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presentes en ambientes metaliferos acidos son diversos, e incluyen bacterias que catalizan
tanto la reduction coma la oxidation de hierro y sulfuro. Ya que estas reacciones de
reduction pueden generar alcalinidad, presentan un interes potential para la remediacion
biologica en AMD. Se piensa que 10s procesos de reduction de ion ferrico y de sulfato-
sulfur0 son importantes en las tierras humedas construidas, que son ampliamente utiliza-
das para la mitigacibn de1 DAM, aunque en la actualidad se desconoce la importancia de
10s microorganismos aciddfilos en estos ecosistemas. Se describen sistemas propuestos para
el procesado de DAM que utilizan poblaciones de bacterias acidofilas reductoras de
sulfato y de hierro inmovilizadas en una serie de bioreactores. La mitigation quimica
conventional (mediante la adicion de alcali y separation de1 voluminoso fango de ion
f&co producido) puede utilizar tambiin acidoftlos inmovilizados (oxidadores de hierro)
para facilitar el paso necesario de oxidation de1 ion ferroso. Se discute ademas la posibili-
dad de usar agentes biologicos (tales coma protozoos acidotilos) para controlar las
bacterias movilizadoras de metales que son responsables de la formation de1 DAM.

Interactions of exopolymers produced by sulphate-reducing bacteria with

metal ions
I. B. Beech and W. S. Cheung
Resumen
El objetivo de1 presente trabajo fue determinar el efecto de especies metales. tales coma Cr,
Ni y MO en el crecimiento en tanques de cultivo y en la production de sustancias exopoli-
mericas (SEP) por dos cepas de bacterias sulfato reductoras (BSR) marinas, aisladas de
material corroido en Portsmouth (Rein0 Unido) e Indonesia. Se estudio mediante espec-
troscopia atomica la capacidad de las SEP liberadas en la fase liquida de1 medio de cultivo
bacteriano para complejar Cr, Ni y MO. Los resultados obtenidos pusieron de manifiesto
que 10s metales influyen tanto sobre el crecimiento de las BSR coma en la production de
exopolimeros y que el efecto de la especie metal sobre el metabolismo depende de1 tipo de
BSR. Se detect6 la presencia de Cr, Ni y MO en las SEP recuperadas de cultivos de 3 dias
de BSR. Aunque las concentraciones de estos elementos en 10s exopolimeros fueron vari-
ables en funcion de la especie metal y de1 aislado de BSR, se comprobb que 10s niveles de
MO asociados con las SEP fueron significativamente superiores a 10s de Cr o Ni, en todos
10s aislados bacterianos estudiados.

Biomass production for the removal of heavy metals from aqueous solutions
at low pH using growth-decoupled cells of a Citvubacter sp.
L. E. Macaskie, C. J. Hewitt, J. A. Shearer and C. A. Kent
Resumen
Una especie de Citrobacter acumula metales pesados mediante la actividad de un tipo de
fosfatasa acida que produce fosfato inorganico, HI’-. Este ligando precipita con metales
pesados (M) coma MHP04, que es retenido en la superficie celular. Se acoplo la deposi-
cion continua de metal a la elimination de metales pesados de una solution cargada de
metales. La fosfatasa mediadora presentaba un pH optima de actividad de 5.0-8.0, con
una retention de la actividad de 7&80% a pH 4.0 y 4.5, respectivamente. A pH 5 se
observe una reduccibn de la acumulacion de metal, debido probablemente a un increment0
en la solubilidad de1 fosfato met&o, y por tanto a una reduction de la precipitation de
dicho fosfato. Sin embargo, esta reduction se super6 mediante la utilization de celulas con
mayor actividad fosfatasa. Asi, una sobreproduccion de enzima de 3.25 veces compensaba
un increment0 de 100 veces en la concentracibn de Hf. Ensayos preliminares permitieron
predecir el increment0 de actividad fosfatasa requerido para tratar un arroyo residual que
contenia ion uranilo a pH 4.5. Se consiguio una sobreproduccion de enzima mediante el
crecimiento de una variante con fosfatasa constitutiva en un medio con lactosa. Sin
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embargo, la actividad de la enzima era reducida a la elevada concentration de fuente de

