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1. ¿Qué son los metabolitos secundarios?

Los metabolitos secundarios son aquellos compuestos orgánicos sintetizados por el


organismo que no tienen un rol directo en el crecimiento o reproducción del mismo. A
diferencia de lo que sucede con los metabolitos primarios, la ausencia de algún metabolito
secundario no le impide la supervivencia, si bien se verá afectado por ella, a veces
gravemente.

Los metabolitos secundarios no tienen función directa en los procesos de fotosíntesis,


respiración, transporte de solutos, síntesis de proteínas, asimilación de nutrientes,
diferenciación o formación de carbohidratos, proteínas y lípidos. Estos metabolitos tienen
una distribución restringida en el reino vegetal, es decir, un metabolito secundario
determinado se encuentra en una sola especie o un grupo de especies relacionadas.

2. ¿Cuál es la diferencia entre los metabolitos primarios y los secundarios?


metabolitos primarios metabolitos secundarios
√ Los metabolitos primarios son √ Conjunto de procesos mediante los cuales
compuestos biológicos necesarios para el se generan sustancias que no forman parte
crecimiento, desarrollo y reproducción de del metabolismo primario y que no es vital
los organismos vivos. para la planta.
√ Un metabolito principal está directamente √ los metabolitos secundarios no están
implicada en el crecimiento normal, el directamente relacionados con las funciones
desarrollo y la reproducción. principales de la planta
√ Se producen durante la idiofase de los √ Se producen en la profase o fase de
Cultivos crecimiento
√Cumple función vital en todos los seres √ Cumple función específica para cada ser
vivos vivo

√ Ejemplos de metabolitos primarios son √ Ejemplos de los metabolitos secundarios


los glucósidos, lípidos, aminoácidos de son los alcaloides, cumarinas, terpenos,
proteínas, monosacáridos, entre otros esteroides, flavonoides, entre otros.
√ Moléculas de bajo peso molecular que √ Moléculas sintetizadas por determinados
Intermediarios en las rutas metabólicas. microorganismos en una fase tardía
 ¿Cuáles son las características químicas y farmacológicas de: alcaloides,
flavonoides, compuestos terpénicos ó terpenos, saponinas y antraquinonas?

CARACTERÍSTICAS QUÍMICAS Y FARMACOLÓGICAS

Compuestos orgánicos, Formados a partir de aminoácidos,


Sustancias nitrogenadas, Nitrógeno heterocíclico, Origen
fundamentalmente vegetal, Estructura compleja, Carácter
básico, Tóxicos, Actividad fisiológica incluso a dosis bajas,
Precipitan con reactivos específicos.
Tamaño molecular variable: 100-900 P.M. , La mayoría
oxigenados: sólidos y cristalizables a Tª amb., generalmente
incoloros e inodoros y de sabor amargo. Los no oxigenados
(pocos): líquidos a Tª ambiente, arrastrables en corriente de
ALCALOIDES vapor de agua, algunos volátiles, olorosos, Propiedad óptica:
capacidad de desviar la luz polarizada. Formas levógiras más
activas, Carácter básico (N suele tener electrones libres)
inestables: sensibles al calor, la luz y el oxígeno. Forman sales
con diversos ácidos (suelen cristalizar –sales- y ser estables),
aunque también en forma libre (- frecuente).

