Professional Documents
Culture Documents
Kesht
Kesht
آب:
ویفیت ٔحیظ ٞبی وكت ثغٛض ٔؿتمیٓ ثؿتٍی ث ٝویفیت ٔٛاز ذبْ ٔٛضز اؾتفبز ٜزض تٟی ٝآٟ٘ب زاضز .آة یىی اظ
ٕٟٔتطیٗ ٔٛازی اؾت و ٝزض تٟیٔ ٝحیظ ٞبی وكت ثىبض ٔیطٚز .ؾٔ ٝؼیبض ٔ ٟٓثطای آة ٔٛضز اؾتفبز ٜزض تٟیٔ ٝحیظ
ٞبی وكت قبُٔ ٚخٛز یٟ٘ٛبی ٔؽ ،لسضت ٞسایت اِىتطیىی ٔ pH ٚی ثبقس .زض قطایظ ایس ٜآَ یٟ٘ٛبی ٔؽ ثسِیُ
ذبنیت ٟٔبضوٙٙسٌی ثطای اغّت ٔیىطٚاضٌب٘یؿٓ ٞب ٘جبیس زض آة ٔٛضز اؾتفبز ٜخٟت تٟیٔ ٝحیظ ٞبی وكت ٚخٛز
زاقت ٝثبقس .لسضت ٞسایت اِىتطیىی آة ثبیس وٕتط اظ ٔ 15یىط ٚظیٕٙؽ ثبقس ٕٞٚچٙیٗ pHآة ٔٛضز اؾتفبز ٜثٟتط
عجك زؾتٛضاِؼُٕ تٟیٔ ٝحیظ وكت و ٝثط ضٚی لٛعی ٘هت ٌطزیس ٜاؾتٔ ،مساض ٔٙبؾجی اظ پٛزض ٔحیظ وكت ضا
ثب زلت ٚظٖ ٕ٘بییس .ظطف ٔحیظ وكت ضا زٚض اظ وٛضاٖ ٛٞا ٚضعٛثت ثبظ وٙیس .اظ اؾتٙكبق پٛزضٞب ث ٝذهٛل
آٟ٘بیی و ٝزاضای ٔٛاز ؾٕی ٞؿتٙس ٚتٕبؼ عٛال٘ی ٔست آٟ٘ب ثب پٛؾت اختٙبة وٙیس .پٛزض ضا ث ٝؾطػت ،ث ٝزلت
ٚثس ٖٚایدبز تٛز ٜای اظ غجبض ٚظٖ وٙیسٞ .طچ ٝظٚزتط زضة ظطف ضا ثجٙسیس.
٘هف حدٓ آة ٔٛضز ٘یبظ ضا زاذُ ظطف ثطیعیس .ؾپؽ ٔمساض ٚظٖ قسٔ ٜحیظ وكت ضا ث ٝآٖ اضبفٕ٘ ٝبییس .ثطای
چٙس زلیم ٝث ٝتٙسی تىبٖ زٞیس .ثبلیٕب٘س ٜآة ضا ث ٝزیٛاض ٜظطف ثطیعیس تب شضات ٔحیظ وكت چؿجیس ٜث ٝزیٛاضٜ
٘یع ٚاضز ٔحّ َٛق٘ٛس .ایٗ ٔطحّ ٝثؿیبض ٔ ٟٓاؾت ،چ ٖٛپٛزض ذكه ٔحیظ وكت زض ثبالی ؾغح آةٕٔ ،ىٗ
ٔحیظ ٞبی وكت ثس ٖٚآٌبضٔ ،ؼٕٛال ثب تىبٖ زازٖ آٞؿتٔ ٚ ٝالیٓ حُ ذٛاٙٞس قس .أب ٔحیظ ٞبی وكت حبٚی
آٌبض ثبیس لجُ اظ حطاضت زازٖ ثٔ ٝست چٙس زلیم ٝثب آة ٔرّٛط ق٘ٛس .ؾپؽ حطاضت زاز ٜق٘ٛس تب آٌبض لجُ اظ
اتٛوال ٚوطزٖ ،حُ قٛزٔ .حیظ ٞبی وكت ضا ثدٛقب٘یس ثس ٖٚآ٘ى ٝثؿٛظ٘س.
