“Año de la consolidación del Mar de Grau”

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Perú, DECANA DE AMERICA
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

Escuela académico profesional de Farmacia y Bioquímica

Departamento Académico de Farmacología, Bromatología y Toxicología
Cátedra de Química farmaceutica II

ANALISIS CUALITATIVO Y
CUANTITATIVO DE CEFALEXINA

Profesor responsable:
Mg.Q.F.Juan Roberto Pérez León Camborda

Integrantes:

 Mendoza Vilchez, Mayra Lucia.


Mesa: B4
Ciclo: 2018-II
PRÁCTICA N°3
ANALISIS CUALITATIVO Y
CUANTITATIVO DE CEFALEXINA CEFALEXINA

INTRODUCCIÓN
La cefalexina es una cefalosporina de primera generación que incluye en
su espectro a patógenos causantes de infecciones como S. aureus, S.
epidermidis, Streptococcus spp, y algunas cepas de Escherichia coli,
Proteus spp., Klebsiella spp. Si bien la forma más frecuente en que se
administra este antibiótico es la vía oral también existen formulaciones
para la administración parenteral que pueden ser de utilidad para el
tratamiento de infecciones sistémicas; sin embargo, es un poco menos
activa contra Estafilococos productores de penicilinasa.

La cefalexina, un antibiótico beta-lactámicos como las penicilinas, es

principalmente bactericida. Inhibe la tercera y última etapa de la síntesis
de la pared celular bacteriana uniéndose preferentemente a las proteínas
de unión a penicilina (PBP específicas) que se encuentran dentro de la
pared celular bacteriana. Estas proteínas de unión a penicilinas son
responsables de varios pasos en la síntesis de la pared celular y se
encuentran en cantidades de varios cientos a varios miles de moléculas
por célula bacteriana. Estas proteínas de unión a penicilinas varían entre
diferentes especies bacterianas, y por lo tanto, la actividad intrínisica de la
cefalexina, así como la de las otras cefalosporinas y penicilinas contra un
organismo particular depende de su capacidad para acceder a y fijarse a
la PBPs. Como todos los antibióticos beta-lactámicos, la capacidad de
cefalexina para interferir con la síntesis de la pared celular mediada por las
PBPs, en última instancia conduce a la lisis celular. Esta lisis está
producida por enzimas autolíticos bacteriano presentes en la pared celular
(es decir, autolisinas).

El tratamiento oral con cefalexina origina concentraciones máximas en

plasma de 16 ug/ml después de administrar una dosis de 0.5g; es
adecuada para inhibir muchos de los patógenos grampositivos y
gamnegativos. El fármaco no es metabolizado y se excreta a 70ª 100% por
la orina. La administración de cefalexina puede producir hipersensibilidad,
esta reacción puede dar lugar a urticaria, prurito, rash, fiebre, eosinofilia,
dolores articulares, mialgia, angioedema, edema y eritema. Las reacciones
anafilácticas son raras, pero algunas han resultado fatales. Otros efectos
causados por la administración oral de cefalexina son: náuseas, vómitos,
diarrea y malestar abdominal. Puede ocurrir luego de la administración de
1
cefalexina, superinfección con microorganismos resistentes especialmente Candida y existe la
posibilidad de desarrollo de colitis seudomembranosa.

2
Marco teórico
En la costa de Cagliari (Cerdeña), en el año de 1948, Brotzu aisló al hongo Cephalosporium
acremonium, de allí se obtuvieron tres antibióticos llamados: cefalosporinas P, N y C. De este último,
se obtuvo el núcleo activo de la cefalosporina C; el ácido 7-amino cefalosporánico, por sustitución de
sus cadenas laterales, se han aislado compuestos con mejor actividad antimicrobiana que la
sustancia original. (1)

El núcleo activo de las cefalosporinas es el ácido cefalosporínico y están conformadas por un anillo
ß-lactámico fusionado con un anillo dihidrotiazínico constituyendo el núcleo cefem (Figura 1)
derivándose todas las cefalosporinas.

Figura 1. Núcleo básico de las Cefalosporinas.

