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Ibarra – Ecuador
2015
UNIVERSIDAD TÉCNICA DEL NORTE
Tesis revisada por el Comité Asesor, por lo cual se autoriza su presentación como requisito parcial
para obtener el Título de:
APROBADA:
...................................................... Directora
2015
ii
ÍNDICE DE CONTENIDOS
CAPÍTULO I …………………………………………………………………….. 1
1 INTRODUCCIÓN ...........................................................................................1
1.1 Objetivo General .......................................................................................4
1.2 Objetivos Específicos ................................................................................4
1.3 Pregunta Directriz.....................................................................................4
2 REVISIÓN DE LITERATURA.......................................................................5
2.1 Lagos tropicales de alta montaña y su entorno..........................................5
2.1.1 Yahuarcocha.......................................................................................6
2.2 Puntos estratégicos y protocolo de muestreo.............................................8
2.3 Fitoplancton ...............................................................................................9
2.3.1 Principales grupos de algas ..............................................................10
2.3.2 Variables físico-químicas y su relación con el fitoplancton ............13
2.4 Evaluación de la interrelación entre las variables físico-químicas del agua
y la composición de la comunidad de algas .......................................................21
2.4.1 Análisis Canónico de Correspondencias (CCA) ..............................22
2.5 Marco legal de la investigación ...............................................................23
2.5.1 Legislación ecuatoriana....................................................................23
3 MATERIALES Y MÉTODOS ......................................................................25
3.1 Materiales ................................................................................................25
3.1.1 Materiales, equipos y reactivos ........................................................25
3.2 Metodología.............................................................................................27
3.2.1 Determinación de puntos estratégicos de muestreo .........................27
3.2.2 Elaboración del protocolo de muestreo ............................................27
3.2.3 Identificación y contabilización del fitoplancton de Yahuarcocha ..30
3.2.4 Evaluación de la variación en la composición de la comunidad de
fitoplancton y su relación con los parámetros físico-químicos ......................35
4 RESULTADOS Y DISCUSIÓN....................................................................38
4.1 Sitios estratégicos de muestreo................................................................38
4.2 Protocolo de monitoreo de fitoplancton para el lago Yahuarcocha ........39
4.2.1 Introducción .....................................................................................40
4.2.2 Objetivo ............................................................................................40
4.2.3 Parámetros a monitorearse ...............................................................40
4.2.4 Ubicación de los puntos de muestreo ...............................................41
4.2.5 Frecuencia de monitoreo ..................................................................41
iii
4.2.6 Materiales y equipo necesarios ........................................................42
4.2.7 Muestreo, cadena de custodia, conservación y análisis de las muestras
43
4.2.8 Aseguramiento y control de calidad.................................................49
Anexo .............................................................................................................50
4.3 Caracterización del fitoplancton, un análisis mensual ............................51
4.3.1 Cianobacterias, género Cylindrospermopsis ....................................55
4.4 Dinámica poblacional del fitoplancton con relación a las características
físico-químicas del lago ....................................................................................57
4.4.1 Análisis de las variables ambientales ...............................................58
4.4.2 Análisis estadístico multivariado (CCA) .........................................61
4.4.3 Lago Yahuarcocha ...........................................................................66
5 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES.............................................68
BIBLIOGRAFÍA....................................................................................................70
ANEXOS................................................................................................................76
iv
ÍNDICE DE TABLAS
v
ÍNDICE DE ILUSTRACIONES
vi
Ilustración 13: Lineas de tendencia del género Cylindrospermopsis y la
profundidad Secchi. Se destaca la correlación negativa existente entre la abundancia
del taxón y los datos de la variable ambiental........................................................64
Ilustración 14: Diagrama completo de ordenación de las interacciones entre los
meses de muestreo y las variables ambientales......................................................65
Ilustración 15: Mapa de ubicación de los puntos estratégicos de muestreo. ........86
Ilustración 16: Tendencias lineales de la Clorofila-b y los contajes mensuales de
Chlorophyta. ...........................................................................................................87
Ilustración 17: Tendencias lineales de la Zeaxantina y los contajes mensuales de
Cyanobacteria.........................................................................................................87
Ilustración 18: Tendencias lineales de la Fucoxantina y los contajes mensuales de
la división Bacillariophyta. ....................................................................................88
Ilustración 19: Tendencias lineales de la Clorofila-a y los contajes totales
mensuales del fitoplancton. ....................................................................................88
vii
1
CAPÍTULO I
1 INTRODUCCIÓN
Con los inicios de la microscopía los estudios de las ciencias ambientales, médicas
y de toda índole evolucionaron y cambiaron esquemas hasta entonces concebidos
como únicos, ciertos e irrefutables. Es gracias a estos adelantos en la ciencia de la
óptica que durante la segunda mitad del siglo XIX, Viktor Hensen -el padre de la
Limnología- estudió las desconcertantes fluctuaciones en las poblaciones de peces
del Mar del Norte, descubriendo la conexión entre el fitoplancton y la luz en las
capas de agua cercanas a la superficie, el recurso nutritivo que proporciona a los
copépodos y otros animales pequeños, así como el valor de éstos como fuente de
alimento para los peces. También fue quien acuñó por vez primera el término
Plancton, que tiene origen griego y significa errante (Reynolds, 2006).
No mucho después de los sucesos antes citados un gran desarrollo de ésta ciencia
tomó lugar principalmente en Europa y Norte América, donde la mayoría de las
investigaciones en la materia se han llevado a cabo. Como consecuencia, el
conocimiento de los ecosistemas acuáticos templados es amplio (Casallas, 2005).
referencia para las investigaciones en nuestro país por dos motivos esenciales: el
primero es la reducida cantidad de información disponible de los lagos en Ecuador
(Casallas, 2005), y la segunda razón son las características geográficas similares
que los dos países poseen, lo que crea ecosistemas comparables.