ٔحیظ ٞبی وكتی و٘ ٝجبیس اتٛوال ٚق٘ٛس ،ثؼس اظ ایٗ ٔمساض حطاضت زازٖ ،ثطای تمؿیٓ زاذُ پّیت ٞب یب ظطٚف
زیٍط آٔبز ٜذٛاٙٞس ثٛز .اوثط ٔحیظ ٞبی وكت ث ٝاؾتطیّیعاؾیٟ٘ ٖٛبیی (زض زٔبی 121° Cثٔ ٝست 15زلیم)ٝ
ٔحیظ ٞبی وكت زٞیسضات ٝاٌط ثغٛض ٔٙبؾت تٟی ٝق٘ٛس ٘یبظی ث ٝتٙظیٓ ٘ pHساض٘سٟ٘ pH .بیی ٔحه َٛاؾتطیُ
قس ٜضا ٔی تٛاٖ ضٚی پّیت یب ثغطی ا٘ساظٌ ٜیطی وطز ،أب ثبیس آٟ٘ب ضا ثؼس اظ ؾٙدف pHزٚض ضیرت .ثٙبثطایٗ ثؼس
ٔ ،25° Cمساض pHضا زض حس ٔٛضز ٘ظط ( )± 0/2تٙظیٓ اظ اؾتطیُ قسٖ ٚذٙه قسٖ ٔحیظ وكت تب زٔبی
ٕ٘بییس .تٙظیٓ ٔ pHؼٕٛال ثب اؾتفبز ٜاظ ٞیسضٚوؿیس ؾسیٓ ٌ 40طْ زض ِیتط (تمطیجب " یه ٔٛالض) ٚیب ثب اؾتفبز ٜاظ
تَسيع:
ٔحیظ وكت ضا زض ظطفی ٔٙبؾت ثب حدٓ 2تب 3ثطاثط حدٓ ٔحیظ وكت ثطیعیس تب ثتٛا٘یس آ٘طا ث ٝذٛثی تىبٖ
استزيليشاسيَى:
ثؼضی اظ ٔحیظ ٞبی وكت ث ٝاؾتطیّیعاؾی ٖٛثب اتٛوال ٚاحتیبخی ٘ساقت ٚ ٝثب خٛقب٘سٖ اؾتطیُ ٔی ق٘ٛس وٝ
زؾتٛض ؾبذت آٟ٘ب ثط ضٚی ثطچؿت لٛعی ٔحیظ وكت لیس ٌطزیس ٜاؾت .اؾتطیّیعاؾی ٖٛؾبیط ٔحیظ ٞبی وكت
تٛؾظ حطاضت ٔطعٛة یب نبفی غكبیی ا٘دبْ ٔی ٌطزز و ٝایٗ ٔٛاضز ٘یع ثط ضٚی ثط چؿت لٛعی ٔحیظ وكت لیس
ٌطزیس ٜاؾت.
15زلیم ٚ ٝزض زٔبی ( 121° Cفكبض اؾتطیّیعاؾیٔ ٖٛحیظ وكت تب حدٓ یه ِیتط ،زض اتٛوال ٚثٔ ٝست
1/2ویٌّٛطْ ثط ؾب٘تیٕتطٔطثغ) ا٘دبْ ٔی ٌیطز .ثطای حدٓ ٞبی ثیكتط اظ یه ِیتط ثبیس چطذٝ
اؾتطیّیعاؾی ٖٛضا ثغٛض ٔٙبؾت تغییط زاز .أب چ ٖٛاوثط ٔكىالت زض اؾتطیّیعاؾیٔ ٖٛحیظ ٞبی وكت ٚلتی
ضخ ٔیسٞس ؤ ٝمبزیط ثیكتط اظ زِ ٚیتط ٔحیظ وكت ثبیس اؾتطیُ قٛزِ ،صا تٛنیٔ ٝی قٛز ؤ ٝمبزیط ظیبز
ثطای وٙتطَ اتٛوال ٚاظ وٙتطِی ویفی اتٛوال ، ٚوٙتطَ زٔب ٚفكبض اتٛوال ٚثبیؿتی ثغٛض ٔسا ْٚا٘دبْ ٌطزز.
ا٘سیىبتٛضٞبی قیٕیبئی TSTاؾتفبزٔ ٜی وٙٙس .اظ ا٘سیىبتٛضٞبی ثیِٛٛغیىی و ٝخٟت وٙتطَ وبضائی اتٛوالٚ
اؾتفبزٔ ٜی وٙٙس اؾپٛض Bacillus Stearothermophilusضا ٔی تٛاٖ ٘بْ ثطز و ٝثهٛضت تدبضی لبثُ
زؾتطؼ ٔی ثبقس.
اظ نبفی غكبیی ثطای اؾتطیُ وطزٖ ٔحیظ ٞبی وكت ٚتطویجبت حؿبؼ ث ٝحطاضت اؾتفبزٔ ٜی قٛز.
