tanaman pepaya, termasuk biji, akar, kulit, dan buah, memiliki efek positif
pada kesehatan umum dan pencegahan penyakit.

Antioksidan bertindak sebagai jaringan kooperatif menggunakan serangkaian reaksi

redoks yang berbeda. Antioksidan, seperti vitamin C (asam askorbat), vitamin E, flavonoid,
dan polifenol, adalah senyawa yang baik mencegah atau mengurangi stres oksidatif dengan
menyumbangkan elektron ke ROS, dengan demikian menetralkan kemampuan ROS untuk
bertindak sebagai radikal bebas. Sampah atau produk sampingan dari pengolahan makanan
seperti biji dan kulit buah-buahan adalah makanan potensial dan sumber antioksidan. Sebagai
contoh; kulit buah delima dan biji anggur telah terbukti memiliki aktivitas antioksidan yang
lebih tinggi daripada pulpnya. Mengubah biji limbah pepaya menjadi produk yang layak
secara ekonomi tidak hanya akan membantu mengurangi biaya membuang limbah ini, tetapi
juga akan membuka sumber baru bisnis yang layak dan penghasilan untuk industri pepaya.

BAHAN DAN METODE

Buah Carica papaya Linn dikumpulkan dari pepohonan pepaya yang terletak di
berbagai bagian Obafemi Universitas Awolowo, Ile-Ife, Nigeria. Buahnya terbelah terbuka
dan biji diekstraksi, dicuci, dan dilapis dengan menggosok secara cepat dengan parutan
domestik di atas permukaan yang datar. Biji kering digiling menggunakan penggiling
Kenwood dan disaring melalui saringan 300 μm (Saringan Endecott, Kerajaan Inggris).
Tepung yang diayak dikemas menggunakan wadah kedap udara dan disimpan pada suhu
kamar hingga digunakan.

Bahan kimia berikut digunakan untuk analisis: asam galat, reagen fenol Folin-Ciocalteu,
natrium karbonat anhidrat (Na2CO3), aluminium klorida (Al2Cl3.6H2O), katekin, natrium
hidroksida (NaOH), natrium nitrit (NaNO2), asam sulfat (H2SO4), 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil
(DPPH), vanilin, asam klorida (HCl), metanol, buffer asetat; 2,4,6-tri- (2-piridil) -1,3,5-
triazina, asam askorbat, FeCl3.6H2O, FeCl2.4H2O, dan ferrozine dan dibeli dari Sigma-
Aldrich Chem. Co. (Inggris). Pelarut yang digunakan untuk kromatografi adalah kelas HPLC.
Air bi-distilasi, dan air kelas HPLC diperoleh dengan sistem pemurnian air Milli-Q plus
(Millipore Corp., Bedford, MA).
Desain eksperimental

Analisis LC – DAD – ESI – MS / MS dari senyawa fenolik

Uji antioksidan

2,2-difenil-2-pikrilhidrazil hidrat (DPPH) assay

Persentase penghambatan dihitung dengan cara berikut:

di mana Acontrol adalah absorbansi dari reaksi kontrol (mengandung semua reagen kecuali
tes compound) dan Asample adalah absorbansi senyawa uji. Kurva standar disiapkan oleh
merencanakan persentase penghambatan terhadap konsentrasi sampel dengan kisaran linier
0,25-2,5 mg / ml.

Penentuan kekuatan antioksidan reduksi besi (FRAP)

Prinsip metode ini didasarkan pada pengurangan kompleks besi-tripyridyltriazine berwarna ke

biru bentuk berwarna besi karena sumbangan elektron oleh senyawa antioksidan.
Kemampuan chelating logam assay

Penghambatan persentase formasi kompleks ferrozine-Fe + 2 dihitung dengan menggunakan

rumus:

Penentuan kadar fenol total (TPC)

Total fenol ditentukan dengan reagen Folin-Ciocalteu sesuai dengan prosedur dijelaskan oleh
Singleton dan Rossi. [17] Asam galat digunakan sebagai standar untuk kurva kalibrasi dan
hasilnya dinyatakan sebagai setara asam galat (GAE μg / g) dari ekstrak.