carbon0 necesaria para alcanzar una alta production de biomasa. Este ultimo requer-
imiento se consiguib, obteniendose adembs un aumento en la production de la enzima,
utilizando un cultivo “fed-batch”, en el que la adicion de sustrato estaba regulada por
retroalimentacion mediante el anilisis de 10s gases que salian de1 sistema. La biomasa
elimino eticientemente el ion uranilo de una solution prueba en un tanque de contacto, a
pH 4.5. Celulas inmobilizadas que crecian sobre lactosa tambien eliminaron ion uranilo de
un agua residual Bcida industrial simulada.

Enzymically-enhanced extraction of uranium from biologically leached

solutions
M. G. Roig, T. Manzano, M. Diaz, M. J. Pascual, M. Paterson and
J. F. Kennedy
Resumen
Gran cantidad de residuos contienen metales pesados que son toxicos y refractarios.
Ademas, la production y descarga de residuos radionucleidos plantea problemas adicio-
nales, debido a sus efectos radiotoxicos sobre la biosfera. En la actualidad, las cuatro
principales formas de aproximacion a este problema son: (i) metodos quimicos directos; (ii)
tratamientos electroquimicos; (iii) cambio ionico y metodos de biosorcibn; (iv) secuestro
intracelular por cklulas microbianas en crecimiento. Una aproximacion hibrida explota las
ventajas de 10s procesos (iii) y (iv) sin presentar ninguna de sus desventajas. En este
contexto, se evaluo un proceso biotecnologico disefiado para eliminar y recuperar metales
pesados de soluciones acuosas a bajo PH. La toma de metal se basa en la deposition
acumulativa in situ de fosfato metalico insoluble unido fuertemente a la superficie celular
de Citrobacter N14. Una elevada carga de fosfato localizado es aportada por la hidrolisis,
catalizada por una fosfatasa, de una molecula de fosfato orgbnico “donadora” atiadida a
la solution de metal, con la consiguiente precipitation de1 metal (M) coma MHP04 unido
a la cklula. En el presente trabajo se informa sobre el potential de esta biomasa microbiana
inmovilizada para la recuperation de uranio presente en el drenaje bide de una mina de la
empresa ENUSA en el tknino de Ciudad Rodrigo (Espafia). Se investigaron una serie de
soportes (organicos e inorganicos) y metodos de inmovilizacion para cklulas de Citro-
batter. Finalmente, se escogieron y caracterizaron biotihns y celulas atrapadas en espuma
de poliuretano y dlulas inmovilizadas covalentemente sobre anillos Rasching de A1203
silanizados y cubiertos con glutaraldehido, valorandose su estabilidad y conveniencia para
su uso a gran escala. Se evaluo el control fisico-quimico y la composition quimica de las
aguas de la mina ENUSA biolixiviadas naturalmente y se desarrollaron metodos mejo-
rados para el analisis por inyeccion por flujo (FIA) de uranio y fosfato inorganico. Los
estudios de optimization de las condiciones operacionales y de funcionamiento de un
bioreactor de flujo de Citrobacter inmobilizado, para la elimination de uranio a 30°C
condujeron a las siguientes conslusiones: (1) se establecio un pH de trabajo de 4.5, en
ausencia de un agente ecomplejante de metales (citrate), (2) es necesaria una relation de
glicerol 2-fosfato/UOz+ de 39 para que tenga lugar una elimination optima de uranio; (3)
la eficiencia de elimination fue de1 50% a una velocidad de flujo de 50 ml/h (tiempo de
residencia de 1 a 4 h).

A systematic study on equilibrium and kinetics of biosorptive accumulation.

The case of Ag and Ni
M. Tsezos, E. Remoudaki and V. Angelatou
Resumen
Se evaluo cuantitativamente la capacidad de captacion biosortiva de 10s metales plata y
niquel por seis cepas seleccionadas de biomasa microbiana, mediante una aproximacion