El ácido 7 amino cefalosporánico tiene poca actividad antimicrobiana, pero con la sustitución de uno
o dos de sus radicales R1 o R2 se obtienen las cefalosporinas semisintéticas. Con los agregados de
cadenas laterales es posible producir compuestos semisintéticos de actividad antibacteriana mucho
mayor que la sustancia madre. Estos compuestos que contienen el ácido 7- aminocefalosporánico
son relativamente estables en medio ácido diluido y resistente a las penicilinasas, cualquiera que sea
la índole de sus cadenas laterales. Las modificaciones en la posición 7 del anillo betalactámico alteran
la actividad antibacteriana, y sustituciones en la posición 3 del anillo dihidrotiazina se asocian con
cambios en el metabolismo y propiedades farmacocinéticas de las drogas. Las cefalosporinas, al igual
que el resto de los antibióticos ß-lactámicos ejercen su actividad antibacteriana, impidiendo la síntesis
de la pared celular bacteriana al inhibir el proceso de transpeptidación, bloqueando las
carboxipeptidasas y las transpeptidasas a través de su unión a las proteinas fijadoras de penicilinas
provocando finalmente, la inhibición de la síntesis de peptidoglicanos, por lo que la pared celular
desaparece y se activan las enzimas autolíticas produciéndose la lisis bacteriana. (2)

La clasificación de las cefalosporinas de acuerdo al desarrollo histórico y algunas características

microbiológicas y estructurales en común son las denominadas generaciones de cefalosporinas. De
esta manera se clasifican en primera, segunda, tercera y cuarta generación Las cefalosporinas de
primera generación presentan mejor actividad antibacterial sobre cocos Gram-positivos como S.
aureus susceptible a meticilina, S. pyogenes y S. pneumoniae; carecen de actividad sobre
Enterococcus spp. Es limitada sobre bacilos Gram negativos de cepas de E. coli, Klebsiella spp. Y
Proteus mirabilis (no productoras de ß-lactamasas cromosomales y/o plasmidiales). Las moléculas
de este grupo no son útiles para el tratamiento de infecciones producidas por estos patógenos.
Además, carecen de actividad significativa sobre Haemophilus influenzae y desde un punto de vista
farmacológico se caracterizan por sus cortos tiempos de vida media aunque la cefazolina y el
Cefadroxilo presentan tiempos de eliminación más prolongados que el resto. (3)
3
La cefalexina es un antibiótico oral de la primera generación de cefalosporinas con excelente actividad
contra la mayoría de bacterias gram-positivas. Se utiliza principalmente en el tratamiento de la otitis
media y las infecciones de las vías respiratorias (por ejemplo, faringitis, amigdalitis, neumonía lobar)
causadas por estafilococos susceptibles, Streptococcus pneumoniae, estreptococos del grupo A y
beta-hemolíticos. (3)

FARMACOCINÉTICA:
La cefalexina se administra por vía oral ya sea como cefalexina o cefalexina clorhidrato, ambas en
forma de monohidratos. Ambas sales son estable frente a los ácidos, se absorben rápidamente en el
tracto gastrointestinal, y presentan unos parámetros farmacocinéticos similares. Después de una
dosis oral de 250 mg o 500 de la cefalexina, las concentraciones séricas máximas de 9 o 15-18 ug /
ml, respectivamente, se logran en la primera 1 hora, disminuyendo a 1,6 o 3,4 ug/ml, respectivamente
a las 3 horas después de la dosis. Se distribuye en la mayoría de tejidos y fluidos corporales, pero no
logra llegar al LCR. Se elimina ampliamente y sin cambios en la orina mediante filtración glomerular
y secreción tubular. La semi-vida de eliminación es de aproximadamente 1 hora en pacientes con
función renal normal. Esta semi-vida de eliminación aumenta hasta 7,5 a 14 horas en pacientes con
enfermedad renal en etapa terminal. (3)

PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS

Fórmula molecular C16H19N3O4S

Peso molecular 347,39 g/mol
Densidad 1.5±0.1 g/cm3
Punto de ebullición 727.4±60.0°C a 760 mmHg
Presión de vapor 0.0±2.5 mmHg a 25°C
Entalpía de Vaporización 111.5±3.0 kJ/mol
Punto de fusión 393.7±32.9 °C
Índice de refracción 1.700
Refractividad molar 89.4±0.4 cm3
Aceptores de enlaces de #H 7
Donantes de enlaces de #H 4
#Enlaces que giran libremente 4
LogP 0.65
LogD (pH 5.5) -2.83
LogD (pH 7.4) -3.63
ACD/BCF (pH 7.4) 1.00
ACD/KOC (pH 7.4) 1.00
Superficie polar 138 Å2
Tensión superficial 78.5±5.0 dinas / cm
Volumen molar 231.3 ±5.0 cm3
4
FARMACODINAMIA
La cefalexina es un antibiótico oral de la primera generación de cefalosporinas con excelente
actividad contra la mayoría de bacterias gram-positivas. La cefalexina, un antibiótico beta-
lactámicos como las penicilinas, es principalmente bactericida. Inhibe la tercera y última
etapa de la síntesis de la pared celular bacteriana uniéndose preferentemente a las proteínas
de unión a penicilina (PBP específicas) que se encuentran dentro de la pared celular
bacteriana. Estas proteínas de unión a penicilinas son responsables de varios pasos en la
síntesis de la pared celular y se encuentran en cantidades de varios cientos a varios miles
de moléculas por célula bacteriana. Estas proteínas de unión a penicilinas varian entre
diferentes especies bacterianas, y por lo tanto, la actividad intrínisica de la cefalexina, así
como la de las otras cefalosporinas y penicilinas contra un organismo particular depende de
su capacidad para acceder a y fijarse a la PBPs. Como todos los antibióticos beta-lactámicos,
la capacidad de cefalexina para interferir con la síntesis de la pared celular mediada por las
PBPs, en última instancia conduce a la lisis celular. Esta lisis está producida por enzimas
autolíticos bacteriano presentes en la pared celular (es decir, autolisinas).