اؾتطیّیعاؾی ٖٛثٛؾیّ ٝنبفی غكبیی تحت قطایظ ذالء یب افعایف فكبض ا٘دبْ ٔی پصیطز .اظ غكبء ٞب ٚ
نبفیٟبی ثب لغط ٔٙفص 0/22یب ٔ 0/45یىطٔٚتط اؾتفبزٕ٘ ٜبییس .ایٗ فیّتطٞب ثبیس لجُ اظ اؾتفبز ،ٜزض اتٛوالٚ
اؾتطیُ ق٘ٛس .زض ٔٛضز غكبء ٞب ٚنبفیٟبیی و ٝزض ثؿت ٝثٙسیٟبی اؾتطیُ ث ٝفطٚـ ٔی ضؾٙس ،ثٝ
زؾتٛضاِؼُٕ ؾبظ٘سٔ ٜطاخؼٕ٘ ٝبییس .لؿٕت ٞبی ٔرتّف زؾتٍب ٜنبفی ضا ثب نبفی یب ثس ٖٚنبفی زض اتٛوالٚ
50° Cثطؾس ،ؾپؽ ثب ضػبیت قطایظ آؾپتیه ثؼس اظ اؾتطیّیعاؾی ،ٖٛاخبظ ٜزٞیس زٔبی ٔحیظ وكت ث ٝحسٚز
50° Cتمؿیٓ ٘ىٙیسٔ .ىُٕ ٞبی زض ظطٚف ٟ٘بیی تمؿیٓ ٕ٘بییسٞ .یچ ٚلت ٔحیظ وكت ضا زض زٔبی ثبالتط اظ
حؿبؼ ثٌ ٝطٔب ٚحطاضت ثبیس ثؼس اظ ایٗ و ٝزٔبی ٔحیظ وكت ث ٝحسٚز 50° Cضؾیس ،ث ٝآٖ اضبف ٝق٘ٛس .اخبظٜ
زٞیس زٔبی ٔىُٕ (ؾبپّٕٙت) اؾتطیُ لجُ اظ ایٗ و ٝثٔ ٝحیظ وكت اضبف ٝقٛز ،ث ٝزٔبی اتبق ثطؾس .ؾپؽ
ٔىُٕ ضا ثب ضػبیت قطایظ آؾپتیه ثٔ ٝحیظ وكت اضبفٕٛ٘ ٝز ،ٜذٛة ٔرّٛط وٙیس ٚزض ظطٚف ٟ٘بیی و ٝاظ لجُ
پتزی ديص:
ویفیت پتطی زیف ٞبی ٔٛضز اؾتفبز ٜزض تٟیٔ ٝحیظ ٘یع إٞیت زاضزٔ .ؼٕٛالً پتطی زیف ٞب ضا ضا ثب اتیّٗ اوؿبیس ٚیب
اقؼٌ ٝبٔب اؾتطیُ ٔی وٙٙس .زض نٛضت اؾتفبز ٜاظ پتطی زیف ٞبیی و ٝثب اتیّٗ اوؿبیس اؾتطیُ قس ٜثبقٙس ثبیؿتی اظ
٘ظط ٚخٛز ثمبیبی ایٗ ٔبز ٜثطضؾی قٛز ظیطا اتیّٗ اوؿبیس زاضای ذبنیت ٟٔبض وٙٙسٌی ثطای ٔیىطٚاضٌب٘یؿٓ ٞب ٔی ثبقس
زض نٛضت اؾتفبز ٜاظ ٔ ٚی تٛاٖ آٖ ضا ثب ضٚـ وطٔٚبتٌٛطافی ا٘ساظٌ ٜطفت.
پتطی زیف ٞبی قیك ٝای ثبیؿتی اظ پتطی زیف ٞبیی اظ خٙؽ ثطٚؼیِیىبت اؾتفبز ٜوطز .اؾتفبز ٜاظ پتطی زیف ٞبیی
اظ خٙؽ لّیبئی ٕٔىٗ اؾت ٔٛخت آظاز ؾبظی لّیب زض زاذُ ٔحیظ وكت ٌطزز.
پاراهتزّای فيشيکی:
ٔحیظ وكت ٞبی تٟی ٝقس ٜثبیس لجُ اظ اؾتفبز ،ٜاظ ِحبػ فیعیىی ٚظبٞطی ٘یع ثطضؾی ق٘ٛسٔ .ؼیبضٞبی ظبٞطی لبثُ
ثطضؾی قبُٔ ٚخٛز حجبة ،حفط٘ ،ٜبنبفی ؾغح ٔحیظ ،تطن ذٛضزٌی ،ید ظزٌی ٔی ثبقس .ضربٔت ٔحیظ ٘یع إٞیت
زاضز .ضربٔت ٔحیظ ٞبی وكت پّیتی ٘جبیس وٕتط اظ ٔ 3یّی ٔتط ثبقس.