Los flavonoides tienen grandes actividades farmacológicas en


modelos “in vitro” tales como: antioxidantes, antiinflamatorias,
antialérgicas, antibióticas, antidiarreicas y contra el cáncer. En
modelos “in vivo” no se ha podido demostrar la actividad
antioxidante, así́ como no se han podido relacionar directamente
con la efectividad contra el cáncer. Algunos estudios parecen
indicar que una dieta rica en flavonoides puede disminuir el
riesgo de cáncer pero no se ha encontrado significación
estadística.
Los flavonoides son compuestos de bajo peso molecular que
flavonoides comparten un esqueleto común de difenilpiranos (C6-C3-C6),
compuesto por dos anillos de fenilos (A y B) ligados a través de
un anillo C de pirano (heterocíclico). Los átomos de carbono en
los anillos C y A se numeran del 2 al 8, y los del anillo B desde
el 2' al 6'12 (fig. 1). La actividad de los flavonoides como
antioxidantes depende de las propiedades redox de sus grupos
hidroxifenólicos y de la relación estructural entre las diferentes
partes de la estructura química. Esta estructura básica permite
una multitud de patrones de sustitución y variaciones en el
anillo C. En función de sus características estructurales se
pueden clasificar en:
1. Flavanos, como la catequina, con un grupo -OH en posición
3 del anillo C.
2. Flavonoles, representados por la quercitina, que posee un
grupo carbonilo en posición 4 y un grupo -OH en posición 3 del
anillo C.
3. Flavonas, como la diosmetina, que poseen un grupo
carbonilo en posición 4 del anillo C y carecen del grupo
hidroxilo en posición C3.
4. Antocianidinas, que tienen unido el grupo -OH en posición 3
pero además poseen un doble enlace entre los carbonos 3 y 4 del
anillo C.
Los terpenos son los metabolitos secundarios que dan las
características organolépticas de las plantas, son los
responsables de las características físicas que presentan, todo lo
COMPUESTOS que es el aroma, sabor, textura, color, y temperatura de las
TERPÉNICOS Ó plantas.
TERPENOS
Los terpenos son substancias derivadas de del denominado
isopreno activo o isoprenil‐pirofosfato. Se parte de la hidroxi‐
metil‐glutaril‐CoA, compuesto clave en la síntesis de colesterol
ya que es un inhibidor de su propia síntesis por inhibición
“feed‐back” e inhibición de la expresión del enzima hidroxi‐
metil‐glutaril‐CoA reductasa.
De naturaleza heterosídica (saponósidos), con genina (saponina)
de naturaleza esteroídica o triterpénica, Alto peso molecular y
elevada polaridad, Dotados de propiedades tensioactivas en
contacto con agua forman espuma persistente por disolución
(efecto afrógeno; por tanto, hidrosolubles). Ej: Saponaria
officinalis, Interés medicinal relativo. Mucho mayor en la
industria: cosmética (detergentes) y para semisintetizar
fármacos (antiinflamatorios esteroídicos, anticonceptivos, etc.),
SAPONINAS Muy frecuentes en vegetales.
Solubles en agua e insolubles en disolventes apolares,
Extracción mediante alcohol o medio hidroalcohólico,
Detección por sus propiedades tensioactivas: observar la
formación de espuma en extracto acuoso (entre otras como
colorimetría o reacciones específicas), Separación y
determinación complejas, generalmente con técnicas
cromatográficas.

