Capítulo 13

Introducción a la
espectroscopia de absorción
molecular ultravioleta / visible /
cercano Infrarrojo

A = -log T = -logP/P0 = εbC

Medición de la Transmitancia y Absorbancia:

A = -log [Psolución/Pdisolvente]≈ - log [P/Po]

Ajuste a 0%T (ajuste de la corriente oscura)

Ajuste a 100% T (ajuste de las perdidas)

Medicion de la transmitancia de la muestra

Ley de Beer-Lambert

1
 Consideraciones teóricas para la derivación de la ley de Beer

1. El área S debe permanecer constante

2. Debe haber una distribución homogénea de las especies

absortivas en la celda.

3. El único fenómeno involucrado entre la radiación incidente

y las especies absortivas debe ser la absorción de tal
radiación

4. El número de especies absortivas debe permanecer

constante, por lo que el fenómeno de absorción debe ser
rápido así como el proceso por el cual la especie pierda la
energía ganada

5. La absorbancia es una propiedad aditiva

6. La luz incidente debe ser monocromática

Limitaciones (desviaciones) de la Limitaciones Físicas

ley de Beer
A altas concentraciones (>0.01M) la
distancia entre moléculas es pequeña con
lo que algún cambio (ej. carga) en la
Físicas molécula absorbente afectará la capacidad
de absorción de sus vecinos
Químicas
A altas concentraciones se altera el índice
Instrumentales de refracción de la solución con lo que ε
(que depende del índice de refracción)
también varía.

Limitaciones Químicas Limitaciones Químicas

Producidas cuando el analito se disocia,

asocia, o reacciona con el solvente para
producir un producto que tenga diferente
espectro de absorción que el analito. ej.
indicadores ácido / base en los cuales
tenemos el equilibrio: HIn ↔ H+ + In-

2
 Limitaciones
Limitaciones Químicas
Químicas

Limitaciones Instrumentales Limitaciones Instrumentales

Efecto de luz policromática

a). Ancho de banda efectiva
b). Radiación extraña (stray Radiation)

Efecto fotométrico:
producido por ruido instrumental que
aumenta la incertidumbre de la medida a
absorbencias altas y bajas (concentraciones
altas y bajas).

Limitaciones Instrumentales
Limitaciones
Instrumentales

3
 Error Fotométrico Error Fotométrico
Curva de Error
Aún bajo las mejores condiciones, la exactitud de los relativo versus
procesos fotométricos se encuentran limitados tanto a transmitancia
para soluciones
valores de absorbancia altos como bajos. de permanganato
de potasio

Bajas absorbencias: La intensidad de la

radiación incidente y trasmitida es prácticamente A=0.8

la misma. A=0.4343

A=0.2
Altas absorbencias: Poca radiación es trasmitida
y no es posible medirse con exactitud

Error Fotométrico (Gráfica de Ringbom) Error Fotométrico

Error Fotométrico
Error
Fotométrico

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 Efectos del ancho de rendija Efectos del ancho de rendija

Fuentes
Componentes de los instrumentos empleados comúnmente en
espectroscopia de absorción UV/Vis/NIR

Fuente Zona de Selector de Procesador

Detector
de muestra longitudes de de señal y
fotoeléctrico
radiación (celda) onda salida

1) Lámpara de deuterio o 1) Filtros

hidrogeno (UV) 190-300nm
2) Monocromador
2) Lámpara de tungsteno
(Vis/NIR)

1) Celdas de cuarzo, vidrio o 1) Celda fotovoltaica

polímetros
2) Fototubo
2) Probes de fibras ópticas
3) Fotomultiplicadores
3) Celda fotoacústica
4) Diodo de Silicio
Lámpara de Tungsteno (W)
Lámpara de Deuterio

5
 Instrumento de haz sencillo
Tipos de Instrumentos

Haz sencillo

Haz doble
a) “In space”
b) “in time”
Multicanal

Instrumento de haz sencillo

6
 Fuente

Rejilla

Detector

Celda

Instrumento de haz doble “in space”

Lamparas
Rejilla

Celdas

Splitter

Rejilla

NTO
IMIE
MOV

Detectores

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 Beam
Splitter

Instrumento de haz doble “In time”

Instrumento Multicanal Instrumento Multicanal

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 Instrumento Multicanal
Fotómetros
INSTRUMENTOS EMPLEADOS EN LAS MEDICIONES
DE LA ABSORCION MOLECULAR
Instrumento Ventajas
Haz sencillo 1). Mayor paso de energía y
por tanto mejor relación S/R
2). Instrumentos sencillos y
relativamente económicos.
Probe de fibra 3). Compartimiento de
muestra pequeño
Haz doble Producen una señal que
óptica está prácticamente libre de
las fluctuaciones (deriva)
en la fuente y el detector
sin requerir fuentes y
componentes electrónicos
más caros y/o estables.
Arreglo de 1). Obtienen mediciones
Diodo (espectros) rápidamente.
2). Como no tiene partes
móviles y el paso de
energía es grande, la señal
puede ser promediada para
obtener un gran incremento
en la relación S/R
Desventajas
1). Sujeto a fluctuaciones
en la emisión y respuesta
del detector (aún los
computarizados).
2). Relativamente lentos
1). Menor paso de energía
debido al sistema de doble
haz.
2). Relativamente lentos
3). Resolución
relativamente alta
1). Baja resolución . 2 nm
2). Límites de Detección
/cuantificación ligeramente
mayores que los de doble
haz
Diferencias
Toda la radiación proveniente
del selector de largos de onda se
hace incidir sobre la muestra.
El haz de radiación
proveniente del selector de
largos de onda se divide en dos
haces alternados, uno de ellos
pasa por la muestra y el otro por
el blanco, luego ambos haces se
hacen incidir en el detector.
1). Emplea un sistema lineal de
arreglo de diodos (multicanal)
2). La Zona de muestra se
encuentra antes del selector de
largos de onda.
3). El monocromador empleado
no tiene partes móviles.