Dr.

Edwin Julio Cóndor Salvatierra Biología General

GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO N0 06

MICROSCOPIA

I. OBJETIVO

- Realizar preparados microscopios directo o en fresco de muestras

frescas
- Manejar el microscopio óptico de manera correcta

II. FUNDAMENTO TEÓRICO

Desde el siglo XVII en que Antonio Van Leenwenhook, conjuntando y

dando soporte a una serie de lentes que el mismo pulía, logro observar
pequeños organismos, por lo cual se le considera el inventor del primer
microscopio.
Con el correr del tiempo la biología avanza a pasos agigantados para lo
cual se inventa nuevos microscopios que permita un mejor aumento, es
así que desde una simple lupa se ha llegado a la construcción del
microscopio electrónico que tiene un gran poder de resolución, que no
presenta el actual microscopio compuesto. Es por eso que ahora ya se
estudia las ultra estructuras y se habla de Biología Celular o Molecular.
La palabra microscopio deriva de voces griegas: MICRO; que significa
pequeño; y SKOPEIN; que significa observar; este es un instrumento que
sirve para observar objetos de pequeño tamaño.

PARTES DEL MICROSCOPIO COMPUESTO

- Sistema óptico
o OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la
imagen del objetivo.
o OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la
imagen de ésta.
o CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre
la preparación.
o DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el
condensador.
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o FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

- Sistema mecánico
o SOPORTE: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o
base y el brazo.
o PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación.
o CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser
monocular, binocular,
o REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite,
al girar, cambiar los objetivos.
o TORNILLOS DE ENFOQUE: Macrométrico que aproxima el
enfoque y micrométrico que consigue el enfoque correcto.

PODERES DEL MICROSCOPIO

Poder de Definición: Es la capacidad que tiene el objetivo para formar
imágenes claras de contornos nítidos.
Poder de Penetración: Es propiedad del objetivo de permitir observar
varios planos del preparado con una misma posición de enfoque.
Poder de Resolución: Es la Facultad del objetivo de distinguir los más
finos detalles de estructura y ligeros contrastes de índice de refracción.

CUIDADOS, USOS Y MANTENIMIENTO DEL MICROSCOPIO

El microscopio es un instrumento delicado y es el más valioso del
laboratorio cuya conservación exige que se trate cuidadosamente.
- Mientras no se use debe quedar guardado en su caja-armario.
- Para sacar de su caja se cogerá con una mano por el brazo del
microscopio y con la otra mano por la base.
- El microscopio se coloca a 10 cm. del filo de la mesa.
- Cuando se desea cambiar de objetivo de menor a mayor aumento
solo se gira el revólver, teniendo cuidado de no chocar con el
preparado encuentra en la platina.
- Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor
aumento en posición de observación, asegurarse de que la parte
mecánica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo
cubierto con su funda.
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- Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo

cubierto con su funda para evitar que se ensucien y dañen las lentes.
Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja
dentro de un armario para protegerlo del polvo.
- Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian,
limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un
papel de óptica.
- No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está
utilizando el microscopio.
- Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite
que queda en el objetivo con pañuelos especiales para óptica o con
papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasará el
papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha
llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una
mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este
tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se
pueden dañar las lentes y su sujeción.
- No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico,
micrométrico, platina, revólver y condensador).
- El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre
la mirada a la preparación para prevenir el roce de la lente con la
muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrándolo por el tubo del
mismo ni hacerlo mientras se está observando a través del ocular.
- Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama
sobre ella algún líquido, secarlo con un paño. Si se mancha de aceite,
limpiarla con un paño humedecido en xilol.

III. MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

Portaobjetos, tela para limpieza y secado, cubreobjetos, un gotero, tijera,

una hoja de revista y microscopio óptico.

IV. PROCEDIMIENTOS

MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO

Dr. Edwin Julio Cóndor Salvatierra Biología General

- Limpiar el portaobjeto y cubreobjeto en la forma que le indica el

profesor
- Colocar una gota de agua en el centro del mismo.
- Cortar la letra "a" minúscula y colocarla en la gota de agua, luego
protegerla con el cubreobjeto.
- Evite la formación de burbujas de aire en esta preparación. Este
procedimiento es el de un PREPARADO MICROSCÓPICO DIRECTO
O EN FRESCO.
- Observar el preparado microscópico y realiza un esquema de la letra
"a" tal como aparece en el portaobjeto.
- Luego el preparado en fresco, colóquelo sobre la platina del
microscopio y acomodar la muestra (letra “a” en posición de lectura)
en la abertura central de la platina.
- A continuación enfocar con el objetivo de menor aumento, y gire el
tornillo único de mando hasta que la letra "a" se observe con toda
claridad.
- Ahora realice lo siguiente:
a) Describa la imagen y la orientación de la letra "a"
b) Mueva el portaobjeto hacia adelante. ¿En qué sentido se observa
que se mueve la letra "a"?.
c) Mueva el portaobjeto hacia la izquierda. ¿En qué sentido se
observa que se mueve la letra’ "a".
d) Ahora cambie el objetivo de mayor aumento. Para esto gire con
cuidado el revólver para colocarlo en su lugar el objetivo.

Aviso. Tener en cuenta el siguiente esquema durante los dibujos

microscópicos.

ESQUEMA DE LOS DIBUJOS MICROSCÓPICOS

OBJETIVO :
AUMENTO TOTAL:
DESCRIPCIÓN :