HASIL DAN PEMBAHASAN

 Tabel 1 daftar senyawa yang diidentifikasi menurut keluarga yang berbeda, termasuk
informasinya disediakan oleh HPLC-DAD-ESI-MS / MS analisis. Asam ferulic adalah
senyawa fenolik utama dalam sampel eksperimen, diikuti oleh caffeic asam dan asam p-
coumaric karena mereka merupakan proporsi besar dari total konten fenolik (Tabel 2). Ketiga
senyawa ini juga dilaporkan memiliki konsentrasi yang lebih tinggi pada kulit pepaya sebagai
sebelumnya dilaporkan oleh Sancho et al. Senyawa fenolik telah dilaporkan memiliki sifat
antarsinogen, antiradikal, dan antimutagenik dan juga melindungi tanaman dari radiasi UV.
Barone et al. menyatakan bahwa sintesis asam ferulat terjadi dari fenilalanin melalui
shikimate. Kawabata dkk, melaporkan bahwa asam ferulat memiliki antikarsinogenik efek
pada kanker usus besar pada tikus, dan ini berkorelasi dengan kemampuan untuk mengais
radikal bebas dan merangsang efek sitoprotektif dari berbagai enzim.

Di antara antioksidan dan antiinflamasi sifat-sifat yang memiliki asam ferulat, telah
diamati bahwa ia memiliki efek positif pada Penyakit Alzheimer. Kegiatan pemulungan
semua ekstrak dipengaruhi oleh konsentrasi sampel. DPPH aktivitas pemulungan dari ekstrak
mengikuti urutan berikut: PI ˃ PC ˃ DF ˃ WF. Peningkatan dalam pemulungan kegiatan
radikal bebas adalah sebagai akibat dari peningkatan senyawa fenolik pada konsentrasi
ekstrak yang lebih tinggi. Dengan meningkatnya konsentrasi senyawa fenolik, jumlah gugus
hidroksil yang tersedia dalam medium reaksi juga meningkat, sehingga kemungkinan
sumbangan hidrogen untuk radikal bebas juga meningkat. Perbedaan kemampuan pembilasan
radikal yang ditemukan di sini mungkin disebabkan oleh perbedaan komposisi dan / atau
alam, jenis dan pola distribusi asam amino dalam molekul protein. Radikal DPPH Aktivitas
pembilasan semua ekstrak menunjukkan potensi antioksidan berdasarkan nilai IC50 dan lebih
rendah.

Nilai IC50 menunjukkan aktivitas antioksidan yang lebih tinggi sementara nilai IC50
yang lebih tinggi menunjukkan lebih rendah aktivitas antioksidan. Nilai IC50 seperti
ditunjukkan pada Tabel 3 untuk rentang PI – WF dari 0,266 hingga 0,109 mg / mL. Ekstrak
metanol berair memiliki nilai IC50 yang lebih rendah dibandingkan dengan metanol absolut
ekstrak (tidak terdaftar di tabel). Ini berarti bahwa metanol cair adalah pelarut yang lebih baik
untuk ekstraksi senyawa antioksidan dalam semua sampel.

Singkatnya, ekstrak protein isolat Carica papaya baik dari air maupun metanol absolut
diamati memiliki aktivitas antioksidan yang lebih tinggi pada semua konsentrasi yang
mungkin dikaitkan dengan proporsi protein yang lebih besar dalam sampel dan paparan dari
mereka amino asam menjadi reaksi oksidatif seperti histidin yang mampu mengais radikal
bebas.

KESIMPULAN

Skrining fenolik, penentuan TPC dan studi aktivitas antioksidan dari Carica papaya
konsentrat protein dan isolat dinilai untuk pertama kalinya. Kapasitas antioksidan dan TPC
menunjukkan bahwa aktivitas antioksidan dari biji dapat terutama dianggap berasal dari
senyawa fenol. Selain aktivitas antioksidan yang kuat, hasil ini menunjukkan bahwa tepung
yang dihilangkan lemaknya, isolat protein, dan konsentrat membuat benih ini menjadi sumber
antioksidan alami dan senyawa bioaktif lain yang menjanjikan yang dapat menemukan
kegunaan dalam industri makanan dan farmasi.