Formas libres (geninas): compuestos cristalinos con carácter


ácido. Compuestos coloreados (amarillo, naranja, rojo).
– Solubles en disolventes orgánicos y alcohol, insolubles en
ANTRAQUINONAS
agua.
– Si tienen grupos carboxílicos lo son en soluciones acuosas de
bicarbonato sódico.
– Color amarillo en disolución.
Heterósidos:
– Solubles en agua y mezcla hidroalcohólica.
Métodos de estudio:
_ Extracción
_ Caracterización del extracto
_ Reacción de Bornträger.
_ Reacción de acetato de Mg en etanol.
_ Identificación → CLAR
_Cuantificación → fotocolorimetría
Laxante estimulante (vía oral) (A dosis mayores →purgantes)
– Formas libres: lipofílicas, se absorben en el duodeno →
hígado, conjugación con ác. glucurónico → riñón →excretadas
por la orina. Inactivas.
– Heterósidos: + hidrosolubles, pasan al colon → enzimas
intestinales los hidrolizan y reducen las formas libres a antronas
→ejercen su acción. Activas.
Laxante estimulante. Mecanismo de acción
Actúan a dos niveles:
Motilidad
– Promueven movimientos peristálticos (terminaciones
nerviosas, contacto con células del epitelio) →Hacen avanzar el
contenido rápidamente y la absorción de agua desciende.
Transporte de electrolitos
– Inhiben la reabsorción de agua/electrolitos por (-) bomba Na+
/K+ ATPasa.
– Estimula la secreción de algunos electrolitos de forma
indirecta (principalmente Cl- , con agua).
_Esto se debe a la estimulación de la formación de PG, que
estimulan la adenilatociclasa, enzima que cataliza la formación
AMPc, que estimula la secreción de Cloro.
METODOLOGIA.
1. Ensayos químicos cualitativos para la identificación en el laboratorio de
taninos, flavonoides, terpenoides (compuestos terpénicos), alcaloides y
saponinas.
RECONOCIMIENTO DE TANINOS:
Tomar aproximadamente 50 g del material vegetal fresco, macerar en un mortero
hidratando la muestra para facilitar el rompimiento de los tejidos, pasar la muestra
completamente macerada a un matraz Erlenmeyer y adicionar cantidad suficiente de agua
para cubrir la muestra, calentar en baño maría de 10 a 15 minutos, filtrar en caliente.
Tomar 1 ml del filtrado en un tubo de ensayo y adicionar dos (2) gotas de solución de
tricloruro férrico (FeCL3 al 1%). La aparición de un color verde, azul o negro es prueba
positiva (+) para compuestos fenólicos; en un segundo tubo de ensayo tomar otro mililitro
del filtrado y agregar grenetina, si hay turbidez o formación de precipitado es prueba
positiva para taninos en la muestra.
Las dos pruebas son necesarias para comprobar la presencia de taninos.
RECONOCIMIENTO DE FLAVONOIDES:
Macerar en un mortero aproximadamente 5 g del material vegetal finamente picado, pasar a
un matraz Erlenmeyer, adicionar suficiente cantidad de etanol al 50% que cubra la muestra;
calentar al baño maría durante cinco minutos, enfriar y filtrar.
Tomar un 1 ml del filtrado etanólico en un tubo de ensayo, agregar varias limaduras de
magnesio y por la pared del tubo dejar caer lentamente HCl concentrado (37%) la aparición
de colores: naranja, rojo, violeta o rosado, indican que la prueba es positiva (+) para
flavonoides.
RECONOCIMIENTO DE ALCALIODES:
1) Secar el material vegetal y triturar
2) Colocar la muestra en un Erlenmeyer, añadir EtOH y calentar al baño maría mientras se
agita.
3) Filtrar (papel filtro), apartar el marco y agregar NaOH al extracto etanólico y luego éter
de petróleo
4) La mezcla formará dos capas, una etérea y otra acuosa alcalina, separarlas por medio del
embudo de decantación
5) A la capa acuosa alcalina agregar HCl hasta alcanzar un pH ácido
6) A la capa etérea agregar también HCl hasta alcanzar PH ácido
7) Realizar las pruebas cualitativas con cada uno delos reactivos
8) Reactivo de Tanred, Dragendorff, Mayer, Wagner ,Mecke, Erlich, y deValser
9) ensayo cromatográfico, ensayo
1: FE: Silica gel. FM: Cloroformo-Metanol ensayo
2: FE: Sílica gel FM: Benceno-Acetona10) Observación de la placa (ojo humano), UV y
posterior a la aspersión con Reactivo de Dragendorff y calentamiento en estufa a 105°C
RECONOCIMIENTO DE SAPONINAS:
A partir del extracto alcohólico seco se procedió a realizar los siguientes ensayos:
i) Prueba de Liebermann Burchard. - Se tomó una pequeña cantidad de extracto y se
añadió 2 ml de anhídrido acético, 2 ml de cloroformo y se enfrió a0ºC. Se añadió 2 gotas de
ácido sulfúrico La aparición de una coloración azulada que pasa a anaranjado para luego
volverse verde, indica que la reacción es positiva.
ii) Prueba de Salkowski. - Se tomó una pequeña cantidad del extracto y se le añadió 2 ml
de cloroformo y 2 ml de ácido sulfúrico. Una coloración anaranjada indica reacción
positiva.
iii) Prueba del α naftol. - En un tubo de ensayo se colocó una pequeña cantidad de
extracto alcohólico seco y se añadió 2 ml de etanol y 2 gotas de solución 0.1% de α - naftol
adicionándose por la pared del tubo de ensayo 2 ml de ácido sulfúrico, La reacción es
positiva cuando en la interfase se forme un anillo de color violeta.
Recursos a utilizar en la práctica (Equipos / instrumentos)
Material de laboratorio (por grupo)
 Embudo común para filtración por gravedad.
 vaso de precipitado de 50 mL
 Erlenmeyer
 Cápsula de porcelana mediana espátula
 agitador de vidrio
 pipeta de 10 mL (con pera para succión y expulsión o pipeteador)
 6 tubos de ensayo para capacidad de 10 mL
 Gradilla
 Pinza o depilador pequeño
 Papel filtro o algodón
 Capilar delgado
 Toallas absorbentes
 Goteros o pipetas pasteur para los reactivos que lo requieran Cinta de enmascarar
delgada
 Cada estudiante debe traer guantes de laboratorio (latex o nitrilo)
Equipos, reactivos y solventes (de uso común)
Estufa de secado que alcance una temperatura de 70-100ºC. También puede ser plancha de
calefacción.
Baño maría (ó baño termostatado) para calentar de 50ºC a 70 °C
Reactivos y reveladores quimicos para la identificación de metabolitos
1. Reactivo de Mayer: disolver por separado 1.5 g de cloruro mercúrico y 5.0 g de yoduro
de potasio en la mínima cantidad de agua, mezclar las dos soluciones y completar con agua
destilada a un volumen de 100 mL (este reactivo alcanza para las tres prácticas)
2. Reactivo de Valser: Disolver 1.0 g de yoduro de potasio en agua destilada y completar a
100 mL, agregar agitando a la anterior solución yoduro de mercurio sólido hasta que no se
disuelva (aprox 14.0 gramos). Filtrar si es necesario. (este reactivo alcanza para las tres
prácticas).
3. Para la reacción de Shinoda: tener limadura de magnesio o magnesio en polvo.
Sustancias
 Hojas de caléndula, hojas de apio, hojas de manzanilla, hojas de diente de león,
hojas de romero, hojas de margarita
 Agua destilada
 Gelatina salada al 1%
 NaCl al 10 %
 Acetato de zinc amoniacal
 Acetato sódico en polvo
 limaduras de magnesio
 tricloruro férrico (FeCL3 al 1%)
 HCl concentrado (37%)
METODOLOGÍA EMPLEADA

