Universidad Nacional Autónoma de México

Facultad de Química

Analítica experimental 2

Práctica 8
ANÁLISIS DE CAFEÍNA Y ÁCIDO ACETILSALICÍLICO EN CAFIASPIRINA POR
HPLC

Alumnos:
Hernández Díaz Diana Belén
Legorreta Díaz Verónica
Olvera González Estefanía
Vázquez González Christian

Grupo 18

27 de septiembre de 2018
 Práctica 6
ANÁLISIS DE CAFEÍNA Y ÁCIDO ACETILSALICÍLICO EN CAFIASPIRINA.

OBJETIVOS

 Determinar cuantitativamente (por el método de estándar externo) el contenido de

cafeína y ácido acetilsalicílico en un analgésico mediante cromatografía líquida de alta
eficiencia.
 Demostrar las ventajas de la técnica en el análisis para el control de calidad.

CUESTIONARIO PREVIO

1.- Calcula las cantidades de cafeína y ácido acetilsalicílico necesarias para preparar las
disoluciones estándar a una concentración de:

Cafeína = 0.030 mg/mL.

Ácido acetilsalicílico = 0.50 mg/mL.

Toma en cuenta para el cálculo, el material volumétrico que se indica en la parte de material y
equipo.

2.- ¿Cuál es el sistema de introducción de muestra que se utiliza en los cromatógrafos de líquidos
de alta eficiencia?

3.- ¿Cómo funciona el inyector de un cromatógrafo de líquidos para introducir la muestra al

sistema?

4.- ¿Qué ventajas y desventajas presenta este tipo de inyector?

MATERIAL

 4 vasos de precipitados de 100 mL

 2 pipeta volumétrica de 2.0 mL
 3 matraces volumétricos de 25 mL
 2 naves para pesar
 1 espátula
 1 Jeringa
 1 Pipeta beral
 1 Embudo de vidrio de tallo largo
 1 Mortero con pistilo
 1 Jeringa de 100 µl para cromatografía de líquidos.
 1 Papel filtro de filtración rápida

REACTIVOS

 Metanol (Grado R.A)

 Estándar de cafeína (99% pureza)
  Estándar de ácido acetilsalicílico
 Fase móvil 1) 65% Ácido Acético al 1% en agua: 35% Metanol. (Para el HPLC 04)
2) 55% Ácido Acético al 1% en agua: 45% Metanol. (Para el HPLC 05)

EQUIPOS

 HPLC 04 Marca: LS-Class Modelo: s/m

 HPLC 05 Marca: Agilent Technologies Modelo: 1220 Infiniti II LC

TÉCNICA ANALÍTICA

 Cromatografía de líquidos en fase reversa

METODOLOGÍA EMPLEADA

1. Ajustar el cromatógrafo en condiciones adecuadas para llevar a cabo la separación de la

muestra.

2.- Preparar una disolución con el estándar de cafeína (0.030 mg/mL) y ácido acetilsalicílico (0.50
mg/mL) en metanol. Pesar aproximadamente 10 mg del estándar de cafeína y 150 mg de ácido
acetilsalicílico, depositar en un matraz de 25.0 mL y agregar metanol cbp 25 mL, agitar. Tomar 2.0
mL de esta solución y llevar a matraz de 25.0 mL y agregar metanol hasta marca de aforo.

3.- Calcula el peso promedio de 5 tabletas de Cafiaspirina pesando tableta por tableta del
medicamento a analizar.

4.- Moler 5 tabletas en un mortero, tomar el peso aproximado de 205 mg del polvo de Cafiaspirina
y agregar a matraz de 25.0 mL.

5.- Extraer los principios activos con metanol en un matraz volumétrico de 25.0 mL durante 10
minutos (realiza esto en la campana), tomar 2.0 mL de la solución y depositar matraz volumétrico
de 25.0 mL. Lleva la disolución a su marca de aforo con metanol. Filtrar

5.- Inyecta cada una de las disoluciones estándar así como la disolución problema que se preparó.

DIAGRAMA DE FLUJO
RESULTADOS

Condiciones cromatográficas

Columna: C-18, Marca: Thermofisher, diámetro: 4.6mm, largo 15 cm.