ع َٛػٕط ٔحیظ ٞبی وكت تٟی ٝقس ٜثؿتٍی ثٛ٘ ٝع اخعا ء تكىیُ زٙٞسٔ ٜحیظ٘ ،حٍٟ٘ ٜٛساضی ٚشذیط ٜوطزٖ آٟ٘ب
زاضز .تٕبٔی ٔحیظ ٞبی وكت ثبیس زٚض اظ ٘ٛض ٍٟ٘ساضی ق٘ٛس .تبثف ٘ٛض ثٔ ٝحیظ ٞبی وكت ٔٛخت تكىیُ ٔٛاز
ثبوتطیٛؾتبتیه ٚثبوتطیؿبیس ٔب٘ٙس پطاوؿیساظ ٔی ٌطزز .ع َٛػٕط اغّت ٔحیظ ٞبی وكت پّیت ی زض زٔبی 4زضخٝ
ؾب٘تیٍطاز یه ٞفتٔ ٝی ثبقس ِٚی اٌط زض زاذُ ویؿٞ ٝبی پالؾتیىی ثؿت ٝثٙسی ق٘ٛس ثغٛضیىٛٞ ٝا زاذُ آٟ٘ب ٘فٛش
٘ىٙس تب ٞ 3-4فت ٝلبثُ ٔهطف ٞؿتٙس .ع َٛػٕط ٔحیظ ٞبی وكت حبٚی آ٘تی ثیٛتیه ثؿتٍی ث ٝپبیساضی آ٘تی
ثیٛتیه ٔٛخٛز زض آٖ زاضز .زض ٔدٕٛع ٔحیظ ٞبی حبٚی آ٘تی ثیٛتیه ضا زض ٔست یه ٞفت ٝثبیس ٔهطف وطز .اظ ؾٛی
زیٍط ثب ٌصقت ظٔبٖ ایٔ ٍٝ٘ٛٙحیظ ٞبی وكت ضعٛثت ذٛز ضا اظ زؾت زاز ، ٜثسِیُ افعایف غّظت آ٘تی ثیٛتیه لسضت
8 ا٘تربثی آٟ٘ب افعایف ٔی یبثس .پّیت ٞب ضا ثبیس لجُ اظ ٔهطف ث ٝزٔبی اتبق ضؾب٘س .اٌط پّیت ٔحیظ وكت ثیف اظ
ؾبػت زض زٔبی اتبق ثبلی ثٕب٘س ثطای ٔهطف ٔٙبؾت ٕ٘ی ثبقسٔ .حیظ ٞبی وكت ِ ِٝٛای زض ٔمبیؿ ٝثب ٔحیظ ٞبی
وكت پّیتی ػٕط عٛال٘ی تطی زاض٘س .اغّت ایٗ ٔحیظ ٞبی وكت اٌط زض زٔبی 4زضخ ٝؾب٘تیٍطاز ٍٟ٘ساضی ق٘ٛس 3-6
هَارد استثٌاء :تبیٌّٛیىٛالت ثطاث ،ا٘س٘ َٚیتطات ثطاث SIM ٚفمظ ثٔ ٝست یىٕب ٜلبثُ ٍٟ٘ساضی ٔی ثبقٙسٔ .حیظ
ٞ 6فت ٝلبثُ ٞبی OF Medium ٚ CTA Mediumحبٚی وطثٞٛیسضات ِٛٔ ٚطٞیٙت ٖٛثطاث فمظ ثٔ ٝست
ٍٟ٘ساضی ٔی ثبقٙس.
