ERRORS COMESOS

A UN LABORATORI DE
MICROBIOLOGIA
LOS CORROSIVOS
CAS DE LA SEMBRA

Ens ha arribat al nostre laboratori una suspensió del

bacteriana del bacteri Mycobacterium tuberculosis.
Aquest l’hem de sembrar per esgotament en estries
segons el protocol establert al nostre laboratori per veure
les colònies aïllades. Un cop ha sigut incubat hem pogut
observar el creixement de dos tipus de bacteri diferents
que hem pogut distingir gràcies al color. Què creus que ha
pogut passar?
Aquests són alguns dels errors que es poden
haver comès en el procés de sembra:
 La nansa no ha estat esterilitzada abans d’utilitzar-la.

 El bacteri ha estat contaminat per un altre.

 El medi no s’ha autoclavat.

 Les plaques de petri no eren estèrils.

 A l’hora de preparar el medi s’ha utilitzat agua de l’aixeta

en lloc d’aigua destil·lada.
CAS DE LA TINCIÓ
Recollim un portaobjectes qualsevol del laboratori i en ell a
partir d’un cultiu ja sembrat ( en condicions d’asèpsia)
realitzem una tinció del bacteri Mycobacterium
tuberculosis que ha crescut.
La tinció ha sigut realitzada a partir del protocol establert
al nostre laboratori: En primer lloc, en un portaobjectes
qualsevol s’ha dipositat una gota d’aigua. A continuació, el
bacteri s’ha afegit a partir d’una nansa de sembra. Una
vegada fixat, s’han afegit 4 gotes de cada reactiu i per
rentar-los s’ha utilitzat aigua. Quan s’ha assecat el
portaobjectes hem observat que aquest no presenta cap
color i tampoc es veu cap fixació en ell. Quins errors han
pogut causar aquest resultat?
Aquests són alguns dels errors que es poden
haver comès en el procés de tinció:

 El portaobjectes estava brut i no s’ha netejat abans d’utilitzar-lo.

 Per fixar el bacteri s’ha utilitzat aigua de l’aixeta en lloc d’aigua

destil·lada.

 Els reactius són afegits a la vegada en lloc de separats.

 La nansa de sembra s’ha utilitzat sense esterilitzar-la .

 A l’hora de fixar el bacteri en el portaobjectes s’ha cremat al

tenir-lo massa temps en el bec-bunsen o massa a prop.
CAS ANTIBIOGRAMA

Ens arriba la mostra d’un pacient que es sospita que pateix una
infecció causada pel bacteri Mycobacterium tuberculosis.
Cultivem el nostre bacteri sembrant-lo per el mètode de
estries en una placa de Petri per poder realitzar l’
antibiograma. Al introduir els discos per determinar la seva
resistència o sensibilitat antibiòtica i esperar el temps que
hem vist oportú ens adonem que els resultats que obtenim no
són els esperats. Que pot haver passat per a que el
antibiograma estigui malament fet?
Aquests són alguns dels errors que es poden
haver comès per a que el antibiograma
s’hagi realitzat de manera incorrecta:
 Utilització d’un medi de cultiu diferent al de Mueller-Hinton.
 Realització de la sembra per mètode d’estries en comptes de per sembra invasiva.
 Preparació incorrecta del medi de cultiu pel que fa a la determinació del pH.
 Ús de medi amb data de caducitat vençuda o incorrectament emmagatzematge.
 Preparació incorrecta i emmagatzemen incorrecte del estàndard de terbolesa i dels discos.
 Inadequada estandardització de la concentració de l'inòcul.
 Espera excessiva en l'estandardització del cultiu o en la inoculació del mitjà sòlid.
 Espera excessiva en l'aplicació dels discos després d'haver fet la inoculació en el medi sòlid.
 Espera excessiva en la incubació del medi després d'haver posat els discos.
 Incubació a temperatura diferent de 35 "C i amb tems d’espera diferent a 16-18 hores.
 Incorrecta il·luminació a l’hora de observar els halos d’inhibició fent així una incorrecta lectura dels resultats.
 Lectura dels resultats sense mesurar amb el regla fent així una lectura de resultats poc exacta.
 Realització de l’antibiograma amb microorganismes de creixement lent o anaeròbic.
 No fer controls de qualitat amb soques control i no anotar el resultat d’aquests.
CAS DEL BACTERI NO DETECTAT
Ens arriba al laboratori una mostra de saliva d’un pacient del qual el
metge està segur que pot estar patint la infecció d’un bacteri
anomenat streptococcus pyogenes ja que en presenta tots els signes i
símptomes. A continuació, realitzem un cultiu en agar de sang de la
mostra de saliva en condicions totals d’asèpsia, fixem la placa de petri
i la posem boca a baix en la incubadora per evitar la formació de gotes
en el cultiu. 24 hores després observem el cultiu i detectem un
creixement massiu i irregular en les colònies del bacteri, però encara
així decidim fer una tinció de gram i el bacteri resulta ser gram
negatiu cosa que si es tracta del streptococcus pyogenes no es
possible. Ens estranya que no pugui ser el bacteri que creu el doctor,
així que realitzem un parell de vegades més de nou tot el procediment
però hem canviat un pas que creiem era el error; 24 hores després
observem uns cultius normals i totes dues ens donen un bacteri gram
positiu que era el de esperar. Que ha pogut passar en el primer
procediment?
Aquests són alguns dels errors que es poden
haver comès per no detectar el bacteri:

 No esterilitzar la nansa abans de sembrar.

 No hem esterilitzat el medi abans de posar-lo a la placa

de petri.

 En la tinció de gram no vàrem afegir adequadament el

cristall violeta en un primer moment.
CAS DEL RECOMPTE DE BACTERIS
En primer lloc fem un agar nutritiu per a realitzar una sembra el
qual tenim les quantitats exactes i procedirem a fer la
dissolució, barreja i ebullició i ho traiem ràpidament sense
observar la dissolució clarament per la condensació d’aigua.
Dipositem el medi directament a la placa de petri i el posem a
la nevera perquè solidifiqui. Ja solidificat fem la sembra en
estries d’una suspensió bacteriana que tenim ja preparada.
Després posem la placa en l’estufa de cultiu i passades 24 hores
observem la mostra i fem el recompte de colònies. El resultat
son 13 colònies molt juntes entre elles en una zona en concret
del medi; aquesta mostra no pot ser acceptada per les poques
colònies que s’hi detecten, que ha pogut passar?
Aquests són alguns dels errors que es poden
haver comès en el recompte de bacteris:
 El medi de cultiu no havia estat barrejat ni bullit
adequadament.

 No vàrem col·locar bé la placa en la incubadora i es van

formar gotes d’aigua per la condensació en el propi medi i per
tant no van créixer correctament els bacteris.

 A l’hora de fer la sembra per estries no es va realitzar

correctament i es van sembrar únicament en una zona de
manera massiva.