El lago San Pablo y la laguna de Yahuarcocha son dos grandes lagos eutróficos bien
conocidos, que le han dado a Imbabura el nombre de “Provincia de los lagos”
(Steinitz, 1997). Dicho calificativo es muy conocido a nivel nacional e internacional
repercutiendo en una gran afluencia de turistas a los lagos imbabureños sobre todo
durante los fines de semana. En el caso de Yahuarcocha las actividades turísticas,
agrícolas, de explotación de vegetación, ganaderas, automovilísticas, usos
recreacionales y demás, se dan lugar en todos los ecosistemas conformantes de la
microcuenca del lago, produciendo tensión ecológica que no está debidamente
regularizada. La calidad ambiental de los sistemas ecológicos comprometidos es
afectada y se refleja en los cambios de las características físico-químicas del agua
del lago generando a su vez alteraciones en la biota existente y produciendo
desmedro en el paisaje, objeto de visita y disfrute de miles de turistas cada semana
(GAD-Ibarra, 2012).
lago que no se han estudiado al detalle (GAD-Ibarra, 2012). Aunque el estudio del
estado trófico y la ecología del fitoplancton de Yahuarcocha realizado por Mandonx
(2014), marca un consistente punto de partida en el conocimiento del estado actual,
no muestra los cambios en la comunidad de fitoplancton a través de un periodo
considerable de tiempo. En concordancia con Scheffer (2004) y Rissik & Suthers
(2009), con el aumento del nivel de eutrofización se avizora en los lagos la pérdida
de avifauna acuática, de belleza escénica, la disminución del nivel de agua, el
aumento de turbidez y de biomasa de fitoplancton con repercusiones negativas en
los medios de comunicación, la pesca y la disminución de la afluencia de turistas.
Todos los impactos antes mencionados afectarían a la población cuyos ingresos
económicos dependen del turismo. Debido a esta realidad, la Universidad Técnica
del Norte aunando esfuerzos con el Consejo Interuniversitario Flamenco (Vlaamse
Interuniversitaire Raad/VLIR)- a través del proyecto “Manejo Sostenible de los
lagos del norte del Ecuador, bajo las crecientes actividades económicas y el cambio
climático”, enfocaron sus fortalezas, recursos y talento humano en la generación de
información base de la dinámica poblacional del fitoplancton en Yahuarcocha y en
la elaboración de un protocolo de muestreo que facilitará el monitoreo permanente
del ecosistema lacustre en lo posterior, a la vez, buscando influir en la toma de
decisiones encaminadas al uso racional de los bienes y servicios ambientales que el
lago proporciona.
4
CAPÍTULO II
2 REVISIÓN DE LITERATURA
Para Casallas (2005): “Los lagos tropicales de alta montaña se encuentran entre los
2000 y 4000 metros sobre el nivel del mar” (p.11). Sin embargo, Steinitz (1997)
define un rango altitudinal más preciso (entre 2000 y 3000 m.s.n.m.) en donde
incluye a todos los lagos de meseta interandinos que hay en el Ecuador. Los lagos
interandinos se diferencian de los lagos de páramo no solo en el gradiente altitudinal
6
2.1.1 Yahuarcocha
El nombre del lago viene del Quechua y significa “Lago de Sangre”. Se dice que
las aguas de Yahuarcocha se tornaron rojas con la sangre de más de 30000 hombres
asesinados a manos de los soldados Incas durante una batalla por la conquista del
reino de Quito (Steinitz, 1997).
A pesar del hecho de que el actual Sistema Nacional de Áreas Protegidas (SNAP)
comprende el 14% del territorio ecuatoriano, no garantiza una protección apropiada
para todos los ecosistemas y para la biodiversidad a nivel específico. El
establecimiento de áreas protegidas en ecosistemas biodiversos puede no ser el
enfoque más eficiente en pro de la conservación. La razón para esto es que no todas
las áreas están bajo los mismos niveles de amenaza, por lo tanto no tienen los
mismos riesgos de conservación. La delimitación de las áreas protegidas en el
Ecuador parece haber sido realizada en el pasado a favor de los ambientes húmedos
y ricos en especies, en desmedro de los ambientes secos y con baja biodiversidad
(Steinitz, (1979); Sierra, Campos & Chamberlin, (2002)). Han existido varias
propuestas y acciones encaminadas a frenar la disminución del nivel de agua y en
pro de la recuperación del equilibrio ecológico del lago Yahuarcocha. Tal como lo
describen Erazo y Jaramillo (2005) en su trabajo, se realizó un estudio de impacto
ambiental en el que se evaluaron las repercuciones de la extracción de colla y totora,
el dragado de sedimentos y la siembra-veda de peces. Tal estudio fue llevado a cabo
con la firme intención de remediar el desequilibrio ecológico del lago con la
consecuente mejora paisajística y el fortalecimiento de la actividad turistica. Los
resultados mostraron un balance muy favorable para la puesta en marcha de las
8
2.3 Fitoplancton
El filo Cyanobacteria pertenece al reino Prokaryota, por tanto posee una mínima
organización interna, tal es así que su ADN se encuentra libre en el centro de la
célula sin estar encapsulado dentro de membrana alguna, además carece de
organelos (tales como núcleo, vacuolas y mitocondrias). Es el grupo más estudiado
de algas debido a las implicaciones que tiene en la vida de los humanos. Las
Cianobacterias comparten más semejanzas con las bacterias que con los demás tipos
de algas eucariotas, pues éstas últimas realizan sus funciones celulares por separado
en organelos intracelulares especializados. Se encentran provistos únicamente de
clorofila-a como pigmento fotosintético. Varias especies planctónicas de algas
verde-azules poseen vesículas de gas que pueden llegar a formar agregados
conocidos como vacuolas de gas, observables bajo la luz del microscopio en forma
de puntos oscuros dentro de la célula. Éstas vesículas dotan de flotabilidad a las
células, permitiéndoles moverse en de la columna de agua hacia la superficie en
búsqueda de luz adicional para la fotosíntesis durante el día y mediante el colapso
de las vesículas de gas (por turgencia celular debido al exceso de oxígeno)
descienden al estrato profundo donde se abastecen de los nutrientes cercanos a los
sedimentos, evento que generalmente sucede al caer la tarde. Los heterocistos son
células especializadas en la fijación de nitrógeno, tienden a desaparecer cuando los
niveles de nitrógeno biodisponible son altos. Los acinetos, por su parte, son células
encargadas de la germinación de nuevos individuos, se depositan en los sedimentos
para comenzar una nueva generación de algas cuando las condiciones sean
favorables. Por éstas razones tanto heterocistos como acinetos no siempre son
visibles en las células (Bowling, (2009); Scheffer & van Nes, (2007); van den Hoek,
et al., (1995)).