علت اضکال
ٔی ٌطزز ، حطاضت ثیف اظ حس pH ،پبییٗ وٛٔ ٝخت ٞیسضِٚیع اؾیس زض ٔحیظ وكت ٘طْ ثٛزٖ آٌبض
تٛظیٗ یب ٔرّٛط ٘ىطزٖ زضؾت ،حُ ٖقسٖ وبُٔ آٌبض ،حدٓ ٘بزضؾت آة ،ضلیك ؾبظی ظیبز
ثب ٔبیغ تّمیح یب ٔىُٕ ٞب ٚشذیط ٜؾبظی عٛال٘ی زض زٔبی 50 ºC
اؾتفبز ٜاظ قیكٞ ٝبی لّیبئی ،آة ٘بذبِم ،حطاضت ثیف اظ حس ،آِٛزٌی قیٕیبئی ،ا٘ساظٜ ٘ pHبٔٙبؾت
ٌیطی pHزض زٔبی ٘بٔٙبؾت ،اؾتفبز ٜاظ ٔ pHتط غیطوبِیجط ،ٜاؾتفبز ٜاظ پٛزضٞبی ٔحیظ
وكت ذطاة قس ، ٜشذیط ٜؾبظی ٘بزضؾت ٔحیظ وكت زٞیسضات ٚ ٝویفیت پبییٗ آة یب
ظطٚف
٘بذبِم ثٛزٖ آة ،اؾتفبز ٜاظ قیك ٝآالت وثیف ،اؾتفبز ٜاظ پٛزضٞبی ٔحیظ وكت ذطاة ضً٘ یب تیطٌی غیطعجیؼی
قس ،ٜحطاضت زازٖ ثیف اظ حس ٘ pH ،بٔٙبؾت ،حُ ٘كسٖ وبُٔ ٔحیظ وكت ٚشذیطٜ
حطاضت زازٖ ثیف اظ حس (ؾٛظا٘سٖ ٔحیظ) ،اؾتفبز ٜاظ پٛزضٞبی ٔحیظ وكت ذطاة قس، ٜ ؾٕیت
لطاضٌیطی زض ٔؼطو ٔؿتمیٓ ٘ٛض ذٛضقیس ٚحدٓ ٘بزضؾت ٔىُٕ اضبف ٝقسٜ
اؾتفبز ٜاظ آة ٚیب قیك ٝآالت آِٛز ،ٜاؾتفبز ٜاظ پٛزضٞبی ٔحیظ وكت ذطاة قس ،ٜتٛظیٗ ضقس ضؼیف اضٌب٘یؿٓ یب زاقتٗ
یب ٔرّٛط ٘ىطزٖ زضؾت ،حطاضت ثیف اظ حس ،شذیط ٜؾبظی عٛال٘ی ٔحیظ وكت ،ذكه ذبنیت ضؼیف ا٘تربثی ٚیب
ِرت ٝیب وٛاٌ ِٝٛقسٖ ٔحیظ وكت حطاضت ثیف اظ حس ٔحیظ زض ٍٙٞبْ افعٚزٖ ٔىُٕ ث ٝآٖ
ضٌ ٝضٌ ٝؾیب٘ :ٜیٓ ؾٛظ قسٖ آٌبض ضٌ ٝضٌ ٝقسٖ ٔحیظ وكت
٘ pHبٔٙبؾت٘ ،بذبِم ثٛزٖ آة ،اؾتفبز ٜاظ قیك ٝآالت وثیف ،حُ ٘كسٖ ٔحیظ وكت، ایدبز ضؾٛة یب وسٚضت
ویفیت پبییٗ آة یب ظطٚف ،حطاضت ثیف اظ حس ٚشذیط ٜؾبظی عٛال٘ی زض زٔبی 50 ºC
-ؾٛی ٝوٙتطَ (ٔ :)Control Strainیىطٚاضٌب٘یؿٕی و ٝثطای اضظیبثی ػّٕىطز ٔیىطٚثی ٔحیظ وكت اؾتفبزٔ ٜی
قٛز.
-ؾٛیٔ ٝطخغ (ٔ :)Reference Strainیىطٚاضٌب٘یؿٕی و ٝحسالُ تب ؾغح خٙؽ ٌٝ٘ٛ ٚقٙبؾبیی قس ٚ ٜثط
اؾبؼ ٚیػٌی ٞب ٚتطخیحبً ٔٙكب آٖ ،فٟطؾت ثٙسی ٚتؼطیف قس ٜاؾت.
-شذیطٞ ٜبی ٔطخغ ( :)Reference Stocksوكت ٞبی ثسؾت آٔس ٜاظ پبؾبغ ؾٛیٔ ٝطخؼی و ٝاظ ٔطاوع ثیٗ
-شذیطٞ ٜبی وبضی ( :)Working Stocksوكت ٔدسزی و ٝاظ وكت ٞبی شذیط ٜخٟت وٙتطَ ویفیت ٔحیظ
ٕٝٞؾٛیٞ ٝبی وٙتطَ و ٝزض خس 2 َٚاظ آٟ٘ب ٘بْ ثطز ٜقس ٜاؾتٔ ATCC ،ی ثبقٙس
) .(American type culture collectionایٗ ؾٛقٟب ،حسالُ ؾٛقٟبیی ٞؿتٙس و ٝثبیس ثطای اضظیبثی ٞط
ٔحیظ وكت اؾتفبز ٜق٘ٛس .اضٌب٘یؿٓ ٞبی ٔٛضز اؾتفبز ٜثطای اٞساف وٙتطَ ویفی ْی تٛا٘س اظ ؾٛیٞ ٝبی National
collectionثبقس .ؾٛیٞ ٝبی زیٍطی ٘یع ٕٔىٗ اؾت تٛؾظ ؾبظ٘سٔ ٜحیظ وكت ث ٝوبض ضٚز و ٝقبُٔ ٔدٕٛػ ٝای اظ
ؾٛیٞ ٝبی ٚحكی ( )Wild strainیب ثسؾت آٔس ٜاظ ٕ٘ٞ ٝ٘ٛبی ثیٕبض ٔی ثبقس ؤ ٝرتم ٞط آظٔبیكٍب ٜثٛز ٚ ٜثطای
ٖ.