Por regla general, las cefalosporinas de primera generación son más activos contra los
organismos gram-positivos que las cefalosporinas de segunda y tercera generación, pero
tienen relativamente poca actividad contra especies gram-negativas.

1 2

Figura 2. ESTRUCTURA DE PARED CELULAR DE BACTERIAS 1.- GRAM (+) 2.- GRAM (-)
5
 Figura N°3. MECANISMO DE ACCION DE CEFALEXINA.

Figura N° 4. MECANISMO DE ACCION DE CEFALOSPORINA.

6
ESTRUCTURAS QUÍMICAS

Figura N°5. Estructura química de la Figura N°6. Estructura 3D de la

Cefalexina3 Cefalexina4

Figura N°7. Cefalosporinas de Primera Generación derivados del ácido D-α-

aminoadípico el cual es condensado con un anillo β-lactámico dihidrotiazínico.5
7
RELACIÓN ESTRUCTURA ACTIVIDAD

8
MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales
 1 bureta de 25mL
 1 soporte universal
 2 beaker 250mL
 8 tubos de ensayo
 1 pinza de bureta
 1 pinza de tubo de ensayo
 1 pinza de cromatoplaca
 1 cubeta cromatográfica
 2 matraz Erlenmeyer 250 mL
 2 capilares
 1 cromatoplaca
 1 piseta
 1 gradilla
 1 bagueta
 1 balanza analitica

Reactivos
 Acido perclórico 0.1N 50ml
 Ácido acético anhidrol 50ml
 Ácido acético anhidro 20ml
 α- naftol benceína 0.2% en ácido acético
 Alcohol etílico
 Alcohol metílico 50ml
 Agua destilada 100 mL
 Reactivo de cloruro férrico 20 mL
 Reactivo de Le Rosen
 Reactivo de Dragendorff
 Reactivo fosfomolíbdico
 Solución de ácido clorhídrico
 Solución de NaOH 10%

Muestra Problema
 Capsulas de cefalexina 500mg
9
 PROTOCOLO DESARROLLADO

DATOS GENERALES

DCI de la muestra: CEFALEXINA Procedencia: Desconocido

Nombre Comercial: NO APLICA Registro Sanitario: EN-02019

Forma Farmacéutica: CÁPSULA Número de Lote: 151001

Peso Molecular: 365.40 g/mol Fecha de Vencimiento: Desconocido

Concentración: 500 mg Fecha de Análisis: 04-09-18

Origen: FARMINDUSTRIA Lugar de Análisis: LABORATORIO
DE QUÍMICA FARMACEUTICA

1. Análisis Cualitativo:
II. ANÁLISIS DE SOLUBILIDAD
I. ANÁLISIS ORGANOLÉPTICO
Solvente Solubilidad

Aspecto: HOMOGENEO Agua POCO SOLUBLE

Color: BLANCO Etanol INSOLUBLE
Olor: INODORO Cloroformo INSOLUBLE
Sabor: PARTICULAR Éter INSOLUBLE

III.- CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

Sistema de solventes: AGUA/METANOL/ACIDO ACÉTICO

Proporción: (1,5: 1,5: 0,3)

Revelador: VAPORES DE YODO

RF estandar: 0,81 RF muestra problema: 0,80

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 Fig. 8. Siembra de muestra y de estándar de Cefalexina

Fig. 9. IZQUIERDA: Corrida de la cromatoplaca en un sistema de solvente agua: metanol: ácido acético (1,5: 1,5: 0,3).
DERECHA: Cromatoplaca revelada con vapores de yodo.
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 IV. ANÁLISIS QUÍMICO CUALITATIVO

REACTIVOS RESULTADOS OBSERVACIÓN INDICA PRESENCIA

DE:
REACCION DE COLORACIÓN ROJO PRESENCIA DE
HIDROXAMATO
++ VIOLÁCEA AMIDAS O ESTERES
REACCIÓN DE LE COLORACIÓN PRESENCIA DE
ROSEN
+++ AMARILLENTA ANILLO AROMATICO

