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UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS

Departamento de Ciencias de la Vida y la Agricultura


Fitoquímica
INFORME DE LABORATORIO
Integrantes: Álvarez Jesús, Campaña Alexis, Criollo Victor, Simaluisa Dayana.
NRC: 4217 Docente: Dra. Blanca Naranjo
1. TEMA

Extración y cuantificación de fenoles por un método analítico.

2. OBJETIVOS

2.1 Objetivo General

Extraer y cuantificar fenoles de Cyclamen persicum (ciclamen) utilizando solventes


polares.

2.2 Objetivos Específicos

 Realizar una curva de calibración a partir de soluciones estándares.


 Comprender el mecanismo de oxidación de fenoles con el reactivo de Folin-
Ciocalteu.
 Cuantificar los fenoles presentes en Cyclamen persicum (ciclamen) comparando con
una curva de calibración obtenida.
 Evaluar el contenido de compuestos fenólicos del extracto de Cyclamen persicum
(ciclamen).

3. RESULTADOS

1.2

1.0

0.8

0.6

0.4

0.2

0.0
0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000
mg/L

Parámetros de la curva: y = 1,280151E-03 x -4,786227E-02


Resíduos: 0,0169 Coeficiente de Correlación: 0,99919
Fecha: 11/12/2017 16:00:49

Fig 1. Curva de calibracion para la cantificación de fenoles.


Tabla 1. Patrones para la curva de calibración realizada en el espectofotómetro.
Nº Concentración [mg/L] Ordenadas [A] Error [A] Empleado
1 100 0,083 0,003 Sí
2 100 0,089 0,009 Sí
3 100 0,088 0,007 Sí
4 300 0,320 -0,016 Sí
5 300 0,332 -0,005 Sí
6 300 0,328 -0,008 Sí
7 500 0,588 -0,004 Sí
8 500 0,576 -0,016 Sí
9 500 0,581 -0,012 Sí
10 700 0,865 0,017 Sí
11 700 0,878 0,030 Sí
12 700 0,863 0,015 Sí
13 900 1,099 -0,005 Sí
14 900 1,114 0,010 Sí
15 900 1,060 -0,044 No
16 1000 1,185 -0,047 No
17 1000 1,246 0,014 Sí
18 1000 1,194 -0,038 Sí

Tabla 2. Concentración de fenoles presentes en Cyclamen persicum (ciclamen) realizado en el


espectofotómetro.

Muestra Factor de Ordenadas [A] Concentración Concentración


dilución [mg/L] en 1 g [mg/L] en 100 g
de muestra de muestra
1 0,25 0,013 19,75 0.1975
2 0,25 0,015 21,25 0.2125
3 0,25 0,019 23,75 0.2375
Promedio: 0.2158

4. DISCUCIÓN

La extracción de compuestos fenólicos con disolventes orgánicos, se utiliza en el


pretratamiento de la muestra para la cuantificación. Las características físicas de las muestras
cambian debido a la polaridad del solvente, por el tiempo y la temperatura de extracción,
quedándonos un precipitado despigmentado más los componentes disueltos en el solvente
(Ochoa & Michelis, 2013). Al realizar la extracción con metanol acidificado, la muestra se
decoloro parcialmente, comprobando demostrado la presencia de fenoles.

El coeficiente de correlación lineal se correlacionan en sentido directo si r >0. Si r = 1 se


habla de una correlación positiva perfecta, es decir existe una relación lineal perfecta (Lahura,
2003). Se utilizó un r igual a 0.99919, de donde se deduce que existe una fuerte relación lineal
positiva entre la concentración de ácido gálico y la absorbancia.
No se utilizó el r=0.33 que obtuvo nuestro grupo porque significa que no existe relación lineal
entre los datos. Este error fue producido debido a que los principales factores que gobiernan
la degradación de las fenoles son el pH, temperatura y concentración de oxígeno (Luna,
Barreto, & Marín., 2016).
El método de Folin-Ciocalteu proporciona una evaluación media de fenoles totales presentes
en el extracto de la planta, basándose en la oxidación de compuestos fenólicos a pH básico,
dando lugar a una coloración azul intensa, que es susceptible a ser determinada por
espectrofotometría 765 nm, cuantificado en base a una recta patrón de ácido gálico. Este
método no es muy preciso debido a la interferencia de algunas moléculas que pueden
reaccionar con el reactivo dando concentraciones de fenoles elevadas lo cual puede alterar los
resultados. Esto se pudo confirmar en nuestra práctica debido a que la oxidación de fenoles
con el reactivo de Folin-Ciocalteu no dio la coloración azul intensa por lo cual existió una
alteración en los resultados (Muñoz et al, 2017).

La concentracion de fenoles [mg/L] en 100 g de muestra de Cyclamen persicum (ciclamen)


fue 0.2158 en promedio. Según un estudio de Jaradat, y otros (2017), la concentración para
la misma cantidad de muestra fue de 0.327 en promedio aproximadamente. Esta variación
puede deberse a un error al realizar las diluciones del extracto de la muestra.

5. CONCLUSIONES

 Fue posible la extracción de fenoles presentes en Cyclamen persicum (ciclamen)


utilizando metanol acidificado como solvente polar para triturar la muestra y evitar
alteraciones en los compuestos.
 Se obtuvo una curva de calibración con una relacion lineal muy baja, por lo que se
utilizó una curva de cursos anteriores.
La ecuacion de la curva fue: y=1,280151E-03 x -4,786227E-02.
 La concentracion de fenoles en Cyclamen persicum (ciclamen) fue de 0.2158 [mg/L]
en 100 g de muestra.

6. BIBLIOGRAFÍA

Jaradat, N. A., Al-Masri, M., Hussen, F., Zaid, A. N., Ali, I., Tammam, A., & & Rajabi, A.
(2017). Preliminary Phytochemical and Biological Screening of Cyclamen coum a
Member of Palestinian Flora. Pharmaceutical Sciences .
Luna, Barreto, & Marín. (2016). DESARROLLO DE UN MODELO MATEMÁTICO QUE
PERMITA PREDECIR EL CAMBIO DEL CONTENIDO DE POLIFENOLES EN
UNA MATRIZ. Revista de asociacion colombiana de ciencia y tecnología de
alimentos, 117-128.
Muñoz et al. (2017). NUEVO ACERCAMIENTO A LA INTERACCIÓN DEL REACTIVO
DE FOLIN-CIOCALTEU CON AZÚCARES DURANTE LA CUANTIFICACIÓN DE
POLIFENOLES TOTALES. TIP Revista Especializada en Ciencias Químico-
Biológicas.
Ochoa, M., & Michelis, A. (2013). Compuestos bioactivos en frutas pequeñas de la Patagonia
argentina: Efecto del solvente. Argentina : Editorial Recitela.

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