ا٘دبْ آظٔبیف ٞبی ثیكتط ث ٝوبض ٔی ض ٚز
3-5وّٙی ایع ِٝٚضا زض یه وكت اظ اضٌب٘یؿٓ وٙتطَ ویفی ضٚی پّیت ثالزآٌبض تٟی ٝوٙیس .ثؼس اظ ا٘ىٛثبؾی ٖٛپّیت
ٔمساض وٕی تطیپتیىیؽ ؾٛی ثطاث ) (TSBاؾتطیُ حُ ٕ٘بییز تب ؾٛؾپب٘ؿیٔ ٖٛیىطٚثی حبنُ قٛز ٚآٖ ضا ثطای
چٟبض یب پٙح ؾبػت ا٘ىٛثٕ٘ ٝبییس .ؾپؽ وسٚضت آٖ ضا ثب اؾتب٘ساضز ٘یٓ ٔه فبضِٙس تٙظیٓ وٙیس( .اؾتب٘ساضز ٘یٓ ٔه
ث ٝخبی ایٗ ضٚـ ٔی تٛاٖ ٔؿتمیٕبً اظ وّٙی ٞبی ایع ِٝٚضٚی پّیت ،ؾٛؾپب٘ؿیٔ ٖٛیىطٚثی ٔغبثك ثب وسٚضت ٘یٓ ٔه
فبضِٙس تٟی ٝوطز .ثسیٗ تطتیت و 3-5 ٝوّٙی ایع ِٝٚضٚی پّیت 24ؾبػت ٝضا زض ٔ 3-5یّی ِیتط ؾطْ فیعیِٛٛغی اؾتطیُ
حُ وطز ٚ ٜوسٚضت آٖ ضا ثب ٘یٓ ٔه فبضِٙس تٙظیٓ ٕ٘بییس .ثب ٞط ضٚقی و ٝایٗ ؾٛؾپب٘ؿیٔ ٖٛیىطٚثی تٟی ٝقٛز ،ثبیس
وسٚضتی حبٚی 107-108 CFU/mlوّٙی زاقت ٝثبقسٔ( .غبثك ثب اؾتب٘ساضز ٘یٓ ٔه فبضِٙس).
-1آسهايص ظزفيت هغذی بَدى ( )Nutritional activityهحيط ّای کطت پليتی ٔب٘ٙس ثالز آٌبض
ؾٛؾپب٘ؿی ٖٛاِٚی ٝضا ث٘ ٝؿجت 1بِ 100زض ٘طٔبَ ؾبِیٗ یب آة ٔمغط اؾتطیُ ضلیك ٕ٘ٛزٔ ٚ ٜمساض 10 µlیب 0/01 ml
ؾٛؾپب٘ؿی ٖٛضلیك قس ٜضا ثٔ ٝحیظ وكت ٔٛضز آظٔبیف تّمیح وٙیس .تؼساز وّٙی ٞبی ٔٛضز ا٘تظبض زض ٞط پّیت
(ٔ 103-104 )CFU/plateی ثبقس .ثطای اختٙبة اظ ضقس ظیبز ثبوتطی زض ثؼضی اظ ٔحیغٟبی وكت ا٘تربثی ٕٔىٗ
-2آسهايص ظزفيت هْار کٌٌذگی هحيط ّای کطت اًتخابی پليتی ٔب٘ٙس ٔىب٘ىی آٌبض
10 µlیب ؾٛؾپب٘ؿی ٖٛاِٚی ٝضا ث٘ ٝؿجت 1بِ 10زض ٘طٔبَ ؾبِیٗ یب آة ٔمغط اؾتطیُ ضلیك ٕ٘ٛزٔ ٚ ٜمساض
0/01mlؾٛؾپب٘ؿی ٖٛضلیك قس ٜضا ثٔ ٝحیظ وكت ٔٛضز آظٔبیف تّمیح وٙیز .تؼساز وّٙی ٞبی ٔٛضز ا٘تظبض زض ٞط
پّیت (ٔ 104-105 )CFU/plateی ثبقس .ثطای اختٙبة اظ ضقس ظیبز ثبوتطی زض ثؼضی اظ ٔحیغٟبی وكت ا٘تربثی
ٕٔىٗ اؾت ٘یبظ ثبقس و ٝؾٛؾپب٘ؿی ٖٛز ٜثبض ضلیك تط تٟی ٝقٛز.