 REACCION DE TARTRATO DE COBRE ALCALINO  COLORACION ROJIZA

 REACCION DE SULFATO DE COBRE ACIDO  COLORACION VERDE

REACCIONDE HIDROXAMATO: REACCIÓN DE LE ROSEN:

(Fig. 10) (Fig. 11)

12
 2. Análisis Cuantitativo

I. ANÁLISIS QUÍMICO CUANTITATIVO

Método de VALORACIÓN DE BASES DÉBILES EN MEDIO

Análisis:
NO ACUOSO
Solución ACIDO PERCLÓRICO 0,1N
valorante:
Solvente: ÁCIDO ACÉTICO ANHIDRO
Indicador: α-Naftol benceína SR

Gasto Obtenido: 2,4 mL mg de muestra por cada

100 mg Tableta: 84,64
Resultado: mg obtenidos: % en la muestra: Rango aceptable:
83,37 98,49% 90-120%
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Fig. 14. Valoración de bases débiles en medio no acuoso. Se observa que una coloración verde, Matraz titulado con ácido
perclórico 0,1 N.

Cálculos: 𝐦𝐠 = 𝐍 𝐱 𝐏𝐄𝐪 𝐱 𝐦𝐋
mg: miligramos de muestra problema
Peso de la capsula: 0,687 g N: normalidad del titulante
PEq: peso equivalente de la muestra
Peso del contenido: 0,591 g problema
mL: mililitros del titulante (gasto)

→ 591,3 mg 500 mg

100 mg X
X═ 84, 644 mg

→ mg= N x PEq x mL
mg= 0.1 x 365,4 x (2.4)

mg= 83,37

84,644 mg --------------- 100%

83,37 mg -------------- X

X= 98,49% de Cefalexina.
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 I. DATOS GENERALES: REGITRADO

RESULTADO

II. ANÁLISIS ORGANOLÉPTICO: CUMPLE

III. ANÁLISIS DE SOLUBILIDAD: CUMPLE

RESULTADOS
GENERALES IV. OBSERVACIÓN CUMPLE
MICROSCÓPICA:
V. ANÁLISIS CROMATOGRÁFICO: CUMPLE

VI. ANÁLISIS QUÍMICO CUMPLE

CUALITATIVO:
VII. ANÁLISIS QUÍMICO CUMPLE
CUANTITATIVO:
El principio activo de cefalexina cumple con las especificaciones
CONCLUSIONES según las bibliografías consultadas, por lo cual SE ACEPTA.

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CUESTIONARIO
1. Explicar el método cuantitativo con reacciones químicas.
La cefalexina presenta un grupo amino en su estructura, este grupo amino reaccionará con el ácido
acético y se cargará positivamente. Paralelamente otra molécula de ácido acético reaccionará con
el ácido perclórico para formar el ion acetoxonio, el cual reaccionará con el ion acetato, formado en
la primera reacción, para producir otra molécula de ácido acético.

2. Porque se debe evitar la presencia de agua en la determinación cuantitativa de éste

fármaco.
El fármaco analizado en esta práctica, la cefalexina, es una base débil; debido a ello para su titulación
debe utilizarse un solvente no básico o levemente ácido como en el ácido acético anhidro más no
agua ya que ésta por su carácter anfótero (actúa como ácido y como base) tiene un limitado uso como
medio de valoración puesto que actuaría como base competitivo. Por ello se dice que se consigue
una valoración adecuada bloqueando el carácter básico del solvente agua, esto usando solventes
inertes o relativamente acídicas.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. Cuesta R. Antimicrobianos betalactámicos. Manual de farmacología. Segunda parte. La
Habana: Editorial Pueblo y Educación; 1988:63-66
2. Cué Brugueras M, Morejón García M. Antibacterianos de acción sistémica. Parte I. Antibióticos
betalactámicos. Rev Cubana de Med Gen Integr. 1998; 14(4):347-61
3. Hoffman F. Microbiología y farmacocinética de las cefalosporinas parenterales. Basilea: La
Roche, 1984:1-44
4. Shriner R, Identificación Sistemática de Compuestos Orgánicos. 2da. Edición. México: Limusa
Wiley; 2013.
5. Hyneck NL, Berardi RR, Johnson RM. Interference of cephalosporinsand cefoxitin with serum
creatinine determination. Am J Hosp Pharm 1981;3(1):1348-52
6. Albores M. Caballero Y. Gonzales Y. Pozas R. Grupos Funcionales. Nomenclatura Y
Reacciones Principales. México: Universidad Nacional Autónoma de Mexico: 2007.
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