tamaño y vacuolas acuosas. Pueden estar presentes como células solitarias, colonias
y filamentos, además generalmente sus paredes celulares están compuestas de
celulosa rodeada de una capa de mucílago. Poseen clorofila a y b, así como también
caroteno y xantófilos como pigmentos adicionales. Algunos grupos tienen mucha
movilidad gracias a uno, dos, cuatro o más flagelos. Otros por su parte, constan de
células aplanadas con espinas y otras protuberancias que aumentan su superficie en
contacto con el agua, reduciendo la tasa de hundimiento, mejorando su actividad
fotosintética y actuando como defensa contra sus predadores naturales. Aunque
algunas especies pueden formar blooms en aguas ricas en nutrientes, ninguna es
tóxica (Bowling, 2009).
2.3.1.3 Diatomeas
2.3.1.4 Dinoflagelados
causar problemas para los humanos, taponando los equipos de filtración de agua
por ejemplo. La mayoría de ellos son especies de células solitarias y como su
nombre común lo indica, poseen flagelos que les permite moverse en la columna de
agua de manera muy activa. La forma típica de dinoflagelado consiste de una célula
con un hemisferio superior y un inferior, separados por una ranura que rodea la
célula en su región ecuatorial conocido como cíngulo. Muchas especies, conocidas
como dinoflagelados blindados, tienen placas de celulosa que cubren la totalidad de
la célula. Las placas o tecas son de utilidad para la diferenciación taxonómica, pero
no todos los dinoflagelados las poseen o las tienen muy delgadas (Bowling, 2009).
Las propiedades físicas y químicas del agua varían diaria, estacional y anualmente
debido a los ciclos estacionales naturales, las fluctuaciones diarias en el entorno
físico, mismas que determinan la comunidad planctónica (Suthers, Bowling,
Kobayashi, & Rissik, 2009).
14
Los aniones más abundantes en el agua de los lagos son los bicarbonatos, siendo
los sulfatos, los cloruros y los nitratos menos abundantes. De los cationes, el que
lidera es el calcio seguido del magnesio, sodio y potasio, mismos que provinieron
de la meteorización de las rocas al momento de la formación de los lagos y una
pequeña porción incluso ingresó al sistema gracias a la precipitación. Lampert &
Sommer (2007) señalan que desde el punto de vista biológico los iones más
abundantes no son los más relevantes, por cuanto, los nutrientes esenciales y raros
regulan y limitan la producción biológica. Los fosfatos, sílice, nitratos, amoníaco y
el hierro son ejemplos de los iones que limitan la productividad de los lagos.
Perfiles de oxígeno
Ilustración 3: Concentraciones de oxígeno y temperatura en una distribución vertical idealizada durante las
cuatro principales fases estacionales de un lago oligotrófico y uno eutrófico.
Fuente: Wetzel, 2001.
2.3.2.3 Turbidez
relacionar con el campo visual que poseen los peces cazadores o las aves piscívoras
para alimentarse. El disco Secchi desciende poco a poco dentro de la columna de
agua hasta que, ante la vista del investigador, desaparece. La distancia que ha
recorrido el disco desde la superficie hasta que no se lo distingue se denomina
profundidad Secchi (O'Sullivan & Reynolds, (2004); Scheffer, (2004); Suthers, et
al., (2009)).
Ilustración 4: Atenuación de la irradiancia con la profundidad en cada uno de los tres bloques espectrales.
Fuente: Redibujado de Reynolds por Scheffer, 2004.
2.3.2.4 Temperatura
los lagos continentales las aguas superficiales son calentadas por el sol, proceso que
conjuntamente con la acción del viento crean una capa superficial que puede ser de
2 a 50 m de profundidad (Redden, et al., (2009)).
Para fines de monitoreo de las variables físicas Suthers, Bowling, Kobayashi &
Rissik (2009) proponen medir la temperatura a distintas profundidades en cada
estación de muestreo para evaluar cómo la estratificación vertical puede influir en
las comunidades de plancton. Un perfil vertical de temperatura a lo largo de un
considerable número de sitios permite identificar si el cuerpo de agua está
estratificado horizontal o verticalmente, hecho que pondría en evidencia por
ejemplo, las preferencias térmicas de los diferentes grupos de algas. Es muy
importante el monitoreo de la temperatura porque un aumento súbito puede
exacerbar el crecimiento de cianobacterias, mismas que producen cianotoxinas y
que pueden ser transferidas a niveles tróficos superiores luego de haber sido
consumidas por el zooplancton como la Daphnia (Rissik, et al., (2009)).
Scheffer (2004) señala que en el caso de los lagos poco profundos la estratificación
térmica puede ocurrir en los días soleados. Sin embargo, durante la noche estos
micro-estratificaciones se eliminan y por consiguiente, una estratificación estable
nunca ocurre durante largos períodos. Las termoclinas son efímeras en lagos poco
profundos, por tal motivo no hay punto de no retorno para las particulas que
terminan sedimentandose en el fondo lacustre.
Estos dos parámetros físicos del agua tienen gran interrelación dentro de la ecología
lacustre. El agua es un excelente solvente, lo cual facilita la solubilidad y el
transporte de gases e iones dentro del lago. En el agua de los lagos hay grandes
cantidades de gases disueltos provenientes de la atmosfera. En éste contexto, el
lugar que ocupa el dióxido de carbono es crucial porque aparece disuelto en el agua
tanto en forma gaseosa como química. El equilibrio carbonatos-bicarbonatos-
dióxido de carbono es el principal responsable de la capacidad buffer de un lago,
21
CCA consiste en un método ligero, pero significativo para entender la relación entre
la distribución espacial de la comunidad fitoplanctónica y los factores ambientales
en sistemas lacustres (Shen & Liu, 2009). Barinova & Tavassi (2009), mediante el
uso del CCA y métodos bio-indicadores, identificaron taxones de algas indicadores
de calidad de agua, de contaminación antropogénica y eutrofización. Barinova,
Medvedeva, & Nevo (2008) fueron capaces de obtener información cuantitativa
sobre la relación entre las especies y las variables ambientales. Los cambios en los
grupos taxonómicos dominantes ligados al estado del medio ambiente, a lo largo
del cambio estacional, son evidenciados de manera global y eficaz por el CCA
(Pappas, 2010).