ٞط ِ ِٝٛثبیس ثب 10 µlیب 0/01 mlاظ ؾٛؾپب٘ؿی ٖٛاِٚی ٝتٟی ٝقسٔ ٜغبثك ثب ٘یٓ ٔه فبضِٙس (ثس ٖٚضلیك ؾبظی) تّمیح
ٔحیظ ٔٛضز آظٔ ٖٛضا ثؼس اظ تّمیح تحت قطایغی و ٝزض خس 2 َٚآٔس ٜاؾت ،ا٘ىٛثٕ٘ ٝبییس .ث ٝعٛض ٘طٔبَ ظْاٖ
ا٘ىٛثبؾی 18-24 ،ٖٛؾبػت یب 24-48ؾبػت زض زٔبی ٔ 35±2 ºCی ثبقسٔ .حیظ قىالت آٌبض ٚؾبیط ٔحیظ ٞبی
وكت ثطای خساؾبظی ا٘تربثی ٌٞ ٝ٘ٛبی ٘یؿطیبی ثیٕبضیعا ثبیس زض Co2 %5 -10ا٘ىٛث ٝق ٛز
ٖ ٚزض فٛانُ ظٔب٘ی -24
ثطای ثبوتطی ٞبی ثی ٛٞاظی ،وكتٟب ػٕٔٛبً ث ٝحسالُ 48ؾبػت ا٘ىٛثبؾی ٖٛزض قطایظ ثی ٛٞاظی ٚغٙی اظ ٘ Co2یبظ
زاض٘س.
زض ٔٛضز وٕپیّٛثبوتط آٌبض ،پّیتٟب ثبیس زض 42 ºCزض قطایظ ٔیىط ٚآئضٚفیّیه غٙی اظ Co2ثٔ ٝست 48ؾبػت ا٘ىٛثٝ
ق٘ٛس.
اظ ؾٛؾپب٘ؿیٔ ٖٛیىطٚثی ضلیك ٘كس ٜثطای وٙتطَ ایٗ ٔحیغٟب اؾتفبزٔ ٜی وٙیٓ.
پؽ اظ تّمیح ،تٕبْ وكت ٞب ضا زض قطایظ الظْ (اظ ٘ظط ،Co2ضعٛثت ٚیب قطایظ ثیٟٛاظی ٚزضخ ٝحطاضت ٔٙبؾت ) لطاض
زاز ٚ ٜپؽ اظ عی ٔست ظٔبٖ الظْ ( 24تب 48ؾبػت) آٟ٘ب ضا ٔٛضز ثطضؾی لطاض ٔی زٞیٓٔ .حیظ ٞبی ٔٙبؾت زاضای
ضقس وبفی اظ وّٙی ٞبی ثبوتطیٟبی ٔٛضز ٘ظط ٔی ثبـٖز ٚزض ٔٛضز ٔحیغٟبی ا٘تربثی ٟٔبض ٔیىطٚاضٌب٘یؿٕٟبی ٔٛضز ٘ظط
- 1ضعٛثتٔ :حیغٟبی وكت ثبیس ثسٞ ٖٚط ٌ ٝ٘ٛضعٛثت اضبفی ثٛزٕٞ ، ٜچٙیٗ ٞیچ ٘كب٘ ٝای اظ ذكه قسٖ اعطاف
ضً٘ٔ :حیغٟبی وكت آٌبض ذ٘ٛساض ٘جبیس ٞیچ ٘كب٘ ٝای اظ ِٕٛٞیع زاقت ٝثبـٖز ٔ ٚحیغٟبی وكت زیٍط ٖثبیس ٞیچٍٝ٘ٛ
بزرسی آلَدگی هحيط ّای کطت (استزيل بَدى هحيط ّای کطت):
%3-5 زض نٛضتیى ٝتؼساز پّیت یب ِ ِٝٛتٟی ٝقس ٜزض ٞط ؾطی ؾبذت یب 100 ،Lotػسز یب وٕتط ثبقس ،ثبیس ث ٝتؼساز
،100 ٔحیظ ٞبی تٟی ٝقس ٜضا زض زٔبی 35-37 ºCثٔ ٝست 2-5ضٚظ ا٘ىٛثٕٛ٘ ٝز .ثطای ٞ Lotبی ثب تؼساز ثیف اظ
ثبیس ث ٝتؼساز 10پّیت یب ِ ِٝٛضا ث ٝعٛض تهبزفی ثطزاقت ٚ ٝزض قطایظ فٛق ا٘ىٛثٚ ٓ٘ ٝز .ثؼس اظ ا٘ىٛثبؾیٞ ٖٛیچ ٌٝ٘ٛ