Sesión de práctica No. 1- adquisición, preparación y secado del material vegetal


Materiales y/o solventes:
- tijeras
- toallas absorbentes
- papel periodo
- Cinta adhesiva
- estufa de secado
- frasco de vidrio
- mortero
- planta medicinal (flores de sauco)
- etanol industrial

procedimiento evidencia

Fue necesario seleccionar el material


vegetal (caléndula) fresco, sano y en
buen estado, y posteriormente fue
pesado.

Se colocó sobre un papel y se puso a


secar en estufa de secado entre 55oc -
60oc, aproximadamente durante una
semana
Pasado ese tiempo, se sacó y se colocó
el vegetal seco en un mortero y lo
trituramos de tal manera que quedo
totalmente hecho polvo

En un frasco de vidrio se colocó el


material vegetal.
Se adiciono etanol al 94%(etanol
industrial) hasta cubrir todo el material,
sin llenar el frasco, en donde este nos
ayudara para identificar su principio
activo.

Se cerró muy bien el frasco y el


proceso a seguir durante una semana,
fue; no destapar el frasco, solo agitarlo
todos los días durante ese periodo de
tiempo.

Para saber la humedad que perdió en el


proceso de secado se realizó la
siguiente operación:

𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑚𝑎𝑡𝑒𝑟𝑖𝑎𝑙 𝑣𝑒𝑔𝑒𝑡𝑎𝑙 𝑓𝑟𝑒𝑠𝑐𝑜


𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑚𝑎𝑡𝑒𝑟𝑖𝑎𝑙 𝑣𝑒𝑔𝑒𝑡𝑎𝑙 𝑠𝑒𝑐𝑜 𝑦 𝑚𝑜𝑙𝑖𝑑𝑜
∗ 100

53.45
∗ 100
4.76

= 1,122 % de humedad que perdió


Sesión de practica No. 2- trituración y extracción del material vegetal

Materiales y/o solventes:


- vaso de precipitado
- capsula de porcelana
- espátula
- pipeta
- tubos de ensayo
- gradilla
- papel filtro
- toallas absorbentes

procedimiento evidencia

Pasado aproximadamente una semana se


destapa el frasco, luego se agita con
movimientos suaves.