CAPÍTULO III
3 MATERIALES Y MÉTODOS
3.1 Materiales
Frascos Falcon de 15 y 50 ml
Chaleco salvavidas (para muestreo desde embarcación)
Red de Nytal® de 64 µm para filtración del agua
Cilindro Van Dorn tipo Beta de 2,2 litros de capacidad
Cámara de conteo Utermöhl
Cámara de conteo Sedgewick-rafter
Micropipeta
Bote
Filtros de jeringa + elasticos
Pipetas pasteur
Jeringas de 60 y 10 ml con sus respectivas cámaras de filtración
Filtros de fibra de vidrio Whatman GF/F de 25 mm
Puntas de disección
Papel aluminio
Tijeras
Etiquetas autoadhesivas
Cinta adhesiva
Cubetas de cuarzo para mediciones en el fluorímetro
Baldes industriales
Porta y cubre objetos
Material de escritorio
Reactivos
Equipos
3.2 Metodología
Para cada monitoreo se utilizó una lancha a motor, misma que presta el servicio de
recorridos al interior del lago para los turistas. La información general contenida en
la hoja de campo fue llenada (Tabla 7 en los anexos). Un total de 14 tubos Falcon
de 50 ml fueron previamente etiquetados conteniendo la información necesaria
(fecha y número del sitio de muestreo). Se utilizó siempre tubos limpios y además
se verificó que el frasco y la tapa en conjunto ofrezcan un cierre hermético, tal como
CEN (2003) lo recomienda. Se utilizaron 12 tubos correspondientes a los 12 puntos
de muestreo, más dos adicionales en donde se almacenó las muestras de 3 y 6 metros
de profundidad, colectadas en el punto más profundo (punto 9). Una vez ubicado el
equipo técnico provisto de chalecos salvavidas y los aparatos de monitoreo dentro
de la embarcación se procedió de la siguiente manera:
Se colectó agua de la superficie usando la Botella de Van Dorn tipo Beta con
capacidad de 2,2 litros y posteriormente se filtró sobre una Red de Nytal® de
64 µm tal cual lo recomiendan Bellinger y Sigee (2010).
El proceso de filtrado tuvo lugar sobre un balde industrial del cual se extrajo
una muestra de 50 ml con un tubo Falcon previamente etiquetado con el número
del punto de muestreo y la fecha. Estas muestras fueron utilizadas para la
identificación y contabilización del fitoplancton
Un aproximado de 2 litros (el sobrante), fue vertido en otro balde industrial en
donde los sobrantes de las muestras de todos los puntos fueron integrados. Esta
agua fué utilizada en el laboratorio para la determinación de los nutrientes y
pigmentos fotosintéticos.
Tal como la Confederación Hidrológica del Ebro (2005) lo recomienda, los frascos
con las muestras para análisis de fitoplancton fueron colocados en condiciones de
oscuridad tan pronto el monitoreo terminó. Para esto se utilizaron coolers de
espuma flex, en los cuales se colocó tanto los tubos Falcon como las botellas con
agua de la muestra integrada.
Como tercera actividad se saturó 4 filtros Whatman GF/F usando las jeringuillas y
sus cámaras de filtración correspondientes. Luego de haber sido saturados, los
filtros fueron doblados en la mitad con la superficie verde por efecto de la presencia
de algas hacia adentro. Se los envolvió en papel aluminio para su almacenamiento
en condiciones de congelación. Estos filtros fueron enviados posteriormente al
Laboratorio de Ecología Acuática de la Universidad de KU-Leuven en Bélgica,
para el análisis de pigmentos fotosintéticos.
Tal como lo sugiere The British Phycological Society and The Natural History
Museum (2011), se utilizó formaldehído para la fijación de las muestras. A pesar
de que el formaldehido afecta a la salud, causa cambios en las dimensiones de las
células y distorsiona los cloroplastos, todavía se mantiene como el fijador más
usado con propósitos de identificación. Los rangos recomendados de concentración
31
del formaldehido están entre 2,5 y 4,0 %. La concentración más baja produce el
menor daño posible a las células, mientras que la más alta garantiza la conservación
en períodos amplios de almacenamiento. Debido a las propiedades carcinógenas del
formaldehído se tomaron las medidas de seguridad necesarias para su manejo
acorde a lo que Suthers, Bowling, Kobayashi, y Rissik (2009) y CEN (2003)
recomiendan.
Con frecuencia es más fácil identificar la taxonomía de las algas en muestras vivas
que en preservadas. Por tanto, se llevaron a cabo técnicas de visualización en
muestras vivas para la identificación de organismos de movilidad activa que
cuentan con flagelos y otras estructuras delicadas, siguiendo las recomendaciones
de The British Phycological Society and The Natural History Museum (2011).
Una centrifugación suave (a 6000 revoluciones por minuto –rpm- durante un
minuto) permitió que las especies ricas en lípidos o con vacuolas de gas como las
algas verde-azules sedimenten. Posteriormente, utilizando una pipeta Pasteur, se
32
absorbió desde el fondo del tubo de ensayo una pequeña gota de agua con una alta
concentración de algas, garantizando una buena muestra para la identificación.
Ilustración 6: En la interpretación, la especie Spc_2 tendrá la mayor abundancia relativa en la muestra Sa3 y
Sa4 y la menor en la Sa5 (en la cual probablemente es ausente).
Fuente: Lepš & Šmilauer (2003).
Ilustración 7: En la interpretación, Spc_2 tendrá su estado óptimo con respecto a la variable ambiental B
cuando los valores de dicha variable sean mayores, en tanto que para la especie Spc_1 se encuentra una
correlación negativa, pues mientras menores sean los valores de la variable B la especie estará mas cerca de su
estado óptimo.
Fuente: Lepš & Šmilauer (2003).
Ilustración 8: El ángulo entre las dos variables sugiere que casi no existe correlación entre ellas.