تفسيز ًتايج:
یه ٔحیظ وكت ظٔب٘ی لبثُ لجٔ َٛی ثبقس و ٝثب ٕٝٞؾٛیٞ ٝبی پیكٟٙبزی ثطای آظٔٔ ٖٛحیظ وكت و ٝزض خس2 َٚ
ٔكرم قس ٜاؾت ،ضقس وبفی زاقت ٚ ٝذهٛنیبت ٔٛضفِٛٛغیىی وّٙی ٞب ثبضظ ثبقس .زض ٔٛضز ٔحیظ ٞبی ا٘تربثی ،ضقس
ثؼضی اظ اضٌب٘یؿٓ ٞبی ذبل ٟٔبض ٔی قٛز ،ضٕٗ ایٙى ٝاخبظ ٜضقس وبفی ث ٝؾبیطاضٌب٘یؿٓ ٔی زٞس .زض ثؼضی ٔٛاضز،
ٚاوٙكٟبی ضٍ٘ی ذبل یب ِٕٛٞیع ٕٞچٙب٘ى ٝزض خس 2 َٚآٔس ٜاؾت ،ثبیس ایدبز قٛزٔ .ثالً زض ٔٛضز وكت ثالزآٌبض ایدبز
ِٕٛٞیع ٔٙبؾت ضطٚضی اؾت ٚیب ثطای ٔحیظ ٔىب٘ىی آٌبض ایدبز ٚاوٙف ٞبی ضٍ٘ی ثطای ؾٛیٞ ٝبی ٔیىطٚثی ٔكرم
ضطٚضی ٔی ثبقس.
ٔحیغٟبی وكت آٔبزٔ ٜهطف ثبیس اظ ٘ظطٔٛاضز ظیط ٘یع ثطضؾی ق٘ٛس:
ید ظزٌی
ٚ خٛز ٔمساض ظیبز حجبة یب حفط ٜزض ؾغح ٔحیظ وكت
جذٍل 2
24ؾبػت غالتیٙبظ
ٔثجت ثبؾیّٛؼ ؾٛثتیّیؽ Bacillus
subtilis
ٌبظ A/A, SH2 + ؾیتطٚثبوتط فط٘ٚسی Citrobacter
frundii
ٌبظ یب ثسٌ ٖٚبظ K/A, SH2 +
ؾبِٕ٘ٛال تبیفی ٔٛضیS. ْٛ والیٍّطآیط ٖٚآٌبض
typhimurium 24ؾبػت
K/A
اؾیٙتٛثبوتط وبِىٛؾتیىٛؼ
Acinetobacter calcoaceticus
وّٙی ٞبی ثیطً٘ ،ثس ٖٚؾٛاضٔیًٙ پطٚتئٛؼ ٔیطاثیّیؽ Proteus ٔه وب٘ىی آٌبض
mirabilis 24ؾبػت
(ذعـ) (ٕٞطا ٜثب وطیؿتبَ ٚی)ِٝٛ
اؾتطپتٛوٛن فىبِیؽ S. faecalis
ضقس ٔٙفی
ٔٙفی (ؾجع ضً٘) اقطقیب وّی E. coli
٘بیؿطیب ٔٙٙػیتیسیؽ
ضقس ٔثجت Neisseria meningitidis
)(CO2
ضقس ٔثجت 24ؾبػت تبیط ٔبضتیٗ
ي٘ٛضN. Gonorrhoeae ٜ
٘بیؿطیب ٚ
ضقس ٔٙفی
اقطقیب وّی E. coli
ضقس ٔثجت ثبوتطٚئیسؼ فطاخیّیؽ تبیٌّٛیىٛالت ثطاث
24ؾبػت
Bacteriodes fragilis Thioglycollate broth
ٌبظ A/A, SH2 + ؾیتطٚثبوتط فط٘ٚسی
Citrobacter frundii TSI
ػٕك ٔحیظ ثبیس 3ؾب٘تی
ؾبِٕ٘ٛال تبیفی ٔٛضیS. ْٛ ٔتط ثبقس
ٌبظ یب ثسٌ ٖٚبظ K/A, SH2 + 24ؾبػت
typhimurium (ثب زضپیچ قُ اتٌ ٚٛصاضی
K/A قیٍال فّىؿٙطی Sh. flexneri قٛز)