Se filtró poco apoco el producto de la


maceración, para así obtener el filtrado o
extracto fluido.
Marcamos cuatro tubos de ensayo y en cada
uno de ellos colocamos 1 ml de extracto
líquido de la muestra (calendula) , para cada
una de las siguientes pruebas de identificación
de metabolitos secundarios para:
 Taninos (2 tubos)
 Flavonoides
 Saponinas
 Alcaloides

Tubo 1: identificación de taninos, adicionamos


5 ml de solución de etanol (agua 8:2) en un
tubo de ensayo tomar un mililitro del filtrado y
agregar grenetina, si hay turbidez o formación
de precipitado es prueba positiva para taninos
en la muestra.
En este caso fue negativa la presencia de
taninos en la caléndula

Se separó de 1 a 2 ml de la solución anterior


en otro tubo de ensayo, dos (2) gotas de
solución de tricloruro férrico (FeCL3 al 1%).
La aparición de un color verde, azul o negro es
prueba positiva (+) para compuestos fenólicos,
en el caso de la calendula fue positivo

Las dos pruebas son necesarias para comprobar


la presencia de taninos.
Tubo 2: identificación de saponinas

Prueba de Salkowski. - Se tomó una pequeña


cantidad del extracto y se le añadió 2 ml de
cloroformo y 2 ml de ácido sulfúrico. Una
coloración anaranjada indica reacción positiva.
Test de espuma. - añadir 9 ml de agua a un
tubo de ensayo con la muestra. Utilizar 1 ml de
esta solución en un tubo de ensayo pequeño,
agitar vigorosamente por 30 segundos y dejar
en reposo durante 15 minutos en la muestra.
Si hay presencia de espuma por más de dos
segundos es positiva para saponinas, en este
caso es positiva en la calendula

Tubo 3: identificación de flavonoides,


(Reacción de Shinoda). A 1 mL de extracto
líquido adicionar 5 mL de solución de etanol y
agitar suave. En otro tubo de ensayo adicionar
magnesio en polvo o limadura de magnesio de
forma tal que cubra el fondo del tubo, adicionarle
1 mL de la solución diluida de extracto y luego
lentamente 3 a 5

gotas de HCl. Esperar a que termine el


desprendimiento de hidrógeno y observar el
cambio de color. Prueba positiva: Cambios de color
a amarillo, amarillo oscuro, naranja, rojo o violeta.
Tubo 4: identificación de alcaloides, se
colocó el volumen restante del extracto liquido
obtenido en el punto 1 en una capsula de
porcelana donde se calentó a baño maría.

Pasado aproximadamente 1 hora se observa


que se evaporo completamente.

donde agregamos HCL diluido Luego se


prosigue a desprender el extracto de las
paredes de la capsula de porcelana con la
ayuda de la espátula
Filtramos y se separo en dos tubos de ensayo
aproximadamnete 5 ml de filtrado, donde se
adiciono a un tubo de ensayo alrededor de 1
ml de reactivo de mayer y al otro tubo 1 ml de
reactivo de valser de igual manera para los
reactivos de Wagner y dragendorff.

Como se muestra en la imagen no tubo


ningun cambio de color, lo que quiere decir
que dio como resultado prueba negativa, en
presencia de alcaloides en la calendula.
RESULTADOS
RESULTADOS Y ANÁLISIS PARA LA CALENDULA

Grupo a prueba resultados


identificar

Reactivo de meyer y valser -No detecta


negativo
ALCALOIDES
Reactivo de dragendorff ---negativo

Reactivo de Wagner ---negativo

+++positivo
FLAVONOIDES Prueba de shinoda

Test de la espuma +++positivo


SAPONINAS Prueba de Salkowski +++positivo

Prueba de cloruro férrico +++positivo


TANINOS Prueba de Gelatina -NaCL ---negativo

RESULTADOS Y ANÁLISIS PARA OTRAS PLANTAS MEDICINALES


PRESENCIA DE TANINOS

Planta medicinal Taninos cloruro férrico Prueba de Gelatina -NaCL


Manzanilla positivo positivo

Apio positivo negativo


Margarita negativo positivo

Romero negativo negativo

Hierbabuena negativa negativo


Diente de leon Positivo negativo
Dentro de la composición de la planta de manzanilla, apio, caléndula, margarita están
presentes los taninos, que son considerados muy beneficiosos para la salud debido a las
propiedades antioxidantes que poseen.