Fuente: Lepš & Šmilauer (2003).
38
CAPÍTULO IV
4 RESULTADOS Y DISCUSIÓN
El punto YAH-10 se ubicó cerca del desfogue del lago, lugar en donde también
se registró un importante crecimiento de plantas acuáticas como la Elodea
densa.
El punto YAH-04 fue ubicado como un punto neutral de referencia para la
comparación con los demás puntos.
4.2.1 Introducción
4.2.2 Objetivo
Los trabajos de Blomme (2014), Mandonx (2014), Portilla (2015), Saelens (2015)
y Steinitz (1979) sugieren que la columa de agua de Yahuarcocha se mezcla
constantemente debido, entras otras cosas, a la inexistencia de estratificación
térmica. Esto produce una distribución homogenea en la comunidad de algas, por
tanto el fitoplancton no varía espacialmente. Por estas razones se realizarán
muestreos a orillas del lago solamente, por cuanto no hay necesidad de adentrarse
en el cuerpo de agua para obtener una muestra representativa. Un sitio idoneo para
la toma de muestras se ubicaría cercano al ingreso a la pista, debido a la facilidad
de acceso y la rapidez para el muestreo que el mencionado sitio provee (Figura 1).
Figura 1: Orilla del lago Yahuarcocha situada frente al ingreso del autódromo
Figura 2: Fila superior: equipos a utilizarce. Fila inferior: materiales y reactivo a usarse.
Se tendrá a disposición los suficientes frascos idóneos, los cuales deberán cumplir
varios requisitos que garanticen seguridad para la muestra durante el muestreo,
transporte y almacenaje en el laboratorio. Los tubos o frascos deben ser
identificados antes de la toma de la muestra con una etiqueta a prueba de agua
escrita con letra clara y legible. Varias consideraciones a tomarse en cuenta son las
siguientes:
La información en la etiqueta de los frascos debe contener la fecha, hora, las
letras YAH (para hacer referencia a que proceden del lago Yahuarcocha) y el
nombre del muestreador responsable
Se utilizará tubos Falcon de 50 ml para el almacenaje de las muestras
44
Observaciones:
Debido a la relativa corta distancia que existe entre Yahuarcocha y la UTN, el único
requisito fundamental para trasladar las muestras es ubicarlas dentro de un cooler o
equipaje que ofrezca una restricción total de luz solar. Esto previene la alteración
de las muestras durante el traslado hacia el laboratorio por efecto de la actividad
fotosintética del fitoplancton.
Las muestras deben ser fijadas tan pronto como sea posible para mantener la
representatividad.
El zooplancton que existiere en la muestra no será filtrado
El proceso de fijación se lo realizará en una habitación libre de luz solar y
artificial (en penumbra)
En total, 45 ml de agua del lago estarán presentes en el tubo antes de la fijación.
Se retirará el exceso con ayuda de una pipeta Pasteur. 5 ml de formaldehído al
37% (concentración mas frecuente encontrada en el mercado) serán vertidos
sobre los 45 ml de agua del lago, logrando una concentración de formaldehído
final del 3,7% y un volumen total de 50 ml
46
Con frecuencia es más fácil identificar la taxonomía de las algas en muestras vivas
que en preservadas. Por tanto se sugiere (de ser necesario), realizar técnicas de
visualización en muestras vivas para la identificación de organismos de movilidad
activa que cuentan con flagelos y otras estructuras delicadas. Una centrifugación
suave (a 6000 revoluciones por minuto –rpm- durante un minuto) permite que las
especies ricas en lípidos o con vacuolas de gas como las algas verde-azules
sedimenten. La centrifugación se la realiza en tubos plásticos Falcon de 15 ml.
Posteriormente, utilizando una pipeta Pasteur, se absorbe desde el fondo del tubo
una pequeña gota de agua con una alta concentración de algas, garantizando una
buena muestra para la identificación.
Para la identificación del fitoplancton de agua dulce se toma en cuenta una serie de
características morfológicas tradicionalmente manejadas, mismas que son
expuestas a continuación:
47
Aseguramiento y control de calidad (AC y CC) son parte esencial de todo sistema
de monitoreo. Comprende un programa de actividades (capacitación, calibración de
equipos y registro de datos) que garantizan que la medición cumple normas
definidas y apropiadas de calidad con un determinado nivel de confianza, o puede
ser visto como una cadena de actividades diseñadas para obtener datos fiables y
precisos. Las funciones de control de calidad influyen directamente en las
actividades relacionadas con la medición en campo, la calibración de los equipos
de campo, registro de datos y la capacitación del personal técnico. Para garantizar
el éxito del programa, es necesario que cada componente del esquema del
aseguramiento y control de calidad se implemente de manera adecuada, para lo cual
debe tenerse en cuenta lo siguiente:
Asegurarse que los frascos de muestreos cumplan con los requisitos técnicos
establecidos en el presente protocolo
Crear un respaldo digital y físico de toda la documentación (ficha de campo,
ficha de conteo, etiquetas, oficios, etc)
Es esencial que el personal de campo este capacitado para aplicar las
metodologías estandarizadas y aprobadas
Verificar la curva de calibración del fluorímetro periódicamente, tal como lo
describe el manual del equipo
La correcta limpieza es muy importante para obtener resultados confiables, se
recomienda lavar las cámaras usando soluciones de metanol o etanol seguido
de un enjuague con agua destilada
50
Anexo
7000
6000
Euglenozoa
5000
4000 Dinophyta
3000
2000 Bacillariophyta
1000
Cyanobacteria
0
Chlorophyta
Ilustración 9: Histograma de contajes de las divisiones de algas encontradas en cada muestra mensual.
Fuente: Trabajo de campo y gabinete.
Elaboración: el autor.