Tiempo de corrida: 7 minutos
Flujo: 0.5 mL/min
Volumen de inyección: 20 µL
λ= 254 nm

Ácido acetilsalicílico

Cafeína

Tiempo muerto

Peso promedio tabletas de Cafiaspirina

Número de tableta Peso (g)
1 0.6430
2 0.6590
3 0.6589
4 0.6601
5 0.6476
Peso promedio: 0.6537 g

Muestra Área Tiempo de W (ancho)

retención (min)
Tiempo muerto ----------------- 2.213 -----------------
Estándar de Cafeína 1466028.250 4.237 0.577
Estándar de AAS 2971886.000 6.158 1.022
Cafeína 1746100.756 4.237 0.605
AAS 3501952.250 6.158 1.297
CALCULOS

Indica los valores del Factor de respuesta (Fr) que obtuviste para la cafeína y el ácido
acetilsalicílico.

Concentración del estándar de Cafeína:

0.0105 𝑔 𝐶𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎 2 𝑚𝐿 𝑠𝑜𝑙 1000 𝑚𝑔 𝒎𝒈
× × = 𝟎. 𝟎𝟑𝟑𝟔 𝑪𝒂𝒇𝒆í𝒏𝒂
25 𝑚𝐿 25 𝑚𝐿 𝑠𝑜𝑙 1𝑔 𝒎𝑳

1746100.756 𝒎𝒍
FRcafeína= 0.0336 𝑚𝑔/𝑚𝐿
= 𝟓𝟏𝟗𝟔𝟕𝟐𝟖𝟒. 𝟒
𝒎𝒈
𝑪𝒂𝒇𝒆í𝒏𝒂

Concentración del estándar de Cafeína:

0.1595 𝑔 𝐴𝐴𝑆 2 𝑚𝐿 𝑠𝑜𝑙 99 𝑚𝑔 𝐴𝐴𝑆 1000 𝑚𝑔 𝒎𝒈
× × × = 𝟎. 𝟓𝟎𝟓𝟑 𝑨𝑨𝑺
25 𝑚𝐿 25 𝑚𝐿 𝑠𝑜𝑙 100 𝑚𝑔 𝐴𝐴𝑆 1𝑔 𝒎𝑳

3501952.250
FRAAS=0.0336 𝑚𝑔/𝑚𝐿
= 𝟔𝟗𝟑𝟎𝟒𝟒𝟏. 𝟖𝟐 𝒎𝒍/𝒎𝒈 AAS

3.- ¿Cuál es la concentración de cafeína por mg/tableta?

𝑚𝑔 1746100.756 𝑚𝑔
0.0336 𝐶𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎 × = 0.0400 𝐶𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎
𝑚𝐿 1466028.250 𝑚𝐿
0.0400 𝑚𝑔 𝐶𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎 25 𝑚𝐿 𝑠𝑜𝑙 25 𝑚𝐿 𝑆𝑜𝑙 0.6537 𝑔 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
× × × = 𝟑𝟗. 𝟒𝟎 𝒎𝒈 𝑪𝒂𝒇𝒆í𝒏𝒂/𝒕𝒂𝒃
𝑚𝐿 𝑠𝑜𝑙 2 𝑚𝐿 𝑠𝑜𝑙 0.2074 𝑔 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 1 𝑡𝑎𝑏

4.- ¿Cuál es la concentración del ácido acetilsalicílico por mg/tableta?

𝑚𝑔 3501952.250 𝑚𝑔
0.5053 𝐴𝐴𝑆 × = 0.0400 𝐴𝐴𝑆
𝑚𝐿 2971886.000 𝑚𝐿
0.5904 𝑚𝑔 𝐴𝐴𝑆 25 𝑚𝐿 𝑠𝑜𝑙 25 𝑚𝐿 𝑆𝑜𝑙 0.6537 𝑔 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
× × × = 𝟓𝟖𝟏. 𝟓𝟐 𝒎𝒈 𝑨𝑨𝑺/𝒕𝒂𝒃
𝑚𝐿 𝑠𝑜𝑙 2 𝑚𝐿 𝑠𝑜𝑙 0.2074 𝑔 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 1 𝑡𝑎𝑏

5.- ¿Qué ventajas y desventajas se observó durante la realización de esta práctica por el método
de estándar externo, y el no realizarlo por estándar interno?

Parámetros cromatográficos

Platos teóricos (N)

N=16 (Tr/W)2 =

Factor de retención (k)

K= (Tr-TM)/Tm

Factor de simetría (As)2

As= W0.05/2f

Resolución (Rs)

Rs= 2(Tr2-Tr1)/(W1+W2)
Eficiencia de la comuna (H)

H=L/N

DISCUSION DE RESULTADOS

CONCLUSION

BIBLIOGRAFIA

- Fundamentos de química analítica. Skoog, West, Holler, Crouch. Thomson. 8va edición.
- Análisis instrumental. Kenneth, Judith Rubinson. Prentice Hall. Madrid 2001