PRESENCIA DE SAPONINAS

Planta medicinal Prueba de Espuma


Manzanilla Positivo

Apio positivo

Margarita positivo

Diente de leon positivo


Romero Negativo

Hierbabuena Negativo

Las saponinas son un grupo de glucósidos oleosos, los cuales son solubles en agua
produciendo espumosidad cuando las soluciones son agitadas, para este caso la manzanilla,
el apio, diente de león y romero las poseen en gran mayoría.
Algunas saponinas son marcadamente tóxicas. Estas son llamadas sapotoxinas y tienen una
acción hemolítica sobre los glóbulos rojos sanguíneos si son inyectadas directamente por
vía intravenosa.
PRESENCIA DE FLAVONOIDES

Planta medicinal Prueba de shinoda

Manzanilla positivo

Apio positivo
Margarita positivo

Diente de leon positivo

Romero positivo

Hierbabuena positivo
En todas las plantas medicinales se encuentra los flavonoides que poseen muchas
propiedades medicinales, entre ellas las de beneficiar al sistema circulatorio, previniendo la
aparición de trombos y disminuyendo las posibilidades de tener un ataque
cardiorrespiratorio. Los flavonoides son considerados antioxidantes y también
anticancerígenos, además de ser un excelente controlador de los niveles de colesterol en la
sangre.

PRESENCIA DE ALCALOIDES

Planta medicinal Reactivo Valser Reactivo Mayer Reactivo


Dragendorff
Manzanilla negativo negativo negativo

Apio positivo negativo negativo

Margarita negativo negativo negativo

Diente de leon positivo positivo Negativo

Romero negativo negativo negativo

Hierbabuena negativo negativo negativo

Los Alcaloides, son sustancias orgánicas nitrogenadas, de estructura compleja, cuya


molécula está constituida por grupos atómicos que contienen nitrógeno y forman anillos
cerrados. Los Alcaloides tienen carácter básico, o sea que se parecen a los álcalis, de donde
deriva su nombre. En algunos casos se extraen de animales, pero lo más general que se
obtengan de las plantas, en especial las pertenecientes a la familia de las solanáceas (tabaco,
papa, belladona), papaveráceas (adormidera, amapola), papilionáceas (altramuces y
retamos), ranunculáceas (acónitos) y rubiáceas (quína, café, ipecacuana).Para el caso de la
plantas tratadas en el labotarorio se pudo evidenciar que en todas se dieron casos negativos
a excepción del apio y diente de león.
CONCLUSIONES

 En relación a lo antes expuesto pude conocer y comprender más acerca de los


principales pasos requeridos para realizar un estudio fitoquímico preliminar de un
extracto vegetal, así mismo comprender como se desarrolla el proceso
farmacoergasico de las plantas medicinales.
 En el desarrollo de las practicas obtenemos en general un conocimiento de lo que
son los metabolitos secundarios según su variación identificando Los flavonoides,
saponinas, taninos y alcaloides en algunas plantas medicinales

 El estudio fitoquímico de las plantas usadas en medicina popular es importante ya


que mediante el, es posible la identificación de los metabolitos responsables de su
acción terapéutica y con ella una base científica para su uso apropiado.
REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA

 Barquero, A. A. (2007). Plantas sanadoras pasado, presente y


futuro. QuímicaViva, (2), 53-69 Recuperado
de http://www.quimicaviva.qb.fcen.uba.ar/v6n2/barquero.pdf

 Rodríguez, E., Biopharmaceutical. (2013). Metabolismo vegetal: Metabolitos


primarios y secundarios [OVI]. Universidad Antonio José Camacho (Cali).
Recuperado de https://www.youtube.com/watch?v=FUXUeZNAGZg

 Giraldo, S.E. (2016). Los metabolitos secundarios: Fuente potencial de principios


activos [OVI]. Universidad Nacional Abierta y a Distancia. Recuperado
de http://hdl.handle.net/10596/9927

 Montero, P. (2015). Plantasnet: Diccionario On Line de Plantas Medicinales.


Recuperado dehttp://www.plantasnet.com/index.html

 Alcaloide recuperado
de:http://www.micobotanicajaen.com/Revista/Articulos/GBenitezC/Farmacognosia
05/Farmacognosia%20GB_19.pdf

 Saponinas y saponósidos. Recuperado


de:http://www.micobotanicajaen.com/Revista/Articulos/GBenitezC/Farmacognosia
04/Farmacognosia%20GB_17.pdf

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