Julio merece un párrafo exclusivo. Tuvo la máxima abundancia total de algas (5741
individuos), con un dominio muy marcado de la diatomea Fragilaria (3755
individuos, correspondiente al 65,41% del total mensual). Un importante hecho fue
anotado en las observaciones de la hoja de campo de julio, registrándose actividades
de extracción de colla y totora desde las orillas del lago mediante maquinaria
pesada. La mencionada actividad provocó efectos colaterales como la re-suspensión
de sedimentos y la incorporación de partículas de suelo al agua procedente de las
orillas. La erosión de las áreas circundantes del lago (suelo, rocas, biota, etc.), el
dragado o la limpieza de plantas acuáticas conlleva la adhesión de fosfatos,
carbonatos y silicatos al sistema lacustre además del incremento de la turbidez por
las floraciones algales y la suspensión de sedimentos (O’Sullivan citado en
O'Sullivan y Reynolds, (2004); Scheffer, (2004); Smith et al. citados en Rissik et
al., (2009)). Bellinger y Sigee (2010) detallan los procesos mediante los cuales las
diatomeas toman el silicio disuelto en el agua para aumentar su abundancia
rápidamente, sobre todo en lagos polimícticos (como Yahuarcocha) donde el
mezclado constante permite a las diatomeas realizar la fotosintesis de manera
satisfactoria. Todo parece indicar que la remosión de macrofitas desde la zona
litoral afectó negativamente la dinámica del fitoplancton en este mes.
100%
90% Euglenozoa
80%
70%
60% Dinophyta
50%
40%
30% Bacillariophyta
20%
10%
0% Cyanobacteria
Chlorophyta
Ilustración 10: Histograma de abundancia relativa de las divisiónes de algas ponderadas al 100%.
Fuente: Trabajo de campo y gabinete.
Elaboración: el autor.
54
tasa de crecimiento. No obstante, las opciones más eficaces para reducir las
floraciones de algas en general son las que resultan en menos nutrientes
provenientes de las descargas de escorrentía y aguas residuales que llegan
directamente desde las casas y algunos barcos Rissik, et al., (2009).
Especial atención se debe dar a la población humana y animal que tiene contacto
directo e indirecto con Yahuarcocha. Existen varios estudios que revelan la
agresividad de la CYN en diferentes animales eucarióticos. El cangrejo de río
(Saker & Eaglesham, 1999), el ganado vacuno y los ratones (Saker, Thomas, &
Norton, 1999), son solo pocos ejemplos de animales que tras haber estado expuestos
a la cianotoxina tuvieron graves complicaciones (en dosis no letales) en el hígado,
páncreas, riñón, corazón y el intestino delgado, dejando en estos órganos secuelas
irreversibles típicas de carcinogénesis. Las dosis fueron en muchos de los casos
letales, intoxicaciones que se produjeron de manera accidental en el campo o en
situaciones controladas en laboratorio.
4.4.1.1 Temperatura
La curva de oxígeno que Steinitz (1979) reportó era clinógrada (misma que según
Wetzel (2001) corresponde a un lago con condiciones eutróficas). Los valores de
OD que Portilla (2015) reportó tienen la misma característica clinógrada con
valores cercanos a cero a seis metros de profundidad, hecho que demuestra que aún
con el amplio intervalo de tiempo entre los dos trabajos antes citados el nivel de
eutrofización, lejos de disminuir, se ha mantenido o ha aumentado.
4.4.1.4 pH
4.4.1.5 Turbidez
Los valores promedio de nitrógeno y fósforo fueron 1957,39 µgL -1 y 56,43 µgL-1
respectivamente. La relación nitrógeno-fósforo (N:F) en el presente estudio fue en
promedio de 36:1. La relación más baja fue encontrada en Febrero/2015 y fue de
22:1 aproximadamente, a la vez que la relación más alta (56:1) fue encontrada en
el primer mes, abril/2015. En febrero, la gran tasa de crecimiento de algas verde-
azules pudo haber utilizado mucho del nitrógeno disponible en el agua, y por el
contrario, en abril el nitrógeno pudo haber sido abundante porque las algas tuvieron
contajes muy conservadores. Este comportamiento en particular es docuemntado
por Willis, et al., (2015) quienes hicieron investigaciones puntuales con el género
Cylindrospermopsis encontrando que a mayor disponibilidad de nitrógeno mayor
crecimiento de la cianobacteria en cuestión, con la correspondiente disminución del
elemento en el medio.
Steinitz (1979), reportó que el agua del lago Yahuarcocha es rica en nitratos y
fosfatos. Mandonx (2014) también encontró valores altos de nitrógeno y fósforo,
además precisó que la relación N:F fue de 40:1 con concentraciones promedio de
800 µg L-1 y 20 µg L-1 respectivamente. No obstante, dichas concentraciones son
muy bajas en comparación con las encontradas en éste trabajo.
Los resultados del CCA, mostrados en los diagramas de ordenación que el software
estadístico CANOCO 4.5 para Windows® despliega, tienen muchas especies y
variables ambientales que mostrar. Conforme a lo que Lepš y Šmilauer (2003)
recomiendan, se redujo el número de géneros a mostrarse en favor de aquellas con
alto peso estadístico, con la finalidad de facilitar la visualización de las
interacciones que el estudio revela. Esto fue necesario aún después de que el
software omitiera la mitad de los géneros de algas by default, debido a su baja
incidencia en el análisis estadístico global. Es así que, de los 42 géneros de
fitoplancton identificados y contabilizados a lo largo del año, 21 fueron omitidos
de manera automática por el software y 13 fueron eliminados de los diagramas
mediante una restricción del 0 al 25% del peso estadístico. Los 8 géneros que son
mostrados en los diagramas a continuación, tienen el 75% del peso estadístico total.
Ilustración 11: Diagrama de ordenación de las interacciones entre los géneros de algas y los meses de muestreo.
Se muestran los géneros con pesos estadísticos dentro del rango de 25 al 100%.
Fuente: Análisis Canónico de Correspondencias (CAC) realizado con el software estadístico CANOCO.
Elaboración: el autor.
La dominancia del género Fragilaria, según el CCA (ver Ilustración 12), no tiene
correlación alguna con las variables ambientales que forman parte del análisis
global. Posiblemente, si se hubiera incluido dentro de las variables la concentración
de Silicio en el agua, se hubiera encontrado una correlación positiva con el taxón
antes mencionado.
63
Ilustración 12: Diagrama de ordenación de las interacciones entre los géneros de algas y las variables
ambientales. Se muestran los géneros con pesos estadísticos dentro del rango de 25 al 100%.
Fuente: Análisis Canónico de Correspondencias (CAC) realizado con el software estadístico CANOCO.
Elaboración: el autor.
intensos estudios realizados, la Limnología está todavía muy lejos de poder predecir
qué especies de fitoplancton dominarán y bajo cuáles condiciones (Scheffer & van
Nes, 2007).
2500 0,8
0,7
2000
0,6
1500 0,5
0,4
1000 0,3
0,2
500
0,1
0 0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Ilustración 13: Lineas de tendencia del género Cylindrospermopsis y la profundidad Secchi. Se destaca la
correlación negativa existente entre la abundancia del taxón y los datos de la variable ambiental.
Fuente: Trabajo de gabinete.
Elaboración: el autor.
Ilustración 14: Diagrama completo de ordenación de las interacciones entre los meses de muestreo y las
variables ambientales..
Fuente: Análisis Canónico de Correspondencias (CAC) realizado con el software estadístico CANOCO.
Elaboración: el autor.
Lepš & Šmilauer (2003), verifican los resultados que el diagrama de ordenación
presenta con los efectos marginales y condicionantes obtenidos mediante la
herramienta de forward selection. En el presente estudio el vector de mayor
longitud representa a la profundidad Secchi, es decir, es el factor ambiental que
mayor influencia ejerce en la composición de especies. Este hecho es ratificado con
el cuadro de efectos marginales y condicionales en donde se observa también que
la profundidad Secchi se ubica en la primera ubicación de las tablas (ver Tabla 6).
Yahuarcocha es un lago poco profundo, con una amplia zona litoral; La profundidad
del lago fue medido cerca al centro del mismo y dio como resultado 9 metros
(Steinitz, 1979).
cuantas horas y, a escalas espaciales a menos de cientos de metros. Por tanto, para
la gestión de la calidad del agua se deben tomar acciones de remediación holísticas
y no basadas solamente en una serie de cambios efímeros del fitoplancton.
CAPÍTULO V
5 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
BIBLIOGRAFÍA
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fitoplancton.
76
ANEXOS
Volumen contabilizado: 10 µl
Mes contabilizado Agosto 2014 Diciembre 2014
Género Punto 1 Punto 2 Punto 6 Punto 1 Punto 8 Punto 12
Amphora 0 1 1 0 0 0
Anabaena 4 3 4 7 6 8
Ankistrodermus 1 0 0 0 0 0
Aulacoseira 0 0 0 0 0 0
Chlamydomonas 15 7 17 1 2 1
Chlorella 9 10 10 20 18 22
Chlorogonium 0 0 0 0 0 0
Chroococcus 0 0 0 0 0 0
Coelastrum 0 0 0 0 0 0
Cosmarium 4 3 2 1 1 2
Crucigeniella 0 0 0 0 0 0
Cyclotella 0 0 0 0 0 0
Cylindrospermopsis 166 225 183 527 542 525
Dictyosphaerium 0 0 0 1 2 0
Eudorina 1 3 2 5 9 8
Euglena 0 0 0 0 0 0
Fragilaria 355 359 330 44 39 45
Golenkinia 0 0 2 1 0 0
Gonium 1 0 1 0 0 0
Gymnodinium 0 0 0 3 4 4
Lagerheimia 0 0 0 0 0 0
Melosira 5 3 3 1 2 1
Merismopedia 3 3 0 1 0 3
Micractinium 0 0 0 0 0 0
Microcystis 21 17 31 26 32 24
Monoraphidium 80 48 61 40 48 42
Oocystis 0 1 0 3 3 2
Pediastrum 3 7 1 3 2 3
Peridinium 2 3 1 1 1 1
Phacus 0 0 0 0 2 0
Polyedriopsis 0 0 0 0 0 1
Pseudanabaena 19 12 10 100 104 107
Scenedesmus 21 24 19 12 23 14
Staurastrum 0 1 1 1 2 4
Stauroneis 0 0 0 0 0 0
Synedra 2 0 0 5 3 3
Tetradesmus 0 2 5 5 9 8
Tetraedron 7 5 4 15 6 10
Continúa
78
Termina
Tetrastrum 2 0 2 0 1 1
Trachelomonas 0 0 1 1 7 1
Trigonium 4 5 3 4 4 3
Westella 1 6 5 9 7 6
TOTAL 726 748 699 837 879 849
Diciembre
Septiembr
Noviembr
Octubre
Febrero
Marzo
Agosto
Enero
Mayo
Junio
Abril
Julio
GENERO \ MES
e
Chlorophyta
Ankistrodermus 1 0 1 4 2 0 0 2 1 0 0 0
Chlamydomonas 23 46 65 78 63 83 100 105 41 55 79 39
Chlorella 107 53 64 79 76 105 86 110 68 45 85 25
Chlorogonium 0 0 4 5 0 23 6 20 7 21 12 5
Coelastrum 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 1 1
Cosmarium 7 9 18 18 11 14 6 8 4 4 2 4
Crucigeniella 0 0 6 4 5 3 5 2 2 7 1 6
Dictyosphaerium 0 1 1 3 7 5 7 8 2 0 5 6
Eudorina 1 0 1 4 14 15 24 36 40 44 54 46
Golenkinia 2 4 3 8 4 15 20 16 11 6 4 0
Gonium 0 0 0 0 0 0 1 0 0 2 0 0
Lagerheimia 2 0 0 2 1 0 0 3 0 0 0 0
Micractinium 0 0 1 0 1 7 3 2 3 0 8 0
Monoraphidium 134 839 231 341 911 1023 593 731 620 695 791 636
Oocystis 1 2 8 4 3 21 10 16 22 20 20 16
Pediastrum 14 7 7 18 16 16 15 18 14 10 4 12
Polyedriopsis 0 0 0 1 0 0 1 0 1 0 1 0
Scenedesmus 60 57 55 69 90 120 121 152 78 100 83 64
Staurastrum 1 0 3 3 1 2 7 10 5 2 4 3
Tetradesmus 0 4 4 0 14 3 12 13 11 24 12 27
Tetraedron 38 22 20 40 33 46 56 56 57 19 41 39
Tetrastrum 1 0 1 5 5 6 7 2 1 1 3 1
Westella 2 3 0 8 2 13 11 10 21 13 5 8
Cyanobacteria
Anabaena 45 27 21 9 8 31 20 32 38 14 11 3
Chroococcus 14 27 3 9 11 8 3 24 0 2 4 2
Cylindrospermopsis 92 110 269 552 678 1069 1188 1663 2240 2161 2031 1671
Merismopedia 3 8 7 15 9 6 5 8 4 5 0 2
Microcystis 122 144 251 373 133 259 297 452 143 49 39 34
Pseudanabaena 0 110 396 235 66 70 112 239 775 2046 583 549
Continúa
80
Termina
Dinoflagellata
Gymnodinium 1 6 3 11 1 14 3 10 2 7 3 1
Peridinium 16 9 16 14 3 13 10 28 12 11 8 9
Euglenozoa
Euglena 0 0 0 5 1 3 12 2 7 9 8 0
Phacus 0 0 1 1 4 0 3 1 1 1 0 0
Trachelomonas 1 0 6 8 4 1 2 5 0 0 0 1
Bacillariophyta
Amphora 0 1 0 0 0 2 2 0 0 0 0 0
Aulacoseira 4 1 1 2 0 1 2 2 3 1 1 2
Cyclotella 1 0 0 3 1 1 0 2 0 0 0 0
Fragilaria 3 42 622 3755 1488 806 172 200 174 129 155 109
Melosira 20 6 3 10 10 18 21 10 9 11 6 15
Stauroneis 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1
Synedra. 8 11 22 20 1 16 19 16 30 20 9 17
Trigonium 6 13 16 25 10 22 27 31 23 12 13 13
TOTAL 730 1562 2131 5741 3687 3860 2989 4045 4470 5546 4086 3367
Nitrógeno (µg/L)
Conductividad
Fósforo (µg/L)
Temperatura
Profundidad
Secchi (m)
(µs/cm)
(mg/l)
(°C)
pH
Chlorophyta
Coelastrum sp. 0,25
Cosmarium sp. 31,25
Crucigeniella sp. 0,75
Dictyosphaerium sp. 3,25
Lagerheimia sp. 0,75
Monoraphidium sp. 0,75
Oocystis sp. 5,50
Pediastrum sp. 2,50
Scenedesmus sp. 4,75
Staurastrum sp. 0,25
Tetraedron sp. 7,00
Tetrastrum sp. 2,75
Westella sp. 0,25
Género desconocido 2,75
Cianobacteria
Género desconocido 0,50
Spirulina sp. 1,50
Dinophyta
Ceratium sp. 0,25
Gymnodinium sp. 1,25
Peridinium sp. 1,50
Euglenophyta
Euglena sp. 0,75
Phacus sp. 0,25
Heterokontophyta
Aulacoseira sp. 4,25
Cocconeis sp. 7,50
Cyclotella sp. 10,00
Fragilaria sp. 0,25
Nitzschia sp. 9,00
Rhopalodia sp. 0,25
Tabla 14: Generos de algas presentes en Yahuarcocha en Agosto 2013.
Fuente: (Mandonx, 2014).
Elaboración: el autor.
84
Contaje
Familia
Género
Orden
Clase
#
Bacillariophyta
1 Naviculales Stauroneidaceae Stauroneis 1
Bacillariophyceae
2 Thalassiophysales Catenulaceae Amphora 5
3 Aulacoseirales Aulacoseiraseae Aulacoseira 20
Coscinodiscophyceae
4 Melosirales Melosiraceae Melosira 139
5 Fragilaria 7655
Fragilariophyceae Fragilariales Fragilariaceae
6 Synedra 189
7 Biddulphiales Biddulphiaceae Trigonium 211
Mediophyceae
8 Thalassiosirales Stephanodiscaceae Cyclotella 8
Chlorophyta
9 Chlamydomonadaceae Chlamydomonas 777
10 Goniaceae Gonium 3
Chlamydomonadales
11 Haematococcaceae Chlorogonium 103
12 Volvocaceae Eudorina 279
13 Pediastrum 151
Hydrodictyaceae
14 Tetraedron 467
15 Neochloridaceae Golenkinia 93
16 Chlorophyceae Coelastrum 3
17 Scenedesmus 1049
18 Sphaeropleales Scenedesmaceae Tetradesmus 124
19 Tetrastrum 33
20 Westella 96
21 Ankistrodermus 11
Selenastraceae
22 Monoraphidium 7545
23 Sphaeropleales Polyedriopsis 4
24 Cosmarium 105
Conjugatophyceae Desmidiales Desmidiaceae
25 Staurastrum 41
26 Chlorella 903
27 Chlorellaceae Dictyosphaerium 45
28 Micractinium 25
Trebouxiophyceae Chlorellales
29 Crucigeniella 41
30 Oocystaceae Lagerheimia 8
31 Oocystis 143
Cyanobacteria
32 Chroococcaceae Chroococcus 107
Cyanophyceae Chroococcales
33 Microcystaceae Microcystis 2296
85
4,5 1600
4 1400
3,5 1200
3
1000
2,5
800
2
600
1,5
1 400
0,5 200
0 0
Clorofila-b Chlorophyta
Lineal (Clorofila-b) Lineal (Chlorophyta)
10 4500
9 4000
8 3500
7 3000
6
2500
5
2000
4
3 1500
2 1000
1 500
0 0
Zeaxantina Cyanobacteria
Lineal (Zeaxantina) Lineal (Cyanobacteria)
12 4500
4000
10
3500
8 3000
2500
6
2000
4 1500
1000
2
500
0 0
Fucoxantina Bacillariophyta
Lineal (Fucoxantina) Lineal (Bacillariophyta)
Ilustración 18: Tendencias lineales de la Fucoxantina y los contajes mensuales de la división Bacillariophyta.
Fuente: Trabajo de gabinete.
Elaboración: El autor.
7000 30,000
6000 25,000
5000
20,000
4000
15,000
3000
10,000
2000
1000 5,000
0 0,000
Ilustración 19: Tendencias lineales de la Clorofila-a y los contajes totales mensuales del fitoplancton.
Fuente: Trabajo de gabinete.
Elaboración: El autor.